摘要： 【目的】通过克隆梨小食心虫Grapholita molesta的Minus-C气味结合蛋白(odorant binding protein, OBP)基因，并测定其在成虫不同组织中的表达量及其重组蛋白对气味配体的结合能力，推测其嗅觉生理功能。【方法】基于梨小食心虫雌虫触角转录组测序数据，利用RT-PCR克隆Minus-C OBP基因的完整编码区；qPCR测定该基因在成虫不同组织［触角、头(去除触角)、胸、腹、足、翅］中的表达量；构建原核表达系统表达重组蛋白，利用SDS-PAGE和Western blot检测蛋白的表达和纯度；运用荧光竞争结合实验测定重组蛋白与35种气味配体的结合能力。【结果】成功克隆了梨小食心虫的一个Minus-C OBP基因，命名为GmolOBP14 (GenBank登录号： MF066361)。GmolOBP14开放阅读框长411 bp，编码136个氨基酸，成熟蛋白具有4个保守的半胱氨酸残基，属于Minus-C OBP亚家族。GmolOBP14在雌雄成虫的不同组织中均有表达，但在雄成虫翅和雌成虫触角中的表达量显著高于同性别的其他组织。重组蛋白GmolOBP14与气味配体的结合谱较窄，仅能与16种配体表现出不同程度的结合活性，其中与梨酯和十二醛的结合能力较强，解离常数Ki分别为6.92和12.74 μmol/L；与癸醛、十四醛、顺-3-己烯-1-醇、苯甲醇和己酸丁酯有中等程度的结合活性，Ki分别为25.54, 20.61, 24. 35, 23.44和23.33 μmol/L；GmolOBP14对性信息素组分没有结合活性，提示该蛋白不参与对性信息素的感受和识别。【结论】根据GmolOBP14基因的组织表达特点及其重组蛋白的结合特性，推测GmolOBP14除具有选择性结合和运输寄主植物挥发物的作用外，还参与与嗅觉无关的生理过程。
PDF全文下载地址:
http://www.insect.org.cn/CN/article/downloadArticleFile.do?attachType=PDF&id=6210
删除或更新信息，请邮件至freekaoyan#163.com(#换成@)
梨小食心虫Minus-C气味结合蛋白的分子克隆、表达谱及结合特性分析
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
相关话题/组织 基因 信息 阅读 实验
领限时大额优惠券,享本站正版考研考试资料!
优惠券领取后72小时内有效，10万种最新考研考试考证类电子打印资料任你选。涵盖全国500余所院校考研专业课、200多种职业资格考试、1100多种经典教材，产品类型包含电子书、题库、全套资料以及视频，无论您是考研复习、考证刷题，还是考前冲刺等，不同类型的产品可满足您学习上的不同需求。 ...考试优惠券 本站小编 Free壹佰分学习网 2022-09-19柞蚕蛹滞育和滞育解除过程中海藻糖酶基因表达模式及酶活力分析
摘要：【目的】克隆柞蚕Antheraeapernyi海藻糖酶（trehalase,Treh）基因，探讨该基因在柞蚕蛹滞育和滞育解除过程中的表达模式与海藻糖酶活力变化，为阐明柞蚕蛹滞育期间糖代谢机制提供参考。【方法】利用RT-PCR技术从柞蚕蛹中克隆获得海藻糖酶基因，并对其进行生物信息学分析。采用半定 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03沙葱萤叶甲化学感受蛋白基因的鉴定及表达谱分析(英文)
摘要：【目的】沙葱萤叶甲Galerucadaurica是一种在内蒙古草原上爆发成灾的新害虫。昆虫的化学感受蛋白(CSPs)是一类水溶性小分子蛋白，其主要功能是识别和传导环境中的化学刺激至受体，参与众多昆虫行为。本研究旨在鉴定沙葱萤叶甲化学感受蛋白基因，并对其表达谱进行分析。【方法】通过筛选本实验室组 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03马铃薯甲虫N-β-丙酰多巴胺水解酶基因的克隆及功能分析
