孙平平, 崔建潮, 贾晓辉, 王文辉
中国农业科学院果树研究所, 辽宁 兴城 125100
收稿日期：2017-12-13；修回日期：2018-03-25；网络出版日期：2018-05-25
基金项目：国家重点研发计划（2016YFD0400903-06）；国家现代农业产业技术体系（CARS-29-19）
*通信作者：王文辉, Tel/Fax:+86-429-3598655, E-mail:wangwenhui@caas.cn
摘要：[目的]明确贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）L-1对梨灰霉和青霉病菌的抑制作用，明确菌株L-1无菌发酵液拮抗活性的稳定性及可能的拮抗机制。[方法]通过离体测定、活体测定和病原菌菌丝形态观察，评价菌株L-1对梨灰霉和青霉病菌的拮抗活性。以梨灰霉病菌为供试病原菌，利用牛津杯法测定菌株L-1无菌发酵液拮抗活性的稳定性。利用Pacbio RSⅡ三代测序技术测定L-1的全基因序列，将全基因序列与基因蛋白质序列数据库进行BLAST比对分析，预测菌株L-1可能产生的次生代谢产物及潜在的作用机制。[结果]菌株L-1对梨灰霉和青霉病菌的活体抑制率分别为92.88%和77.47%，能引起病原菌菌丝膨大、畸形。菌株L-1在含10% NaCl的培养液中仍能正常生长，其无菌发酵液耐高温、酸、碱、紫外照射和蛋白酶降解，对病原菌具有稳定的拮抗活性。全基因序列分析结果显示菌株L-1有112个基因参与了多种碳源的代谢，可以利用多种碳源进行生长；含有参与亚精胺、海藻糖等与菌株抗逆性相关化合物合成的基因；次生代谢产物预测结果显示：L-1含有合成surfactin、fengycin、bacillibactin、bacillaene、macolactin、difficidin、bacilysin等多种肽聚糖和聚酮糖类抗性化合物的基因簇，以及能够降解病原菌细胞壁的β-1，3-葡聚糖酶和几丁质酶相关的基因；此外菌株L-1含有生成乙偶姻等能够诱导植物抗性的基因。[结论]菌株L-1能有效拮抗多种梨果采后病害，抗逆性强，拮抗活性稳定，预测菌株L-1能够通过产生多种拮抗活性化合物和细胞壁水解酶类以及诱导植物抗性实现防病效果，具有很大的应用潜力。
关键词： 梨灰霉病 梨青霉病 生物防治 贝莱斯芽孢杆菌 全基因组序列
Complete genome analysis of Bacillus velezensis L-1 and its inhibitory effect on pear gray and blue mold
Pingping Sun, Jianchao Cui, Xiaohui Jia, Wenhui Wang
Institute of Pomology, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Xingcheng 125100, Liaoning Province, China
Received 13 December 2017; Revised 25 March 2018; Published online 25 May 2018
*Corresponding author: Wenhui Wang, Tel/Fax:+86-429-3598655, E-mail:wangwenhui@caas.cn
Supported by the National Key Research and Development Program of China (2016YFD0400903-06) and by the China Agriculture Research System (CARS-29-19)
Abstract: [Objective]This work aimed to uncover the inhibitory effects of Bacillus velezensis L-1 on pear gray and blue mold, the inhibitory stability of its cell-free supernatant, and understand the molecular mechanism underlying the biocontrol processes.[Methods]We analyzed the inhibitory effects of strain L-1 on pear gray and blue mold both in vitro and in vivo, and observed the influences of strain L-1 on the mycelium growth of pathogens by microscopes. We determined the inhibitory stability of strain L-1 on Botrytis cinerea by oxford cup method and performed the complete genome sequencing of strain L-1 by Pacbio RSⅡ platform. We also annotated the obtained sequences through different protein databases to predict the mechanisms involved in the biocontrol processes.[Results]The control efficacy of strain L-1 against pear gray and blue mold was 92.88% and 77.47% respectively, and strain L-1 caused the swallow and abnormal growth of the pathogens' mycelium. Strain L-1 could grow normally in the broth containing 10% (W/V) NaCl, and its cell-free supernatant showed stable inhibitory effects against pear gray mold under acid, alkali, UV light, heat and protease treatments. Complete genome sequence analysis showed that there were 112 genes involved in the metabolism of different carbons, indicating its ability to grow on different carbon sources. Strain L-1 contained genes encoding the alimine and trehalose, that are related to stress resistance. Strain L-1 contained gene clusters related to the biosynthesis of a variety of polypeptide and polyketide compounds, such as surfactin, fengycin, bacillibactin, bacillaene, macolactin, difficidin, and bacilysin, and the genes encoding enzymes like β-1, 3-glucase and chitinase, that could hydrolyze the pathogen cell wall. In addition, strain L-1 contained genes related to the biosynthesis of actoin, which could induce host resistance.[Conclusion]B. velezensis L-1 has the potential as an effective biocontrol agent.
