周平平, 辛云辉, 肖敏, 张燕, 邹萲
武汉市红十字会医院, 湖北 武汉 430000
2020-09-09 收稿, 2020-12-31 录用
^*通讯作者: 辛云辉

摘要: 选取我院收治的乳腺癌（BC）患者82例设为研究组，同期乳腺良性肿瘤患者82例设为对照组，探讨了超声参数联合血清骨桥蛋白（OPN）、白细胞介素-1β（IL-1β）对BC的诊断价值。结果显示，研究组患者病灶处的RI值、PI值和血清OPN、IL-1β水平均高于对照组（P < 0.05）；PI值、RI值、血清OPN、IL-1β水平与临床分期、肿瘤直径、远处转移存在正相关关系（P < 0.05）；预后良好者PI、RI、OPN、IL-1β低于预后不良者（P < 0.05）；超声参数联合血清OPN、IL-1β诊断BC的AUC值为0.900，预测预后的AUC值为0.875。本研究证实BC患者存在超声参数及血清OPN、IL-1β水平异常情况，且异常程度与疾病病理特征关系密切，通过超声参数及相关血清因子水平可对乳腺病变情况进行鉴别，并指导临床制定治疗方案。
关键词: 超声骨桥蛋白白细胞介素-1β乳腺癌阻力指数搏动指数
The Diagnostic Value of Ultrasound Parameters Combined with Serum OPN and IL-1β in the Clinical Diagnosis of Breast Cancer
ZHOU Pingping, XIN Yunhui, XIAO Min, ZHANG Yan, ZOU Xuan
Wuhan Red Cross Hospital, Wuhan 430000, Hubei, P. R. China
^*Corresponding author: XIN Yunhui
Abstract: In this research, 82 patients with breast cancer (BC) in our hospital were selected as the study group. And 82 patients with benign breast tumors during the same period were selected as the control group. The diagnostic value of ultrasound parameters combined with serum osteopontin (OPN) and interleukin-1β (IL-1β) on BC were explored, as well as the correlation with the pathological characteristics of BC. The results showed that the levels of RI, PI, serum OPN and IL-1β in the study group were higher than those in the control group (P < 0.05). PI, RI, serum OPN, IL-1β levels were positively correlated with clinical stage, tumor diameter and distant metastasis (P < 0.05). PI, RI, OPN, IL-1β in the patients with good prognosis were lower than those with poor prognosis (P < 0.05). The AUC of ultrasound parameters combined with serum OPN and IL-1β to diagnose BC was 0.900, and the AUC for predicting prognosis was 0.875. It shows that there are abnormalities in ultrasound parameters and serum OPN and IL-1β levels in BC patients, and the degree of abnormality is closely related to the pathological characteristics of the disease. The ultrasound parameters and the levels of related serum factors can be used to identify breast lesions to guide clinical treatment plans.
