删除或更新信息,请邮件至freekaoyan#163.com(#换成@)

48份玉米自交系抗病性的精准鉴定

本站小编 Free考研考试/2021-12-26

赵子麒,1, 赵雅琪,1, 林昌朋1, 赵永泽1, 余宇潇1, 孟庆立2, 曾广莹3, 薛吉全1, 杨琴,11西北农林科技大学农学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室/农业农村部西北旱区玉米生物学与遗传育种重点实验室,陕西杨凌 712100
2宝鸡市农业科学研究院,陕西岐山 722499
3镇坪县农业科学研究所,陕西镇坪 725600

Precise Evaluation of 48 Maize Inbred Lines to Major Diseases

ZHAO ZiQi,1, ZHAO YaQi,1, LIN ChangPeng1, ZHAO YongZe1, YU YuXiao1, MENG QingLi2, ZENG GuangYing3, XUE JiQuan1, YANG Qin,11College of Agronomy, Northwest A&F University/State Key Laboratory of Crop Stress Biology for Arid Areas/Key Laboratory of Maize Biology and Genetic Breeding in Arid Area of Northwest Region, Ministry of Agriculture, Yangling 712100, Shaanxi
2Baoji Institute of Agricultural Science, Qishan 722499, Shaanxi
3Zhenping Institute of Agricultural Science, Zhenping 725600, Shaanxi

通讯作者: 杨琴,E-mail:qyang@nwafu.edu.cn

赵子麒和赵雅琪为同等贡献作者。
责任编辑: 李莉
收稿日期:2020-11-2接受日期:2020-12-29网络出版日期:2021-06-16
基金资助:国家高层次人才计划青年项目.31872871
国家自然科学基金.31872871


Received:2020-11-2Accepted:2020-12-29Online:2021-06-16
作者简介 About authors
赵子麒,E-mail:zhaoziqi@nwafu.edu.cn

赵雅琪,E-mail:zhaoyaqi@nwafu.edu.cn










摘要
【目的】结合已克隆抗病基因的分子标记,对来自陕A群、陕B群的30份核心自交系和18份国内外优良种质进行抗病性鉴定,为玉米抗病育种奠定基础。【方法】2019年、2020年分别在陕西省不同地点开展茎腐病、穗腐病、大斑病和小斑病的田间接种鉴定,以及灰斑病的田间自然发病鉴定。试验采用随机区组设计,每个试验设置2—3个重复。采用苗期高粱粒接种法接种大斑病和小斑病,在乳熟后期,对大斑病、小斑病和灰斑病进行病情分级鉴定;在玉米抽雄期,采用土埋伤根法接种禾谷镰孢茎腐病,生理成熟后进行劈茎调查;采用花丝通道和针刺果穗接种法,分2次接种禾谷镰孢穗腐病,玉米生理成熟后进行调查。分别计算不同病害病情指数的最佳线性无偏预测(best linear unbiased predictions,BLUPs),并分析两两病害之间的相关性。对已克隆抗病基因进行功能分子标记基因型鉴定。【结果】对48份自交系开展5种病害田间鉴定,筛选到9份高抗大斑病自交系、2份高抗小斑病自交系、10份抗灰斑病自交系、5份高抗禾谷镰孢茎腐病自交系和5份抗禾谷镰孢穗腐病自交系。1145、CML170、KA103等8份自交系兼抗3种叶斑病。对5种病害综合抗性表现优良的材料有7份,包括1145、CML170、KA105、KB020、X178、沈137和郑58。5种病害相关性分析发现,禾谷镰孢茎腐病与3种叶斑病抗性呈极显著正相关,与穗腐病抗性无相关性。对已知抗病基因鉴定表明,1145、KA081和沈137携带抗禾谷镰孢茎腐病的qRfg1位点,KB109携带抗炭疽茎腐病的Rcg1位点,带有抗大斑病基因Htn1和多抗小斑病、灰斑病基因ZmCCoAOMT2的材料较多。【结论】1145、CML170、KA105、KB020、X178、沈137和郑58对5种病害综合抗性表现良好,可作为供体亲本进行自交系的综合抗性改良。沈137携带抗病的qRfg1Htn1ZmCCoAOMT2等位基因,可用于分子标记辅助改良。
关键词: 玉米;抗病性;大斑病;小斑病;灰斑病;茎腐病;穗腐病

Abstract
【Objective】 In order to provide valuable resources to the maize community for enhancing disease resistance, we selected 30 core maize inbred lines from Shaan A and Shaan B heterotic groups, and 18 major maize germplasms worldwide for disease resistance evaluation and resistance gene identification.【Method】Gibberella stalk rot, Gibberella ear rot, northern leaf blight (NLB) and southern leaf blight (SLB) were artificially inoculated, while gray leaf spot (GLS) was naturally infected in replicated field trials at different locations in 2019 and 2020. A randomized complete block design was adopted with two to three replicates being evaluated at each location. Sorghum grain inoculum was artificially inoculated to the whorl of each plant at the seedling stage for NLB and SLB. Gibberella stalk rot was artificially inoculated using corn grain inoculum buried next to the root of each plant at heading time, while Gibberella ear rot was artificially inoculated by injecting conidial suspension through the silk channel and the husk separately. The best linear unbiased predictions (BLUPs) were estimated and correlation coefficients were calculated between each pair of the disease resistance. Disease resistance genes were genotyped using functional markers. 【Result】Nine highly resistant (HR) lines for NLB, two HR lines for SLB, ten resistant (R) lines for GLS, five HR lines for stalk rot, and five R lines for ear rot resistance were identified out of the 48 maize germplasms. Eight inbred lines showed multiple disease resistance to the three foliar diseases, such as 1145, CML170, and so on. We identified seven elite inbred lines showing good performance for all the five diseases, including 1145, CML170, KA105, KB020, X178, Shen137, and Zheng58. NLB, SLB, GLS, and Gibberella stalk rot resistance were significantly positively correlated, while Gibberella ear rot was not correlated with the other four diseases. 1145, KA081, and Shen137 contain the resistant qRfg1 allele. KB109 harbors the resistant Rcg1 allele. Many inbred lines carry the resistant Htn1 and ZmCCoAOMT2 alleles.【Conclusion】1145, CML170, KA105, KB020, X178, Shen137, and Zheng58 could be selected for multiple disease resistance improvement in breeding program. Shen137 is the best line for marker-assisted selection for qRfg1, Htn1, and ZmCCoAOMT2 loci.
Keywords:maize;disease resistance;northern leaf blight;southern leaf blight;gray leaf spot;stalk rot;ear rot


PDF (871KB)元数据多维度评价相关文章导出EndNote|Ris|Bibtex收藏本文
本文引用格式
赵子麒, 赵雅琪, 林昌朋, 赵永泽, 余宇潇, 孟庆立, 曾广莹, 薛吉全, 杨琴. 48份玉米自交系抗病性的精准鉴定[J]. 中国农业科学, 2021, 54(12): 2510-2522 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2021.12.003
ZHAO ZiQi, ZHAO YaQi, LIN ChangPeng, ZHAO YongZe, YU YuXiao, MENG QingLi, ZENG GuangYing, XUE JiQuan, YANG Qin. Precise Evaluation of 48 Maize Inbred Lines to Major Diseases[J]. Scientia Acricultura Sinica, 2021, 54(12): 2510-2522 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2021.12.003


