叶迪^,1, 施江¹, 高双成¹, 王占营², 史国安^,11河南科技大学牡丹学院/洛阳市牡丹生物学重点实验室,河南洛阳 471023
²洛阳农林科学院牡丹研究所,河南洛阳 471000

Correlation Analysis of Auxin Involved in the Process of Petal Abscission of Tree Peony Luoyanghong Cut Flowers by Ethylene Promoting

YE Di^,1, SHI Jiang¹, GAO ShuangCheng¹, WANG ZhanYing², SHI GuoAn^,11College of Mudan, Henan University of Science and Technology/Luoyang Key Laboratory of Peony Biology, Luoyang 471023, Henan
²Research Institute of Peony, Luoyang Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Luoyang 471000, Henan

通讯作者: 史国安,E-mail： gashi1963@163.com

责任编辑: 赵伶俐
收稿日期:2021-02-10接受日期:2021-04-19

基金资助:

国家重点研发计划(2018YFD1000407) 国家自然科学基金(31372098) 河南省自然科学基金(162300410075)

Received:2021-02-10Accepted:2021-04-19
作者简介 About authors
叶迪,E-mail： yedi1208@163.com。







摘要
【目的】探讨牡丹切花衰老过程中花瓣萎蔫脱落的生理机制,为更好地开发牡丹切花贮藏保鲜技术提供理论依据。【方法】以 ‘洛阳红’牡丹为试材,分别用去离子水（CK）、20 µL·L^-1乙烯拮抗剂可利鲜（AVB）、20 µL·L^-1乙烯释放剂乙烯利（CEPA）处理1 h时及20 µL·L^-1可利鲜预处理1 h后再用20 µL·L^-1乙烯利处理1 h（AVB+CEPA）,然后插入去离子水进行单枝瓶插,观测不同预处理的生理效应。利用显微镜观察花瓣离层细胞形态,通过拉力试验测定瓶插过程中花瓣抗脱落力,运用生理生化手段测定乙烯与生长素代谢、离层水解相关酶活性和PsETR1、PsCTR1、PsEIN3、PsERF1、PsYUCCA10、PsPIN1、PsPME1、PsPG1及PsBG1的相对表达量。【结果】牡丹‘洛阳红’切花花瓣基部有明显的离层结构;AVB预处理明显推迟了切花乙烯跃变出现的时间,乙烯释放峰值降低34.9%（P<0.05）,提高了花瓣的抗脱落力,降低了花瓣基部多聚半乳糖醛酸酶（PG）、β-葡萄糖苷酶（BG）活性和PsPG1、PsBG1表达量,延缓了牡丹切花的衰老进程,显著延长了切花的瓶插寿命;外源CEPA明显加快了花瓣内源乙烯的释放速率,提高了生长素氧化酶（IAAO）、PG和BG活性,加快了切花花瓣的离层细胞的衰老,减小了花瓣的抗脱落力,从而促进了花瓣的萎蔫脱落;AVB+CEPA复合预处理瓶插寿命和最佳观赏期与对照组相差不大,CEPA能够部分抵消AVB的生理效应。【结论】对乙烯敏感型切花牡丹‘洛阳红’,内源生长素参与了乙烯促进花瓣离层细胞脱落的过程,控制乙烯是改善其切花瓶插品质的基础途径。
关键词： 牡丹;切花;离区;乙烯;生长素;脱落

Abstract
【Objective】The aim of this study was to explore the physiological mechanisms of petal wilting and abscission during the senescence of cut tree peony flowers, so as to provide the theoretical basis for better development of storage and preservation technology of cut tree peony flowers.【Method】The cut flowers were pretreated with deionized water (CK), 20 µL·L^-1 ethylene antagonist Correxian (AVB), 20 µL·L^-1 ethylene releasing agent ethephon (CEPA), and 20 µL·L^-1 Correxian for 1 h, respectively, followed by 20 µL·L^-1 ethephon 1 h (AVB+CEPA). The flowers were then placed in individual vases filled with distilled water. The morphology of the petals absciss zone cells were observed by using a microscope. The petal anti-falling ability was determined by using the tensile test during the vase cutting process. The physiological effects of different pretreatments were observed respectively using the physiological and biochemical methods to determine the ethylene and auxin metabolism, the absciss zone hydrolysis-related enzyme activities, and the relative expressions of PsETR1, PsCTR1, PsEIN3, PsERF1, PsYUCCA10, PsPIN1, PsPME1, PsPG1 and PsBG1 genes. 【Result】 The results showed that the basal petal of the cut tree peony Luoyanghong had a clear separation layer structure. AVB significantly delayed the occurrence of ethylene climacteric in cut flowers, and decreased the ethylene release peak by 34.9% (P<0.05), while the petal anti-falling ability was improved. The activities of polygalaturonase (PG), β-glucosidase (BG) and the expressions of PsPG1 and PsBG1 genes at the base of the petals absciss zone were reduced, which delayed the senescence process of cut tree peony flowers, thus significantly extended its vase life. Nevertheless, the exogenous CEPA significantly accelerated the release rate of endogenous ethylene in the petals, increased the activities of IAA oxidase (IAAO), PG and BG, accelerated the senescence of the absciss zone cells in the petals of cut flowers, and reduced the petal anti-falling ability, thus promoted its wilting and falling. Meanwhile, the vase life and the optimal viewing period of AVB+CEPA composite pretreatment were not much different from control, so CEPA could partially offset the physiological effects of AVB. 【Conclusion】 For the ethylene sensitive cut tree peony Luoyanghong, endogenous auxin was involved in the process of ethylene promoting the abscission of petal absciss zone cells. The control of ethylene was the basic way to improve the quality of Luoyanghong cut flowers.
Keywords：tree peony;cut flowers;absciss zone;ethylene;auxin;abscission


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本文引用格式
叶迪, 施江, 高双成, 王占营, 史国安. 乙烯促进牡丹‘洛阳红’切花花瓣脱落与内源生长素的关联性分析. 中国农业科学, 2021, 54(23): 5097-5109 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2021.23.014
YE Di, SHI Jiang, GAO ShuangCheng, WANG ZhanYing, SHI GuoAn. Correlation Analysis of Auxin Involved in the Process of Petal Abscission of Tree Peony Luoyanghong Cut Flowers by Ethylene Promoting. Scientia Acricultura Sinica, 2021, 54(23): 5097-5109 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2021.23.014