Key words: ultrasoundOPNIL-1βbreast cancerresistance indexpulsation index
乳腺癌(breast cancer，BC)是女性常见恶性肿瘤疾病之一，其病死率约占女性全部恶性肿瘤的14%，主要致死病因是BC转移及复发^[1]。BC早期无特异性症状，如何早期确诊并预测预后、有效指导临床完善治疗方案是当前临床重点研究方向之一。目前超声是临床筛查、诊断BC的常用手段，其具有操作简便、可重复性强、软组织分辨率高、能全方位多角度显示病变等优势，但其缺点是所提供诊断信息相对滞后，有明确影像学表现患者多数已进展至较严重阶段^[2]。近年随深入研究发现，无论是肿瘤发生还是转移侵袭过程中均伴细胞因子异常表达现象^[3]。白细胞介素-1β(IL-1β)是一种炎症介导因子，可使宿主来源的恶性细胞及基质细胞生成分泌乏氧诱导因子、血管生成因子及黏附分子等，增加肿瘤细胞局部浸润、定植活性；骨桥蛋白(OPN)是一种多功能分泌型磷酸糖蛋白，临床已证实其在转移癌和具有高转移潜能的肿瘤中呈高表达。基于上述研究，笔者推测OPN、IL-1β可能共同作用促进BC发生发展，但临床鲜见相关机制报道，本研究旨在探究上述血清因子与BC病理特征关联性，为临床完善诊断机制提供参考。
1 资料与方法1.1 一般资料选取2017年6月~2019年5月我院BC患者82例设为研究组，另选取同期收治的乳腺良性肿瘤患者82例设为对照组。对照组年龄21~73岁，平均(61.46±4.75)岁，体质量指数18~25 kg/m²，平均(21.33±1.02)kg/m²，肿瘤直径0.5~3 cm，平均(2.01±0.24)cm；研究组年龄22~74岁，平均(61.35±4.06)岁，体质量指数18~25 kg/m²，平均(21.26±1.01)kg/m²，肿瘤直径0.5~3 cm，平均(2.02±0.25)cm。两组研究对象的年龄、体质量指数、肿瘤直径等基础资料均衡可比(P＞0.05)。
1.2 纳入及排除标准(1) 纳入标准：均经病理诊断确诊；原位乳腺肿瘤；入组前均未接受放疗、化疗、内分泌治疗；对研究知情并签署同意书。
(2) 排除标准：有乳腺假体植入史、乳腺外科塑形史；伴其他肿瘤疾病者；存在急慢性乳腺炎、肝硬化、糖尿病者。
1.3 方法a. 超声检查：采用飞利浦彩色多普勒超声诊断仪(Philips iU22型)，高频探头频率7.0~12 MHz。患者取仰卧位，充分显露胸部，按从左至右、从外上至内下顺序扫查乳腺，并扫查腋窝、锁骨上下窝淋巴结，观察乳腺形态、结构、回声特征，重点观察钙化、后方回声、纵横比、血流动力学特征，记录病灶阻力指数(RI)、搏动指数(PI)。
b. 血清OPN和IL-1β检测：采用非抗凝真空管采集3mL晨空腹肘静脉血，加温(37 ℃)促凝，离心(半径8 cm，时间15 min，转速3500 r/min)后收集上层血清，采用上海康泰生物技术有限公司OPN酶联免疫试剂盒和上海信然实业有限公司IL-1β酶联免疫试剂盒分别测OPN和IL-1β水平。由专科医师严格参考仪器和试剂盒说明书步骤规范完成操作。
1.4 观察指标(1) 对比两组患者超声参数(RI、PI)及血清OPN、IL-1β水平。
(2) 对比研究组不同病理特征患者的超声参数及血清OPN、IL-1β水平。
(3) 分析PI、RI、OPN、IL-1β与BC病理特征关联性。
(4) 分析PI、RI、OPN、IL-1β对BC的诊断效能。
(5) 随访1年，对比不同预后(生存为预后良好，死亡为预后不良)患者的PI、RI、血清OPN、IL-1β水平。
(6) 分析PI、RI、OPN、IL-1β对患者预后的预测价值。
1.5 统计学处理采用统计学软件SPSS 23.0处理数据。计数资料以例数描述，计量资料采取Bartlett方差齐性检验与Kolmogorov-Smirnov正态性检验，均确认具备方差齐性且近似服从正态分布，以平均数±标准差描述。变量间存在共线性时采用Pearson相关系数模型分析相关性；变量间不存在线性关系采用Logistic回归分析模型分析相互间关系。预测效能分析采用受试者工作特征(ROC)曲线，获取曲线下面积、置信区间、敏感度、特异度及cut-off值，不同预测方案间曲线下面积比较采用DeLong检验。均采用双侧检验，α=0.05。
2 结果2.1 研究组与对照组患者的超声参数及OPN、IL-1β水平研究组患者的RI、PI、血清OPN、IL-1β水平均值高于对照组(P＜0.05)。详见表 1。
表1