Key words: pear gray mold pear blue mold biological control Bacillus velezensis complete genome sequence
我国是世界上最大的梨生产和出口国，2016年我国梨果总产量达到1930万t，占到世界总产量的75%[1]。梨果含水量大、表皮脆弱并且内含物丰富，在生长和储藏过程中容易受到多种病原物侵染，引起腐烂变质，导致果实品质降低或失去经济价值。例如，梨灰霉病菌(Botrytis cinerea)和青霉病菌(Penicillium expansum)能够从梨果伤口侵染果实，分别引起梨灰霉病和青霉病，造成严重损失[2]。目前对梨果病害的防治主要采用化学药剂，如在幼果期、果实生长中期和采收前施用多菌灵、退菌特、乙磷铝、甲基硫菌灵等有机磷杀菌剂或波尔多液，而对其生物防治的研究较少[3]。
作者在前期研究中筛选出对梨轮纹病菌(Botryosphaeria berengeriana)具有显著拮抗活性的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens) L-1。菌株L-1能够抑制梨果轮纹病害的扩展，诱导果实抗性相关酶(POD、CAT)的表达，并且具有较广的抑菌谱，可以在果实伤口中快速克隆和繁殖，具有很大的应用潜力[4]。芽孢杆菌属具有非常相似的生理和分子特性，最近一些芽孢杆菌属的菌株被重新分类[5]，其中Bacillus methylotrophicus与B. amyloliquefaciens subsp. plantarum被划定为Bacillus velezensis的同物异名[6]，因此菌株L-1被重新命名为贝莱斯芽孢杆菌(B. velezensis L-1)。贝莱斯芽孢杆菌L-1对梨灰霉和青霉病菌的防治效果、防治效果的稳定性及其拮抗机制仍需进一步研究。随着DNA测序技术的发展，以及集高通量、快速度、长读长及低成本等多种优点于一身的第三代测序技术的出现，为从基因组学角度研究微生物提供了快速简便的途径[7]。
本研究测定了贝莱斯芽孢杆菌L-1对梨灰霉和青霉病菌的防治效果，明确了该菌株拮抗活性的稳定性，并利用第三代测序技术测定了其全基因组序列，从基因角度分析其可能的作用机制及应用潜力，为菌株L-1的应用研究提供更多的参考。
1 材料和方法 1.1 试验材料
1.1.1 试验果: 试验用‘黄冠梨’于2016年8月中旬采自河北省晋州市，选择大小一致的健康果实装箱、运输(采收后2 d内)至本单位冷库(0 ℃)保存备用。
1.1.2 培养基: 试验中所用培养基原材料均购自上海索桥生物技术有限公司，包括马铃薯葡萄糖粉、牛肉膏蛋白胨粉、琼脂粉。试验用马铃薯葡萄糖培养基(PDA)、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(NBA)和牛肉膏蛋白胨(NB)培养液均按照说明进行配置。
1.1.3 供试菌株及其菌饼制备: 本实验涉及菌株包括梨灰霉病病原菌(B. cinerea LHM)、梨青霉病病原菌(P. expansum LQM)和贝莱斯芽孢杆菌(B. velezensis) L-1。LHM和LQM由本实验室分离自储藏过程中表现出典型灰霉和青霉病症状的梨果，并经过光学显微镜和致病性验证。病原菌接种PDA培养基，在25 ℃培养5 d，取菌落生长前沿的菌饼(直径6 mm)用于离体和活体活性测定。B. velezensis L-1由作者于2015年9月从梨树根际土壤中分离得到，–20 ℃保存于20%甘油中。将菌株L-1接种NBA培养基，32 ℃培养2 d，取直径6 mm的菌饼用于离体活性测定。菌株L-1已于2017年06月30日提交至中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC14373。
1.1.4 菌株L-1发酵液、孢悬液及无菌发酵液制备: 采用摇瓶发酵培养法用200 μL菌株L-1孢子(20%甘油–20 ℃保存)接种100 mL的NB培养液，180 r/min、32 ℃培养48 h，获得种子液。将种子液按10% (V/V)接种到新的NB培养液中，于180 r/min、32 ℃培养48 h，得到发酵液。发酵液经过8000 r/min离心20 min，分别收集沉淀和上清。沉淀用蒸馏水稀释，血球计数板观察调节孢子浓度至108 CFU/mL得到孢悬液；上清液经微孔滤膜(孔径0.22 μm)过滤去除孢子，得到无菌发酵液。
1.2 菌株L-1对梨灰霉和青霉病菌的离体活性防效及菌丝生长的影响 平板对峙法[8]测定L-1对梨灰霉病菌的拮抗活性。取灰霉病菌(LHM)菌饼置于PDA平板中央，用无菌打孔器在菌饼两侧3 cm处对称打孔，在孔中倒置接种L-1菌饼。接种的平板置于25 ℃培养。不接种L-1的平皿为对照。每个处理重复3次。待对照菌落长满平板时，测量抑菌圈直径。
