李晓颍¹, 王海静¹, 徐宁伟¹, 曹翠玲², 刘建珍¹, 武春成¹, 张立彬^,11 河北科技师范学院园艺科技学院,河北秦皇岛 066600
2 秦皇岛出入境检验检疫局检验检疫技术中心,河北秦皇岛 066004

Analysis of Volatile Components in Cerasus Humilis (Bge.) Sok by Headspace Solid Phase Microextraction-Gas Chromatography-Mass Spectrometry

LI XiaoYing¹, WANG HaiJing¹, XU NingWei¹, CAO CuiLing², LIU JianZhen¹, WU ChunCheng¹, ZHANG LiBin^,11 College of Horticulture Science & Technology, Hebei Normal University of Science & Technology, Qinhuangdao 066600, Hebei
2 Inspection and Quarantine Technique Centre, Qinhuangdao Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Qinhuangdao 066004, Hebei

通讯作者: 张立彬，E-mail：13603232069@163.com

责任编辑: 赵伶俐
收稿日期:2019-03-27接受日期:2019-08-21网络出版日期:2019-10-01

基金资助:

河北省科技计划项目.15236802D

Received:2019-03-27Accepted:2019-08-21Online:2019-10-01
作者简介 About authors
李晓颍,E-mail：xiaoyingli_run@163.com。









摘要
【目的】 优化前处理影响因素,分析欧李果实挥发性成分,明确挥发性成分特点并对果实特征性香气成分进行评价。【方法】 以欧李果实为试材,采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用法（HS-SPME-GC-MS）测定其挥发物成分,通过优化前处理影响因素,确定最佳试验条件。利用解卷积系统（AMDIS）与NIST11质谱数据库以及保留指数（RI）对其挥发性成分进行鉴定,内标法确定挥发物含量,并计算香气强度值（OAVs）,评价欧李果实香气品质与特征。【结果】 在欧李果实中累计鉴定出63种挥发物,含量范围为0.01—3.25 μg·kg ^-1。挥发物以酯类、烷类为主,并有少数醇类、芳香类、醛类、萜类、酸类、酮类,其中苯甲酸乙酯含量最高。通过参考相关挥发物香气阈值并计算部分挥发物OAVs可知,己酸乙酯、乙酸苯乙酯、β-芳樟醇、乙酸己酯、壬醛等物质对欧李果实香气成分构成具有重要作用,而烷烃不具有特征性香气。欧李果实香气主要为青香、花香、果香、脂蜡香和其他少数香型（木香型、芳香油香型等）,并以青香、花香、果香型物质为主,三者总含量达到挥发物总量的80%。【结论】 优化确立的试验条件为：果肉去核切碎处理,取样量5 g,萃取温度50℃,萃取时间与平衡时间均为30 min。SPME前处理条件对果实挥发性成分检测到的种类与含量有较大影响,通过优化试验条件可以获得最佳检测结果。欧李果实挥发物组成复杂,除烃类物质香气品质较弱外,多数具有特征香气,且香气强度属中高级,酯类物质是欧李果实的重要挥发物组成,清香型、花香型和果香型是欧李果实香气成分的主要特点。
关键词： 欧李;挥发性成分;条件优化;香气强度值;香气品质

Abstract
【Objective】 The objective of this study was to optimize the pretreatment conditions and to analyze the volatiles of Cerasus Humilis (Bge.) Sok, further to evaluate the characteristics of the main aroma components.【Method】 The fruit of Cerasus humilis (Bge.) Sok was used as material, the volatiles were determined by headspace solid phase microextraction coupled with gas chromatography-mass spectrometry (HS-SPME-GC-MS), and the pretreatment conditions were optimized. Automatic Mass Spectral Deconvolution and Identification System (AMDIS), NIST11 database and retention index (RI) were applied to volatiles identify, internal standard to contents calculate, final the odor-activity values (OAVs) and aroma qualities were evaluated.【Result】 Total of 63 volatiles were identified, namely main of esters and alkanes, few of alcohols, arenes, aldehydes, terpenes, acid and ketone, with ranges from 0.01 to 3.25 μg·kg ^-1, in which ethyl benzoate as the highest. The OAVs showed ethyl hexanoate, phenethyl acetate, β-linalool, hexyl acetate, and nonanal were the main aroma components, alkanes almost the odorless. Green, fruity, floral, waxy and less woody and oily aromatic formed the odor qualities, while the former three performed the main odors reached 80% content. 【Conclusion】 The conditions were optimized as follows: samples loading for 5 g after cored and chipping, extraction temperature was 50℃, and both extraction and balance time was 30 min. The pretreatment had great influence on the volatiles detection, and preferable results would be yield by optimizing conditions. Results showed esters were the main components, except alkanes, and the most of them had aroma characteristics, presented medium or high strength, while green, fruity, floral were the major odor types.
Keywords：Cerasus humilis (Bge.) Sok;volatile components;optimization analysis;odor-activity values (OAVs);aroma quality


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本文引用格式
李晓颍, 王海静, 徐宁伟, 曹翠玲, 刘建珍, 武春成, 张立彬. 顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用法分析 欧李果实挥发性成分[J]. 中国农业科学, 2019, 52(19): 3448-3459 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.19.014
LI XiaoYing, WANG HaiJing, XU NingWei, CAO CuiLing, LIU JianZhen, WU ChunCheng, ZHANG LiBin. Analysis of Volatile Components in Cerasus Humilis (Bge.) Sok by Headspace Solid Phase Microextraction-Gas Chromatography-Mass Spectrometry[J]. Scientia Acricultura Sinica, 2019, 52(19): 3448-3459 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.19.014

0 引言

【研究意义】欧李[Cerasus humilis (Bge.) Sok]是一种矮小、丛生的灌木型蔷薇科植物,其根冠比大,具有耐旱、耐寒、耐盐碱的特点,广泛分布于我国北方干旱、寒冷地区,是我国北方特有树种^[1]。欧李果实形似樱桃,酸甜可口,风味独特,是天然补钙、铁的水果,是深加工的适宜原料^[2,3,4]。作为一种高营养、高保健的第三代果树,现已选育出一系列新品种,株产0.3—1.5 kg^[5,6]。随着消费者对果实品质要求不断提高,有关香气品质的研究也日益受到重视。香气作为果品加工和鲜食的主要因素,不仅反映果实的风味特点和成熟度,而且是评价果实商品品质的重要指标。开展欧李果实香气品质的研究,对于进一步了解欧李果实特点和品质开发具有重要意义。【前人研究进展】欧李果实香气成分研究工作已逐渐开展,YE等^[7]评价了30份欧李种质资源挥发性成分之间的差异,累计鉴定出85种成分,不同品种间挥发物种类与含量有较大差别,其中,红果香气含量最高,紫果香气含量最低,依据挥发物的主成分分析将30份资源分为4个群组。刘俊英等^[8]研究了成熟度对欧李果实香气成分的影响,表明随着成熟度增加,醇类、醛类、酸类、萜烯类相对含量增加,脂类相对含量降低。周立华等^[9]研究了冷冻对欧李香气的影响,结果表明,冷冻前后挥发物数量变化不大,冷冻对欧李果实加工特性的影响不明显,反而有助于增加果实的成熟香气。此外还有基于不同提取方法与固相微萃取（SPME）条件所进行的欧李香气分析方法优化的研究^[10,11]。此外,相关研究表明^[12,13,14],对测定结果进行谱库检索以及RI分析是对挥发物进行鉴定的有效手段。通过参考香气阈值、香气品质,则可对香气特征进行描述^[15]。【本研究切入点】SPME是目前广泛应用的挥发性成分萃取方法^[16],其萃取效果受萃取头类型、萃取温度、萃取时间、盐离子浓度和平衡时间等因素的影响,通过优化条件可以明显改善试验效果^[17]。本试验以我国特有树种欧李果实为试材,在优化SPME萃取影响因素的基础上,采用AMDIS软件、NIST11数据库以及RI对其挥发性成分进行鉴定,内标法确定挥发物含量,并通过OAVs以及香气品质对欧李果实香气成分进行评价,对特征性香气物质及其系列分布进行预测。【拟解决的关键问题】旨在优化并建立有效、准确的欧李果实挥发性成分分析鉴定方法,对欧李果实主要香气成分及其特征进行评价,为欧李风味物质研究与开发利用提供一定的科学依据。

1 材料与方法

试验于2018年7—9月在河北省昌黎县河北科技师范学院园艺科技学院中心实验室进行。

1.1 材料准备

欧李品种为‘燕山1号’,土壤为褐土,肥力中等。试验采摘健康无病害的成熟果实,分别装入塑料袋封好,立刻带回实验室进行试验。其中,切碎处理是将完整欧李果实去核后均匀切碎,充分混匀后取样;榨汁处理是将上述样品挤压,纱布过滤,取果汁;匀浆处理是将切碎处理的样品进行高速均质破碎,取果浆。处理后的样品均需迅速置于20 mL顶空瓶中,封口。每个样品重复3次。

1.2 仪器与试剂

50/30 μm DVB/CAR/PDMS自动固相微萃取头购自美国Supelco公司;7890A-5975C气相色谱-质谱联用仪（配有PAL自动进样系统、自动质谱解卷积鉴定系统,NIST11质谱库）购自美国Agilent公司。

3-辛醇（纯度≥98.5%）与正构烷烃混合标准品（C6—C30,1 000 mg·L^-1）,均购自美国Sigma-Aldrich公司;正己烷为色谱纯,购自瑞典Oceanpak公司。

