王瑞¹, 陈阳松¹, 孙明昊^1,2, 张秀艳³, 杜依聪¹, 郑军^,1,*1 中国农业科学院作物科学研究所, 北京 100081
2 吉林农业大学农学院, 吉林长春 130118
3 中国农业大学生物学院, 北京 100193

Genetic analysis and causal gene identification of maize viviparous mutant vp-like8

WANG Rui¹, CHEN Yang-Song¹, SUN Ming-Hao^1,2, ZHANG Xiu-Yan³, DU Yi-Cong¹, ZHENG Jun^,1,* 1 Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China
2 College of Agronomy, Jilin Agricultural University, Changchun 130118, Jilin, China
3 School of Life Science, China Agricultural University, Beijing 100193, China

通讯作者: * 郑军, E-mail: zhengjun02@caas.cn

第一联系人: 王瑞, E-mail: 18612261636@163.com; 陈阳松, E-mail: chenyangsong14@163.com** 同等贡献(Contributed equally to this work)
收稿日期:2018-08-15接受日期:2019-01-12网络出版日期:2019-02-22

基金资助:

本研究由国家重点研发计划项目.2016YFD0101002 中国农业科学院创新工程专项经费资助

Received:2018-08-15Accepted:2019-01-12Online:2019-02-22

Fund supported:

This work was supported by the National Key Research and Development Program of China.2016YFD0101002 the Agricultural Science and Technology Innovation Program of Chinese Academy of Agricultural Sciences.

摘要
玉米突变体vp-like8具有明显的穗发芽性状且能稳定遗传, 遗传分析表明该突变性状受隐性单基因控制。用vp-like8与自交系郑58杂交构建F₂遗传定位群体, 利用BSR-Seq方法, 将基因初定在玉米第3染色体160.4 Mb~165.6 Mb区间内。参考玉米基因组信息, 发现已报道的穗发芽基因Vp1位于此定位区间内。分别利用vp1、vp-like8的杂合突变体进行等位测验, 发现杂交后代中正常与穗发芽籽粒符合3∶1遗传分离比。经序列分析, 发现vp-like8突变体中Vp1基因在第2内含子有343 bp碱基的缺失, 且第3内含子有222 bp重复序列的插入, 而已报道的vp1突变体只在第2个内含子有343 bp碱基的缺失。通过实时定量PCR检测发现, 与正常籽粒相比, vp-like8与Vp1突变籽粒中Vp1 基因的转录水平均明显降低。以上证据表明, vp-like8是一个新的Vp1基因等位突变体。
关键词： 玉米;穗发芽;突变体;Vp1;基因定位

Abstract
The maize mutant vp-like8 shows clear viviparous phenotype and stable inheritance, and genetic analysis showed that the mutant phenotype was controlled by a single recessive gene. Using an F₂ segregation population derived from vp-like8 and inbred line Zheng 58, the causal gene was mapped to an interval from 160.4 Mb to 165.6 Mb on chromosome 3 by the BSR-Seq technology. According to the maize genomic database, a previously discovered viviparous gene Vp1 was identified to be in this mapping interval. The test crosses from vp1 and vp-like8 heterozygous plants showed a 3:1 segregation ratio between normal and viviparous kernels. The genomic sequence analysis revealed that vp-like8 mutant had a 343 bp deletion in the second intron and 222 bp insertion in the third intron of Vp1 gene, which is different from vp1 mutation of an only 343 bp deletion in the second intron of Vp1 gene. Further real time PCR analysis revealed that, compared with the normal kernels, the transcript level of Vp1 was significantly decreased both in vp-like8 and vp1 viviparous kernels. Taken together, these evidences suggest that vp-like8 is a new allele mutant of Vp1.
Keywords：maize;viviparous;mutant;Vp1;gene mapping


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王瑞, 陈阳松, 孙明昊, 张秀艳, 杜依聪, 郑军. 玉米穗发芽突变体vp-like8的遗传分析及突变基因鉴定[J]. 作物学报, 2019, 45(5): 656-661. doi:10.3724/SP.J.1006.2019.83058
WANG Rui, CHEN Yang-Song, SUN Ming-Hao, ZHANG Xiu-Yan, DU Yi-Cong, ZHENG Jun. Genetic analysis and causal gene identification of maize viviparous mutant vp-like8[J]. Acta Agronomica Sinica, 2019, 45(5): 656-661. doi:10.3724/SP.J.1006.2019.83058