开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

0 引言

【研究意义】牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.）鲜切花是国内外切花市场的高档花材,极具市场发展前景。通常切花观赏的核心是花朵,但花瓣衰老脱落在很大程度上决定着一朵花的观赏价值和经济价值的高低,对花卉业至关重要^[1,2,3,4,5]。牡丹切花离开母体后衰老加快,开放时间明显缩短,观赏品质受到严重影响,制约了牡丹切花产业的发展^[6],深入开展牡丹切花保鲜理论与技术研究具有重要意义。【前人研究进展】‘洛阳红’是乙烯敏感型花卉,瓶插期间出现明显的乙烯跃变现象^[6,7,8,9]。牡丹花朵开放和衰老脱落受到多方面因素的调控,包括温度、外源糖、乙烯及其作用抑制剂等^{[8,9,10,11,12,13,14,15]},萎蔫和落瓣是其主要衰老特征。器官脱落是高等植物生命周期中一个重要的发育事件^[16],包括衰老叶片、幼蕾、幼铃、成熟果实、成熟种子,以及花朵和部分花器官的脱落等^[17,18]。器官脱落是调节植物体内有机营养物质和矿物质的合理转运与再分配的重要过程^[19],花瓣脱落也属于正常脱落现象之一^[20]。植物器官发生脱落的区域称为离区或离层（absciss zone,AZ）,由几层小而细胞质密集的细胞组成,细胞之间缺乏大的空泡和成熟特征^[21],类似于未分化细胞^[22]。不同植物类型、不同器官与组织中花瓣离层细胞层数存在一定差异,如拟南芥（Arabidopsis thaliana）花瓣的离层细胞有4—6层^[16],水稻离层细胞有12层^[23]。植物花瓣或花被离层部位一般在花瓣基部与花托相连,当花瓣开启衰老进程时,激活相关代谢过程,开始释放水解酶类,离层细胞壁降解,进而离层细胞发生解体,最终导致花瓣脱落^[19,24]。乙烯和生长素共同控制着植物离层细胞的解体过程^[25,26]。生物体内重要的发育过程都有生长素参与,依赖Trp的TAA/YUC合成途径将Trp转化为IAA,调控植物的生长发育^[27]。生长素梯度学说指出,离层的生长素梯度变化能启动脱落,乙烯能够加速这一过程^[17,28]。在许多不同的物种（拟南芥、番茄）和器官（叶片、花瓣、花朵和果实等）中,乙烯加速离层的形成,促进器官脱落^[25,29]。外源施用乙烯或乙烯利能促进植物器官的脱落,外源乙烯处理加快石斛兰和玫瑰花朵脱落^[30,31]。在月季切花衰老过程中,生长素含量逐渐降低,而高含量生长素能抑制器官脱落^[25],生长素的转运调控了蔗糖向花瓣的运输,延缓了乙烯诱导的花瓣脱落^[32]。【本研究切入点】关于牡丹切花花瓣衰老脱落机制研究的报道尚少。基于前期研究,推测牡丹花朵开放和衰老中呼吸跃变受到乙烯和生长素的共同调控,其中伴随着离层水解酶类活性升高以及相关基因表达变化。【拟解决的关键问题】本研究用乙烯拮抗剂（AVB）预处理,结合乙烯释放剂乙烯利（CEPA）预处理,观测牡丹‘洛阳红’切花瓶插过程中花瓣脱落的生理效应,以期为牡丹切花保鲜技术研究提供理论支持。

1 材料与方法

试验于2019年在河南科技大学洛阳市牡丹生物学重点实验室进行。

1.1 试材及取样

供试材料为‘洛阳红’牡丹,于2019年4月14日取自牡丹实验基地,采取开放程度二级（绽口期）的牡丹花枝,采后放入置有冰袋的泡沫箱中,保湿并快速运回实验室。选取生长状态一致的切花,在水中剪切花枝至25 cm,保留2—3片复叶。

将花枝随机分为4组,每组40枝。4个处理包括：对照组用去离子水预处理1 h（CK）;20 µL·L^-1乙烯拮抗剂可利鲜（商用乙烯拮抗剂,荷兰可利鲜公司产品）预处理1 h（AVB）;20 µL· L^-1外源乙烯释放剂乙烯利（40%CEPA,江苏安邦电化有限公司）预处理1 h（CEPA）;AVB预处理1 h,接着再用CEPA预处理1 h（AVB+CEPA）。预处理结束后,用去离子水单枝瓶插。观察花枝形态和瓶插寿命,瓶插过程中测定花瓣生理指标,并采取1 cm长度的花瓣基部样品,经液氮速冻后保存在-80℃备用。

瓶插环境温度设为23—25℃,相对湿度在50%—60%,光照12 h/光暗12 h。

1.2 测定指标与方法

1.2.1 离区细胞形态观察 将切花的花朵整体切下,纵切为两半,徒手撕取带有花托的花瓣,将花瓣上部分切除,留取1 cm带有花托的花瓣基部,在解剖镜下用尖头镊和刀片撕取合适的切片,用70%乙醇固定,5%番红染色,依次用70%、85%和95%乙醇梯度冲洗,再用0.05%固绿复染色,100%乙醇固色,50%乙醇-50%二甲苯混合溶液透明,100%二甲苯固定,中性树胶封片,在普通光学显微镜下观察拍照,放大倍数为10倍^[33]。

1.2.2 瓶插品质 从瓶插0 d起,每天在同一时间观察统计花朵的开放等级,测量花朵直径,记录花朵的开放和衰老进程。最佳观赏期为半开期到50%花枝进入始衰期的天数;瓶插寿命为瓶插0 d到50%花枝花瓣开始萎蔫落瓣的天数。

1.2.3 花瓣抗脱落力 依据物理力学原理,自制一个测力装置。用脱脂棉包裹花枝后固定到工作台上,用长尾夹夹紧花瓣中部,链接一根光滑的细尼龙绳,绳子另一端穿过两个无阻尼的定滑轮,链接上与长尾夹等质量的小砝码盘,在砝码盘中增加砝码,直至花瓣脱落,记录添加砝码的总质量。在每一次测量中,花枝和砝码盘的高度以及绳子的长度和角度都保持不变。每个时间点测定外、内层花瓣的抗脱落力,每个测定5个重复,并计算测量值的平均值。依据作用力与反作用力相等的原理,统计花瓣抗脱落力的大小。

1.2.4 乙烯释放速率、ACC含量、ACS和ACO活性 参照王哲等^[34]的方法,取花瓣基部0.5 cm称量后放入集气瓶中,静置3 h后采用顶空法,抽取5 mL混合气体注入气相色谱仪中,测定乙烯释放速率。试验使用GC-7890Ⅱ气相色谱仪（上海天美）测定,分析检测器为FID检测器,分析条件为进样口温度120℃,Porapak Q 色谱柱,柱长2 m,内径3 mm,柱温45℃,检测口温度140℃,燃气（H₂）流速25 mL·min^-1,载气（N₂）流速25 mL·min^-1,空气流速250 mL·min^-1。