开放科学(资源服务)标识码(OSID):

0 引言

【研究意义】玉米是全世界种植范围最广、总产量最高的作物。在全球气候变化的背景下,由于耕作制度、栽培方式的转变和新品种的推广,中国玉米病害发生呈现新的动态,特别是茎腐病(stalk rot)、穗腐病(ear rot)、大斑病(northern leaf blight)、小斑病(southern leaf blight)、灰斑病(gray leaf spot)等发生频率增加,影响范围扩大,给玉米产量和品质带来巨大威胁[1,2,3,4,5,6]。收集和鉴定重要玉米种质的综合抗性,明确种质中的优良抗病等位基因,对抗病育种意义重大。【前人研究进展】茎腐病当前已成为全国性的重大病害,近年来,在中国西北、东北、黄淮海部分地区重度发生,高感品种的发病率达到40%—100%[2,3]。镰孢穗腐病在全国不同玉米产区均有发生,感病品种的发病率可高达50%,致病菌在籽粒中产生的毒素直接威胁人畜健康[4]。大斑病在中国东北、华北北部、西北东部、西南山区等地发病势头严重,一般造成减产20%[5]。小斑病在温暖潮湿的气候条件下发病严重,感病品种在严重发生年份减产20%—30%[3]。灰斑病主要在中国东北、西南地区发生,近几年扩展迅速,严重发生时产量损失达10%—60%[6]。种植抗病品种是病害防治最经济有效的措施,开展抗病性和抗病基因鉴定是选育抗病品种的前提。国内外****针对不同玉米病害开展了大量的抗病性鉴定工作,筛选出一系列抗病种质[1,3-4,7-18]。然而,大部分研究只针对1种或2种病害进行种质资源抗性评价,很少开展多年多点的鉴定,难以解决当前多种病害同时混合发生的问题。利用抗病基因培育抗病品种是更加经济有效的途径,分子标记辅助育种可以大大缩短育种年限,在抗病主基因的导入方面有明显的优势[19]。目前,针对玉米茎腐病、穗腐病、大斑病、小斑病和灰斑病,已克隆的基因有5个,包括抗大斑病Htn1ZmWAK-RLK1[20],多抗玉米小斑病、灰斑病qMdr9.02ZmCCoAOMT2[21],抗禾谷镰孢茎腐病qRfg1ZmCCT[22]qRfg2ZmAuxRP1[23],以及抗炭疽茎腐病Rcg1[24]。利用抗病基因的功能分子标记,开展自交系基因型鉴定,结合抗病性精准评价,将为抗病育种提供优良的抗病性改良靶点。目前,玉米中已报道的抗病位点鉴定主要利用与抗病基因连锁的分子标记,由于玉米自交系之间遗传变异丰富,位点间重组率高,如果分子标记与抗病基因相距较远,可能会导致分子标记鉴定结果与抗病性不符[25,26,27]。目前还没有针对这些已知抗病基因开展种质资源精准鉴定的研究。【本研究切入点】病害是影响玉米产量和品质的重要因素,选育综合抗性优良的品种对保障玉米高产稳产至关重要。对重要玉米自交系开展多年多点多个病害的综合鉴定,对已知抗病基因进行准确鉴定,将为玉米抗病性遗传改良提供材料基础和技术支撑,然而目前仍然缺乏这方面的系统研究。【拟解决的关键问题】本研究收集陕A群、陕B群30份核心自交系和18份国内外优良种质,分别于2019年和2020年在陕西省杨凌区、岐山县、三原县、镇坪县鉴定禾谷镰孢茎腐病、禾谷镰孢穗腐病、大斑病、小斑病和灰斑病的抗性,分析种质对不同病害抗性水平及其相关性,明确材料的综合抗性及已知抗病基因数目,为抗病育种提供材料基础。

1 材料与方法

1.1 供试材料和田间试验设计

陕A群、陕B群是由西北农林科技大学玉米遗传育种课题组构建的2个杂种优势群,依据“二群论”理论,以国内外优良种质形成的综合种为基础群体,以提高适应性为主线,采用两边推、两向分群的育种思路,强化逆境选择(高密、低氮、干旱),通过多点联合持续改良,育成了一批早熟、耐密、高产、宜机收的自交系。选择11份陕A群核心玉米自交系:KA064、KA081、KA103、KA105、KA106、KA109、KA115、KA147、KA203、KA225、KA327;19份陕B群核心自交系:KB019、KB020、KB024、KB025、KB043、KB052、KB062、KB081、KB089、KB102、KB106、KB107、KB109、KB128、KB204、KB207、KB227、KB243、KB588;18份国内外重要种质:1145、2082、AMD43、B110、B73、CML170、Mo17、NW-H537、PH4CV、PH6WC、PHK42、PHN11、PHT60、X178、昌7-2、黄早四、沈137、郑58。大斑病、小斑病和灰斑病选取1145为抗病对照,B73为感病对照;茎腐病选取1145为抗病对照,黄早四为感病对照;穗腐病选择昌7-2为感病对照。

2019年和2020年分别在陕西省岐山县开展大斑病接种鉴定;在陕西省杨凌区曹新庄试验农场开展小斑病、禾谷镰孢茎腐病和穗腐病接种鉴定;在陕西省镇坪县开展灰斑病自然发病鉴定;在陕西省三原县斗口试验站开展禾谷镰孢茎腐病和穗腐病接种鉴定。试验采用随机区组设计,每个试验设置2—3个重复,单行区,行长4 m,行距0.6 m,株距0.2 m。

1.2 病原菌及田间接种鉴定方法

1.2.1 供试病原菌 大斑病病原菌为大斑凸脐蠕孢(Exserohilum turcicum),分离自陕西省岐山县田间采集的大斑病样;小斑病病原菌为玉蜀黍平脐蠕孢(Bipolaris maydis),由中国农业科学院作物科学研究所段灿星副研究员惠赠;灰斑病病原菌为玉米尾孢(Cercospora zeina),分离自陕西省镇坪县采集病样;禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)由西北农林科技大学龙书生副研究员惠赠。

1.2.2 病原菌接种方法 采用高粱粒接种法[28]接种小斑病和大斑病。将马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar,PDA)培养基上活化的大斑凸脐蠕孢/玉蜀黍平脐蠕孢切成小块,接种到含有灭菌高粱粒的锥形瓶中,26℃黑暗条件下静置培养,培养期间,定期摇晃锥形瓶,保证菌丝充分生长。待菌丝长满高粱粒后,将高粱粒接种物倒出,自然晾干备用。在玉米苗期6—8叶期,将制备好的带菌高粱粒投入植株心叶中,每株接种15—20粒,接种时间选择在傍晚或阴天进行。灰斑病为田间自然发病。