穗发芽严重影响作物的产量与品质, 给农业生产造成巨大的损失。早在20世纪20年代, 就已经有玉米穗发芽相关的研究报道^[1,2,3,4,5]。截至目前已发现十多个玉米穗发芽突变体, 通过对这些突变体基因的克隆, 发现这些突变体大多是植物激素脱落酸(ABA)合成途径或信号转导途径受阻, 从而导致穗发芽的表型。根据Robertson的评定标准^[6], 将已鉴定的玉米穗发芽突变体分为两种类型。一类是胚乳和幼苗的颜色不发生改变的突变体, 包括vp1/vp4、vp8、vp10/vp13、vp14和vp15^{[7,8,9,10,11,12]}; 另一类是玉米籽粒颜色发生改变的突变体, 该突变体植株类胡萝卜素和叶绿素的生物合成受到影响, 包括vp2、vp5、vp7/ps1、vp9、y9和vp12/lw2 ^{[13,14,15,16,17,18]}。

vp1是玉米中典型的ABA不敏感突变体, Vp1基因编码一类特异的转录因子, 在玉米种子发育成熟过程中的胚和胚乳中特异表达, 调控种子对植物激素ABA的响应过程^[7]。研究表明位于VP1蛋白氨基端的保守结构域对ABA信号转导至关重要, 而VP1蛋白最大的保守区域B3则在ABA含量较低时起重要作用, B3结构域与下游基因的启动子结合, 并激活其表达^[21]。此外, 通过对vp1突变体中糊粉层和胚组织中的花青素合成受阻现象深入研究, 发现VP1蛋白可能通过与多个转录因子互作, 进而激活C1基因来控制花青素代谢^[19], 表明VP1转录因子在种子成熟过程中参与了多个信号转导过程。

研究作物穗发芽的遗传调控, 克隆穗发芽相关基因, 将为深入解析作物穗发芽的分子遗传机制, 以及鉴定和筛选耐穗发芽的种质资源奠定基础。尽管目前已克隆多个玉米穗发芽基因, 但玉米籽粒穗发芽形成的分子遗传调控网络仍不够清晰。因此, 有必要进一步鉴定新的玉米穗发芽突变体, 克隆更多的穗发芽基因, 并深入研究其调控玉米穗发芽的遗传机制。本研究对一个新发现的玉米穗发芽突变体(命名为vp-like8)进行遗传分析和基因定位, 经等位测验和突变基因的分子鉴定发现, vp-like8是Vp1基因的一个新等位突变体。该研究为进一步探索玉米穗发芽的分子遗传机制丰富了实验材料。

1 材料与方法

1.1 实验材料

玉米突变体vp-like8是本实验室在玉米繁种过程中新发现的一个穗发芽突变体。授粉后30 d, Vp-like8杂合植株的果穗上呈现出明显的穗发芽分离的表型。利用vp-like8杂合体与自交系郑58杂交, 然后再自交得到F₂群体用于基因定位。vp1基因突变体326B(vp1/+)订购自Maize Genetics Cooperation Stock Center (玉米遗传学合作库存中心, https:// maizecoop.cropsci.uiuc.edu/request)。

1.2 vp-like8突变体的表型鉴定和遗传分析

由于玉米果穗成熟收获时, 穗发芽的胚芽已脱水干枯致死, 因此vp-like8突变体以杂合体形式保存。随机选取有穗发芽分离果穗上的正常籽粒种植, 自交后代中, 再选取有穗发芽表型果穗上的正常籽粒种植。以此方式连续多代自交, 观察vp-like8突变体的遗传稳定性, 并进行遗传分析。在每一世代自交授粉后30 d, 对vp-like8穗发芽的表型进行鉴定, 剥开果穗苞叶, 选取出现穗发芽表型的果穗, 脱粒并统计正常与穗发芽籽粒的分离比。

1.3 目的基因的初定位

BSR-Seq方法已被证明适用于玉米突变体基因的定位与克隆^[22,23], 本研究利用该方法对vp-like8突变体基因进行初定位。授粉后30 d, 随机挑选出现穗发芽表型分离的F₂果穗, 分别挑选40粒正常和穗发芽籽粒, 去除种皮后分别混合成2份实验样品, 液氮速冻并迅速研磨至粉末, 使用植物总RNA提取试剂盒(北京天根生化科技有限公司, Cat# DP432)提取样品总RNA。利用Illumina HiSeq2000型测序仪(北京贝瑞和康生物技术有限公司)进行转录组测序。参照BSR-Seq分析流程^[22], 比对、分析测序结果, 提取样本间的SNP标记, 计算SNP标记与突变基因的连锁概率, 分析获得基因Vp-like8的初定位区间。

1.4 定位区间基因检索及等位测验

根据 BSR-Seq 数据, 将基因Vp-like8定位于第3染色体160.4 Mb~165.6 Mb区间内, 利用MaizeGDB数据库网站(http://www.maizegdb.org/), 检索该定位区间内所有基因的注释信息, 发现该区间内存在已经报道的玉米穗发芽Vp1基因^[7]。