1-氨基环丙烷-1-羧酸（1-aminocyclopropane1- carboxylate acid,ACC）含量采用Concepcion^[35]的方法测定。

ACS（ACC synthase）活性采用FERNÁNDEZ- MACULET和YANG^[36]的方法测定。ACO（ACC oxidase）活性采用KATO和HYODO^[37]的方法测定。

1.2.5 生长素（IAA）含量 参考YANG等^[38]的方法,采用酶联免疫吸附分析法（ELISA）检测花瓣基部IAA含量。取0.5 g花瓣基部样品加提取液快速匀浆,4℃冰箱放置4 h,4 000 r/min离心10 min,取上清液,沉淀中加1 mL提取液,混合均匀,置4℃再提取1 h,离心得上清,合并上清液过C-18固相萃取柱,将过柱后的样品转入5 mL塑料离心管中,氮吹仪吹干,用样品稀释液稀释至1 mL。样品测定按ELISA试剂盒说明书进行,试剂盒由中国农业大学植物生长调控重点实验室提供。

1.2.6 IAAO活性 参考张志良^[39]分光光度法改进试验温度和反应条件,测定花瓣基部IAA氧化酶（IAAO）活性。取0.5 g花瓣基部样品加5 mL pH 6.0磷酸缓冲液冰浴匀浆,4 000 r/min离心15 min,上清液即为酶液,试管中加氯化锰1 mL、二氯酚1 mL、IAA标品2 mL、磷酸缓冲液5 mL、酶液1 mL,混合均匀,弱光条件下置于30℃水浴中孵育30 min,吸取混合液2 mL,加入FeCl₃和过氯酸混合液,摇匀置于40℃的黑暗处保温30 min,显色后用分光光度计测定A₅₃₀吸光值。

1.2.7 水解酶类活性 果胶甲酯酶（PME）活性测定参考LOHANI等^[40]的方法;多聚半乳糖醛酸酶（PG）和β-葡萄糖苷酶（BG）测定参考曹建康^[41]等的方法。

1.3 基因表达分析

使用RNAprep Pure Plant Plus Kit（北京天根科技有限公司）提取‘洛阳红’花瓣的总RNA,用Fastking cDNA 第一链合成试剂盒（北京天根科技有限公司）将 RNA 进行反转录获得cDNA,选择PsD-GAPDH作为内参基因,测定瓶插过程中PsETR1、PsCTR1、PsEIN3、PsERF1、PsYUCCA10、PsPIN1、PsPME1、PsPG1、PsBG1的相对表达量。荧光实时定量PCR反应在Roche Light Cycle 96 PCR仪上进行。反应体系和反应程序参照TB Green^TM Premix Ex Taq^TMⅡ（Tli RNaseH Plus）说明书进行。引物（表1）委托华大基因股份有限公司合成。

Table 1
表1
表1qRT-PCR引物序列
Table 1The primer sequences for qRT-PCR

基因 Gene	正向引物序列（5′-3′） Foward primer sequence	反向引物序列（5′-3′） Reverse primer sequence	预期大小 Expected size (bp)
PsD-GAPDH	TGTTCACTCCATCACTGCTAC	ACATCCACAGTAGGAACACGA	189
PsETR1	CGTGGGTCGTCAGAGTGTGT	CCTTGCACCTGCCGTTCTTG	153
PsCTR1	CTCAACCCAGCCGTACAGACAT	CGGGCAGTAAACAACAGAAAAT	182
PsEIN3	TTTGTGAGCTTTGGGGGTGT	GCCAACTCTGCAACACGAAA	190
PsERF1	AGTCGGAAAGGAGCTAGGGT	TTCAGACACCGACGAACACC	147
PsYUCCA10	CAACATACGTGCCAAGAG	GGTAGCCACCACCAGAAA	206
PsPIN1	GGCCGTTGTCCCTCTCTATG	AAAGGGGTACGGCGAAGATG	125
PsPME1	ATGCTTGGACGGTCTGAT	GCTGGAGGTATGGATTTC	193
PsPG1	GATGCGTCTTCTCTTCCT	GGTTTCGTCACATTCTAC	190
PsBG1	ATTTCTACTCCCCGCCAT	GGGGCTTTGTTGTTCACT	195

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1.4 数据处理

采用Microsoft Office Excel 2016软件及SPSS20.0进行数据整理及图表绘制,在显著性检验的基础上采用Duncan多重比较进行显著性分析,显著水平P<0.05。

2 结果

2.1 花瓣离区形态

‘洛阳红’切花衰老过程中花瓣逐渐萎蔫脱落,从靠近雌蕊的内层花瓣最早开始脱离花托,靠近萼片的外层花瓣最后脱落。图1-A为切花花器官分布情况,图1-B为切花盛开期花瓣和花托的连接状态,图1-C为解剖镜下与花托相连的单片花瓣,图1-D和图1-E为花瓣与花托相连的细胞状态。图1-E为离区放大部分,上半部分为正常花瓣细胞,排列规则紧密,接近离层的部分细胞逐渐变小,下半部分为花托细胞,排列疏松不规则,中间相连的部分为离层细胞,约有2—5层,部分细胞已经转化为横向排列的细胞,与花瓣和花托的细胞形态明显不同。

图1

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图1花瓣基部细胞形态观察（箭头表示离层）

Fig. 1Observation of cell morphology at the basal petal (The arrowhead shows the separation layer)

2.2 切花形态和瓶插品质变化

CK瓶插1 d后进入盛开期,4 d时花瓣开始萎蔫失水,6 d开始落瓣;与CK相比,AVB处理在2 d时达到盛花期且一直不脱落;CEPA处理在4 d时花瓣逐渐失水萎蔫,且花径较大,5 d开始脱落,至6 d结束瓶插;AVB+CEPA处理在4 d时花瓣逐渐失水萎蔫, 但在7 d时才开始脱落（图2）。AVB预处理能明显延缓切花花瓣脱落,CEPA加快花瓣脱落,而CEPA能够部分抵消AVB的抗脱落效应,说明乙烯在调控‘洛阳红’花瓣脱落过程中起着重要的生理作用。