采用田间土埋伤根接种法[29]接种禾谷镰孢茎腐病。将PDA平板上活化的禾谷镰孢菌接种于经高压灭菌的玉米粒培养基进行扩繁。26℃黑暗培养10—14 d后,菌丝布满玉米粒,即可用于田间接种。在玉米抽雄期,距离植株茎基部约5 cm处,向下剖开土壤并切断毛细根,将培养好的带菌玉米70—80粒埋入根系处,接种后覆土并进行浇灌,保证土壤湿润。

采用花丝通道法和针刺果穗法分别进行2次接种禾谷镰孢穗腐病[30,31]。将PDA平板上活化的禾谷镰孢菌切成小块,接种到液体绿豆培养基中,25℃黑暗条件180 r/min震荡培养7—10 d,过滤菌丝,收集孢子悬浮液,配置孢子浓度为1×106个/mL的接种液,加入表面活性剂吐温20,浓度为2 μL·mL-1,混匀待用。在玉米吐丝后7 d进行第1次接种,采用花丝通道法将2 mL孢子悬浮液注射到玉米果穗顶端,在吐丝后14 d进行第2次接种,采用针刺果穗法将2 mL孢子悬浮液注射到玉米果穗中部。

1.2.3 抗病性鉴定方法 小斑病/灰斑病:玉米进入乳熟期开始调查,重点调查穗位叶及果穗的上部和下部各1叶,根据叶片的感病面积进行病情分级,分级方法参考1—9级鉴定标准[32],其中,1为高抗,9为高感。共调查3次,每次间隔7—10 d,以3次的结果对发病情况进行综合判断(表1)。

Table 1
表1
表1玉米大斑病、小斑病、灰斑病、穗腐病及茎腐病病情级别与抗性评价
Table 1Disease rating scale and evaluation of northern leaf blight, southern leaf blight, gray leaf spot, ear rot and stalk rot in maize
大斑病
Northern leaf blight
小斑病
Southern leaf blight
灰斑病
Gray leaf spot
禾谷镰孢穗腐病
Gibberella ear rot
禾谷镰孢茎腐病
Gibberella stalk rot
感病面积
Diseased area (%)
抗性评价
Disease level
病情分级
Disease scale
抗性评价
Disease level
病情分级
Disease scale
抗性评价
Disease level
感病面积
Diseased area (%)
抗性评价
Disease level
病情分级
Disease scale
抗性评价
Disease level
0—10HR1—2HR1—2HR0—1HR1—2HR
10—25R2—3R2—3R1—10R2—3R
25—40MR3—4MR3—4MR10—25MR3—5MR
40—65S4—5S4—5S25—50S5—7S
65—100HS5—9HS5—9HS50—100HS7—9HS
HR:高抗;R:抗;MR:中抗;S:感病;HS:高感。下同
HR: Highly resistant; R: Resistant; MR: Moderately resistant; S: Susceptible; HS: Highly susceptible. The same as below

新窗口打开|下载CSV

大斑病:玉米进入乳熟后期开始调查,针对感病叶片面积占整株叶片面积的比例进行病情分级,分级方法参考《玉米抗病虫性鉴定技术规范NY/T 1248.1- 2006》(表1)。

禾谷镰孢茎腐病:在玉米生理成熟后进行劈茎调查,将植株沿茎秆纵向劈开,根据茎秆内坏死组织的长度和坏死程度进行病情分级(图1表1[29]

图1

新窗口打开|下载原图ZIP|生成PPT
图1玉米茎腐病病情级别划分标准

Fig. 1Rating scale of maize resistance to stalk rot



禾谷镰孢穗腐病:在玉米生理成熟后,采收接种的玉米果穗,逐穗进行病情分级调查(表1)。分级方法参考《玉米抗病虫性鉴定技术规范NY/T 1248.8-2016》。

1.3 数据分析

采用整行调查法进行大斑病、小斑病、灰斑病的病情分级,采用sAUDPC(standardized area under disease progress curve)[33]计算最终表型值,计算公式为:

$\mathrm{sAUDPC}=\frac{1}{t_{n}-t_{1}} \sum_{i=1}^{n-1}\left[\frac{y_{i}+y_{i+1}}{2}\left(t_{i+1}-t_{i}\right)\right] $

其中,yi为每次调查的病情分级,ti+1ti为相邻2次调查相隔的天数,n代表总共调查的次数。

禾谷镰孢茎腐病和穗腐病采用单株调查法,每行调查除第1株之外的所有植株,取平均值用于分析。多年多点的表型数据使用最佳线性无偏预测值(best linear unbiased prediction,BLUP)来估算。利用SAS软件PROC MIXED模型计算[34],将基因型作为固定效应,将环境、基因型与环境互作、重复、散粉期都作为随机效应,获得不同病害抗病性的BLUP值。利用R软件计算不同病害之间的相关性。

1.4 抗病基因鉴定方法

在玉米8—10叶期取样,每个材料随机选5—8株混合取新鲜叶片,用SDS法提取叶片基因组DNA[35]。检测4个抗病基因的引物见表2。使用全式金高保真酶(TransStart? FastPfu DNA Polymerase)对每个基因进行PCR扩增,通过琼脂糖凝胶电泳或PCR产物测序,进行基因型鉴定。

Table 2
表2
表2已克隆抗病基因鉴定引物
Table 2Primers used to identify the cloned disease resistance genes
基因名称 Gene ID病害 Disease引物名称 Primer name引物序列 Primer sequence (5′-3′)
qRfg1禾谷镰孢茎腐病
Gibberella stalk rot
TED-FGCACAAGAGAGATGGAGCATT
TED-RATTCTCAATCCAAGGTGCAG
TERB-FCCTAAGAACCGTCGGAAACA
TERB-RCGAGCGTTTTCGACATAACA
TELB-FAAACGCTGACACTTCCGACT
TELB-RGTCGACACGTGTAGGAAGCA
Rcg1炭疽茎腐病
Anthracnose stalk rot
FLP-111-FTTCCTGTTCGTCTGTATCTGATCCG
FLP-111-RTTTGATTCCGGTCGAGTATAACCTG
FLP-112-FGAAACTGCCTTCCCAGAAAACAATG
FLP-112-RCAAGATCGGTGAAGTTGGTGCTTC
FLP-113-FATCACAGATGGGTCTCAAGGATTGC
FLP-A1-RTTCCAAGCAATTCACAGCTC
Htn1大斑病
Northern leaf blight
Htn1-FTCTTCTCCCCGCCATGGC
Htn1-RCGGTGTAGCCGCAGGAGT
ZmCCoAOMT2小斑病、灰斑病
Southern leaf blight, Gray leaf spot
CAMT-FCCGTCCTGGACGACCTCGTG
CAMT-RTGCTGCGCGTCGTCTACGAT

