摘要： 【目的】鉴定斜纹夜蛾Spodoptera litura新的信息素结合蛋白（pheromone binding protein, PBP）基因，明确其在斜纹夜蛾不同组织中的表达水平并探讨其功能。【方法】基于已报道的烟草天蛾 Manduca sexta、家蚕Bombyx mori、君主斑蝶Danaus plexippus和庆网蛱蝶Melitaea cinxia 4种非夜蛾科昆虫PBP4同源基因的序列特点及与其他PBP基因在染色体上的相邻关系，通过分析实验室先前克隆到的斜纹夜蛾PBP/GOBP基因序列，克隆斜纹夜蛾PBP4同源基因；通过RT-PCR和qPCR技术测定该基因在斜纹夜蛾雌雄成虫不同组织中的表达水平；利用体外表达和荧光竞争性结合实验测定斜纹夜蛾PBP4蛋白对性信息素组分和植物气味物质的结合能力。【结果】在夜蛾科昆虫斜纹夜蛾中鉴定到首个PBP4基因，命名为SlitPBP4（GenBank登录号: MG356847），cDNA编码210个氨基酸，具有N末端信号肽、疏水性气味分子结合域及6个保守半胱氨酸等PBP的典型序列特征，其基因组DNA在保守位置也含有2个内含子；但和已报道的斜纹夜蛾3个PBP相比，PBP4的C末端明显较长。SlitPBP4在雄成虫腹部（生殖系统）极高表达，在雌雄成虫触角及其他组织中仅微弱表达或不表达。荧光竞争性结合实验结果表明，SlitPBP4蛋白与被测定的信息素组分及植物气味物质均没有明显结合能力。【结论】报道了夜蛾科昆虫的首个PBP4基因,该基因可能主要参与雄虫生殖相关的生理过程而非嗅觉功能。
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斜纹夜蛾信息素结合蛋白SlitPBP4的分子克隆、组织表达谱及结合特性分析
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
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