图2

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图2牡丹切花瓶插过程中形态变化

Fig. 2The morphology changes of cut tree peony flowers in vases



由表2可知,牡丹切花在瓶插过程中,CK组的瓶插寿命、最佳观赏期和最大花径分别为（5.9±0.3）d、（4.5±0.5）d和（11.15±2.2）cm。与对照组相比,CEPA预处理瓶插寿命缩短了1.1 d,最佳观赏期缩短了0.4 d,最大花径增大了1.71 cm;AVB预处理最大花径增大了1.04 cm（P<0.05）;AVB+CEPA组瓶插寿命缩短了0.1 d,最佳观赏期缩短了0.2 d,最大花径增大了1.71 cm,均达到显著水平（P<0.05）。乙烯拮抗剂AVB预处理延缓了牡丹切花的衰老进程,而外源乙烯释放剂CEPA则加速花朵开放和衰老,意味着调控乙烯代谢能够有效地调控‘洛阳红’切花的瓶插品质。

Table 2
表2
表2牡丹切花瓶插品质变化
Table 2Changes of quality of cut tree peony flowers in vase

预处理 Pretreatment	瓶插寿命 Vase life (d)	最佳观赏期 Best viewing period (d)	最大花径 Maximum diameter (cm)
CK	5.9±0.3a	4.5±0.5a	11.15±2.2b
AVB	6.0±0.0a	4.5±0. 5a	12.19±1.6ab
CEPA	4.8±0.4b	4.1±0.6b	12.84±1.6a
AVB+CEPA	5.8±0.4ab	4.3±0.6ab	12.84±1.3a

不同小写字母表示不同处理间存在显著差异（P<0.05）
Different lowercase letters mean significant difference among treatments (P<0.05)

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2.3 花瓣脱落力学特性

图3所示,‘洛阳红’切花瓶插期间逐渐衰老脱落,外、内层花瓣抗脱落力有明显差异。外层花瓣的抗脱落力整体比内层大,均呈下降趋势。瓶插前期（0—4 d）,CK处理和AVB处理抗脱落力下降较缓,4 d后外、内层花瓣的抗脱落力均呈现大幅度下降,但AVB抗脱落力显著高于CK,仅萎蔫、不脱落;CEPA瓶插期间外、内层花瓣抗脱落力持续下降,始终低于其他处理,4 d时外层和内层抗脱落力分别比CK降低了55.1%和56.1%（P<0.05）,5 d即出现脱落现象;AVB+CEPA处理外层花瓣抗脱落力变化趋势与CEPA处理类似,至5 d时接近CK,而内层抗脱落力变化在前3 d与CK接近,4 d才迅速下降,说明瓶插前期AVB与CEPA有一定的拮抗作用。表明‘洛阳红’花瓣的抗脱落力能够作为花朵衰老脱落特征的重要指标,AVB通过抑制乙烯作用则显著提高外层花瓣的抗脱落能力,外用乙烯释放剂CEPA降低了内、外层花瓣的抗脱落力,揭示花瓣离层结构变化与脱落密切相关。

图3

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图3牡丹切花花瓣抗脱落力变化

Fig. 3Changes of the anti-falling force of cut tree peony flowers in vase

2.4 花瓣基部乙烯代谢

图4-A所示,‘洛阳红’瓶插期间花瓣基部有明显的乙烯跃变特征。花瓣基部的乙烯释放速率呈现先降低后上升再降低的趋势。CK处理瓶插1 d时降到最低值,4 d时达到乙烯峰值;CEPA明显提高了切花的乙烯峰值,且在瓶插期间一直高于其他处理;AVB降低并推迟了乙烯跃变峰值,乙烯释放速率明显低于CK和CEPA处理,AVB+CEPA处理的乙烯跃变峰值也显著低于CK。

图4

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图4乙烯释放速率、ACC含量、ACS和ACO活性变化

Fig. 4Changes of ethylene release rate, ACC content, ACS and ACO activities



瓶插前期（0—3 d）花瓣ACC含量变化不明显,之后ACC含量迅速增加。与CK相比,AVB显著降低瓶插中期（4—5 d）时花瓣ACC含量,而CEPA则明显提高了瓶插后期花瓣ACC含量;AVB+CEPA处理仅在瓶插末期（6—7 d）高于CK（图4-B）。花瓣ACS和ACO活性均呈现先升高后降低的趋势,AVB抑制ACS和ACO酶活性,而CEPA促进酶活性,CEPA能部分抵消AVB的效应（图4-C和D）。说明‘洛阳红’花瓣乙烯代谢在调控其衰老过程中有重要的生物学作用。

2.5 花瓣基部生长素代谢

图5-A所示,CK处理花瓣基部IAA含量呈现先迅速上升后缓慢下降的趋势,3 d时达到峰值,而后缓慢下降;AVB在5 d时的花瓣IAA含量达到峰值,末期（6—7 d）显著低于CK,7 d时花瓣萎蔫而没有明显脱落;CEPA末期（5—6 d）花瓣IAA含量显著低于CK;AVB+CEPA 第5天时花瓣IAA含量达到峰值,而后降低接着再升高。说明AVB能提高瓶插后期花瓣基部IAA含量,而CEPA则降低瓶插后期花瓣基部IAA含量。瓶插过程中,CK处理的花瓣基部IAAO活性呈现先下降后上升的趋势;AVB降低瓶插末期IAAO活性,CEPA促进瓶插中后期IAAO活性,而AVB+CEPA处理后期IAAO活性一直低于CK（图5-B）。说明‘洛阳红’瓶插中后期,IAA含量和IAAO活性与花瓣衰老脱落存在一定关系。

图5

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图5牡丹切花花瓣基部IAA含量及IAAO活性变化

Fig. 5Changes of IAA contents and IAAO activity in the basal petals of cut tree peony flowers

2.6 水解酶类活性变化

‘洛阳红’花瓣基部的水解酶类活性变化趋势明显（图6）。花瓣PME活性前期上升缓慢,4 d后迅速增加,与CK相比,AVB处理明显降低了PME活性,CEPA显著升高PME活性,CEPA能够抵消AVB的作用。花瓣基部BG和PG活性在瓶插前期变化平缓,瓶插4 d后迅速升高。说明瓶插过程中,花瓣基部的水解酶类活性与花瓣细胞衰老密切相关,其中BG活性升高早于PME和PG。

图6

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图6牡丹切花花瓣基部水解酶类活性变化

Fig. 6Changes of hydrolytic enzymes activity at the basal petals of cut tree peony flowers

2.7 花瓣脱落相关基因差异表达

2.7.1 乙烯信号转导基因PsETR1、PsCTR1、PsEIN3、PsERF1的表达 乙烯受体编码基因PsETR1和PsCTR1表达量呈现先升高后降低趋势（图7-A、B）。CK处理瓶插前期（0.5—3 d）花瓣PsETR1处于较高的表达水平,1—2 d时AVB处理的峰值比CK显著升高了53.2%和19.8%,中后期表达量较低;CEPA和AVB+CEPA处理瓶插初期（0.5—1 d）和后期（5—7 d）高于CK。CK处理瓶插3 d时花瓣PsCTR1表达量到达峰值,AVB处理的峰值较CK提前了2 d,CEPA处理较CK有不同程度的降低,AVB+CEPA处理则在前期较低,后期升高,说明PsCTR1的表达受乙烯拮抗剂（AVB）的影响,表达为上调,AVB和CEPA有拮抗作用。