参照Wiggins & Kinkel方法[9]测定L-1对青霉菌的拮抗活性。青霉菌(LQM)接种PDA，25 ℃培养5 d，用无菌刀将长有菌落的培养基切成小块，加入50 mL蒸馏水，用无菌搅拌器打碎，得到青霉菌孢悬液。将10 mL孢悬液加入到500 mL 50 ℃的PDA培养基中，混合均匀后倒平板。在含有青霉菌孢子的平板距平皿边缘20 mm的位置对称放置2个牛津杯，每个杯中加入100 μL菌株L-1的发酵液，25 ℃恒温培养，测量并记录抑菌圈直径。
挑取上述各处理及对照的梨灰霉菌、青霉菌菌丝，在光学显微镜下观察菌丝和孢子形态，并进行比较。
1.3 菌株L-1对梨灰霉和青霉病菌的活体防效 参考Sadeghian等[10]的方法测定菌株L-1对梨灰霉和青霉病菌的活体防效。将健康新鲜的‘黄冠梨’果实放置于0.2% (V/V)次氯酸钠中浸泡3 min，自来水冲洗后晾干。用无菌打孔器在梨果实赤道部两侧各打孔1个，孔径5 mm、深3 mm。每孔中加入20 μL菌株L-1孢悬液(1×108 CFU/mL)，以加入20 μL蒸馏水作为阴性对照。处理后的果实用保鲜膜封口，20 ℃保湿培养。培养1 d后，在孔内贴置灰霉(LHM)或青霉病菌(LQM)菌饼，置于20 ℃继续培养，定时(每2 d/5 d)测定不同处理的病斑直径，并按如下公式计算防效。每个处理重复3次，每个重复6个果。
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1.4.1 菌株L-1耐盐性: 将不同量的NaCl加入到NB培养液中，配制成含0.1%、0.5%、1.0%、2.0%、5.0%、10.0%、12.0%、15% NaCl (W/V)的NB培养液，接种1 mL菌株L-1的种子液，180 r/min、32 ℃培养48 h，600 nm测定OD值。
参照葛平华等[11]、Olfa Kilani-Feki等[12]评估菌株L-1无菌发酵液抗菌作用的稳定性。菌株L-1无菌发酵液经不同处理后(见下文描述)，用牛津杯法测定其对梨灰霉病菌的拮抗活性。在PDA平板中央接种灰霉病菌(LHM)菌饼，距培养皿边缘20 mm位置处对称放置无菌牛津杯，每杯内加200 μL处理的无菌发酵液，测定经不同处理后菌株L-1无菌发酵液的拮抗活性。
1.4.2 酸碱稳定性: 用1 mol/L的NaOH或HCl，将菌株L-1无菌发酵液的pH值分别调为2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12，静置24 h后调回原发酵液pH 6.5备用。测定不同酸碱度对其活性的影响。
1.4.3 紫外线稳定性: 将菌株L-1无菌发酵液置于30 W紫外灯下，分别照射10、20、30、40、50、60、90、120 min，紫外灯与无菌发酵液垂直，距离为30 cm。不经紫外线照射的无菌发酵液为对照，测定紫外线对其活性的影响。
1.4.4 热稳定性: 将菌株L-1无菌发酵液分别在40、50、60、70、80、90、100 ℃金属浴20 min后，冷却至室温。未经高温处理的无菌发酵液为对照，测定不同高温处理后其活性的变化。
1.4.5 酶稳定性: 在菌株L-1无菌发酵液中分别加入胰蛋白酶、胃蛋白酶和蛋白酶K，使酶的最终浓度为1 mg/mL，37 ℃反应1 h，然后在80 ℃处理30 min，4 ℃立即冷却，测定不同蛋白酶处理后菌株L-1无菌发酵液的拮抗活性。
1.5 菌株L-1全基因组测定 细菌完整基因组测序与拼接见Sun等[13]。利用细菌基因组DNA快速抽提试剂盒(B518225，生工，上海)提取菌株L-1的总DNA，经过浓度检测后递交北京百迈克公司，利用三代测序平台Pacbio RSII对其进行全基因组测序。通过Prodigal version 2.5软件对编码基因进行预测，借用蛋白质功能数据库COG (Clusters of Orthologous Groups)、GO (Gene Ontolog)、代谢通路数据库KEGG (Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)等功能数据库与该基因组预测的氨基酸序列逐一进行比对，分别对其蛋白质功能和生物学代谢通路进行预测。利用antiSMARSH version 4.0.2软件[14] (https://antismash.secondarymetabolites.org)分析菌株L-1的主要次生代谢产物。