表 1 研究组与对照组超声参数及OPN、IL-1β水平比较(x±s) 组别 例数 PI RI OPN/(ng·mL-1) IL-1β/(ng·L-1) 研究组 82 1.26±0.23 0.84±0.19 195.13±67.81 62.79±6.05 对照组 82 0.99±0.19 0.59±0.16 29.14±12.53 19.56±3.45 t 8.196 9.114 21.798 56.208 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

表 1 研究组与对照组超声参数及OPN、IL-1β水平比较(x±s)

2.2 研究组不同病理特征的患者超声参数及OPN、IL-1β水平不同年龄、患侧、雌激素受体、孕激素受体情况者，其RI、PI、血清OPN、IL-1β水平间差异无显著性(P＞0.05)，不同肿瘤直径、临床分期、远处转移情况的患者，其RI、PI、血清OPN、IL-1β水平间差异具有显著性(P＜0.05)。见表 2。
表2

表 2 研究组不同病理特征患者的超声参数及OPN、IL-1β水平(x±s) 组别 例数 PI RI OPN/(ng·mL-1) IL-1β/(ng·L-1) 年龄 ??≥60岁 46 1.27±0.21 0.85±0.22 196.02±65.63 63.46±9.11 ??＜60岁 36 1.25±0.20 0.83±0.21 194.00±66.97 61.93±8.98 ??t 0.437 0.417 0.137 0.760 ??P 0.663 0.678 0.891 0.450 患侧 ??左侧 48 1.25±0.19 0.82±0.23 194.27±70.33 62.04±7.97 ??右侧 34 1.27±0.21 0.86±0.22 196.35±69.91 63.86±8.06 ??t 0.450 0.790 0.132 1.014 ??P 0.654 0.432 0.895 0.314 雌激素受体 ??阳性 45 1.26±0.22 0.84±0.18 196.02±59.64 63.78±9.02 ??阴性 37 1.25±0.20 0.83±0.19 194.04±61.06 61.58±7.99 ??t 0.213 0.244 0.148 1.157 ??P 0.832 0.808 0.883 0.251 孕激素受体 ??阳性 44 1.28±0.23 0.86±0.25 196.13±80.37 63.63±7.66 ??阴性 38 1.24±0.24 0.82±0.24 193.98±78.64 61.81±8.13 ??t 0.770 0.736 0.122 1.043 ??P 0.444 0.464 0.903 0.300 肿瘤直径 ??≥2 cm 54 1.32±0.18 0.89±0.19 225.25±68.04 67.89±7.59 ??＜2 cm 28 1.14±0.15 0.75±0.16 137.04±56.33 52.96±6.22 ??t 4.534 3.332 5.888 8.958 ??P ＜0.001 0.001 ＜0.001 ＜0.001 临床分期 ??Ⅰ~Ⅱ期 47 1.17±0.17 0.77±0.19 142.26±65.44 57.13±7.11 ??Ⅲ~Ⅳ期 35 1.37±0.19 0.93±0.21 266.13±68.37 70.39±5.69 ??t 5.011 3.606 8.318 9.075 ??P ＜0.001 0.001 ＜0.001 ＜0.001 远处转移 ??无 67 1.23±0.14 0.81±0.15 173.22±61.39 59.63±6.06 ??有 15 1.39±0.16 0.95±0.16 292.98±66.02 76.91±7.38 ??t 3.898 3.229 6.738 9.586 ??P ＜0.001 0.002 ＜0.001 ＜0.001

表 2 研究组不同病理特征患者的超声参数及OPN、IL-1β水平(x±s)