图7

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图7乙烯信号转导途径相关基因表达量变化

Fig. 7The related gene expressions of ethylene signal transduction pathway



乙烯转录因子编码基因PsEIN3在花瓣中的表达量呈现先升高后降低的趋势,瓶插2 d时出现峰值（图7-C）。AVB处理的瓶插初期（0.5—1 d）显著低于CK,后期呈现波动变化;CEPA和AVB+CEPA处理的表达量总体上低于CK。乙烯响应因子编码基因PsERF1的相对表达量呈现波动式变化趋势（图7-D）,AVB处理的瓶插初期表达量增加后迅速下降,4 d时再次达到峰值,CEPA和AVB+CEPA处理初期的表达不明显,1 d后表达量迅速增加。说明外源AVB和CEPA有通过乙烯信号转导系统调控内源乙烯的生理作用。

2.7.2 花瓣生长素合成基因PsYUCCA10和输出载体蛋白基因PsPIN1差异表达 花瓣IAA合成酶基因PsYUCCA10表达量呈现先上升后迅速下降的趋势,第5天出现峰值。AVB处理显著抑制其表达,CEPA处理的表达量在瓶插1 d和4—6 d时显著高于CK。花瓣生长素输出载体蛋白PsPIN1表达量呈现先上升后下降趋势（图8-B）。AVB处理表达量在瓶插前期（0.5—3 d）显著低于CK,4—6 d时高于CK;CEPA处理瓶插0.5 d时的表达量也显著高于CK,瓶插中期（2—3 d）显著低于CK。结果表明切花瓶插过程中花瓣PsYUCCA10调控着IAA的合成,PsPIN1在生长素运输方面也起到一定的调控作用,外源AVB抑制花朵开放,CEPA促进花朵开放。

图8

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图8切花花瓣PsYUCCA10和PsPIN1相对表达量变化

Fig. 8The relative expression of PsYUCCA10 and PsPIN1 in the petals of cut tree peony flowers in vase



2.7.3 花瓣水解酶基因PsPME1、PsPG1和PsBG1差异表达 由图9可知,瓶插过程中,花瓣PsPME1、PsPG1和PsBG1差异表达,变化模式明显不同。CK处理瓶插早期0.5 d花瓣PsPME1呈现大幅升高后快速下降;AVB下调瓶插前期PsPME1表达量,上调后期表达量;而CEPA的作用与AVB相反;AVB+CEPA处理的花瓣PsPME1表达量一直处于极低水平。除瓶插后期（5—6 d）外,CK处理瓶插PsPG1表达量呈现先迅速上升后缓慢下降的趋势;AVB下调瓶插前期花瓣PsPG1表达量;CEPA前期（0.5—2 d）显著上调花瓣PsPG1表达量,AVB+CEPA处理的前期（0.5—2 d）上调效应明显。CK瓶插过程中,PsBG1表达量逐渐升高,末期迅速降低;AVB瓶插后期（4—7 d）显著下调PsBG1表达量。相对于瓶插期间PsPME1和PsPG1表达量变化,PsBG1在瓶插中后期的持续升高可能与离层细胞解体直接相关。

图9

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图9切花花瓣中PsPME1、PsPG1和PsBG1的相对表达量变化

Fig. 9The relative expression of PsPME1, PsPG1 and PsBG1 in the petals of cut flowers

3 讨论

3.1 乙烯可能通过生长素调控牡丹花瓣脱落过程

植物器官的衰老脱落与乙烯和生长素的激素平衡密切相关,前期有关激素对落花落果的研究主要集中在模式植物拟南芥、番茄。拟南芥乙烯不敏感突变体ETR1-1和EIN2表现出抑制花器官脱落^[16];涉及乙烯信号传导的EIN3-like类基因LeEIL的沉默,延迟了番茄花器官的脱落^[42]。外源生长素NAA和生长素运输抑制剂TIBA处理睡莲中间花瓣,白天花朵开启过程中,YUC8、YUC9和YUC10转录水平上调,YUC5在花瓣晚间闭合时表达,表明昼夜花朵开启阶段细胞伸长与闭合阶段细胞收缩的节律运动受到内源生长素代谢的调节^[43]。外源ETH能提前AheERF1/2表达高峰出现时间^[44],但在器官脱落过程中乙烯和生长素相互作用的分子机制还有待进一步分析。GAO等^[24]检测了ERF在月季花瓣离层中的表达,发现RhERF1和RhERF4的表达分别受到乙烯和生长素的影响,乙烯与生长素在调控花瓣脱落过程中可能存在拮抗作用。生长素酸生长理论认为,植物细胞伸长生长受到内源生长素的调控^[45]。牡丹花的迅速开放是一个花瓣细胞伸长和质量的不可逆生长过程^[10],花瓣的快速伸长生长受到高水平IAA的调控,而衰老过程伴随着IAA水平的迅速下降与IAAO活性的上升（图5）。本研究发现AVB+CEPA预处理能降低花瓣基部的乙烯峰值,但不能推迟乙烯跃变出现时间,两者调节牡丹切花花朵开放与衰老的生理效应存在拮抗作用。表明外源AVB和乙烯能够调节‘洛阳红’切花花瓣内源IAA代谢与转运过程,乙烯调控牡丹切花花瓣落瓣过程可能与内源IAA的作用存在一定的关联性。

3.2 乙烯对离层脱落细胞水解酶类的调控

离层细胞的产生不仅受激素的影响,还受到细胞壁代谢酶类调控。已有研究证实,花朵和果实等植物器官脱落主要受纤维素酶（EG）、PG和PME控制^[41]。乙烯不仅加速植物落花落果进程,也能促进离区中诱导合成水解酶类,如纤维素酶和果胶酶^[20]。研究表明,乙烯诱导的番茄花柄离区折断强度的下降伴随着细胞壁降解酶活性的升高^[46]。齐明芳等^[47]认为,β-葡萄糖苷酶属于纤维素酶类,通过糖化作用对花朵离区纤维素进行降解,从而导致花朵凋谢和自动脱落。PG参与多种植物器官的脱落,如大豆花荚^[48]和豇豆花荚^[49]等。本研究也证实外源乙烯拮抗剂（AVB）显著降低4 d后离层水解酶类活性,下调前期PsPME1和PsPG1表达量,抑制细胞降解;外源CEPA显著提高瓶插4 d后离层水解酶类活性,加速离区细胞壁降解,加快切花的衰老和脱落;AVB+CEPA提高4 d后PG活性,但BG和PME活性与CK相差不大,瓶插中后期AVB与CEPA存在拮抗效应。说明内源乙烯是调节水解酶的重要因素之一。牡丹花瓣离层细胞脱落涉及多重因素,进一步深入其分子生理机制研究能够为切花保鲜技术与长寿命品种培育提供理论支撑。