2 结果和分析 2.1 菌株L-1对梨灰霉菌、青霉病菌的离体活性及菌丝生长的影响 菌株L-1在离体条件下能够显著抑制梨灰霉、青霉病菌菌丝的生长，形成明显的抑菌圈(图 1-A，B)。挑取对照及抑菌圈前沿的病原菌菌丝进行观察，发现对照的灰霉菌、青霉菌菌丝生长均匀(图 1-C，D)，而经过L-1处理的病原菌菌丝表现出明显的膨大和畸形(图 1-E，F)。
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| 图 1 菌株L-1对梨灰霉、青霉病菌的离体抑制活性及对其菌丝形态影响 Figure 1 The inhibitory effect of strain L-1 on pear gray mold and blue mold in vivo and its influences on the morphological characters of the pathogens. The antagonistic role of strain L-1 against B. cinerea (A) or P. expansium (B) was shown by dual culture detection. (C–F) showed the phenotypes of B. cinerea (C, E) or P. expansium (D, F) in the absence (C, D) or presence (E, F) of strain L-1 under microscope. |
| 图选项 |
2.2 菌株L-1对梨灰霉菌、青霉病菌的活体抑制活性 在活体条件下菌株L-1能够显著抑制梨灰霉与青霉菌的扩展。常温条件接种灰霉菌后，对照的病斑直径快速扩张，9 d达到(39.35±2.71) mm，而经L-1菌株处理的病斑直径扩展缓慢，接种9 d时的病斑直径为(2.80±3.47) mm，防效达到92.88% (P≤0.001)(图 2)。常温条件下接种25 d后，青霉病斑直径为(31.80±9.75) mm，而经L-1处理的病斑直径为(7.16±5.70) mm，防效达到77.47% (P≤0.001)(图 3)。
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| 图 2 菌株L-1对梨灰霉菌的活体防效 Figure 2 The effect of strain L-1 on B. cinerea in 'Huangguan' pears. ***: P≤0.001. |
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| 图 3 菌株L-1对梨青霉菌的活体防效 Figure 3 The effect of strain L-1 on P. expansum in 'Huangguan' pears. *: P≤0.05, ***: P≤0.001. |
| 图选项 |
2.3 菌株L-1耐盐性及其无菌发酵液抗菌作用的稳定性 菌株L-1在含10% NaCl的培养液中仍能生长(图 4)，其无菌发酵滤液拮抗活性的最适pH为6?7，耐酸碱，在pH为12时对病原菌的拮抗活性仍达到40%以上(图 5-A)。紫外照射2 h之内对L-1无菌发酵液的拮抗活性无显著影响(图 5-B)。不同高温处理对L-1无菌发酵液的拮抗活性无显著影响(图 5-C)，胰蛋白酶、胃蛋白酶与蛋白酶K处理对L-1无菌发酵液产物的拮抗活性没有影响，推测其活性化合物不属于蛋白(图 5-D)。
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| 图 4 菌株L-1的耐盐性 Figure 4 The resistance of strain L-1 to high salt. Strain L-1 were grown under different concentrations of NaCl for 48 h, and the value of OD600 were respectively measured. The letters above the bars indicate significant difference (P < 0.05) between the samples. |
| 图选项 |