1.3 条件与方法

1.3.1 GC-MS条件 GC条件：HP-5 MS石英弹性毛细管柱（30.0 m×320 μm×0.25 μm）,载气为He（99.999%）,不分流进样,流量1.0 mL·min^-1,进样口温度230℃,起始温度为40℃,保持5 min,以2℃?min^-1升至70℃,保持2 min,再以5℃?min^-1升至120℃,保持2 min,再以10℃?min^-1升至230℃,保持5 min。

MS条件：EI源电压70 eV,离子源温度为230℃,接口温度250℃,四级杆温度150℃,质量扫描范围为50—550 m/z。

1.3.2 SPME条件 在试验开始前对固相微萃取纤维头进行老化处理,以消除干扰杂质的影响,老化条件严格按照仪器说明书进行,将固相微萃取纤维头插入GC-MS进样口中,并在250℃条件下,老化5 min。若该萃取纤维头首次使用老化条件则要延长到30 min。按试验要求对自动进样器的加热温度、平衡时间、萃取时间进行设定,振摇速度为250 r/min,解吸时间为5 min。

1.4 数据分析

1.4.1 挥发物定性与定量 内标配制：以3-辛醇为内标物用正己烷稀释10⁵倍后,取1.0 μL按上述GC-MS条件进行测定。

保留指数值（RI）测定：将正构烷烃混标稀释10²倍后,取1.0 μL按上述GC-MS条件测定,通过AMDIS软件建立保留指数校正库（RI calibration library）,并用于挥发物保留指数RI值测定,RI计算公式如下：

$\text{RI}=\text{100Z}+\frac{\text{R}{{\text{T}}_{\text{x}}}\text{-R}{{\text{T}}_{\text{z}}}}{\text{R}{{\text{T}}_{\text{z}+\text{1}}}\text{-R}{{\text{T}}_{\text{z}}}}$

其中,Z是未知组分峰的前一个相邻正构烷烃所含碳原子数目,RT_x、RTz、RT_z+1分别表示未知组分以及碳数为Z、Z+1的正构烷烃的保留时间。

定性分析：利用GC-MS联用仪工作站所关联的自动解卷积系统（AMDIS）与NIST11质谱库结合化合物保留指数值（RI）对挥发物进行鉴定。

定量分析：根据内标含量和挥发物的色谱峰面积与内标的色谱峰面积进行比较,计算挥发物相对于内标的含量,计算公式如下^[18]：

${{\text{ }\!\!\omega\!\!\text{ }}_{\text{x}}}=\frac{{{\text{A}}_{\text{x}}}{{\text{n}}_{\text{is}}}{{\text{M}}_{\text{x}}}}{{{\text{m}}_{\text{0}}}{{\text{A}}_{\text{is}}}}\times {{10}^{9}}$

其中,ω_x是未知挥发物的浓度（μg·kg^-1）,n_is是内标物质的量（g·mol^-1）,M_x是内标物的摩尔质量,A_x是未知化合物的峰面积,A_is是内标物的峰面积,m₀是样品取样量（g）。

1.4.2 香气强度值（Odor-activity values, OAVs）的计算 根据文献提供的挥发性物香气阈值（Odor threshold）,计算香气强度值,计算公式如下：

$\text{OAV}=\frac{{{\text{ }\!\!\omega\!\!\text{ }}_{\text{x}}}}{{{\text{T}}_{\text{x}}}}$

其中,T_x是未知挥发物的香气阈值（μg·kg^-1）。

1.4.3 统计分析 试验数据采用Microsoft Excel 2016软件处理,DPS 7.05软件进行差异显著性分析。

2 结果

2.1 前处理条件单因素优化

2.1.1 样品处理与加盐量 试验首先对比欧李果肉去核切碎处理与榨汁处理两种条件下检测到的挥发物情况,两种条件下分别检出挥发物59与50种,峰面积分别为54.00×10⁷与67.62×10⁷,综合挥发物种类与峰面积情况,选择果肉去核切碎处理最大程度保持了样品的原有挥发性成分,且操作简单,便于分析。

试验进一步分析了不同加盐量（0、0.5、1.0、1.5 g）在匀浆处理后的挥发物萃取情况（图1）。试验表明,当添加1.0 g NaCl后检出挥发物种类最多为47种,峰面积总量随加盐量的增加逐渐升高,添加1.5 g NaCl时峰面积总量为9.40×10⁶,不加盐情况下检测到的挥发物种类和总量均少于加盐条件,这表明加盐可以提高对目标物的萃取效率,但由于萃取到的挥发物种类和总量均远少于前述果肉去核切碎处理,可见,挥发物在加盐均质破碎过程中会有很大损失。因此,采用加盐均质破碎的方法在本次试验中不宜采用。

图1

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图1加盐量对挥发物萃取情况的影响

同一曲线中标有不同小写字母分别表示组间差异显著（P<0.05）。下同
Fig. 1Effect of NaCl spiked on volatiles extraction from Cerasus humilis (Bge.) Sok

Different lowercase letters indicate significant differences (P<0.05). The same as below


通过对样品处理方法的优化,最终选择果肉切碎处理,不仅样品处理简单,还能降低挥发物损失,因此,后续试验过程中均采用果肉去核切碎处理。

2.1.2 取样量 取样量与挥发物检出情况（图2）表明,随着取样量的增加,检出挥发物种类呈先增后减的趋势,取样量为5 g时达到最大值57种;峰面积总量在取样量范围内变化不明显,取样量为5 g时为最大值42.52×10⁷。上述结果表明,随着取样量的增加,含量较低的挥发物逐渐被萃取,检出的挥发物种类增加;此外,取样量范围内萃取头吸附均接近饱和,取样量增加到一定程度（＞5 g）,分析物之间竞争作用加强,反而不利于挥发物的萃取,同时也会造成样品的浪费。综合考虑,选择样品用量为5 g较为合适。

图2

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图2取样量对挥发物萃取情况的影响

Fig. 2Effects of sample loading on volatiles extraction from Cerasus humilis (Bge.) Sok



2.1.3 萃取温度 萃取过程中温度的升高可以加大分析物的扩散系数,从而增加分析物向涂层纤维的传质速率。由图3可知,随着萃取温度的升高,挥发物种类呈逐渐升高的趋势,其中30—50℃之间变化在正常范围内,但当萃取温度高于50℃时,挥发物种类与峰面积均急剧增加,萃取温度为60、70℃时增加的挥发物中有相当数量的氧化产物,可见,当萃取温度高于50℃时,样品开始发生变质,对测定结果造成影响。由试验结果看,选择萃取温度50℃进行试验更为合理。

图3

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图3萃取温度对挥发物萃取情况的影响

Fig. 3Effects of extraction temperature on volatiles extraction from Cerasus humilis (Bge.) Sok



2.1.4 萃取时间 萃取时间与香气检出情况的关系（图4）可知,在萃取时间范围内,挥发物检出种类与峰面积总量随萃取时间的增加大致呈先升后降再上升的趋势。说明随着萃取时间的增加,检出香气物质增多,峰面积总量增加,直至萃取头吸附达到饱和;继续增加萃取时间,原来吸附在萃取头上的目标物则会重新解析出来,从而造成萃取量的降低,目标物在萃取头上的吸附与解析呈动态变化的过程。萃取时间30 min是第一个平衡的最大值,继续增加萃取时间无益,因此,选择30 min萃取时间为宜。

图4

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图4萃取时间挥发物萃取情况的影响

Fig. 4Effects of extraction time on volatiles extraction from Cerasus humilis (Bge.) Sok



2.1.5 平衡时间 平衡时间与挥发物检出情况（图5）可知,挥发物种类在平衡时间内主要呈先升高后平衡的趋势,这表明一定的平衡时间可使更多的挥发物从样品中释放出来,平衡40 min时检出最多为67种;由挥发物总量的变化情况可知,主要挥发物的释放在10 min内就可以完成,由于目标物在两相中的竞争作用,增加平衡时间,挥发物会重新溶解在样品中,导致挥发物总量的下降,平衡时间内挥发物的释放与溶解同样呈现动态平衡过程,其中10、30、50 min时挥发物的释放程度最大,峰面积总量为1.30×10⁸左右。因此,选择平衡时间为30 min即可保证分析要求也可缩短试验时间。

图5

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图5平衡时间对香气检出情况的影响

Fig. 5Effects of balance time on volatiles extraction from Cerasus humilis (Bge.) Sok

2.2 挥发性成分与含量

按优化的方法,对欧李果实挥发性成分进行测定,总离子流色谱图如图6所示。

图6

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图6欧李果实挥发性成分总离子流图

Fig. 6The total ion chromatogram of volatiles of Cerasus humilis (Bge.) Sok



由欧李果实挥发物种类与含量（表1）可知,本试验鉴定出各类挥发物共63种,含量范围为0.01—3.25 μg·kg^-1,其中含量较高的挥发物有苯甲酸乙酯（3.25 μg·kg^-1）、十五烷（1.31 μg·kg^-1）、乙酸苯乙酯（1.16 μg·kg^-1）、4,11-二甲基-十四烷（0.85 μg·kg^-1）、(Z)-3-辛酸己烯酯（0.78 μg·kg^-1）、乙酸己酯（0.66 μg·kg^-1）、十三烷（0.61 μg·kg^-1）、辛酸己酯（0.54 μg·kg^-1）。

Table 1
表1
表1欧李果实挥发性成分及其含量
Table 1The volatiles and contents of Cerasus humilis (Bge.) Sok