4 结论

牡丹‘洛阳红’切花瓶插期间存在明显的乙烯跃变,内源IAA含量先上升后下降,提高了乙烯促进衰老的敏感性,切花在瓶插6 d时即出现脱落;乙烯拮抗剂（AVB）推迟乙烯的跃变,并降低乙烯峰值,维持瓶插末期切花IAA含量,提高花瓣抗脱落力,降低离层水解酶类活性和水解酶类基因表达量,有效抑制切花花瓣的脱落;外源乙烯释放剂（CEPA）促进乙烯跃变,提高乙烯释放量,提高瓶插前期花瓣伸长过程中IAA含量,促进花朵开放,显著提高离层水解酶类活性,切花瓶插5 d时即出现萎蔫脱落;AVB与CEPA存在拮抗效应,能降低乙烯峰值,但不能延迟乙烯跃变。说明内源IAA参与了乙烯调控牡丹‘洛阳红’切花花瓣离层细胞的衰老脱落过程。

参考文献 View Option 原文顺序
文献年度倒序
文中引用次数倒序
被引期刊影响因子

[1] MA N, MA C, LIU Y, SHAHID M O, WANG C P, GAO J P. Petal senescence: A hormone view
Journal of Experimental Botany, 2018, 69(4):719-732.
DOI:10.1093/jxb/ery009URL [本文引用: 1]

[2] DANAEE E, MOSTOFI Y, MORADI P. Effect of GA3 and BA on postharvest quality and vase life of Gerbera (Gerbera jamesonii. cv. Good Timing) cut flowers
Horticulture, Environment, and Biotechnology, 2011, 52(2):140-144.
DOI:10.1007/s13580-011-1581-7URL [本文引用: 1]

[3] LIAO W B, ZHANG M L, HUANG G B, YU J H. Hydrogen peroxide in the vase solution increases vase life and keeping quality of cut Oriental×Trumpet hybrid lily ‘Manissa’
Scientia Horticulturae, 2012, 139(139):32-38.
DOI:10.1016/j.scienta.2012.02.040URL [本文引用: 1]

[4] 苏筱雨, 李文娟. 不同瓶插液配方对香石竹切花保鲜效果的影响
北方园艺, 2014(1):133-136.
[本文引用: 1]

SU X Y, LI W J. Influence of different preservatives formula on preservation effect of carnation cut flower
Northern Horticulture, 2014(1):133-136.(in Chinese)
[本文引用: 1]

[5] 方华, 王春蕾, 廖伟彪, 张静, 霍建强, 黄登静, 牛丽涓, 王波. 一氧化氮通过调控水分和抗氧化酶活性参与脱落酸延缓切花月季衰老
园艺学报, 2019(5):901-909.
[本文引用: 1]

FANG H, WANG C L, LIAO W B, ZHANG J, HUO J Q, HUANG D J, NIU L J, WANG B. NO is involved in ABA-regulated senescence of cut roses by maintaining water content and increasing antioxidant enzyme activities
Acta Horticulturae Sinica, 2019(5):901-909.(in Chinese)
[本文引用: 1]

[6] SHI J, TIAN Z, SHI G A. Effect of exogenous hydrogen peroxide or ascorbic acid on senescence in cut flowers of tree peony (Paeonia suffruticosa Andr.)
Journal of Horticultural Science & Biotechnology, 2015, 90(6):689-694.
[本文引用: 2]

[7] 周琳, 贾培义, 刘娟, 王玮然, 霍志鹏, 董丽. 乙烯对‘洛阳红’牡丹切花开放和衰老进程及内源乙烯生物合成的影响
园艺学报, 2009(2):239-244.
[本文引用: 1]

ZHOU L, JIA P Y, LIU J, WANG W R, HUO Z P, DONG L. Effect of ethylene on cut flowers of tree peony ‘Luoyang Hong' opening and senescence process and endogenous ethylene biosynthesis
Acta Horticulturae Sinica, 2009(2):239-244. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[8] 史国安, 杨正申, 王长忠, 金志伟, 韩向阳. 温度和化学药剂对牡丹切花乙烯释放及贮藏品质影响
北方园艺, 1997, 21(6):62-63.
[本文引用: 2]

SHI G A, YANG Z S, WANG C Z, JIN Z W, HAN X Y. Effects of temperature and chemical agents on ethylene release and storage quality of cut peony flowers
Northern Horticulture, 1997, 21(6):62-63. (in Chinese)
[本文引用: 2]

[9] 史国安, 郭香凤, 韩建国, 孙鲜明, 杨正申. 牡丹开花和衰老期间乙烯及脂质过氧化的研究
西北农业大学学报, 1999, 27(5):50-53.
[本文引用: 2]

SHI G A, GUO X F, HAN J G, SUN X M, YANG Z S. A study on ethylene production and lipid peroxidization in florescence and flower senescence of Paeonia suffruticosa
Acta Universitatis Agriculturalis Boreali-Occidentalis, 1999, 27(5):50-53. (in Chinese)
[本文引用: 2]

[10] 史国安, 郭香凤, 张国海, 包满珠. 牡丹开花和衰老期间花瓣糖代谢的研究
园艺学报, 2009, 36(8):1184-1190.
[本文引用: 2]

SHI G A, GUO X F, ZHANG G H, BAO M Z. Analysis of sugar metabolism during florescence and flower senescence of tree peony petal
Acta Horticulturae Sinica, 2009, 36(8):1184-1190. (in Chinese)
[本文引用: 2]

[11] 史国安, 郭香凤, 李春丽, 范丙友, 施江, 包满珠. 牡丹花枝不同发育时期各器官乙烯释放和ACC含量的变化
园艺学报, 2010, 37(1):77-82.
[本文引用: 1]

SHI G A, GUO X F, LI C L, FAN B Y, SHI J, BAO M Z. Changes on ethylene release and ACC content of peony flowers at different development stages
Acta Horticulturae Sinica, 2010, 37(1):77-82. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[12] 史国安, 郭香凤, 张国海, 高双成, 范丙友, 包满珠. 不同发育时期牡丹切花瓶插生理特性的研究
园艺学报, 2010, 37(3):449-456.
[本文引用: 1]

