RNAi沉默CsHB1降低茶树叶片愈伤组织咖啡碱积累
康 馨1，刘 平1，马雯慧1，张媛媛1，林晓蓉1，李 斌1,2，陈忠正1,2,*1华南农业大学食品学院，广州 510642；2广东省功能食品活性物重点实验室，广州 510642
出版日期:2020-12-25发布日期:2021-01-06基金资助:国家自然科学基金项目（31770727，31270726）；广州市科技计划项目（201607010139）；国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目（CARS-19）；广东省科技计划项目（2015A030302065）RNAi Silencing CsHB1 Reduces the Accumulation of Caffeine in Tea Callus
KANG Xin1，LIU Ping1，MA Wenhui1，ZHANG Yuanyuan1，LIN Xiaorong1，LI Bin1,2，and CHEN Zhongzhen1,2,*1College of Food Science，South China Agricultural University，Guangzhou 510642，China；2Guangdong Provincial Key Laboratory of Nutraceuticals and Functional Foods，Guangzhou 510642，China
Online:2020-12-25Published:2021-01-06摘要/Abstract
摘要： 以‘英红9号’茶树叶片为材料，克隆HD-Zip转录因子基因CsHB1，原核表达CsHB1重组蛋白，利用本氏烟草进行CsHB1表达蛋白的亚细胞定位；构建CsHB1的RNAi转基因载体，经农杆菌介导转化‘英红9号’茶树叶片愈伤组织，并对沉默CsHB1愈伤组织系进行基因表达分析和咖啡碱含量测定。结果表明，克隆基因与NCBI登记的‘龙井43’茶树CsHB1（MF033534）有6个碱基差异，但编码相同的氨基酸序列；原核诱导表达获得CsHB1的49 kD不可溶蛋白；将CsHB1蛋白亚细胞定位于细胞核和细胞质。在沉默表达CsHB1愈伤组织中，CsHB1表达显著下降，催化茶叶咖啡碱合成的N–甲基转移酶基因yhNMT1表达下调，愈伤组织中咖啡碱含量显著降低。推测转录因子基因CsHB1的沉默抑制了靶基因yhNMT1的表达，进而降低‘英红9号’愈伤组织中咖啡碱的合成积累。
中图分类号:
S571.1
引用本文
康 馨, 刘 平, 马雯慧, 张媛媛, 林晓蓉, 李 斌, 陈忠正, . RNAi沉默CsHB1降低茶树叶片愈伤组织咖啡碱积累[J]. 园艺学报, 2020, 47(12): 2373-2384.
KANG Xin, LIU Ping, MA Wenhui, ZHANG Yuanyuan, LIN Xiaorong, LI Bin, and CHEN Zhongzhen, . RNAi Silencing CsHB1 Reduces the Accumulation of Caffeine in Tea Callus[J]. Acta Horticulturae Sinica, 2020, 47(12): 2373-2384.
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