序号 No.	挥发性成分 Volatile	分子式 Formula	分子量 Mass	保留时间 Retention time (min)	含量 Content (μg·kg-1)	保留指数 RI		鉴定依据 Identification
						Cal.	Ref.
醇类 Alcohol
1	2-乙基-己醇 2-Ethyl-hexanol	C8H18O	130	20.30	0.02	1034	1035	MS, RI
2	辛醇 Octanol	C8H18O	130	23.64	0.03	1083	1087	MS, RI
3	壬醇 Nonanol	C9H20O	144	29.12	0.28	1172	1171	MS, RI
4	(Z)-3-己烯-1-醇 (Z)-3-Hexen-1-ol	C6H12O	100	8.87	0.01	855	855	MS, RI
5	苯乙醇 Phenylethyl alcohol	C8H10O	122	26.05	0.15	1126	1121	MS, RI
芳香类 Arenes
6	邻二甲苯 o-Xylene	C8H10	106	9.60	0.06	870	879	MS, RI
7	萘 Naphthalene	C10H8	128	29.23	0.02	1174	1170	MS, RI
8	2-甲基萘 2-Methylnaphthalene	C11H10	142	33.81	0.03	1289	1289	MS, RI
酸类 Acids
9	苯甲醛 Benzaldehyde	C7H6O	106	14.96	0.12	956	961	MS, RI
10	壬醛 Nonanal	C9H18O	142	25.62	0.16	1117	1107	MS, RI
11	(E)-3-甲基-4-癸烯酸 (E)-3-Methyl-4-decenoic acid	C11H20O2	184	37.59	0.06	1413	1415	MS, RI
萜类 Terpenoids
12	β-芳樟醇 β-Linalool	C10H18O	154	25.35	0.24	1111	1103	MS, RI
13	α-法呢烯 α-Farnesene	C15H24	204	39.63	0.1	1512	1512	MS, RI
烷类 Alkyls
14	2-壬酮 2-Nonanone	C9H18O	142	24.93	0.05	1102	1104	MS, RI
15	十二烷 Dodecane	C12H26	170	30.25	0.48	1200	1200	MS, RI
16	十三烷 Tridecane	C13H28	184	34.24	0.61	1300	1300	MS, RI
17	2-甲基-十三烷 2-Methyl-tridecane	C14H30	198	36.36	0.04	1369	1362	MS, RI
18	法呢烷 Farnesane	C15H32	212	36.72	0.08	1381	1378	MS, RI
19	十四烷 Tetradecane	C14H30	198	37.33	0.32	1400	1400	MS, RI
20	正辛基环己烷 Octylcyclohexane	C14H28	196	38.39	0.10	1451	1451	MS, RI
21	5-甲基-十四烷 5-Methyl-tetradecane	C15H32	212	38.51	0.07	1456	1454	MS, RI
22	4-甲基-十四烷 4-Methyl-tetradecane	C15H32	212	38.62	0.11	1462	1460	MS, RI
23	4,11-二甲基-十四烷 4,11-Dimethyl-tetradecane	C16H34	226	38.70	0.85	1465	1464	MS, RI
24	3-甲基-十四烷 3-Methyl-tetradecane	C15H32	212	38.87	0.14	1473	1470	MS, RI
25	十五烷 Pentadecane	C15H32	212	39.44	1.31	1500	1500	MS, RI
26	5-丙基-十三烷 5-Propyl-tridecane	C16H34	226	39.69	0.16	1515	1516	MS, RI
27	6-甲基-十五烷 6-Methyl-pentadecane	C16H34	226	40.29	0.06	1551	1551	MS, RI
28	壬基环已烷 n-Nonylcyclohexane	C15H30	210	40.37	0.22	1556	1556	MS, RI
29	4-甲基-十五烷 4-Methyl-pentadecane	C16H34	226	40.45	0.04	1560	1557	MS, RI
30	2-甲基-十五烷 2-Methyl-pentadecane	C16H34	226	40.53	0.15	1566	1564	MS, RI
序号 No.	挥发性成分 Volatile	分子式 Formula	分子量 Mass	保留时间 Retention time (min)	含量 Content (μg·kg-1)	保留指数 RI		鉴定依据 Identification
						Cal.	Ref.
31	3-甲基-十五烷 3-Methyl-pentadecane	C16H34	226	40.65	0.12	1573	1571	MS, RI
32	十六烷 Hexadecane	C16H34	226	41.11	0.36	1600	1600	MS, RI
33	2,6,10-三甲基-十五烷 2,6,10-Trimethyl-pentadecane	C18H38	254	41.84	0.17	1643	1649	MS, RI
酯类 Esters
34	乙酸乙酯 Ethyl acetate	C4H8O2	88	2.95	0.32	659	634	MS
35	己酸乙酯 Ethyl hexanoate	C8H16O2	144	18.14	0.11	1003	1001	MS, RI
36	乙酸叶醇酯 (Z)-3-Hexenyl acetate	C8H14O2	142	18.63	0.25	1010	1007	MS, RI
37	乙酸己酯 Hexyl acetate	C8H16O2	144	19.15	0.66	1017	1017	MS, RI
38	苯甲酸甲酯 Methyl benzoate	C8H8O2	136	24.87	0.05	1101	1093	MS, RI
39	异丁酸叶醇酯 (Z)-3-Hexenyl isobutyrate	C10H18O2	170	27.79	0.21	1138	1145	MS, RI
40	丁酸己酯 Hexyl butanoate	C10H20O2	172	28.05	0.10	1145	1148	MS, RI
41	己酸异丁酯 Isobutyl hexanoate	C10H20O2	172	28.16	0.07	1147	1148	MS, RI
42	乙酸苯甲酯 Benzyl acetate	C9H10O2	150	28.69	0.14	1161	1161	MS, RI
43	苯甲酸乙酯 Ethyl benzoate	C9H10O2	150	28.92	3.25	1167	1170	MS, RI
44	4-辛烯酸乙酯 Ethyl 4-octenoate	C10H18O2	170	29.87	0.04	1190	1191	MS, RI
45	辛酸乙酯 Ethyl octanoate	C10H20O2	172	30.22	0.20	1199	1201	MS, RI
46	乙酸辛酯 Octyl acetate	C10H20O2	172	30.80	0.04	1214	1213	MS, RI
47	异戊酸叶醇酯 cis-3-Hexenyl isovalerate	C11H20O2	184	31.56	0.42	1233	1235	MS, RI
48	异戊酸己酯 Hexyl 2-methylbutyrate	C11H22O2	186	31.74	0.24	1237	1239	MS, RI
49	2-辛烯酸乙酯 Ethyl (E)-2-octenoate	C10H18O2	170	32.12	0.04	1247	1246	MS, RI
50	己酸异戊酯 Isoamyl hexanoate	C11H22O2	186	32.23	0.05	1250	1251	MS, RI
51	乙酸苯乙酯 Phenethyl acetate	C10H12O2	164	32.47	1.16	1256	1256	MS, RI
52	辛酸丙酯 Propyl octanoate	C11H22O2	186	33.96	0.05	1293	1292	MS, RI
53	壬酸乙酯 Ethyl nonanoate	C11H22O2	186	34.15	0.05	1298	1298	MS, RI
54	乙酸壬酯 Nonyl acetate	C11H22O2	186	34.73	0.08	1316	1314	MS, RI
55	乙酸橙花酯 Neryl Acetate	C12H20O2	196	36.95	0.03	1388	1372	MS, RI
56	(E)-己酸-2-己烯酯 (E)-2-Hexenyl hexanoate	C12H22O2	198	37.10	0.14	1393	1391	MS, RI
57	癸酸乙酯 Ethyl caprate	C12H24O2	200	37.25	0.21	1398	1398	MS, RI
58	(Z)-庚酸-3-己烯酯 (Z)-3-Hexenyl heptanoate	C13H24O2	212	39.08	0.13	1483	1489	MS, RI
59	庚酸丁酯 Butyl heptanoate	C11H22O2	186	39.17	0.07	1488	1490	MS, RI
60	(Z)-3-辛酸己烯酯 (Z)-3-Hexenyl octanoate	C14H26O2	226	40.80	0.78	1582	1588	MS, RI
61	辛酸己酯 Hexyl octanoate	C14H28O2	228	40.86	0.54	1585	1582	MS, RI
62	月桂酸乙酯 Ethyl laurate	C14H28O2	228	41.05	0.17	1596	1597	MS, RI
63	软脂酸乙酯 Ethyl palmitate	C18H36O2	284	46.14	0.09	1900	1914	MS, RI

Cal.: The retention index calculated on HP-5ms column against n-alkanes (C6-C30) in this experiment; Ref.: The reference retention index shows in NIST Chemistry WebBook on HP-5ms column
Cal.：挥发物在本次色谱条件下测定的保留指数;Ref.：参考NIST Chemistry WebBook, SRD 69中HP-5ms上的保留指数

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2.3 挥发物类型与含量

挥发性成分主要为酯、烷、醇、芳香类、醛、萜类、酸、酮8类（表1）。其中酯类数量最多,为30种,占累计检出化合物的47.6%;其次为烷烃19种,占累计检出化合物的30.1%;其他几类检出数量均较少（醇5种、芳香类3种、醛2种、萜类2种、酸1种、酮1种）。由不同类型挥发物累计含量可知,酯类最高,为9.69 μg·kg^-1,占总挥发物含量的59.1%;其次为烷类5.38 μg·kg^-1,占总挥发物含量的32.8%;其他几类累计含量均较低（<0.5 μg·kg^-1）,由此可见酯类和烷类是欧李果实主要挥发性成分。

