柑橘愈伤组织RNAi沉默CCD1基因对其类胡萝卜素积累的影响
张 印1，万 勇2，张 婷1，叶俊丽1,*，邓秀新11 华中农业大学园艺林学学院，园艺植物生物学教育部重点实验室，国家柑橘育种中心，武汉 430070；2 当阳市公共检验检测中心，湖北当阳 444100
出版日期:2020-10-25发布日期:2020-11-10基金资助:国家重点研发计划项目（2018YFD1000200）；国家自然科学基金项目（31201595）RNAi-mediated Suppression of CCD1 Gene Impacts Carotenoid Accumulation in Citrus Calli
ZHANG Yin1，WAN Yong2，ZHANG Ting1，YE Junli1,*，and DENG Xiuxin11Key Laboratory of Horticultural Plant Biology，Ministry of Education，National Citrus Breeding Centre，College ofHorticulture & Forestry Science，Huazhong Agricultural University，Wuhan 430070，China；2Dangyang Public Inspectionand Testing Center，Dangyang，Hubei 444100，China
Online:2020-10-25Published:2020-11-10摘要/Abstract
摘要： 类胡萝卜素裂解双加氧酶（CCD）可催化类胡萝卜素在特定位点氧化裂解生成多种生物活性化合物，其活性差异一定程度上决定了植物体内类胡萝卜素含量和组成变化。为了探讨柑橘中CCD1蛋白对类胡萝卜素积累的影响，从红肉脐橙（Citrus sinensis L. Osbeck）果实中克隆了CCD1 基因，将其特异片段通过重组反应连接到pHGRV 载体中，构建CCD1 的RNA 干扰载体pHGRV-CCD1。利用农杆菌介导的方法将其转入‘国庆1 号’蜜柑、‘伏令夏橙’和‘马叙’葡萄柚愈伤组织中，经PCR 鉴定分别获得6、4、4 个转基因干扰系。3 种柑橘材料转基因干扰系中CCD1 基因的表达水平均较野生型显著下调，其中‘马叙’葡萄柚转基因干扰系Rm2 的表达水平仅为野生型的8.4%，干扰效果最佳。CCD1 转基因干扰系愈伤组织外观多数呈现与野生型对照相近的色泽，仅Rm2 系可见较为明显的颜色变化；综合分析3种柑橘材料转基因前后类胡萝卜素含量变化，发现CCD1 基因抑制表达后，紫黄质、9–顺式–紫黄质的含量均较野生型显著增加，表明其可能是CCD1 在柑橘愈伤组织体内优先选择的裂解底物。
中图分类号:
S 666
引用本文
张 印, 万 勇, 张 婷, 叶俊丽, 邓秀新. 柑橘愈伤组织RNAi沉默CCD1基因对其类胡萝卜素积累的影响[J]. 园艺学报, 2020, 47(10): 1982-1990.
ZHANG Yin, WAN Yong, ZHANG Ting, YE Junli, and DENG Xiuxin. RNAi-mediated Suppression of CCD1 Gene Impacts Carotenoid Accumulation in Citrus Calli[J]. Acta Horticulturae Sinica, 2020, 47(10): 1982-1990.
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