2.3 PI、RI、OPN、IL-1β与BC病理特征的关联性PI、RI、OPN、IL-1β与疾病临床分期、肿瘤直径、远处转移间存在正相关关系(P＜0.05)。见表 3。
表3

表 3 PI、RI、OPN、IL-1β与疾病病理特征关联性 病理参数 PI RI OPN IL-1β r P r P r P r P 临床分期 0.535 ＜0.001 0.510 ＜0.001 0.551 ＜0.001 0.607 ＜0.001 肿瘤直径 0.620 ＜0.001 0.538 ＜0.001 0.602 ＜0.001 0.591 ＜0.001 远处转移 0.541 ＜0.001 0.506 ＜0.001 0.541 ＜0.001 0.632 ＜0.001

表 3 PI、RI、OPN、IL-1β与疾病病理特征关联性

2.4 PI、RI、OPN、IL-1β对BC的诊断效能各指标联合诊断AUC为0.900，95%CI为0.844~0.942，联合诊断的敏感度为84.15%，特异度为89.02%，见表 4。ROC曲线见图 1。
表4

表 4 PI、RI、OPN、IL-1β对BC的诊断效能 指标 AUC 95%CI P cut-off值 敏感度/% 特异度/% PI 0.793 0.723~0.852 ＜0.001 ＞1.05 85.37 63.41 RI 0.816 0.748~0.872 ＜0.001 ＞0.69 73.17 85.37 OPN 0.838 0.772~0.891 ＜0.001 ＞111.53 ng·mL-1 73.17 82.93 IL-1β 0.786 0.715~0.846 ＜0.001 ＞40.28 ng·mL-1 82.93 63.41 联合诊断 0.900 0.844~0.942 ＜0.001 84.15 89.02

表 4 PI、RI、OPN、IL-1β对BC的诊断效能

图 1

图 1 PI、RI、OPN、IL-1β诊断BC的ROC曲线

2.5 不同预后患者PI、RI、OPN、IL-1β比较随访1年，观察组中死亡11例，生存71例。回顾预后良好者的PI、RI、OPN、IL-1β，其值均低于预后不良者(P＜0.05)。见表 5。
表5

表 5 不同预后患者PI、RI、OPN、IL-1β比较(x±s) 组别 例数 PI RI OPN/(ng·mL-1) IL-1β/(ng·L-1) 死亡 11 1.63±0.25 0.97±0.08 318.89±70.72 80.86±9.02 生存 71 1.20±0.18 0.82±0.05 175.96±42.53 59.99±6.34 t 6.978 8.470 9.388 9.565 P ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

表 5 不同预后患者PI、RI、OPN、IL-1β比较(x±s)

2.6 PI、RI、OPN、IL-1β对预后预测价值预测预后的ROC曲线见图 2，由图可见PI、RI、OPN和IL-1β水平单独预测BC患者预后的AUC值均小于联合预测的AUC值。详见表 6。
图 2

图 2 PI、RI、OPN、IL-1β对预后预测的ROC曲线

表6

表 6 PI、RI、OPN、IL-1β对BC患者预后的预测价值 指标 AUC 95%CI Z统计 P cut-off值 敏感度/% 特异度/% PI 0.750 0.642~0.839 3.256 ＜0.001 ＞1.45 63.64 80.28 RI 0.794 0.691~0.876 2.993 ＜0.001 ＞0.92 72.73 88.73 OPN 0.804 0.702~0.884 4.838 ＜0.001 ＞249.91 ng·mL-1 81.82 69.01 IL-1β 0.791 0.687~0.873 3.325 ＜0.001 ＞71.79 ng·mL-1 72.73 81.69 联合诊断 0.875 0.783~0.937 5.675 ＜0.001 72.73 95.77