2.4 香气强度与品质

除烷烃不具有明显香气特征,(Z)-庚酸-3-己烯酯和(E)-3-甲基-4-癸烯酸的香气特征未见报道外,试验对剩余42种挥发物（含酯、醇、芳香烃、醛、萜类、酮）的香气强度与品质进行了分析（表2）。其中可参考香气阈值物质为19种,通过计算可知OAV较高的物质（＞0.1）为己酸乙酯（10.87）、乙酸苯乙酯（4.63）、β-芳樟醇（0.48）、乙酸己酯（0.33）、壬醛（0.17）,这些物质对欧李果实香气成分构成具有重要作用。通过香气强度分级情况可知,属高等香气品质的物质为9种,中等32种,低等香气品质的物质仅1种,其中壬醛、苯甲醛、苯甲酸甲酯、萘、乙酸乙酯、异丁酸叶醇酯、(Z)-3-己烯-1-醇、乙酸叶醇酯、己酸乙酯为高等香气品质物质,软脂酸乙酯为低等香气品质物质,其他均为中等香气品质。

Table 2
表2
表2欧李果实挥发性成分香气强度与品质
Table 2Strength and quality of aroma components of Cerasus humilis (Bge.) Sok

化合物 Compound	香气阈值 Odor threshold (μg·kg-1)	香气强 度值 OAVs	香气品质 Aroma quality[19,20,21]	香气类型 Odor type[21,22]	香气强度 Odor strength[21]
苯甲醛 Benzaldehyde	350[23]	<0.001	苦杏仁味 Bitter almond-like	芳香型 Aromatic	高 High
邻二甲苯 o-Xylene			天竺葵香气 Geranium-like	芳香型 Aromatic	中 Medium
苯甲酸甲酯 Methyl benzoate	0.52[24]	0.096	杏仁味 Almond-like	酚香型 Phenolic	高 High
己酸乙酯 Ethyl hexanoate	0.01[25]	10.873	凤梨果香 Pineapple-like	果香型 Fruity	高 High
异丁酸叶醇酯 (Z)-3-Hexenyl isobutyrate			苹果香 Apple-like	果香型 Fruity	高 High
乙酸己酯 Hexyl acetate	2[26]	0.33	梨子香 Pear-like	果香型 Fruity	中 Medium
2-壬酮 2-Nonanone	5[26]	0.01	似草香、泥土气息 Weedy and earthy-like	果香型 Fruity	中 Medium
4-辛烯酸乙酯 Ethyl 4-octenoate			柑橘气味 Citrus-like	果香型 Fruity	中 Medium
2-辛烯酸乙酯 Ethyl (E)-2-octenoate			凤梨果香 Pineapple-like	果香型 Fruity	中 Medium
己酸异戊酯 Isoamyl hexanoate			苹果香 Apple-like	果香型 Fruity	中 Medium
2-乙基-己醇 2-Ethyl-hexanol			香草味 Herbaceou-like	花香型 Floral	中 Medium
β-芳樟醇 β-Linalool	0.5[27]	0.476	铃兰香气 Keiskei-like	花香型 Floral	中 Medium
苯乙醇 Phenylethyl alcohol	750[28]	<0.001	玫瑰花香 Rose-like	花香型 Floral	中 Medium
乙酸苯甲酯 Benzyl acetate			茉莉花香 Jasmin fresh	花香型 Floral	中 Medium
壬醇 Nonanol	50[26]	0.006	玫瑰花、甜橙气息 Rose-and orange-like	花香型 Floral	中 Medium
乙酸辛酯 Octyl acetate	12[29]	0.003	花香、草香 Floral and herbal-like	花香型 Floral	中 Medium
乙酸苯乙酯 Phenethyl acetate	0.25[30]	4.629	甜蜜香味 Sweet honey-like	花香型 Floral	中 Medium
2-甲基萘 2-Methylnaphthalene			甜香 Sweety	花香型 Floral	中 Medium
乙酸橙花酯 Neryl Acetate			甜香 Sweet floral	花香型 Floral	中 Medium
乙酸乙酯 Ethyl acetate	5[17]	0.064	略带水果的酒香气味 Slightly fruity and winey-like	醚香型 Ethereal	高 High
α-法呢烯 α-Farnesene			草香 Herbal-like	木香型 Woody	中 Medium
(Z)-3-己烯-1-醇 (Z)-3-Hexen-1-ol			香草味 Herbaceous-like	青香型 Green	高 High
乙酸叶醇酯 (Z)-3-Hexenyl acetate			香蕉味 Banana-like	青香型 Green	高 High
丁酸己酯 Hexyl butanoate	250[29]	<0.001	蔬菜气息 Vegetables-like	青香型 Green	中 Medium
己酸异丁酯 Isobutyl hexanoate			可可香气 Cocoa-like	青香型 Green	中 Medium
苯甲酸乙酯 Ethyl benzoate	60[26]	0.054	焦油味 Tar-like	青香型 Green	中 Medium
异戊酸叶醇酯 cis-3-Hexenyl isovalerate			青苹果气息 Green apple-like	青香型 Green	中 Medium
异戊酸己酯 Hexyl 2-methylbutyrate			生果实味 Raw fruit-like	青香型 Green	中 Medium
(E)-己酸-2-己烯酯 (E)-2-Hexenyl hexanoate			青香 Green	青香型 Green	中 Medium
庚酸丁酯 Butyl heptanoate			甘草味 Licorice-like	青香型 Green	中 Medium
(Z)-3-辛酸己烯酯 (Z)-3-Hexenyl octanoate			弱的青香 Faint Green-like	青香型 Green	中 Medium
辛酸己酯 Hexyl octanoate			新鲜蔬菜气息 Fresh Vegetables-like	青香型 Green	中 Medium
壬醛 Nonanal	1[24]	0.156	柑橘香 Citrus-like	醛香型 Aldehydic	高 High
萘 Naphthalene	21[31]	0.001	干树脂气味 Dry resinous	辛香型 Spicy	高 High
辛酸丙酯 Propyl octanoate			椰子气味 Coconut-like	椰子香型 Coconut	中 Medium
软脂酸乙酯 Ethyl palmitate	2000[32]	<0.001	微弱蜡香 Soft waxy-like	脂蜡香型 Waxy	低 Low
辛醇 Octanol	110[28]	<0.001	脂蜡香气、柑橘气息 Waxy and orange-like	脂蜡香型 Waxy	中 Medium
辛酸乙酯 Ethyl octanoate	5[33]	0.04	白兰地香气 Brandy-like	脂蜡香型 Waxy	中 Medium
壬酸乙酯 Ethyl nonanoate			略带脂肪-油脂气味 Slightly fatty-oily-like	脂蜡香型 Waxy	中 Medium
乙酸壬酯 Nonyl acetate			果香和栀子花香气 Fruity and gardenia-like	脂蜡香型 Waxy	中 Medium
癸酸乙酯 Ethyl caprate	23[32]	<0.001	油脂、酒香气味 Oily and winey-like	脂蜡香型 Waxy	中 Medium
月桂酸乙酯 Ethyl laurate			花生香气 Peanut-like	脂蜡香型 Waxy	中 Medium

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香气品质分析可知,欧李果实香气主要为果香、花香、青香、脂蜡香和其他少数香型（木香型、芳香油香型等）,其中果香型10种、花香型10种、青香型11种、脂蜡香型6种和其他香型5种。按照各种香气物质在感官特征方面所表现出的香气类型,进行分类分析,具有同种香气类型物质的含量进行加和,作网状图（图7）,由挥发物含量可知主要香气品质的强度分别为：青香型（5.86）、花香型（2.06）、果香型（1.16）、脂蜡香型（0.84）、木香型（0.1）、其他香型（0.78）。青香型物质占有重要比重,果香与花香型占有一定比重,三者达到了香气物质含量的80%,可见,欧李果实香气成分以青香、花香、果香型物质为主。脂蜡香型物质多见于果酒香气中^[34]。

图7

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图7欧李果实香气系列分布

Fig. 7Aroma profile analysis of Cerasus humilis (Bge.) Sok

3 讨论

用于果实香气测定的样品处理主要有榨汁、果肉匀浆加盐、果肉切碎^[4]等处理。对于含水量较高的果实,可选择榨汁的方式处理样品,操作简单,亦可满足分析,如葡萄果实^[35]。研究表明,加盐可以提高挥发物的萃取效率,盐析作用所形成的水合球可降低挥发物分子的溶解浓度,促使多余的分析物进入萃取头。挥发物分子也可能与溶液中的盐离子发生静电作用,降低其进入纤维涂层的能力。但加盐多适用于果汁、果酒类液体样品^[10]或浆果类样品^[36,37,38]分析。本研究表明,随加盐量增加,挥发物萃取总量逐渐升高,说明盐析作用可以促进挥发物的释放,但所得挥发物种类和总量明显低于果肉切碎处理,可能是匀浆和其他操作易造成挥发物损失,榨汁处理同样会造成挥发物损失,而果肉切碎处理,不仅样品处理简单,也降低了挥发物损失,最大程度保留了样品的原有成分。此外,SPME的萃取效果受萃取温度、时间、平衡时间等因素的影响,通过优化条件可以明显改善试验效果^[17]。本次试验采用单因素试验,以检出挥发物种类与峰面积总量为响应值,分别对样品量、萃取温度、萃取时间、平衡时间等影响因素进行了优化。试验表明,增加样品量可以提高挥发物检出数量,取样量持续增加,分析物之间竞争作用加强,反而不利于挥发物的萃取,峰面积总量表明在取样量范围内萃取头吸附均已接近饱和,变化不明显;萃取温度变化表明提高温度可以增加分析物的扩散系数,增加萃取效率,但50—60℃是样品发生变质的关键温度,萃取温度设定不宜高于50℃;萃取时间变化趋势表明萃取头所吸附的被检挥发物有脱落和再吸附的动态过程;平衡时间的变化趋势表明被检挥发物有释放与溶解呈现动态过程。