为检测vp1与vp-like8是否等位, 随机挑选vp1、vp-like8杂合体后代中正常籽粒(基因型应为野生型或杂合型), 各种植2行, 每行25株。开花授粉时, 任选vp1中一行单株自交, 并收集此行所有单株花粉进行混粉作为父本, 分别授予vp-like8中一行的每一单株。同理, vp-like8的另一行的每一单株自交, 同时分别收集此行每个单株的花粉, 混粉后作为父本与vp1的另一行的每一单株杂交。授粉30 d后, 剥开苞叶, 检查是否有穗发芽突变表型的果穗^[23]。

1.5 基因组DNA提取、PCR扩增和序列分析

用CTAB方法分别提取突变体vp-like8和vp1授粉后30 d分离果穗上正常与穗发芽籽粒的基因组DNA^[24]。依据Vp1基因组序列, 利用Primer3引物设计软件(http://primer3.ut.ee/), 设计8对引物(VP1-G- F1/R1~VP1-G-F8/R8)(表1), 扩增产物瓦片式覆盖了Vp1基因组序列。分别以突变体vp-like8与vp1基因组DNA为模板, 扩增Vp1基因片段, 将PCR产物进行测序(北京六合华大基因科技有限公司), 分析测序结果, 分别判断Vp1基因的突变情况。PCR 扩增体系为2 × KOD buffer 25 μL, 引物(10 μmol L^-1) 0.75 μL, 模板DNA 2 μL, dNTPs (2.5 μmol L^-1) 5 μL, KOD FX酶(1.0 U μL^-1) 1 μL, 用超纯水补至50 μL。PCR扩增条件为94℃预变性5 min; 94℃变性10 s, 59℃退火30 s, 68℃延伸1 min, 循环数为35; 68℃延伸7 min。用1%琼脂糖凝胶电泳检测目的条带^[23]。

Table 1
表1
表1本研究所用的引物
Table 1Primers used in this study

引物 Primer	正向序列 Forward sequence (5°-3°)	反向序列 Reverse sequence (5°-3°)
VP1-G-F1/R1	GCGAGACCTGAAAACACACA	CATGGCGTTCTCTAGCATCA
VP1-G-F2/R2	CGCACTCCCAAGAGAACC	ATAGGGTAAGAGCCCGTGGA
VP1-G-F3/R3	GTGGTCGTGAACAGCCAAC	GCTCTGCTTCAGCACCTTCT
VP1-G-F4/R4	CATCGCTGTCGAGCAATAGA	CTGTACCGCATGTTCCACAC
VP1-G-F5/R5	TAAAATCGGCCATGGATAGG	TCTCTGGCCCAGTGGTTAGT
VP1-G-F6/R6	GCTGCTGTTTTCCTCGAATC	GCACCTAGCTGCCAAACACT
VP1-G-F7/R7	AGTCCTCCGGATCTCTCGTT	AAACGGTTGCGTAGATTTGG
VP1-G-F8/R8	CCAGTGCAATGTCAGTGCTT	AATGGCCGAGAGATCAGGTA
VP1-CDS-F1/R1	AGAAGGTGCTGAAGCAGAGC	AACGAACAAATTCCCCTGTG
Zm-GAPDH-F/R	CCCTTCATCACCACGGACTAC	AACCTTCTTGGCACCACCCT

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1.6 vp-like8和vp1再次等位测验

依据测序结果, 分别用特异引物(VP1-G-F4/ R4、VP15-G-F6/R6), 准确鉴定出vp-like8与vp1的杂合突变体。取vp-like8杂合突变体花粉, 授予vp1杂合突变体植株; 同理, 取vp1杂合突变体花粉授予vp-like8杂合突变体植株。授粉后30 d, 检测果穗上籽粒穗发芽情况, 统计分离比^[23]。

1.7 RNA的提取及基因表达量分析

授粉后30 d, 取穗发芽和正常的籽粒, 去除种皮, 提取籽粒RNA (同上)。利用反转录试剂盒(北京全式金生物技术有限公司, Cat# AU311-02)反转录为cDNA, 设计特异引物VP1-CDS-F1/R1, 以GAPDH作为内参引物(表1), 利用ABI 7300实时定量PCR仪进行Vp1基因的表达分析。PCR体系为dye I 0.4 μL, 10 × qMix 10 μL, 引物(10 μmol L^-1) 0.5 μL, 模板cDNA 1 μL, 补灭菌超纯水至20 μL。PCR扩增 条件为95℃预变性2 min, 95℃变性10 s, 60℃退火15 s, 72℃延伸30 s, 设置40个循环, 在72℃延伸30 s阶段收集荧光, 并添加熔解曲线, 用公式2^-ΔΔCt计算正常和穗发芽籽粒中Vp1基因表达量差异^[23]。