新窗口打开|下载CSV

2 结果

2.1 5种病害抗病性表型分析

2年的接种鉴定结果表明,大斑病的感病对照B73的感病面积BLUP值为45.63%,抗病对照1145为3.48%(图2-a);小斑病、灰斑病的感病对照B73的病情级别BLUP值分别为5.59和5.19,抗病对照1145为2.33和2.57(图2-b和图2-c);茎腐病的感病对照黄早四的病情级别BLUP值为7.03,抗病对照1145为1.11(图2-d);穗腐病感病对照昌7-2的发病面积BLUP值达到54.1%(图2-e)。抗感材料抗病性差异明显,表明接种鉴定条件可以显著区分抗病材料和感病材料。

图2

新窗口打开|下载原图ZIP|生成PPT
图2玉米自交系对不同病害抗性BLUP值分布

Fig. 2Histogram of disease resistance BLUP

a: Northern leaf blight; b: Southern leaf blight; c: Gray leaf spot; d: Gibberella stalk rot; e: Gibberella ear rot


48份自交系对不同病害的抗病性表型均呈正态分布,表型变异范围很大(图2)。方差组分分析表明,大斑病、小斑病、灰斑病和禾谷镰孢茎腐病的基因型效应差异极显著,重复、环境差异不显著,基因型与环境互作效应显著(表3)。禾谷镰孢穗腐病基因型与环境互作效应极显著,试验残差极大,导致基因型效应不显著(表3)。

Table 3
表3
表348份玉米自交系对不同病害抗性方差组分分析
Table 3Variance component analysis for resistance to different diseases on 48 maize inbred lines
病害
Disease
随机因子
Random factor
方差估计值(标准误)
Estimate (standard error)
P
P value
固定因子
Fixed factor
F测验
F test
大斑病
Northern leaf blight
重复Rep. (Env.)0.00NS基因型Genotype4.98***
环境Env.26.17(39.43)NS
基因型与环境互作 Genotype×Env.51.55(17.12)0.0038
散粉期DTA0.00NS
残差Residual55.86(8.24)
小斑病
Southern leaf blight
重复Rep. (Env.)0.01(0.01)NS基因型Genotype11.89***
环境Env.0.00NS
基因型与环境互作 Genotype×Env.0.11(0.04)0.0047
散粉期DTA0.00NS
残差Residual0.20(0.02)
灰斑病
Gray leaf spot
重复Rep. (Env.)0.00NS基因型Genotype3.42***
环境Env.0.00NS
基因型与环境互作 Genotype×Env.0.18(0.08)0.0093
残差Residual0.33(0.05)
禾谷镰孢菌茎腐病Gibberella stalk rot重复Rep. (Env.)0.33(0.25)NS基因型Genotype4.44***
环境Env.0.93(1.14)NS
基因型与环境互作 Genotype×Env.1.31(0.27)<0.0001
残差Residual0.89(0.10)
禾谷镰孢穗腐病Gibberella ear rot重复Rep. (Env.)25.06(22.14)NS基因型Genotype1.01
环境Env.20.41(41.66)NS
基因型与环境互作 Genotype×Env.302.13(74.24)<0.0001
残差Residual239.63(30.51)
Rep.:重复;Env.:环境;DTA散粉期;NS:不显著;***:在P<0.0001水平差异极显著
Rep.: Repeat; Env.: Environment; DTA: Days to anthesis; NS: Not significant; ***: Significant at P<0.0001

新窗口打开|下载CSV

对5种病害分别进行抗性评价,获得高抗、抗、中抗大斑病的材料分别为9份(占18.75%)、18份(37.5%)和14份(29.2%);高抗、抗、中抗小斑病的材料分别为2份(4.2%)、16份(33.3%)和15份(31.25%);抗、中抗灰斑病的材料分别为10份(20.8%)和23份(47.9%);高抗、抗、中抗禾谷镰孢茎腐病的材料分别为5份(10.4%)、14份(29.2%)和18份(37.5%);抗、中抗禾谷镰孢穗腐病的材料分别为5份(10.4%)和26份(54.2%);无高抗灰斑病和穗腐病材料(表4)。

Table 4
表4
表4玉米自交系对5种病害的抗性表现
Table 4Resistance evaluation of maize inbred lines to 5 diseases
自交系
Inbred line
类群划分
Sub-group
大斑病
Northern leaf blight
小斑病
Southern leaf blight
灰斑病
Gray leaf spot
禾谷镰孢茎腐病
Gibberella stalk rot
禾谷镰孢穗腐病
Gibberella ear rot
1145P78599HRRRHRMR
2082NSSSRRMRRMR
AMD43NSSSSHSHSHSS
B110BSSSSHSSMRMR
B73BSSSSHSHSSR
CML170TSTHRRRHRMR
KA064陕A群ShaanAMRHRSMRMR
KA081陕A群ShaanAHRRMRRS
KA103陕A群ShaanARRRSMR
KA105陕A群ShaanARRMRRR
KA106陕A群ShaanAMRMRSMRMR
KA109陕A群ShaanARMRMRMRS
KA115陕A群ShaanAHRMRMRMRMR
KA147陕A群ShaanARRMRRS
KA203陕A群ShaanARRMRHRHS
KA225陕A群ShaanAMRSMRSHS
KA327陕A群ShaanARRRMRMR
KB019陕B群ShaanBMRMRMRSMR
KB020陕B群ShaanBHRHRMRRMR
KB024陕B群ShaanBRHSSMRMR
KB025陕B群ShaanBMRHSSMRMR
KB043陕B群ShaanBMRMRSRS
KB052陕B群ShaanBMRSSSMR
KB062陕B群ShaanBSSHSRS
KB081陕B群ShaanBSMRMRMRMR
KB089陕B群ShaanBMRHSSHSMR
KB102陕B群ShaanBRRRRS
KB106陕B群ShaanBMRSSMRS
KB107陕B群ShaanBMRSMRSR
KB109陕B群ShaanBRSMRRMR
KB128陕B群ShaanBMRMRMRMRMR
KB204陕B群ShaanBRMRMRSR
KB207陕B群ShaanBRRSRS
KB227陕B群ShaanBRMRMRRS
KB243陕B群ShaanBRSSMRMR
KB588陕B群ShaanBHRMRMRMRS
Mo17LanRMRMRMRMR
NW-H537ReidMRRMRRMR
PH4CVLanSMRMRMRHS
PH6WCBSSSRMRRHRHS
PHK42NSSSMRRMRMRMR
PHN11NSSSSSHSMRMR
PHT60NSSSRSMRMRS
X178P78599HRRRHRMR
昌7-2 Chang7-2SPTHRMRRSHS
黄早四HZSSPTMRMRMRHSR
沈137 Shen137P78599HRRRRMR
郑58 Zheng58ReidRRRRMR
BSSS:爱荷华州坚秆综合种;NSSS:非坚秆综合种;TST:热带亚热带种质;Lan:兰卡斯特群;SPT:唐四平头群
BSSS: Iowa Stiff Stalk Synthetic; NSSS: Non-Stiff Stalk Synthetic; TST: Tropical and Subtropical Germplasm; Lan: Lancaster; SPT: Sipingtou heterotic group