本次在欧李果实中检测到63种挥发物,明显高于YE等^[7]、刘俊英等^[8]所检测得的挥发物数量,与周立华等^[9]报道所鉴定的挥发物种类接近,但本次试验所采用的定性、定量方法更准确。挥发物含量（0.01—3.25 μg·kg^-1）与YE等^[7]所报道的接近,含酯、烷烃、醇、芳香类、醛、萜类、酸、酮等。挥发物种类及含量表明其挥发物组成复杂,其中酯类和烷类是欧李果实主要挥发性成分,与报道一致^[7];但本次试验未检测到内酯类化合物,可能与样品或处理方式有关。

在欧李果实挥发性成分中,烷烃是仅次于酯类的第二大挥发物来源,烷烃主要来源于植物表皮所覆盖的蜡质^[39],蜡质具有多种功能,可以为植物提供物理化学保护屏障,减少非气孔水分的损失,控制温度,提供光保护,增强抗霜冻能力以及对有害物（包括害虫、真菌和细菌）攻击的抵抗力^[40,41],烷类挥发物多不具有特定气味,香气贡献度低。关于(Z)-庚酸-3-己烯酯和(E)-3-甲基-4-癸烯酸的香气特征未见报道,其他挥发物则不同程度具有特征性香气。

OAVs是评价香气化合物重要性的一个指标,能更好的衡量一个香气物质对香气的贡献度。挥发物的OAV值大于或者等于1时对样品香气组成有贡献,OAV值越大,对香气贡献越大^{[25,26,27,28,29,30]}。欧李香气OAVs表明乙酸苯乙酯、β-芳樟醇、乙酸己酯、壬醛、己酸乙酯、乙酸乙酯以及苯甲酸乙酯7种挥发性物质成分对欧李果实特征性香气的构成具有重要作用。香气系列分布表明青香型物质占有重要比重,果香与花香型物质所占比重接近,是欧李主要香气特征,与实际嗅感一致。

相关研究表明,组成欧李香气成分除用作香精香料使用外,还具有一定生物活性,如乙酸苯乙酯与苯乙醇具有高效的抗菌活性^[42],β-芳樟醇具有抗氧化作用^[43],这可能是欧李作为古老的果药兼用树种的原因。此外,壬醛、2-壬酮对昆虫具有驱避作用^[44],乙酸叶醇酯对昆虫具有引诱作用^[45],这是欧李具有抗病虫害、抗逆性强等特性^[3]的原因,对欧李适应自然环境,抵御各种危害具有重要作用。

4 结论

优化的欧李果实挥发性物质萃取条件为：果肉去核切碎处理,取样量5 g,萃取温度50℃,萃取时间与平衡时间均为30 min。鉴定欧李果实挥发物63种,酯类和烷类是欧李果实主要挥发性成分,除烷类物质其他挥发物多具有特征香气,青香、果香、花香是欧李香气主要特征,这些物质共同构成了欧李果实的独特香气。

参考文献 View Option 原文顺序
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被引期刊影响因子

[1] SONG X S, SHANG Z W, YIN Z P, REN J, SUN M C, MA X L . Mechanism of xanthophyll-cycle-mediated photo protection in Cerasus humilis seedlings under water stress and subsequent recovery
Photosynthetica, 2011,49(4):523-530.
[本文引用: 1]

[2] KHOO G M, CLAUSEN M R, PEDERSEN B H, LARSEN E . Bioactivity and total phenolic content of 34 sour cherry cultivars
Journal of Food Composition & Analysis, 2011,24(6):772-776.
[本文引用: 1]

[3] 张雨晴 , 斯琴格日勒, 翟蓉, 周永斌, 张旋. 野生欧李和栽培欧李果实营养成分的比较分析
食品研究与开发, 2017,38(8):104-108.
[本文引用: 2]

ZHANG Y Q, SI Q, ZHAI R, ZHOU Y B, ZHANG X . Comparison of nutrients in wild and cultivated Chinese dwarf cherry
Food Research and Development, 2017,38(8):104-108. (in Chinese)
[本文引用: 2]

[4] 刘俊英, 辛秀兰, 兰蓉 . 同位素内标法测定欧李果原汁氨基酸
食品研究与开发, 2010,31(8):140-143.
[本文引用: 2]

LIU J Y, XIN X L, LAN R . Study on detection of amino acids in Chinese dwarf cherry juice with isotope internal standard method
Food Research and Development, 2010,31(8):140-143. (in Chinese)
[本文引用: 2]

[5] 张立彬, 刘俊, 肖啸, 李建国, 李泽文, 高海生 . 欧李新品种‘燕山1号’
园艺学报, 2004,31(1):137.
Magsci [本文引用: 1]
<FONT face=Verdana>‘燕山1 号’是从野生欧李中选出的大果型新品种, 平均单果质量15 g , 果实近圆形, 果面鲜<BR>红明亮, 果肉粉红色, 风味甜酸, 香气浓郁, 可溶性固形物10 %～15 % , 株高0.6 m 左右, 树姿开张, 早果丰产, 8 月上旬成熟。适宜在我国北部山区丘陵栽培, 果实主要用于深加工, 兼鲜食。</FONT>
ZHANG L B, LIU J, XIAO X, LI J G, LI Z W, GAO H S . ‘Yanshan 1’ - Chinese dwarf cherry
Acta Horticulturae Sinica, 2004,31(1):137. (in Chinese)
Magsci [本文引用: 1]
<FONT face=Verdana>‘燕山1 号’是从野生欧李中选出的大果型新品种, 平均单果质量15 g , 果实近圆形, 果面鲜<BR>红明亮, 果肉粉红色, 风味甜酸, 香气浓郁, 可溶性固形物10 %～15 % , 株高0.6 m 左右, 树姿开张, 早果丰产, 8 月上旬成熟。适宜在我国北部山区丘陵栽培, 果实主要用于深加工, 兼鲜食。</FONT>

[6] 王鹏飞, 曹琴, 杜俊杰, 张建成, 穆霄鹏 . 鲜食欧李新品种‘农大7号’
园艺学报, 2013,40(1):181-182.
Magsci [本文引用: 1]
欧李（Cerasus humilis</em> Bunge）新品种&lsquo;农大7号&rsquo;是从欧李自然杂交实生后代中选育而成。果实扁圆形，底色橘黄色，向阳面着红晕，果肉淡黄色，离核。平均单果质量14.3 g，可食率94.4%，可溶性固形物14.57%，总糖7.96%，可滴定酸1.28%，糖酸比6.22，维生素C 506.9 mg &middot; kg^-1,氨基酸总量5.45 g &middot; kg^-1。外观漂亮，香味浓郁，酸甜适口，丰产强，在山西晋中8月下旬成熟，为鲜食品种。
WANG P F, CAO Q, DU J J, ZHANG J C, MU X P . A new fresh-eating cultivar of Chinese dwarf cherry (Cerasus humilis Bunge) ‘Nongda 7’
Acta Horticulturae Sinica, 2013,40(1):181-182. (in Chinese)
Magsci [本文引用: 1]
欧李（Cerasus humilis</em> Bunge）新品种&lsquo;农大7号&rsquo;是从欧李自然杂交实生后代中选育而成。果实扁圆形，底色橘黄色，向阳面着红晕，果肉淡黄色，离核。平均单果质量14.3 g，可食率94.4%，可溶性固形物14.57%，总糖7.96%，可滴定酸1.28%，糖酸比6.22，维生素C 506.9 mg &middot; kg^-1,氨基酸总量5.45 g &middot; kg^-1。外观漂亮，香味浓郁，酸甜适口，丰产强，在山西晋中8月下旬成熟，为鲜食品种。

[7] YE L Q, YANG C X, LI W D, HAO J B, MENG S, JINGRU ZHANG A, ZHANG Z S . Evaluation of volatile compounds from Chinese dwarf cherry (Cerasus humilis(Bge.) Sok.) germplasms by headspace solid-phase microextraction and gas chromatography-mass spectrometry
Food Chemistry, 2017,217:389-397.
[本文引用: 4]

[8] 刘俊英, 李双石, 闫征, 李卫东 . GC-MS法研究成熟度对欧李果香气成分的影响
食品研究与开发, 2018,39(14):148-152.
[本文引用: 2]

LIU J Y, LI S S, YAN Z, LI W D . Effect of harvest maturity on aroma components of Chinese dwarf cherry with GC-MS
Food Research and Development, 2018,39(14):148-152. (in Chinese)
[本文引用: 2]

[9] 周立华, 牟德华, 李艳 . HS-SPME结合GC-MS分析冷冻对欧李果香气的影响
酿酒科技, 2016(8):113-118.
[本文引用: 2]

ZHOU L H, MOU D H, LI Y . Analysis of the effects of freezing on the aroma of Cerasus Humilis by HS-SPME-GC-MS
Liquor-making Science & Technology, 2016(8):113-118. (in Chinese)
[本文引用: 2]

[10] 陈臣, 李艳, 牟德华 . 优化GC检测欧李酒香气成分的萃取条件
食品工业科技, 2014,35(6):81-86.
[本文引用: 2]

