摘要： 【目的】获得荔枝蒂蛀虫Conopomorpha sinensis 3个信息素结合蛋白（PBP）基因的全长序列，并分析序列和表达特征，为更好地利用性信息素防治该虫提供必要的基础。【方法】提取荔枝蒂蛀虫触角总RNA，利用转录组测序结果和RACE-PCR技术获得3个PBP基因的全长序列；对序列进行生物信息学分析，用I-TASSER在线软件建立蛋白三维模型，用TM-align软件进行同源建模，用COACH软件推测蛋白的结合位点；用荧光定量PCR方法分析这3个基因在不同龄期（幼虫和蛹）和3日龄雌雄成虫不同组织［触角、头（去除触角）、胸、腹、足和翅］中的表达谱。【结果】从荔枝蒂蛀虫触角中克隆了3个PBP基因的全长序列，分别命名为CsinPBP1, CsinPBP2和CsinPBP3（GenBank登录号： MF093145, MF093146和MF093147）。序列分析结果表明，这3个基因的编码蛋白具有昆虫气味结合蛋白的典型特征，并且CsinPBP1与紫色卷蛾Yponomeuta cagnagellus PBP的氨基酸序列一致性达72%，CsinPBP2与小菜蛾Plutella xylostella PBP1的氨基酸序列一致性达55%，CsinPBP3与水稻大螟Sesamia inferens PBP3的氨基酸序列一致性达39%。软件模拟分析表明，CsinPBP1, CsinPBP2和CsinPBP3蛋白的三维结构分别与家蚕Bombyx mori普通气味结合蛋白2（GOBP2）（PDB: 2wc6A）、脐橙螟Amyetois transitetella PBP1（PDB: 4inxA）和家蚕PBP（PDB: 2p70A）相似度最高，分别预测得到10, 7和8个结合位点。表达谱分析显示，3个基因均只在成虫触角中表达，在幼虫期和蛹期不表达，在成虫头（去除触角）、胸、腹、足和翅中也不表达，且在雄虫触角中的表达量分别是雌虫中表达量的1.94, 28.19和32.94倍。【结论】获得荔枝蒂蛀虫3个PBP基因的全长序列，序列和表达分析结果提示这3个基因与雄虫感受性信息素有关。
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荔枝蒂蛀虫信息素结合蛋白基因序列及表达分析
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
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