新窗口打开|下载CSV

兼抗3种叶斑病的材料有1145、CML170、KA103、KA327、KB102、X178、沈137和郑58共8份材料,对5种病害综合抗性表现优良的自交系有1145、CML170、KA105、KB020、X178、沈137和郑58共7份材料(表4)。

2.2 5种病害抗病性相关性分析

对48份自交系的5种病害抗性BLUP值进行成对相关性分析(图3),结果表明,灰斑病与大斑病抗性相关性最高,相关系数达到0.74(P< 0.001),灰斑病与小斑病抗性的相关系数为0.67(P<0.001),大斑病与小斑病抗性的相关系数为0.61(P<0.001)。禾谷镰孢茎腐病与3个叶斑病的抗性也呈极显著正相关,相关系数介于0.37—0.57(P<0.01),其中,大斑病与茎腐病抗性的相关性最高。禾谷镰孢穗腐病与其他4个病害的抗性之间无显著相关性。

图3

新窗口打开|下载原图ZIP|生成PPT
图3玉米自交系对不同病害的抗性BLUP值相关性分析

蓝色代表两组BLUP值之间在P<0.01水平呈显著正相关
Fig. 3Phenotypic correlations for all pairs of traits based on BLUPs

Positive correlations with P<0.01 are highlighted in blue


2.3 4个已知抗病基因分子标记鉴定结果

针对本研究鉴定的5种病害,目前已报道的图位克隆的抗病基因有5个,抗禾谷镰孢茎腐病位点qRfg2的抗病基因功能变异位点尚不清楚,因此,无法进行抗病等位基因的准确鉴定。选择抗禾谷镰孢茎腐病主效位点qRfg1、抗炭疽茎腐病主效位点Rcg1、抗大斑病位点Htn1和多抗小斑病与灰斑病的ZmCCoAOMT2,利用已发表的引物或根据已知基因序列信息设计引物(表2),对48份自交系进行抗病位点基因型检测。结果表明(表5),1145、KA081和沈137带有抗病的qRfg1等位基因,只有1份材料KB109带有抗病的Rcg1等位基因,KA081、KA115、KA147、KA327、KB020、KB043、KB052、KB106、KB128、KB207、KB243、PH6WC和沈137共13份材料带有抗病的Htn1,1145、KA064、KA106等25份自交系带有抗病的ZmCCoAOMT2等位基因。其中,沈137带有3个抗病等位基因,包括qRfg1Htn1ZmCCoAOMT2

Table 5
表5
表5玉米自交系已克隆抗病基因基因型检测结果
Table 5Test results of the cloned resistance genes in maize inbred lines
自交系
Inbred line
抗病基因Disease resistance gene
qRfg1Rcg1Htn1ZmCCoAOMT2
1145RRrrrrRR
2082rrrrrrrr
AMD43rrrr未知UnknownRR
B110rrrr未知UnknownRR
B73rrrrrrrr
CML170rrrrrrrr
KA064rrrrrrRR
KA081RRrrRRrr
KA103rrrr未知Unknownrr
KA105rrrrrrrr
KA106rrrr未知UnknownRR
KA109rrrrrrRR
KA115rrrrRRrr
KA147rrrrRRRR
KA203rrrr未知UnknownRR
KA225rrrr未知UnknownRR
KA327rrrrRRRR
KB019rrrr未知UnknownRR
KB020rrrrRRrr
KB024rrrr未知UnknownRR
KB025rrrrrrRR
KB043rrrrRRrr
KB052rrrrRRRR
KB062rrrr未知UnknownRR
KB081rrrrrrrr
KB089rrrr未知UnknownRR
KB102rrrrrr未知Unknown
KB106rrrrRRRR
KB107rrrr未知UnknownRR
KB109rrRR未知UnknownRR
KB128rrrrRRrr
KB204rrrr未知Unknown未知Unknown
KB207rrrrRRrr
KB227rrrrrrrr
KB243rrrrRRRR
KB588rrrr未知Unknownrr
Mo17rrrr未知UnknownRR
NW-H537rrrr未知Unknownrr
PH4CVrrrr未知Unknownrr
PH6WCrrrrRRrr
PHK42rrrr未知Unknownrr
PHN11rrrr未知Unknownrr
PHT60rrrr未知UnknownRR
X178rrrr未知UnknownRR
昌7-2 Chang7-2rrrr未知Unknownrr
黄早四 HZSrrrr未知Unknown未知Unknown
沈137 Shen137RRrrRRRR
郑58 Zheng58rrrr未知UnknownRR
RR:纯合抗病等位基因;rr:纯合感病等位基因
RR: Homozygous resistant allele; rr: Homozygous susceptible allele

新窗口打开|下载CSV

3 讨论

茎腐病、穗腐病、大斑病、小斑病和灰斑病是世界范围内重要的玉米病害[36,37]。大部分研究针对单一病害开展种质资源的自然发病鉴定或人工接种鉴定,缺乏对多个病害的多年多点重复接种鉴定[3,7-8]。玉米对这些病害的抗性都是复杂的数量抗性,鉴定结果受环境条件影响较大,自然发病条件下可能存在发病不充分的现象,影响鉴定结果的准确性。本研究对国内外48份优良自交系开展多个环境下大斑病、小斑病、禾谷镰孢茎腐病、禾谷镰孢穗腐病的田间接种鉴定和灰斑病自然发病鉴定,发现测试群体中抗叶斑病的种质较为丰富,茎腐病、穗腐病的抗原不多,一方面,可能由于叶斑病比茎腐病、穗腐病抗性更容易在育种中被选择;另一方面,可能由于茎腐病、穗腐病缺乏主效抗性基因,很难通过传统育种选择,同时聚合多个抗病位点。大斑病、小斑病和灰斑病抗性之间呈极显著正相关,相关系数高达0.61—0.74,暗示这3种叶斑病抗性可能有共同的遗传基础,可进一步挖掘多抗叶斑病的数量性状位点。此外,研究发现一些兼抗2种或2种以上病害的材料,其中,1145、CML170、KA105、KB020、X178、沈137和郑58对5种病害的综合抗性表现良好,可作为供体亲本进行自交系的综合抗性改良。与抗病基因紧密连锁的分子标记可用于抗病性辅助育种,加快抗病育种进程。玉米抗丝黑穗病主效位点qHSR1和抗禾谷镰孢茎腐病主效位点qRfg1已被成功用于分子标记辅助改良不同玉米材料的抗病性[38,39]。玉米种质资源遗传变异丰富,明确不同材料中携带的抗病基因类型,可为抗病分子育种提供准确的抗原信息,优化抗性改良的策略。本研究发现,1145、KA081和沈137共3份材料携带抗病的qRfg1等位基因,对茎腐病表现均为抗病以上级别;只有KB109这1份材料带有抗炭疽茎腐病的Rcg1等位基因,其对禾谷镰孢茎腐病也表现为抗病,该结果暗示qRfg1Rcg1这些茎腐病数量抗性位点可能对不同病原真菌引起的玉米茎腐病均有抗性,同时也表明qRfg1Rcg1在测试群体中属于稀有等位基因,可通过分子标记辅助选择导入感病材料进行茎腐病抗性改良。带有抗大斑病的Htn1的材料有13份,其中,9份自交系对大斑病表现为抗病以上级别,4份表现为中抗,说明Htn1对大斑病的抗性改良效果明显。具有抗病的ZmCCoAOMT2等位基因的材料有25份,其中12份对小斑病表现中抗以上表型,14份对灰斑病表现中抗以上表型,10份材料同时对小斑病和灰斑病表现中抗以上表型,说明ZmCCoAOMT2作为一个微效抗病基因,在进行小斑病和灰斑病抗性改良时,必须与其他基因聚合使用,才能达到理想的效果。沈137对5种病害的综合抗性表现良好,同时携带qRfg1Htn1ZmCCoAOMT2共3个抗病等位基因,可利用这3个基因的功能分子标记同时进行3种病害的辅助改良。