CHEN C, LI Y, MOU D H . Optimization extraction conditions for GC analysis of aromatic constituents in prunus humilis bunge wine
Science and Technology of Food Industry, 2014,35(6):81-86. (in Chinese)
[本文引用: 2]

[11] 薛洁, 涂正顺, 常伟, 贾士儒, 王异静 . 中国特有野生水果欧李(Cerasus Humilis)香气成分的GC-MS分析
中国食品学报, 2008,8(1):125-129.
[本文引用: 1]

XUE J, TU Z S, CHANG W, JIA S R, WANG Y J . Analysis of aromatic composition in Chinese wild fruit (Cerasus Humilis) by gas chromatography-mass spectrometry
Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology, 2008,8(1):125-129. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[12] AHMED H. EL-GHORAB, FADEL H M, EL-MASSRY K F . The Egyptian Eucalyptus camaldulensis var. brevirostris: chemical compositions of the fruit volatile oil and antioxidant activity
Flavour & Fragrance Journal, 2010,17(4):306-312.
[本文引用: 1]

[13] CHANG K M, KIM G H . Volatile aroma constituents of gukhwa (Chrysanthemum morifolium R.)
Food Science & Biotechnology, 2013,22(3):659-663.
[本文引用: 1]

[14] HINGE V R, PATIL H B, NADAF A B . Aroma volatile analyses and 2AP characterization at various developmental stages in Basmati and Non-Basmati scented rice (Oryza sativa L.) cultivars
Rice, 2016,9(1):1-22.
[本文引用: 1]

[15] FENG Y Z, SU G W, ZHAO H F . Characterisation of aroma profiles of commercial soy sauce by odour activity value and omission test
Food Chemistry, 2015,167:220-228.
[本文引用: 1]

[16] BALASUBRAMANIAN S . Solid-phase microextraction (SPME) techniques for quality characterization of food products: A review
Food & Bioprocess Technology, 2011,4(1):1-26.
[本文引用: 1]

[17] 张芳, 未志胜, 王鹏, 李凯旋, 詹萍, 田洪磊 . 基于BP神经网络和遗传算法的库尔勒香梨挥发性物质萃取条件的优化
中国农业科学, 2018,51(23):4535-4547.
DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.23.012Magsci [本文引用: 3]
<p id="C2">【目的】通过BP神经网络结合遗传算法对固相微萃取条件（萃取头种类、样品量、萃取温度、萃取时间和盐离子添加量）的优化,建立高效的库尔勒香梨汁香气物质的萃取分析方法,为库尔勒香梨相关产品天然风味的拟合及调控奠定基础。【方法】通过单因素试验确定最佳萃取纤维头种类和样品量、萃取温度、萃取时间和盐离子添加量的最佳萃取参数。在单因素试验设计的基础上,以库尔勒香梨汁中关键香气物质（己醛、丁酸乙酯、壬醛、乙酸乙酯、(E)-2-己烯醛、己醇、(Z)-2己烯醛、丙酸乙酯和己酸乙酯）的含量为评价指标进行中央复合设计试验进一步考察样品量、萃取温度、萃取时间和盐离子添加量对库尔勒香梨汁固相微萃取效果的影响。最后以中央复合设计的试验结果为初始种群,以样品量、萃取温度、萃取时间和盐离子添加量为输入值,以库尔勒香梨汁中关键香气物质含量为其函数的输出值,通过BP神经网络模型来调试函数适应度。使用中央复合设计数据以外的数据集对BP神经网络外推能力进行验证。利用遗传算法（算法参数：最大进化代数100、初始种群数20、变异概率0.2、交叉概率0.4）在试验水平范围内预测全局最优的萃取条件。【结果】统计分析结果表明,65 &#x003bc;m PDMS/DVB萃取头对库尔勒香梨汁中关键香气物质的萃取效果最好,样品量、萃取温度、萃取时间和盐离子添加量对固相微萃取效果具有显著影响（<italic>P</italic>&lt;0.05）。BP神经网络的拓扑结构为&#x02018;4-15-1&#x02019;。验证数据和训练数据的<italic>MSE</italic>均大于0.017;训练、测试和验证数据的相关系数分别为0.990、0.951和0.973,表明BP神经网络预测模型有很好的准确性,可以用于库尔勒香梨汁香气物质固相微萃取结果的预测。BP神经网络外推能力验证试验的结果与BP神经网络模型预测值的拟合度（<italic>R</italic> ²）为0.992,表明试验建立的BP神经网络模型有很好的外推能力,能够准确地预测不在训练集内的数据集的输出值。遗传算法迭代100代后确定的最优个体为3.41 &#x003bc;g&#x000b7;g ^-1,最佳固相微萃取条件是样品量5.33 g、萃取温度44.70℃、萃取时间25.22 min和盐离子添加量0.63 g。在尽可能接近此条件下进行验证试验（试验条件：样品量5.33 g、萃取温度45℃、萃取时间25 min和盐离子添加量0.63 g）,测得库尔勒香梨汁中9种关键香气物质的含量为（3.37&#x000b1;0.23）&#x003bc;g&#x000b7;g ^-1,与最优个体预测值相比,误差仅为-1.19%。【结论】上述结果表明BP神经网络模型结合遗传算法是一种准确度较好的优化固相微萃取参数的新方法,同时也为解决非线性模型工艺优化的问题提供了新思路。库尔勒香梨汁香气物质固相微萃取的最佳萃取条件为：样品量5.33 g,萃取温度45℃,萃取时间 25 min,盐离子添加量0.63 g。</p>
ZHANG F, WEI Z S, WANG P, LI K X, ZHAN P, TIAN H L . Using neural network coupled genetic algorithm to optimize the SPME conditions of volatile compounds in Korla pear
Scientia Agricultura Sinica, 2018,51(23):4535-4547. (in Chinese)
DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.23.012Magsci [本文引用: 3]
<p id="C2">【目的】通过BP神经网络结合遗传算法对固相微萃取条件（萃取头种类、样品量、萃取温度、萃取时间和盐离子添加量）的优化,建立高效的库尔勒香梨汁香气物质的萃取分析方法,为库尔勒香梨相关产品天然风味的拟合及调控奠定基础。【方法】通过单因素试验确定最佳萃取纤维头种类和样品量、萃取温度、萃取时间和盐离子添加量的最佳萃取参数。在单因素试验设计的基础上,以库尔勒香梨汁中关键香气物质（己醛、丁酸乙酯、壬醛、乙酸乙酯、(E)-2-己烯醛、己醇、(Z)-2己烯醛、丙酸乙酯和己酸乙酯）的含量为评价指标进行中央复合设计试验进一步考察样品量、萃取温度、萃取时间和盐离子添加量对库尔勒香梨汁固相微萃取效果的影响。最后以中央复合设计的试验结果为初始种群,以样品量、萃取温度、萃取时间和盐离子添加量为输入值,以库尔勒香梨汁中关键香气物质含量为其函数的输出值,通过BP神经网络模型来调试函数适应度。使用中央复合设计数据以外的数据集对BP神经网络外推能力进行验证。利用遗传算法（算法参数：最大进化代数100、初始种群数20、变异概率0.2、交叉概率0.4）在试验水平范围内预测全局最优的萃取条件。【结果】统计分析结果表明,65 &#x003bc;m PDMS/DVB萃取头对库尔勒香梨汁中关键香气物质的萃取效果最好,样品量、萃取温度、萃取时间和盐离子添加量对固相微萃取效果具有显著影响（<italic>P</italic>&lt;0.05）。BP神经网络的拓扑结构为&#x02018;4-15-1&#x02019;。验证数据和训练数据的<italic>MSE</italic>均大于0.017;训练、测试和验证数据的相关系数分别为0.990、0.951和0.973,表明BP神经网络预测模型有很好的准确性,可以用于库尔勒香梨汁香气物质固相微萃取结果的预测。BP神经网络外推能力验证试验的结果与BP神经网络模型预测值的拟合度（<italic>R</italic> ²）为0.992,表明试验建立的BP神经网络模型有很好的外推能力,能够准确地预测不在训练集内的数据集的输出值。遗传算法迭代100代后确定的最优个体为3.41 &#x003bc;g&#x000b7;g ^-1,最佳固相微萃取条件是样品量5.33 g、萃取温度44.70℃、萃取时间25.22 min和盐离子添加量0.63 g。在尽可能接近此条件下进行验证试验（试验条件：样品量5.33 g、萃取温度45℃、萃取时间25 min和盐离子添加量0.63 g）,测得库尔勒香梨汁中9种关键香气物质的含量为（3.37&#x000b1;0.23）&#x003bc;g&#x000b7;g ^-1,与最优个体预测值相比,误差仅为-1.19%。【结论】上述结果表明BP神经网络模型结合遗传算法是一种准确度较好的优化固相微萃取参数的新方法,同时也为解决非线性模型工艺优化的问题提供了新思路。库尔勒香梨汁香气物质固相微萃取的最佳萃取条件为：样品量5.33 g,萃取温度45℃,萃取时间 25 min,盐离子添加量0.63 g。</p>