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| 图 5 菌株L-1无菌发酵液对梨灰霉病菌抗菌作用的稳定性 Figure 5 The inhibitory stability of the cell-free supernatant of strain L-1 against B. cinerea. The inhibitory effect of strain L-1 on B. cinerea was detected under different pH value (A), UV light amount (B), temperature (C), or protease amount (D). Different letters indicate significant difference between the samples with P < 0.05. ns. indicates no significant difference was found. |
| 图选项 |
2.4 菌株L-1全基因组分析 菌株L-1全基因组在GenBank的登录号为CP023859。该菌基因组全长为4090582 bp，GC含量为46.52%。基因组包含3978个编码序列(CDS，coding sequences)，在与COG功能富集分析、KEGG代谢通路富集分析、GO功能富集分析等数据库做BLAST比对后，有99.9%的CDS序列得到功能分类。结合antiSMARSH结果，菌株L-1可以产生surfactin、fengycin、bacillibactin、bacillaene、macolactin、difficidin、bacilysin等多种肽聚糖和聚酮糖类抗性化合物(图 6)，该类次生代谢产物的合成成为其防治病害的主要机制之一。
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| 图 6 贝莱斯芽孢杆菌L-1的全基因组环状图 Figure 6 Circular map of B. velezensis L-1 genome. The five circles (outer to inner) represent forward strand CDSs, reverse strand CDSs, nomenclature and locations of predictive secondary metabolite clusters, GC content and GC skew. |
| 图选项 |
菌株L-1有73.61%的CDS序列在COG数据库得到功能分类。如图 7所示，其中参与次生代谢产物生物合成、运输和分解代谢功能的基因共有121个，氨基酸转运与代谢基因349个，脂类转运与代谢基因118个，无机离子转运与代谢基因214，碳水化合物转运与代谢基因255个。有13个基因参与了非核糖体蛋白合成，20个基因参与了聚酮化合物合成，7个基因参与了含铁非核糖体脂肽合成。另外，菌株L-1可以翻译459个碳水化合物酶类。
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| 图 7 菌株L-1全基因序列COG功能分类 Figure 7 Function classification and percentage (A-T) of strain L-1 genome genes according to COG database. A: chromatin structure and dynamics; B: energy production and conversion; C: cell cycle control, cell division, chromosome partitioning; D: amino acid transport and metabolism; E: nucleotide transport and metabolism; F: carbohydrate transport and metabolism; G: coenzyme transport and metabolism; H: lipid transport and metabolism; I: translation, ribosomal structure and biogenesis; J: transcription; K: replication, recombination and repair; L: cell wall/membrane/ envelope biogenesis; M: cell motility; N: post translational modification, protein turnover, chaperones; O: inorganic ion transport and metabolism; P: secondary metabolites biosynthesis, transport and catabolism; Q: general function prediction only; R: function unknown; S: signal transduction mechanisms; T: intracellular trafficking, secretion, and vesicular transport; U: defense mechanisms. |
