摘要： 【目的】油蚕oc突变体是家蚕Bombyx mori油蚕突变体的一种，经典遗传学连锁图谱已经将oc突变基因定位在5号染色体40.8 cM座位。本研究旨在对oc突变体候选基因进行精细定位并克隆，探究oc性状形成的分子机制。【方法】以油蚕oc突变品系和野生型家蚕品系大造(Dz)为亲本，其杂交产生的F1代雄性个体与oc突变的雌性个体进行回交得到的1 397头BC1代个体为定位材料，以家蚕已经报道的基因组序列为参考设计markers，通过亲本及F1代个体筛选多态性markers，并利用多态性markers和BC1代个体对oc突变基因进行精细定位。通过半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR（qPCR）筛选oc紧密连锁区间内的候选基因，确定目标候选基因，继而克隆和测序该基因，分析油蚕oc突变的原因。【结果】利用1 397头BC1代个体和11对有效的多态性markers将oc突变基因定位在M10与M11两个markers之间，物理图谱距离大约为234 kb。通过家蚕基因组数据库对oc连锁区域内的基因进行检索发现该区域有5个预测基因。对这5个预测基因在10个家蚕品系中进行的表达分析发现，只有BGIBMGA003572基因在oc突变个体体壁的表达量明显比正常个体中的低。通过基因的同源分析发现该基因编码的蛋白和人类单羧酸转运蛋白9(可能的尿酸转运蛋白)是同源蛋白，推测其为oc突变的候选基因。对BGIBMGA003572进行的克隆和测序结果显示其编码序列有5个氨基酸在oc突变体中发生了突变。【结论】通过定位克隆，本研究将oc突变基因定位在了234 kb的紧密连锁区间，其中编码单羧酸转运蛋白9的BGIBMGA003572可能和oc突变体的表型有关。
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家蚕油蚕oc突变体突变基因的精细定位
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
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