SHI G A, GUO X F, ZHANG G H, GAO S C, FAN B Y, BAO M Z. Studies of vasing physiological characteristics of cut peony flowers in various development stages
Acta Horticulturae Sinica, 2010, 37(3):449-456. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[13] ZHANG C, LIU M, FU J X, WANG Y J, DONG L. Exogenous sugars involvement in senescence and ethylene production of tree peony ‘Luoyang Hong’ cut flowers
Korean Journal of Horticultural Science and Technology, 2012, 30(6):718-724.
DOI:10.7235/hort.2012.12089URL [本文引用: 1]

[14] 高树林, 张超, 杜丹妮, 刘爱青, 董丽. 乙烯和葡萄糖处理对‘洛阳红’牡丹切花花色和花青素苷合成的影响
园艺学报, 2015, 42(7):1356-1366.
[本文引用: 1]

GAO S L, ZHANG C, DU D N, LIU A Q, DONG L. Effect of glucose and ethylene on flower color and anthocyanin biosynthesis in tree peony ‘Luoyang Hong’ cut flower
Acta Horticulturae Sinica, 2015, 42(7):1356-1366. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[15] 王凯轩, 王依, 史田, 丁熙柠, 袁军辉, 史国安, 胡永红. 雷帕霉素预处理延缓牡丹'洛阳红'切花衰老的生理效应
园艺学报, 2020, 47(10):1956-1968.
[本文引用: 1]

WANG K X, WANG Y, SHI T, DING X N, YUAN J H, SHI G A, HU Y H. Physiological effects of rapamycin pretreatment on delaying the senescence of cut flower in tree peony ‘Luoyanghong’
Acta Horticulturae Sinica, 2020, 47(10):1956-1968. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[16] PATTERSON S E, BLEECKER A B. Ethylene-dependent and -independent processes associated with floral organ abscission in Arabidopsis
Plant Physiology, 2004, 134(1):194-203.
DOI:10.1104/pp.103.028027URL [本文引用: 3]

[17] ROBERTS J A, ELLIOTT K A, GONZALEZ-CARRANZA Z H. Abscission, dehiscence, and other cell separation processes
Annual Review of Plant Biology, 2002, 53:131-158.
DOI:10.1146/arplant.2002.53.issue-1URL [本文引用: 2]

[18] MICHAELI R, PHILOSOPH-HADAS S, RIOV J, SHAHAK Y, RATNER K, MEIR S. Chillinginduced leaf abscission of Ixora coccinea plants. III. Enhancement by high light via increased oxidative processes
Physiologia Plantarum, 2010, 113(3):338-345.
DOI:10.1034/j.1399-3054.2001.1130306.xURL [本文引用: 1]

[19] PATHARKAR O R, WALKER J C. Floral organ abscission is regulated by a positive feedback loop
Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA, 2015, 112(9):2906-2911.
[本文引用: 2]

[20] 崔娅松, 陈庆富, 霍冬敖, 李洪有. 植物落花落果的分子机理研究进展
广西植物, 2018, 38(9):1234-1247.
[本文引用: 2]

CUI Y S, CHEN Q F, HUO D A, LI H Y. Research progress on molecular mechanism of plant falling flowers and fruits
Guihaia, 2018, 38(9):1234-1247. (in Chinese)
[本文引用: 2]

[21] OSBORNE D J, MORGAN P W. Abscission
Critical Reviews in Plant Sciences, 1989, 8(2):103-129.
DOI:10.1080/07352688909382272URL [本文引用: 1]

[22] VAN NOCKER S. Development of the abscission zone
Stewart Postharvest Review, 2009, 5(1):1-6.
[本文引用: 1]

[23] 郑丽媛, 魏霞, 周可, 向佳, 李燕, 刘宝玉, 何光华, 凌英华, 赵芳明. 携带主效落粒基因的水稻染色体片段代换系Z481的鉴定及和SH6(t)定位
科学通报, 2016, 61(7):748-758.
[本文引用: 1]

ZHENG L Y, WEI X, ZHOU K, XIANG J, LI Y, LIU B Y, HE G H, LING Y H, ZHAO F M. Identification of a rice chromosome segment substitution line Z481 carrying a major gene for seed shattering and mapping of SH₆(t)
Chinese Science Bulletin, 2016, 61(7):748-758. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[24] GAO Y R, LIU Y, LIANG Y, LU J Y, JIANG C Y, FEI Z J, JIANG C Z, MA C, GAO J P. Rosa hybrida RhERF₁ and RhERF₄ mediate ethylene- and auxin-regulated petal abscission by influencing pectin degradation
The Plant Journal, 2019, 99(6):1159-1171.
DOI:10.1111/tpj.v99.6URL [本文引用: 2]

[25] MENG J, ZHOU Q, ZHOU X, FANG H X, JI S J. Ethylene and 1-MCP treatments affect leaf abscission and associated metabolism of Chinese cabbage
Postharvest Biology and Technology, 2019, 157:110963.
DOI:10.1016/j.postharvbio.2019.110963URL [本文引用: 3]

[26] MEIR S, PHILOSOPH-HADAS S, SUNDARESAN S, SELVARAJ K S V, BURD S, OPHIR R, KOCHANEK B, REID M S, JIANG C Z, LERS A. Microarray analysis of the abscission-related transcriptome in the tomato flower abscission zone in response to auxin depletion
Plant Physiology, 2010, 154(4):1929-1956.
DOI:10.1104/pp.110.160697URL [本文引用: 1]

[27] ZHAO Y D. Essential roles of local auxin biosynthesis in plant development and in adaptation to environmental changes
Annual Review of Plant Biology, 2018, 69:417-435.
DOI:10.1146/arplant.2018.69.issue-1URL [本文引用: 1]

[28] PARRA-LOBATO M C, GOMEZ-JIMENEZ M C. Polyamine- induced modulation of genes involved in ethylene biosynthesis and signalling pathways and nitric oxide production during olive mature fruit abscission
Journal of Experimental Botany, 2011, 62(13):4447-4465.
DOI:10.1093/jxb/err124URL [本文引用: 1]

[29] BUNYA-ATICHART K, KETSA S, VAN DOORN W. Ethylene- sensitive and ethylene-insensitive abscission in Dendrobium: Correlation with polygalacturonase activity
Postharvest Biology and Technology, 2011, 60(1):71-74.
DOI:10.1016/j.postharvbio.2010.11.006URL [本文引用: 1]

[30] SINGH A P, PANDEY S P, RAJLUXMI, PANDEY S, NATH P, SANE A P. Transcriptional activation of a pectate lyase gene, RbPel1, during petal abscission in rose
Postharvest Biology and Technology, 2011, 60(2):143-148.
DOI:10.1016/j.postharvbio.2010.12.014URL [本文引用: 1]