| 图选项 |
根据KEGG对该菌株的分析结果得知，在97个代谢通路中有40个基因参与果糖、甘露糖、半乳糖等单糖代谢，30个基因参与淀粉、蔗糖以及其他多糖的代谢；42个基因参与氨基糖以及核苷酸糖类代谢。这类基因和代谢通路均与菌株对不同碳源利用及其快速生长、克隆以及防治病害的功能密切相关。
GO数据库比对分析显示：菌株L-1具有产生腈脒合酶(ATO09126)与海藻糖感受蛋白和运输蛋白(ATO10173、ATO10175)等与菌株的抗逆性密切相关的基因，进一步揭示了菌株L-1的抗逆性。含有生成乙酰乳酸合酶(由丙酮酸到乙酰乳酸，ATO11909、ATO12400、ATO08987)与乙酰乳酸脱羧酶(由乙酰乳酸到乙偶姻，ATO08986)等与诱导抗性相关的基因，从基因角度说明菌株L-1能够诱导寄主产生抗性。另外菌株L-1含有合成β-1, 3-葡聚糖酶(ATO11163、ATO09278)与几丁质结合蛋白(ATO11113)等拮抗活性相关基因，指出L-1具有通过产生水解酶类水解病原菌细胞壁的能力。
3 讨论 能够利用多种碳源成功、快速繁殖是生防菌实现生防效果的基础[15]，前期研究中发现菌株L-1能够在果实伤口中成功、快速定殖[4]，本研究从基因学角度进一步阐明了菌株L-1含有459个基因与碳水化合物酶类合成相关，255个基因参与碳水化合物转运与代谢，并且有112个基因参与到多种糖类代谢通路中，说明菌株L-1具有利用多种碳源进行快速生长和繁殖的潜力。
具有应用潜力的生防菌株需要能够耐受极端环境[15]。本研究中的菌株L-1可以在含有10% NaCl培养液中生长繁殖，代谢产物耐高温、紫外照射、酸、碱以及蛋白酶降解。此外，菌株L-1具有产生亚精胺的腈脒合酶以及海藻糖运输和感受蛋白的基因，亚精胺不仅是植物生长调节剂，而且具有保护机体耐受高盐、低温、低湿和过氧环境[16]，而海藻糖(trehalose)作为一种渗透保护剂，具有保护有机体忍受高盐、低温和低湿环境的功能[17]。以上结果均揭示了菌株L-1及其代谢产物具有耐极端环境的能力。
前期研究中发现菌株L-1能够拮抗梨轮纹病菌[4]，本研究中菌株L-1对梨灰霉、青霉病菌也表现出显著的拮抗活性，抑菌谱广。全基因组结果显示菌株L-1具有产生多种聚酮糖、肽聚糖和多肽类等抗性化合物相关的基因簇，以及β-1, 3-葡聚糖酶和几丁质酶合成相关的基因。脂肽类化合物表面活性素(surfactins)以及其他非核糖体合成脂肽类化合物可以作为信号分子，作用于生物膜诱导植物抗性来实现防病效果[18]，bacillibactin可以作为含铁载体通过竞争铁离子实现防病效果，多种脂肽类及肽聚糖类化合物菌具有拮抗病原菌的作用[19]。β-1, 3-葡聚糖酶和几丁质酶是作用于病原菌细胞壁的酶类，能够催化病原菌细胞壁水解，引起病原菌坏死和细胞壁降解从而减少病害发生和水果腐烂[20-21]。以上结果均说明菌株L-1具有产生拮抗病原菌的抗生素和水解酶类来实现病害防治的能力。
此外，全基因序列结果显示菌株L-1含有乙酰乳酸合酶与乙酰乳酸脱羧酶活性相关基因，能够降解形成乙偶姻(acetoin)，乙偶姻具有诱导植物抗性的能力[22]，说明菌株L-1具有诱导植物抗性来实现防病的目的。该结果与前期研究中菌株L-1能够诱导皇冠梨果实抗性相关酶活性表达[4]的结果一致。
庞学群等[23]总结拮抗菌控制果蔬采后病害的机制主要包括：产生胞外抗生素，微生物之间的空间、养分等竞争，直接作用于病原菌，产生几丁质酶和葡聚糖酶等能降解真菌细胞壁的胞外酶使病原菌细胞渗漏、破裂而受到抑制。前期研究结果显示菌株L-1能够显著拮抗梨轮纹病菌，在果实伤口上快速定殖，诱导植物抗性相关酶活性表达[4]，本研究结果进一步表明菌株L-1对梨灰霉菌、青霉菌也具有显著的拮抗活性，并从无菌发酵液拮抗活性的稳定性测定结合全基因序列分析说明菌株L-1能够利用多种碳源进行生长，菌株抗逆性强，拮抗活性稳定，通过产生多种次生拮抗类化合物和水解病原菌的酶类，以及诱导寄主抗性多种作用机制实现防病目的。贝莱斯芽孢杆菌L-1是一株具有较大应用潜力的生防菌株，其最佳发酵条件、应用剂型以及主要次生代谢产物分离有待进一步研究和发掘。
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