[18] 孔慧娟, 赵国玲, 汪雯岚, 阎卫东 . 6种水果中键合态香气成分的气相色谱-质谱法鉴定与比较
食品科学, 2015,36(14):140-144.
DOI:10.7506/spkx1002-6630-201514027Magsci [本文引用: 1]
<p>以菠萝、草莓、苹果、梨、香橙和红提6 种水果为研究对象，通过Amberlite XAD-2树脂吸附、乙醇洗脱的方法，分离得到其对应的键合态香气成分，酶解后所释放的香气成分经气相色谱-质谱检测分析，得到各水果中键合态香气成分的种类和含量。结果表明，各种水果所鉴定出的键合态香气物质种类分别为：苹果18 种、梨33 种、草莓32 种、香橙13 种、菠萝15 种、红提16 种。其中，醇、酚类物质含量总体相对较高，草莓中键合态香气物质的总含量最为丰富，达34.29 mg/L。苯甲醇、苯乙醇、丁香酚等香气成分在至少3 种水果中被检出。各种水果中含量较高的键合态香气种类有所不同。部分水果中的键合态香气物质在文献中鲜见报道。</p>
KONG H J, ZHAO G L, WANG W L, YAN W D . Identification and comparison of bound aroma components in six kinds of fruits by GC-MS
Food Science, 2015,36(14):140-144. (in Chinese)
DOI:10.7506/spkx1002-6630-201514027Magsci [本文引用: 1]
<p>以菠萝、草莓、苹果、梨、香橙和红提6 种水果为研究对象，通过Amberlite XAD-2树脂吸附、乙醇洗脱的方法，分离得到其对应的键合态香气成分，酶解后所释放的香气成分经气相色谱-质谱检测分析，得到各水果中键合态香气成分的种类和含量。结果表明，各种水果所鉴定出的键合态香气物质种类分别为：苹果18 种、梨33 种、草莓32 种、香橙13 种、菠萝15 种、红提16 种。其中，醇、酚类物质含量总体相对较高，草莓中键合态香气物质的总含量最为丰富，达34.29 mg/L。苯甲醇、苯乙醇、丁香酚等香气成分在至少3 种水果中被检出。各种水果中含量较高的键合态香气种类有所不同。部分水果中的键合态香气物质在文献中鲜见报道。</p>

[19] VAN GEMERT L J . Compilations of Odour Threshold Values in Air, Water and Other Media
The Netherlands: Oliemans Punter & Partners BV, 2003.
[本文引用: 1]

[20] 林翔云, 林君如, 何丽洪 . 香料香精实用价值的综合评价
香料香精化妆品, 2000(4):21-26.
[本文引用: 1]

LIN X Y, LIN J R, HE L H . The composite evaluation of practical value of flavors & fragrances
Flavour Fragrance Cosmetics, 2000(4):21-26. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[21] Perflavory Information System. Available online: http://www. perflavory.com/index.html.
[本文引用: 3]

[22] Leffingwell & Associates. Available online: http://www.leffingwell. com/odorthre.html (accessed on 12 April 2012.
[本文引用: 1]

[23] SCHEUERMANN E, SEGUEL I, MONTENEGRO A, BUSTOS R O, HORMAZABAL E, QUIROZ A . Evolution of aroma compounds of murtilla fruits (Ugni molinae Turcz) during storage
Journal of the Science of Food and Agriculture, 2008,88(3):485-492.
[本文引用: 1]

[24] PINO J A, MESA J . Contribution of volatile compounds to mango (Mangifera indica L.) aroma
Flavour and Fragrance Journal, 2006,21(2):207-213.
[本文引用: 2]

[25] QIAN M C, WANG Y . Seasonal variation of volatile composition and odor activity value of ‘Marion’ (Rubus spp. hyb) and ‘Thornless Evergreen’ (R. laciniatus L.) blackberries
Journal of Food Science, 2005,70(1):13-20.
[本文引用: 2]

[26] 孙宝国, 陈海涛 . 食用调香术.第3版. 北京: 化学工业出版社, 2016.
[本文引用: 5]

SUN B G, CHEN H T. The Ttechnology of Food Flavor. 3rd ed. Beijing: Chemical Industry Press, 2016. ( in Chinese)
[本文引用: 5]

[27] BURDOCK G A. Fenaroli’s Handbook of Flavor Ingredients, 4th ed. Boca Raton, FL, USA: CRC Press Inc. 2002.
[本文引用: 2]

[28] JOSHI R, GULATI A . Fractionation and identification of minor and aroma-active constituents in Kangra orthodox black tea
Food Chemistry, 2015,167:290-298.
[本文引用: 3]

[29] TAKEOKA G R, BUTTERY R G, FLATH R A . Volatile constituents of Asian pear (Pyrus serotina)
Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1992,40(10):1925-1929.
[本文引用: 3]

[30] QIN Z H, PANG X L, CHEN D, CHEN H, HU X S, WU J H . Evaluation of Chinese tea by the electronic nose and gas chromatography- mass spectrometry: Correlation with sensory properties and classification according to grade level
Food Research International, 2013,53(2):864-874.
[本文引用: 2]

[31] 侯丽娟, 严超, 赵欢, 王颉 . 顶空固相微萃取-气相色谱质谱联用-嗅闻技术分析红枣白兰地主体香气成分
中国食品学报, 2018,18(8):232-238.
[本文引用: 1]

HOU L J, YAN C, ZHAO H, WANG J . Analysis of characteristic aromatic components in jujube brandy by HS-SPME-GC/MS and GC-O
Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology, 2018,18(8):232-238. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[32] BOONBUMRUNG S, TAMURA H, MOOKDASANIT J, NAKAMOTO H, ISHIHARA S, YOSHIZAWA T, VARANYANOND W . Characteristic aroma components of the volatile oil of Yellow Keaw mango fruits determined by limited odor unit method
Food Science and Technology Research, 2001,7(3):200-206.
[本文引用: 2]

[33] AZNAR M, LóPEZ R, CACHO J, FERREIRA V . Prediction of aged red wine aroma properties from aroma chemical composition. Partial least squares regression models
Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2003,51(9):2700-2707.
[本文引用: 1]

[34] 李丽梅, 郑振山, 何近刚, 冯云霄, 程玉豆, 关军锋 . 不同品种梨酒挥发性成分的SPME-GC-MS结果比较
食品工业科技, 2016,37(11):314-317.
[本文引用: 1]

LI L M, ZHENG Z S, HE J G, FENG Y X, CHENG Y D, GUAN J F . Comparison of volatile components of different pear wine by SPME-GC-MS
Science and Technology of Food Industry, 2016,37(11):314-317. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[35] 胡文舜, 蒋际谋, 黄爱萍, 郑少泉 . ‘晚香’龙眼果实香气成分的3种萃取头GC-MS效果分析
福建农业学报, 2015,30(12):1149-1154.
[本文引用: 1]

HU W S, JIANG J M, HUANG A P, ZHENG S Q . GC-MS analysis on aromatics of Wanxiang longans using different extraction fibers
Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2015,30(12):1149-1154. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[36] 张晓瑜, 吴广臣, 王良, 赵志磊 . 固相微萃取-气质联用分析“大石早生”李香气成分
食品工业, 2018,39(7):178-181.
[本文引用: 1]

ZHANG X Y, WU G C, WANG L, ZHAO Z L . Analysis of volatile aroma component of “Oishiwase” plum by SPME and GC-MS
The Food Industry, 2018,39(7):178-181. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[37] 王娟, 孙瑞, 王桂霞, 常琳琳, 孙健, 钟传飞, 董静, 张运涛 , DETLEF ULRICH. 8个草莓品种(系)果实特征香气成分比较分析
果树学报, 2018,35(8):967-976.
[本文引用: 1]