[31] PATHARKAR O R, WALKER J C. Core mechanisms regulating developmentally timed and environmentally triggered abscission
Plant Physiology, 2016, 172(1):510-520.
DOI:10.1104/pp.16.01004URL [本文引用: 1]

[32] LIANG Y, JIANG C Y, LIU Y, GAO Y R, LU J Y, AIWAILI P, FEI Z J, JIANG C Z, HONG B, MA C, GAO J P. Auxin regulates sucrose transport to repress petal abscission in rose (Rosa hybrida)
The Plant Cell, 2020, 32(11):3485-3499.
DOI:10.1105/tpc.19.00695URL [本文引用: 1]

[33] 洪亚平. 花的精细解剖和结构观察新方法及应用. 北京: 中国林业出版社, 2017.
[本文引用: 1]

HONG Y P. New Method and Application of Fine Anatomy and Structure Observation of Flowers. Beijing: China Forestry Press, 2017. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[34] 王哲, 史国安, 马雪情, 范丙友. 芍药‘桃花飞雪’开花衰老期间乙烯代谢生理机制的研究
园艺学报, 2014, 41(11):2268-2274.
[本文引用: 1]

WANG Z, SHI G A, MA X Q, FAN B Y. The ethylene metabolism in flowers of Chinese peony ‘Taohua feixue’ during opening and senescence
Acta Horticulturae Sinica, 2014, 41(11):2268-2274. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[35] LIZADA M C, YANG S F. A simple and sensitive assay for 1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid
Analytical Biochemistry, 1979, 100(1):140-145.
DOI:10.1016/0003-2697(79)90123-4URL [本文引用: 1]

[36] FERNÁNDEZ-MACULET J C, YANG S F. Extraction and partial characterization of the ethylene-forming enzyme from apple fruit
Plant Physiology, 1992, 99(2):751-754.
DOI:10.1104/pp.99.2.751URL [本文引用: 1]

[37] KATO M, HYODO H. Purification and characterization of ACC oxidase and increase in its activity during ripening of pear fruit
Journal of the Japanese Society for Horticultural Science, 1999, 68(3):551-557.
[本文引用: 1]

[38] YANG J C, ZHANG J H, WANG Z Q, ZHU Q S, WANG W. Hormonal changes in the grains of rice subjected to water stress during grain filling
Plant Physiology, 2001, 127(1):315-323.
DOI:10.1104/pp.127.1.315URL [本文引用: 1]

[39] 张志良. 植物生理学实验指导. 第二版. 北京: 高等教育出版社, 1991.
[本文引用: 1]

ZHANG Z L. Experimental Guidance of Plant Physiology. 2nd ed. Beijing: Higher Education Press, 1991. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[40] LOHANI S, TRIVEDI P K, NATH P. Changes in activities of cell wall hydrolases during ethylene-induced ripening in banana: Effect of 1-MCP, ABA and IAA
Postharvest Biology and Technology, 2004, 31(2):119-126.
DOI:10.1016/j.postharvbio.2003.08.001URL [本文引用: 1]

[41] 曹建康, 姜微波, 赵玉梅. 果蔬采后生理生化实验指导. 北京: 中国轻工业出版社, 2007.
[本文引用: 2]

CAO J K, JIANG W B, ZHAO Y M. Physiological and Biochemical Experiment Guidance for Fruits and Vegetables After Harvest. Beijing: China Light Industry Press, 2007. (in Chinese)
[本文引用: 2]

[42] TIEMAN D M, CIARDI J A, TAYLOR M G, KLEE H J. Members of the tomato LeEIL (EIN₃-like) gene family are functionally redundant and regulate ethylene responses throughout plant development
The Plant Journal, 2001, 26(1):47-58.
DOI:10.1046/j.1365-313x.2001.01006.xURL [本文引用: 1]

[43] KE M Y, GAO Z, CHEN J Q, QIU Y T, ZHANG L S, CHEN X. Auxin controls circadian flower opening and closure in the waterlily
BMC Plant Biology, 2018, 18(1):143.
DOI:10.1186/s12870-018-1357-7URL [本文引用: 1]

[44] 任雪岩, 刘光财, 李国鹏, 叶春海, 丰锋, 王俊宁. 乙烯利和1-MCP对菠萝蜜果实中AheAAT和AheERF表达的影响
中国农业科学, 2019, 52(21):3890-3902.
[本文引用: 1]

REN X Y, LIU G C, LI G P, YE C H, FENG F, WANG J N. Effects of ethephon and 1-MCP on the expression of AheAAT gene and AheERF transcription factors in jackfruit fruit
Scientia Agricultura Sinica, 2019, 52(21):3890-3902. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[45] DU M M, SPALDING E P, GRAY W M. Rapid auxin-mediated cell expansion
Annual Review of Plant Biology, 2020, 71:379-402.
DOI:10.1146/annurev-arplant-073019-025907URL [本文引用: 1]

[46] 王彦昌, 李天来, 侯建平. 乙烯处理对番茄离体小花柄脱落的影响
园艺学报, 2003, 30(5):554-558.
[本文引用: 1]

WANG Y C, LI T L, HOU J P. Effect of ethylene on abscission of tomato pedicel in vitro
Acta Horticulturae Sinica, 2003, 30(5):554-558.(in Chinese)
[本文引用: 1]

[47] 齐明芳, 李天来, 许涛, 曹霞. 园艺作物器官脱落相关酶的研究进展
北方园艺, 2007(6):62-65.
[本文引用: 1]

QI M F, LI T L, XU T, CAO X. Advance of organ abscission research on horticultural plants
Northern Horticulture, 2007(6):62-65. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[48] 宋莉萍, 刘金辉, 郑殿峰, 冯乃杰. 不同时期叶喷植物生长调节剂对大豆花荚脱落率及多聚半乳糖醛酸酶活性的影响
植物生理学报, 2011, 47(4):356-362.
[本文引用: 1]

SONG L P, LIU J H, ZHENG D F, FENG N J. Effects of different plant growth regulators on abscission rate and polygalacturonase activities of soybean flowers and pods by spraying in different stages
Plant Physiology Communications, 2011, 47(4):356-362. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[49] 胡志辉, 汪艳杰, 陈禅友. 喷施细胞分裂素对豇豆花荚脱落率及花荚酶活性的影响
植物科学学报, 2016, 34(3):439-445.
[本文引用: 1]

HU Z H, WANG Y J, CHEN C Y. Effects of spraying cytokinin on abscission rate and enzymic activity of flowers and pods of cowpea
Plant Science Journal, 2016, 34(3):439-445. (in Chinese)
[本文引用: 1]