摘要：【目的】通过RNAi技术分析明确对马铃薯甲虫Leptinotarsadecemlineata黑色素形成重要的N--丙酰多巴胺(NBAD)水解酶基因的功能。【方法】NBAD水解酶基因通过马铃薯甲虫转录组数据分析和RT-PCR克隆获得，分别利用序列比对和系统发育分析确定该基因的完整性和 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03家蚕油蚕oc突变体突变基因的精细定位
摘要：【目的】油蚕oc突变体是家蚕Bombyxmori油蚕突变体的一种，经典遗传学连锁图谱已经将oc突变基因定位在5号染色体40.8cM座位。本研究旨在对oc突变体候选基因进行精细定位并克隆，探究oc性状形成的分子机制。【方法】以油蚕oc突变品系和野生型家蚕品系大造(Dz)为亲本，其杂交产生的F1代 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03斜纹夜蛾信息素结合蛋白SlitPBP4的分子克隆、组织表达谱及结合特性分析
摘要：【目的】鉴定斜纹夜蛾Spodopteralitura新的信息素结合蛋白（pheromonebindingprotein,PBP）基因，明确其在斜纹夜蛾不同组织中的表达水平并探讨其功能。【方法】基于已报道的烟草天蛾Manducasexta、家蚕Bombyxmori、君主斑蝶Danausplexi ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03荔枝蒂蛀虫信息素结合蛋白基因序列及表达分析
摘要：【目的】获得荔枝蒂蛀虫Conopomorphasinensis3个信息素结合蛋白（PBP）基因的全长序列，并分析序列和表达特征，为更好地利用性信息素防治该虫提供必要的基础。【方法】提取荔枝蒂蛀虫触角总RNA，利用转录组测序结果和RACE-PCR技术获得3个PBP基因的全长序列；对序列进行生物信 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03褐飞虱ATP合酶b亚基基因ATPSb的克隆与功能分析
摘要：【目的】克隆褐飞虱NilaparvatalugensATP合酶b亚基基因全长cDNA序列，并通过RNA干扰技术对该基因的功能进行研究，探讨其在褐飞虱防治中的潜在价值。【方法】根据本实验室获得的褐飞虱转录组测序数据提供的ATP合酶b亚基基因部分核心序列信息，以水稻品种TN1饲养的褐飞虱为材料，应 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03柑橘大实蝇气味结合蛋白基因BminOBP25的克隆、原核表达及组织表达分析
摘要：【目的】昆虫的气味结合蛋白(odorantbindingproteins，OBPs)与嗅觉识别密切相关，在触角感受器淋巴液内运输外界的脂溶性气味分子顺利到达嗅觉受体过程中起着关键的作用。本研究对柑橘大实蝇Bactroceraminax的气味结合蛋白基因进行了克隆和表达分析，旨在更好地了解气味结 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03梨小食心虫谷胱甘肽S-转移酶GmolGST6的基因克隆、原核表达和酶学特征
摘要：【目的】克隆一种梨小食心虫Grapholitamolesta触角中谷胱甘肽S-转移酶（glutathioneS-transferase,GST）基因并分析其结构特征，明确其表达特点及该基因编码蛋白的酶学特征，以期为该基因的功能研究提供理论依据。【方法】根据梨小食心虫雌虫触角转录组数据，利用RT ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03家蚕滞育关联山梨醇脱氢酶基因的启动子活性分析
摘要：【目的】明确家蚕Bombyxmori滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因BmSDH（BmSDH-1,BmSDH-2a和BmSDH-2b）的转录特性。【方法】用5RACE技术确定家蚕3个BmSDH基因的转录起始位点。利用PCR技术克隆3个BmSDH基因约1kb及BmSDH-2a不同长度的启 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03