WANG J, SUN R, WANG G X, CHANG L L, SUN J, ZHONG C F, DONG J, ZHANG Y T, DETLEF U . A comparative analysis on fruit characteristic aroma compounds in eight strawberry varieties (strains)
Journal of Fruit Science, 2018,35(8):967-976. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[38] 张克坤, 王海波, 王孝娣, 史祥宾, 王宝亮, 郑晓翠, 刘凤之 . ‘瑞都香玉’葡萄果实挥发性成分在果实发育过程中的变化
中国农业科学, 2015,48(19):3965-3978.
DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2015.19.018Magsci [本文引用: 1]
【目的】早熟、具有玫瑰香味的鲜食葡萄具有较广阔的市场前景,了解各类香气组分及相关代谢途径在果实发育过程中的变化规律,把握香气组分形成的关键时期,为早熟葡萄品种品质调控技术的提出提供理论依据。【方法】以&lsquo;贝达&rsquo;嫁接的4年生早熟葡萄品种&lsquo;瑞都香玉&rsquo;为试材,使用顶空固相微萃取结合气相色谱与质谱联用技术,测定在幼果发育期（花后第3周）至过熟期（花后第12周）果实中挥发性组分的变化。根据各组分的变化探究相关代谢途径的更替,并利用主成分分析确定发育阶段与各类香气组分间的关系。【结果】根据可溶性固形物及可滴定酸含量的变化可以确定&lsquo;瑞都香玉&rsquo;葡萄在花后第5周即可进入果实转色/软化期,花后第9周进入果实成熟期。里那醇、橙花醇、香叶醇、香茅醇、萜品醇等主要呈香型萜烯类组分峰值出现的时期不同,橙花醇、香叶醇含量在成熟初期达到最大值,里那醇、萜品醇含量在成熟中期达到峰值,香茅醇含量在成熟期具有波动性。E-2-己烯醛、己醛为成熟期主要的C6化合物,其含量在转色期以后即可达到峰值,成熟期时含量降低；Z-3-己烯醛主要出现在幼果发育期,转色期时含量处于较低水平。&beta;-紫罗兰酮、大马士酮等降异戊二烯衍生物及苯甲醛等芳香族化合物在成熟期时含量处于较低水平或消失。综合各挥发性组分的含量变化可得,萜烯类组分在各发育期均有积累,过熟期含量降低；酯类物质集中出现在幼果发育期,成熟初期含量有所升高；醛酮类物质集中出现在转色初期；C6化合物在转色期有不同程度的升高,成熟期后含量有减少趋势；醇类物质在转为成熟期后含量开始减少；芳香族化合物集中在转色期以前；酸类物质在转为成熟期后有所增加。转色期以前为酯类物质、芳香族化合物变化的关键时期,转色期为醛酮类物质变化的关键时期,转色期至成熟期为成熟期特征萜烯类物质、C6化合物、酸类物质变化的关键时期。【结论】果实发育早期亚麻酸裂解途径Z-3-己烯醛支路活跃,进入转色期后,脂肪酸代谢其他支路与萜烯类物质合成路径活跃性增强；成熟期发育过程中,主要香气成分的积累都有减弱,转色期转为成熟期时为果实香型形成的关键时期。&lsquo;瑞都香玉&rsquo;主要呈香型萜烯成分的积累具有差异性,里那醇、萜品醇含量在成熟期仍有增加,综合考虑C6组分与萜烯类成分的变化,果实香气成熟期稍晚于生理成熟期,适当延迟采收有助于其特征香型的形成。
ZHANG K K, WANG H B, WANG X D, SHI X B, WANG B L, ZHENG X C, LIU F Z . Evolution of volatile compounds during the berry development of ‘Ruidu Xiangyu’ grape
Scientia Agricultura Sinica, 2015,48(19):3965-3978. (in Chinese)
DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2015.19.018Magsci [本文引用: 1]
【目的】早熟、具有玫瑰香味的鲜食葡萄具有较广阔的市场前景,了解各类香气组分及相关代谢途径在果实发育过程中的变化规律,把握香气组分形成的关键时期,为早熟葡萄品种品质调控技术的提出提供理论依据。【方法】以&lsquo;贝达&rsquo;嫁接的4年生早熟葡萄品种&lsquo;瑞都香玉&rsquo;为试材,使用顶空固相微萃取结合气相色谱与质谱联用技术,测定在幼果发育期（花后第3周）至过熟期（花后第12周）果实中挥发性组分的变化。根据各组分的变化探究相关代谢途径的更替,并利用主成分分析确定发育阶段与各类香气组分间的关系。【结果】根据可溶性固形物及可滴定酸含量的变化可以确定&lsquo;瑞都香玉&rsquo;葡萄在花后第5周即可进入果实转色/软化期,花后第9周进入果实成熟期。里那醇、橙花醇、香叶醇、香茅醇、萜品醇等主要呈香型萜烯类组分峰值出现的时期不同,橙花醇、香叶醇含量在成熟初期达到最大值,里那醇、萜品醇含量在成熟中期达到峰值,香茅醇含量在成熟期具有波动性。E-2-己烯醛、己醛为成熟期主要的C6化合物,其含量在转色期以后即可达到峰值,成熟期时含量降低；Z-3-己烯醛主要出现在幼果发育期,转色期时含量处于较低水平。&beta;-紫罗兰酮、大马士酮等降异戊二烯衍生物及苯甲醛等芳香族化合物在成熟期时含量处于较低水平或消失。综合各挥发性组分的含量变化可得,萜烯类组分在各发育期均有积累,过熟期含量降低；酯类物质集中出现在幼果发育期,成熟初期含量有所升高；醛酮类物质集中出现在转色初期；C6化合物在转色期有不同程度的升高,成熟期后含量有减少趋势；醇类物质在转为成熟期后含量开始减少；芳香族化合物集中在转色期以前；酸类物质在转为成熟期后有所增加。转色期以前为酯类物质、芳香族化合物变化的关键时期,转色期为醛酮类物质变化的关键时期,转色期至成熟期为成熟期特征萜烯类物质、C6化合物、酸类物质变化的关键时期。【结论】果实发育早期亚麻酸裂解途径Z-3-己烯醛支路活跃,进入转色期后,脂肪酸代谢其他支路与萜烯类物质合成路径活跃性增强；成熟期发育过程中,主要香气成分的积累都有减弱,转色期转为成熟期时为果实香型形成的关键时期。&lsquo;瑞都香玉&rsquo;主要呈香型萜烯成分的积累具有差异性,里那醇、萜品醇含量在成熟期仍有增加,综合考虑C6组分与萜烯类成分的变化,果实香气成熟期稍晚于生理成熟期,适当延迟采收有助于其特征香型的形成。

[39] 段中华, 全小龙, 乔有明, 裴海昆, 何桂芳 . 高寒草甸植物正构烷烃特征分析
草业学报, 2016,25(6):136-147.
DOI:10.11686/cyxb2016036Magsci [本文引用: 1]
为研究高寒草甸植物正构烷烃分布特征,对采自黄河源区高寒草甸的58种植物进行了测定和分析。结果表明,单种植物中正构烷烃的碳数在C₈和C₄₀之间,含量分布范围为0.81~22.88 mg/kg,其中碳数为C₂₇、C₂₉、C₃₁、C₃₃正构烷烃的含量均较高;总正构烷烃(C_total)含量变化范围为35.00~78.64 mg/kg,长链正构烷烃(C_25-36)含量范围为16.11~58.68 mg/kg,条叶垂头菊中总正构烷烃和长链正构烷烃含量最小,而阿尔泰狗娃花含量最大。58种植物中含量最高的正构烷烃(C_max)分布特征为:C₁₉有1种,C₂₂有2种,C₂₇有2种,C₂₉有23种,C₃₁有27种,C₃₂有1种,C₃₃有2种。植物中正构烷烃总正构烷烃碳优势指数(CPI_total)范围为1.07~4.32,CPI_25-36范围为1.12~8.20,总的正构烷烃平均碳链长度(ACL_total)范围为23.52~27.22,ACL_27-33范围为28.03~31.07,蜡质指数(P_wax)变化范围为0.60~0.92。植物中长链正构烷烃丰富,奇数碳含量分布优势明显。
DUAN Z H, QUAN X L, QIAO Y M, PEI H K, HE G F . Characterization of plant n-alkanes in alpine meadow
Acta Prataculturae Sinica, 2016,25(6):136-147. (in Chinese)
DOI:10.11686/cyxb2016036Magsci [本文引用: 1]
为研究高寒草甸植物正构烷烃分布特征,对采自黄河源区高寒草甸的58种植物进行了测定和分析。结果表明,单种植物中正构烷烃的碳数在C₈和C₄₀之间,含量分布范围为0.81~22.88 mg/kg,其中碳数为C₂₇、C₂₉、C₃₁、C₃₃正构烷烃的含量均较高;总正构烷烃(C_total)含量变化范围为35.00~78.64 mg/kg,长链正构烷烃(C_25-36)含量范围为16.11~58.68 mg/kg,条叶垂头菊中总正构烷烃和长链正构烷烃含量最小,而阿尔泰狗娃花含量最大。58种植物中含量最高的正构烷烃(C_max)分布特征为:C₁₉有1种,C₂₂有2种,C₂₇有2种,C₂₉有23种,C₃₁有27种,C₃₂有1种,C₃₃有2种。植物中正构烷烃总正构烷烃碳优势指数(CPI_total)范围为1.07~4.32,CPI_25-36范围为1.12~8.20,总的正构烷烃平均碳链长度(ACL_total)范围为23.52~27.22,ACL_27-33范围为28.03~31.07,蜡质指数(P_wax)变化范围为0.60~0.92。植物中长链正构烷烃丰富,奇数碳含量分布优势明显。

[40] SHEPHERD T, GRIFFITHS D W . The effects of stress on plant cuticular waxes
New Phytologist, 2006,171(3):469-499.
[本文引用: 1]

[41] RICHARDSON A, FRANKE R, KERSTIENS G, JARVIS M, SCHREIBER L, FRICKE W . Cuticular wax deposition in growing barley (Hordeum vulgare) leaves commences in relation to the point of emergence of epidermal cells from the sheaths of older leaves
Planta, 2005,222(3):472-483.
[本文引用: 1]

[42] DEV U, DEVAKUMAR C, MOHAN J, AGARWAL P C . Antifungal activity of aroma chemicals against seed-borne fungi
Journal of Essential Oil Research, 2004,16(5):496-499.
[本文引用: 1]

[43] WANG H F, YIH K H, HUANG K F . Comparative study of the antioxidant activity of forty-five commonly used essential oils and their potential active components
Journal of Food and Drug Analysis, 2010,18(1):24-33.
[本文引用: 1]

[44] 黄金萍, 罗孝竹, 许鑫, 何柳寿, 卢加铭, 徐迪, 岑伊静 . 黄曲条跳甲成虫挥发物成分及其活性研究
环境昆虫学报, 2015,37(5):1008-1017.
[本文引用: 1]

HUANG J P, LUO X Z, XU X, HE L S, LU J M, XU D, CEN Y J . Study on the volatile constituents of Phyllotreta striolata Fabricius and their active constituent of attraction
Journal of Environmental Entomology, 2015,37(5):1008-1017. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[45] 王梦馨, 李辉仙, 武文竹, 孙海潮, 石松平, 丁源, 曹春晖, 韩宝瑜 . 假眼小绿叶蝉对茶梢挥发物的行为反应
应用昆虫学报, 2016,53(3):507-515.
[本文引用: 1]

WANG M X, LI H X, WU W Z, SUN H C, SHI S P, DING Y, CAO C H, HAN B Y . Behavioral responses of Empoasca vitis G?the to volatiles from tea shoots
Chinese Journal of Applied Entomology, 2016,53(3):507-515. (in Chinese)
[本文引用: 1]