目前,在玉米中克隆的抗病基因还很少,针对本研究鉴定的5个病害,只克隆了3个抗茎腐病基因(qRfg1qRfg2Rcg1)、1个抗大斑病基因(Htn1)和1个兼抗小斑病和灰斑病的基因(ZmCCoAOMT2)。qRfg2的功能变异位点还不清楚,因此,无法进行抗病基因的准确鉴定。目前还没有克隆穗腐病的抗病基因。研究表明这些病害的抗性都是复杂的数量性状,由多个遗传位点控制,因此,需要进一步挖掘新的抗病基因。本研究发现,对茎腐病表现中抗及以上表型的材料有37份,而带有抗病qRfg1等位基因的材料只有3份;对大斑病表现中抗及以上表型的材料有41份,带有抗病Htn1等位基因的材料只有13份;对小斑病、灰斑病表现中抗及以上表型的材料各有33份,而带有抗病ZmCCoAOMT2等位基因的材料仅有10份对小斑病和灰斑病均表现中抗以上表型。这些结果充分说明,大部分抗病材料中还有未知抗病基因亟待发掘。例如,本研究发现有一些综合抗性表现良好的自交系如CML170和KA105,并不携带任何已知的抗病基因,但对5种病害均表现出良好的抗性,因此,可以进一步从中挖掘新的抗病位点。

茎腐病、穗腐病致病菌复杂多样,发病程度与环境条件密切相关[7,40]。本文只选择了禾谷镰孢菌进行接种鉴定,后续研究将对关键材料进行肿囊腐霉菌、拟轮枝镰孢菌等多个致病菌的接种鉴定,通过多年多点数据明确种质对不同病原菌的综合抗性,确保材料抗病性的稳定性和持久性。另外,由于茎腐病和穗腐病表型鉴定的复杂性,建议设置多个重复,提高鉴定的准确性。灰斑病目前还没有成熟的人工接种鉴定的统一标准,采用自然发病取决于选择的鉴定地点和当年的气候条件,陕西省镇坪县是玉米尾孢灰斑病的高发区[6,41],有研究表明,不同玉米种质对玉米尾孢和玉蜀黍尾孢菌的抗性可能不一样,因此需要进一步对玉蜀黍尾孢灰斑病进行抗性鉴定。

4 结论

1145、CML170、KA105、KB020、X178、沈137和郑58这7份材料的综合抗性表现良好,KA081、KA115、KB207等多份材料抗2种以上病害。大斑病、小斑病、灰斑病和禾谷镰孢茎腐病抗性之间呈极显著正相关,与禾谷镰孢穗腐病无显著相关。自交系沈137同时携带抗病的qRfg1Htn1ZmCCoAOMT2等位基因,可用于分子标记辅助改良。CML170和KA105不携带已知的4个抗病位点,但对5种病害均表现出良好的抗性,可用于挖掘新的抗病基因。

参考文献 原文顺序
文献年度倒序
文中引用次数倒序
被引期刊影响因子

渠清, 李丽娜, 刘俊, 王绍新, 曹志艳, 董金皋. 我国部分常用玉米种质资源对镰孢菌病害的抗性评价
中国农业科学, 2019,52(17):2962-2971.

[本文引用: 2]

QU Q, LI L N, LIU J, WANG S X, CAO Z Y, DONG J G. Resistance evaluation of some commonly used maize germplasm resources to fusarium diseases in China
Scientia Agricultura Sinica, 2019,52(17):2962-2971. (in Chinese)

[本文引用: 2]

郭成, 王宝宝, 杨洋, 王春明, 周天旺, 李敏权, 段灿星. 玉米茎腐病研究进展
植物遗传资源学报, 2019,20(5):1118-1128.

[本文引用: 2]

GUO C, WANG B B, YANG Y, WANG C M, ZHOU T W, LI M Q, DUAN C X. Advances in studies of maize stalk rot
Journal of Plant Genetic Resources, 2019,20(5):1118-1128. (in Chinese)

[本文引用: 2]

段灿星, 董怀玉, 李晓, 李红, 李春辉, 孙素丽, 朱振东, 王晓鸣. 玉米种质资源大规模多年多点多病害的自然发病抗性鉴定
作物学报, 2020,46(8):1135-1145.

[本文引用: 5]

DUAN C X, DONG H Y, LI X, LI H, LI C H, SUN S L, ZHU Z D, WANG X M. A large-scale screening of maize germplasm for resistance to multiple diseases in multi-plot demonstration for several years under natural condition
Acta Agronomica Sinica, 2020,46(8):1135-1145. (in Chinese)

[本文引用: 5]

张艳, 张叶, 王梓钰, 闻竞, 韩四平, 郭嘉, 邢跃先. 44份玉米自交系对镰孢穗腐病的抗性鉴定
植物遗传资源学报, 2019,20(2):276-283.

[本文引用: 3]

ZHANG Y, ZHANG Y, WANG Z Y, WEN J, HAN S P, GUO J, XING Y X. Evaluation of resistance to Fusarium ear rot in 44 maize inbred lines
Journal of Plant Genetic Resources, 2019,20(2):276-283. (in Chinese)

[本文引用: 3]

张小利. 玉米对大斑病和南方锈病抗病性研究
[D]. 北京: 中国农业科学院, 2013.

[本文引用: 2]

ZHANG X L. Study on the resistance of maize to northern corn leaf blight and southern corn rust
[D]. Beijing: Chinese Academy of Agricultural Sciences, 2013. (in Chinese)

[本文引用: 2]

赵立萍, 王晓鸣, 段灿星, 龙书生, 李晓, 李洪连, 何月秋, 晋齐鸣, 武小菲, 宋凤景. 中国玉米灰斑病发生现状与未来扩散趋势分析
中国农业科学, 2015,48(18):3612-3626.

[本文引用: 3]

ZHAO L P, WANG X M, DUAN C X, LONG S S, LI X, LI H L, HE Y Q, JIN Q M, WU X F, SONG F J. Occurrence status and future spreading areas of maize gray leaf spot in China
Scientia Agricultura Sinica, 2015,48(18):3612-3626. (in Chinese)

[本文引用: 3]

金柳艳, 李明顺, 王志伟, 石洁, 郭宁, 刘树森, 张海剑. 美国玉米自交系对4种病原茎腐病的抗性鉴定及遗传多样性分析
植物遗传资源学报, 2019,20(6):1428-1437.