表 6 PI、RI、OPN、IL-1β对BC患者预后的预测价值

3 讨论数据显示，全球每年BC新发患者接近120万，有近50万女性死于BC，其已发展成严重危害女性健康的公共卫生问题之一^[4]。BC早期并无致命性，但其与乳腺增生、乳腺纤维腺瘤等良性病变存在一定重叠，如何有效鉴别早期BC是当前抑制病情进展、改善预后的关键环节。
超声是目前检查乳腺病变最常用的影像学技术，其软组织分辨率高、无电离辐射损伤、性价比高、可重复性强，通过评价病变血供情况可为临床提供诊断信息。乳腺良性病变多呈膨胀性生长，超声所示边缘清晰，内部回声均匀，血流欠丰富，而BC呈浸润性生长，超声所示边缘模糊，形态不规则，内部回声不均匀，同时伴针状、沙粒样钙化，血流丰富，且与正常乳腺组织对比血流呈高阻高流速特征^[5]。本研究发现，研究组RI、PI值高于对照组(P＜0.05)，与上述BC超声特征一致。但近年随超声广泛应用，有研究发现病灶直径＜1 cm时，超声无法判断其血流信号，尤其是无肿块BC，超声检查易漏诊^[6]。
近年BC与细胞因子的关系研究亦备受关注，其与BC发生发展、浸润转移及预后等关系密切^[7]。本研究结果显示，BC患者外周血OPN、IL-1β水平变化趋势与RI、PI值一致，提示其异常升高可能与BC发生有关。IL-1β是由活化单核-巨噬细胞及淋巴细胞生成的一种具广泛生物学特性的细胞因子，其参与免疫调节及炎症反应等多个过程。有研究表明，在细胞受刺激后，可促进IL-1β自分泌及旁分泌网路炎性细胞因子生成，促使细胞变异^[8]。此外，正常情况下人体出现癌细胞后会被免疫细胞吞噬、灭活，但免疫功能异常时，癌细胞则会逃逸，定植于正常器官组织诱发肿瘤^[9]。有基础研究发现，IL-1β能提高黏附分子表达能力并可强化细胞免疫耐受^[10]。本研究对不同肿瘤直径、临床分期、远处转移情况的患者进行对比，随病情加重，其血清IL-1β水平逐渐升高(P＜0.05)，可能与IL-1β自身特殊生理作用有关，其作为癌变的始动因子，水平越高癌变风险越大，病情越严重。OPN是磷酸化糖蛋白家族主要成员之一，其以游离状态及结合状态分布于机体组织及体液内，可结合CD44蛋白及多种整合素受体而促进肿瘤细胞趋化、转移及黏附^[11]。有****检测前列腺癌、BC、结直肠癌患者外周血OPN水平，发现此类群体外周血OPN水平显著升高，可应用于肿瘤的筛查及诊断^{[12, 13]}。本研究发现，研究组血清OPN水平高于对照组，且随肿瘤直径增加、临床分期升高及出现远处转移，血清OPN水平呈升高趋势(P＜0.05)。基于上述结果分析，OPN、IL-1β可能在BC发生发展中起协同作用，IL-1β刺激诱发癌变，而OPN通过促进细胞转移而加剧BC病情进展，因此，血清OPN、IL-1β可以作为BC诊断及病情评价的指标，但血清因子诊断肿瘤疾病的共性缺点是特异性差，还需结合临床症状、影像学手段等排除相关干扰。
另外，超声参数PI、RI值及血清OPN、IL-1β水平均与疾病临床分期、肿瘤直径、远处转移呈正相关，且预后良好者PI、RI值、血清OPN、IL-1β水平低于预后不良者(P＜0.05)，说明PI、RI值、血清OPN、IL-1β在BC整个病变过程具有相似的变化趋势。进一步ROC曲线分析发现，上述指标联合诊断BC的AUC值为0.900，预测预后的AUC值为0.875，均高于单一指标检测，证实超声参数联合血清OPN、IL-1β诊断BC和判断预后都具有较高临床应用价值。
综上可知，BC患者存在超声参数及血清OPN、IL-1β水平异常情况，且异常程度与疾病病理特征关系密切，通过超声参数及相关血清因子水平可对乳腺病变情况进行鉴别，以指导临床制定治疗方案。

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