[本文引用: 3]

JIN L Y, LI M S, WANG Z W, SHI J, GUO N, LIU S S, ZHANG H J. Resistance identification and genetic diversity analysis of American maize inbred lines to four pathogenic stalk rot diseases
Journal of Plant Genetic Resources, 2019,20(6):1428-1437. (in Chinese)

[本文引用: 3]

宋燕春, 裴二芹, 石云素, 王天宇, 黎裕. 玉米重要自交系的肿囊腐霉茎腐病抗性鉴定与评价
植物遗传资源学报, 2012,13(5):798-802.

[本文引用: 1]

SONG Y C, PEI E Q, SHI Y S, WANG T Y, LI Y. Identification and evaluation of resistance to stalk rot (Pythium inflatum Matthews) in important inbred lines of maize
Journal of Plant Genetic Resources, 2012,13(5):798-802. (in Chinese)

[本文引用: 1]

肖明纲, 宋凤景, 孙兵, 左辛, 赵广山, 辛爱华, 李柱刚. 玉米大斑病广谱抗性外引自交系的发掘与抗病基因初步鉴定
作物学报, 2018,44(4):614-619.



XIAO M G, SONG J, SUN B, ZUO X, ZHAO G S, XIN A H, LI Z G. Exploration of foreign maize inbred lines with broad spectrum resistance to northern corn leaf blight and preliminary identification of resistance genes
Acta Agronomica Sinica, 2018,44(4):614-619. (in Chinese)



董怀玉, 薛玉梅, 王丽娟, 刘可杰, 徐秀德. 外引玉米种质对3种玉米叶斑病的抗性鉴定与评价
植物保护, 2015,41(2):167-170.



DONG H Y, XUE Y M, WANG L J, LIU K J, XU X D. Resistance identification and evaluation of introduced maize germplasms to 3 kinds of maize leaf spot
Plant Protection, 2015,41(2):167-170. (in Chinese)



蒙成, 梁庆平, 蒋益敏, 吴地, 吴烈. 70份外引改良玉米种质对广西主要病害抗性鉴定
西南农业学报, 2019,32(4):720-727.



MENG C, LIANG Q P, JIANG Y M, WU D, WU L. Identification on disease resistance of 70 introduced and improved maize to main diseases in Guangxi
Southwest China Journal of Agricultural Sciences, 2019,32(4):720-727. (in Chinese)



WANG X M, ZHANG Y H, XU X, LI H J, WU X F, ZHANG S H, LI X H. Evaluation of maize inbred lines currently used in Chinese breeding programs for resistance to six foliar diseases
The Crop Journal, 2014,2(4):213-222.

DOI:10.1016/j.cj.2014.04.004URL

AFOLABI G, OJIAMBO S, EKPO A, MENKIR A, BANDYOPADHYAY R. Novel sources of resistance to Fusarium stalk rot of maize in tropical Africa
Plant Disease, 2008,92(5):772-780.

DOI:10.1094/PDIS-92-5-0772URL

NYANAPAH J, AYIECHO P, NYABUNDI J, OTIENO W, OJIAMBO P. Field characterization of partial resistance to gray leaf spot in elite maize germplasm
Phytopathology, 2020,110(10):1668-1679.

DOI:10.1094/PHYTO-12-19-0446-RURL

MENKIR A, ADEPOJU A. Registration of 20 Tropical midaltitude maize line sources with resistance to gray leaf spot
Crop Science, 2005,45:803-804.

DOI:10.2135/cropsci2005.0803URL

ELBIETA C, AGNIESZKA W, URSZULA P, MARTA P, JERZY C, UKASZ S. Differences in ear rot resistance and Fusarium verticillioides-produced fumonisin contamination between polish currently and historically used maize inbred lines
Frontiers in Microbiology, 2019,10:449.

DOI:10.3389/fmicb.2019.00449URL

DERERA J, SHIMELIS H, ABERA W, LAING M, WORKU. Northern leaf blight response of elite maize inbred lines adapted to the mid-altitude sub-humid tropics
Cereal Research Communications, 2016,44(1):141-152.

DOI:10.1556/0806.43.2015.037URL

贾娇, 张伟, 孟玲敏, 苏前富, 晋齐鸣. 71份新选育自交系对主要玉米病害的抗性分析
东北农业科学, 2020: 1-6.

[本文引用: 1]

JIA J, ZHANG W, MENG L M, SU Q F, JIN Q M. Resistance analysis of 71 new inbred lines to main maize diseases
Journal of Northeast Agricultural Sciences, 2020: 1-6. (in Chinese)

[本文引用: 1]

余辉, 宋伟, 赵久然, 王凤格, 吴金凤. 分子标记辅助选择玉米自交系京24两种抗病主效基因的聚合
分子植物育种, 2014,12(2):240-245.

[本文引用: 1]

YU H, SONG W, ZHAO J R, WANG F G, WU J F. Two major resistance genes pyramiding on maize inbred line Jing24 with marker assisted selection
Molecular Plant Breeding, 2014,12(2):240-245. (in Chinese)

[本文引用: 1]

SEVERINE H, DANIELA S, SIMON K, BETTINA K, THOMAS W, GERHARD H, MIRJAM F, JAMES B, THOMAS P, MILENA O, BEAT K. The maize disease resistance gene Htn1 against northern corn leaf blight encodes a wall-associated receptor-like kinase
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2015,112(28):8780-8785.

[本文引用: 1]

YANG Q, HE Y J, MERCY K, TIMOTHY C, AMY K, ELI B, BIAN Y, FARID K, YANG L, PAULO T, JUDITH K, REBECCA N, MICHAEL K, JEFFERY D, RANDALL W, JEFFREY C, LI X, NICK L, PETER B. A gene encoding maize caffeoyl-CoA O-methyltransferase confers quantitative resistance to multiple pathogens
Nature Genetics, 2017,49(9):1364-1372.

DOI:10.1038/ng.3919URL [本文引用: 1]

WANG C, YANG Q, WANG W X, LI Y P, GUO Y L, ZHANG D F, MA X N, SONG W, ZHAO J R, XU M L. A transposon-directed epigenetic change in ZmCCT underlies quantitative resistance to Gibberella stalk rot in maize
New Phytologist, 2017,215(4):1503-1515.

DOI:10.1111/nph.2017.215.issue-4URL [本文引用: 1]

YE J R, ZHONG T, ZHANG D F, MA C Y, WANG L N, YAO L S, ZHANG Q Q, ZHU M, XU M L. The auxin-regulated protein ZmAuxRP1 coordinates the balance between root growth and stalk rot disease resistance in maize
Molecular Plant, 2019,12(3):360-373.

DOI:10.1016/j.molp.2018.10.005URL [本文引用: 1]

FREY J. Fitness evaluation of Rcg1, a locus that confers resistance to Colletotrichum graminicola (Ces.) G.W. Wils. using near-isogenic maize hybrids
Crop Science, 2011,51(4):1551-1563.

DOI:10.2135/cropsci2010.10.0613URL [本文引用: 1]

王金萍, 刘永伟, 孙果忠, 王海波. 抗茎腐病分子标记在159份玉米自交系中的验证及实用性评价
植物遗传资源学报, 2017,18(4):754-762.

[本文引用: 1]

WANG J P, LIU Y W, SUN G Z, WANG H B. Evaluation and validation of molecular markers associated with stalk rot resistance in 159 maize inbred lines
Journal of Plant Genetic Resources, 2017,18(4):754-762. (in Chinese)

[本文引用: 1]

杨洋, 郭成, 孙素丽, 陈国康, 朱振东, 王晓鸣, 段灿星. 玉米抗腐霉茎腐病种质标记基因型鉴定与遗传多样性分析
植物遗传资源学报, 2019,20(6):1418-1427.

[本文引用: 1]

YANG Y, GUO C, SUN S L, CHEN G K, ZHU Z D, WANG X M, DUAN C X. Marker-assisted identification and genetic diversity analysis of maize germplasm resources with resistance to Pythium stalk rot
Journal of Plant Genetic Resources, 2019,20(6):1418-1427. (in Chinese)

[本文引用: 1]

程品冰, 王晓鸣, 高卫东. 玉米抗大斑病基因Ht2、Ht3分子标记的应用检测
植物遗传资源学报, 2007(3):285-288.

[本文引用: 1]

CHENG P B, WANG X M, GAO W D. Practical detection of molecular markers for resistance gene Ht2, Ht3 to northern corn leaf blight
Journal of Plant Genetic Resources, 2007(3):285-288. (in Chinese)

[本文引用: 1]

SERMONS S, BALINT-KURTI P. Large scale field inoculation and scoring of maize southern leaf blight and other maize foliar fungal diseases
Bio-protocol, 2018,8(5):e2745.

[本文引用: 1]

YANG Q, YIN G M, GUO Y L, ZHANG D F, CHEN S J, XU M L. A major QTL for resistance to Gibberella stalk rot in maize
Theoretical and Applied Genetics, 2010,121(4):673-687.

DOI:10.1007/s00122-010-1339-0URL [本文引用: 2]

ZILA C T, SAMAYOA L F, SANTIAGO R, BUTRON A, HOLLAND J B. A genome-wide association study reveals genes associated with Fusarium ear rot resistance in a maize core diversity panel
Genes Genomes Genetics, 2013,3(11):2095-2104.

[本文引用: 1]

DONG C P, WU Y B, GAO J Y, ZHOU Z J, MU C, MA P P, CHEN J F, WU J Y. Field inoculation and classification of maize ear rot caused by Fusarium verticillioides
Bio-protocol, 2018,8(23):e3099.

[本文引用: 1]

JILL R. L, MATTHEW K, MAJOR G, SHERRY F, PETER J. B, Identification of alleles conferring resistance to gray leaf spot in maize derived from its wild progenitor species teosinte
Crop Science, 2016,56(1):209-218.

DOI:10.2135/cropsci2014.07.0468URL [本文引用: 1]

BALINT-KURTI P J, YANG J Y, VAN G, JUNG J, SMITH M. Use of a maize advanced intercross line for mapping of QTL for northern leaf blight resistance and multiple disease resistance
Crop Science, 2010,50(2):458-466.

DOI:10.2135/cropsci2009.02.0066URL [本文引用: 1]

HOLLAND J B, NYQUIST W E, CUAUHTEMOC T. Estimating and interpreting heritability for plant breeding: An update
Plant Breeding Reviews, 2002: 9-112.

[本文引用: 1]

MURRAY M G, THOMPSON W F. Rapid isolation of high molecular weight plant DNA
Nucleic Acids Research, 1980,8(19):4321-4325.

DOI:10.1093/nar/8.19.4321URL [本文引用: 1]

MUELLER D S, WISE K A, SISSON A J, ALLEN T W, BERGSTROM G C, BOSLEY D B, BRADLEY C A, BRODERS K D, BYAMUKAMA E, CHILVERS M I, COLLINS A, FASKE T R, FRISKOP A J, HEINIGER R W, HOLLIER C A, HOOKER DAVID C, ISAKEIT T, JACKSON-ZIEMS T A, JARDINE D J, KELLY H M, KINZER K, KOENNING S R, MALVICK D K. Corn yield loss estimates due to diseases in the United States and Ontario, Canada, from 2012 to 2015
Plant Health Progress, 2016,17(3):211-222.

DOI:10.1094/PHP-RS-16-0030URL [本文引用: 1]

徐凌, 左为亮, 刘永杰, 刘青青, 陶永富, 徐明良, 叶建荣. 玉米主要病害抗性遗传研究进展
中国农业科技导报, 2013,15(3):18-29.

[本文引用: 1]

XU L, ZUO W L, LIU Y J, LIU Q Q, TAO Y F, XU M L, YE J R. Progress on major gene /QTL for disease resistance in maize
Journal of Agricultural Science and Technology, 2013,15(3):18-29. (in Chinese)

[本文引用: 1]

余辉, 宋伟, 赵久然, 王凤格, 吴金凤. 分子标记辅助选择育成的玉米自交系京24单抗丝黑穗病和茎腐病改良材料性状分析
分子植物育种, 2014,12(1):56-61.

[本文引用: 1]

YU H, SONG W, ZHAO J R, WANG F G, WU J F. Characters analysis on resistance improved materials of Jing24 single-resistance to head smut and stalk rot bred with molecular marker-assisted selection
Molecular Plant Breeding, 2014,12(1):56-61. (in Chinese)

[本文引用: 1]

ZHAO X R, TAN G Q, XING Y X, WEI L, CHAO Q, ZUO W L, THOMAS L, XU M L, Marker-assisted introgression of qHSR1 to improve maize resistance to head smut
Molecular Breeding, 2012,30(2):1077-1088.

DOI:10.1007/s11032-011-9694-3URL [本文引用: 1]

孙华, 张海剑, 郭宁, 石洁, 陈丹, 马红霞. 黄淮海夏玉米主产区穗腐病病原菌的分离鉴定
植物保护学报, 2017,44(5):796-802.

[本文引用: 1]

SUN H, ZHANG H J, GUO N, SHI J, CHEN D, MA H X. Isolation and identification of pathogens causing maize ear rot in Huang-Huai- Hai summer corn region
Journal of Plant Protection, 2017,44(5):796-802. (in Chinese)

[本文引用: 1]

谭世麒. 陕西玉米灰斑病病原菌鉴定及防控药剂和抗病品种的筛选
[D]. 杨凌: 西北农林科技大学, 2019.

[本文引用: 1]

TAN S Q. Pathogen identification of corn gray leaf spot in Shaanxi and screening effective fungicides and resistant variety for disease control
[D]. Yangling: Northwest A&F University, 2019. (in Chinese)

[本文引用: 1]

相关话题/鉴定 基因 材料 未知 环境