2 结果与分析

2.1 突变体vp-like8的表型和遗传分析

正常情况下, 玉米授粉后30~40 d, 随着籽粒胚乳的硬化, 玉米籽粒逐渐成熟。但对于突变体vp- like8杂合体的果穗, 授粉后30 d, 呈现出明显的穗发芽分离表型(图1-A)。籽粒完全成熟收获时, 穗发芽籽粒提前萌发的胚芽已干枯致死(图1-B, C), 经连续自交, 发现vp-like8穗发芽性状能够稳定遗传。如表2所示, 随机挑选有穗发芽性状分离的果穗, 统计分离比, 经卡方检验发现其分离比符合3∶1, 表明突变体vp-like8穗发芽性状由单隐性核基因调控。

图1

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图1vp-like8突变体穗发芽表型

A: 授粉30 d 后突变体vp-like8杂合果穗上的穗发芽籽粒和正常籽粒; B: 授粉后60 d后突变体vp-like8杂合果穗上穗发芽籽粒和正常籽粒; C: 成熟的正常籽粒(WT)和穗发芽籽粒(vp); 标尺=1 cm。
Fig. 1Viviparous phenotype of vp-like8 mutant

A: viviparous and normal kernels on a vp-like8 heterozygous ear at 30 days after self-pollination; B: viviparous and normal kernels on a vp-like8 heterozygous ear at 60 days after self-pollination; C: mature normal (WT) and viviparous kernels (vp-like8); Bar = 1 cm.


Table 2
表2
表2vp-like8杂合突变体自交授粉后正常籽粒和穗发芽籽粒的分离情况
Table 2Segregation of normal and viviparous kernels on vp-like8 self-pollinated heterozygous ears

年度 Year	地点 Location	植株基因型 Plant genotype	籽粒表型Kernel phenotype
			正常籽粒 Normal	穗发芽籽粒 Viviparous	总数 Total	χ2 (3:1)
2014	海南Hainan	vp-like8/+	150	45	195	0.289
			361	118	479	0.017
2016	北京Beijing	vp-like8/+	132	46	178	0.030
			121	38	159	0.052

χ²_(0.05)(1)=3.84.

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2.2 Vp-like8基因定位

BSR-Seq基因定位发现, 在玉米10条染色体中, 只有第3染色体出现一个明显的峰。以P > 0.5作为标准, 将基因Vp-like8定位在第3染色体160.4 Mb~ 165.6 Mb区间内(图2)。

图2

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图2利用BSR-Seq方法对vp-like8突变体基因的初定位

Fig. 2Gene mapping of the vp-like8 mutant by the BSR-Seq strategy

2.3 vp-like8和vp1初步等位测验

分析发现在Vp-like8初定位的区间内存在已报道的Vp1基因, 为判断二者是否为同一个基因, 通过vp1和vp-like8杂合体的正反交进行了等位测验。在vp1杂合突变体混粉杂交vp-like8的果穗中, 发现有穗发芽分离的果穗(图3-A); 同时, 在vp-like8杂合突变体混粉杂交vp1的果穗中, 也发现有穗发芽分离的果穗(图3-B)。初步证明vp-like8突变体很有可能是Vp1基因的一个等位突变体。

图3

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图3利用杂合体对vp-like8和vp1进行等位测验

A: 以vp1/+杂合突变体混粉杂交vp-like8的果穗上出现穗发芽籽粒。B: 以vp-like8/+杂合突变体混粉杂交vp1的果穗上出现穗发芽籽粒。
Fig. 3Allelism test of vp-like8 with vp1 by heterozygous mutants

A: viviparous kernels were emerged on vp-like8 heterozygous ear crossed by the mixed pollen of vp1 heterozygous plants; B: viviparous kernels were emerged on vp1 heterozygous ear crossed by the mixed pollen of vp-like8 heterozygous plants.

2.4 vp-like8突变位点鉴定

为准确验证Vp-like8和Vp1是等位基因并鉴定vp-like8的突变位点, 参考Vp1基因组序列(Vp1基因组序列全长5085 bp, 有6个外显子, 开放阅读框共2717 bp), 共设计8 对PCR引物(表1), 分别扩增vp- like8、vp1 突变体基因组DNA, 扩增产物起始于起始密码子上游-423 bp, 到终止密码子下游1088 bp结束, 瓦片式覆盖了Vp1基因组序列。测序发现, vp- like8突变体中Vp1基因在第2内含子处缺失343 bp碱基, 且在第3内含子插入222 bp的重复序列; 而vp1突变体只在第2内含子处缺失343 bp碱基 (图4)。由此证明, 这2个突变体的Vp1基因突变方式不同, 即Vp-like8是Vp1一个新的等位突变基因。

图4

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图4Vp1基因结构示意图及突变体的突变位置

Fig. 4Gene structure of Vp1 and mutation site of two mutants



根据vp-like8和vp1在Vp1基因上的突变位置, 设计特异引物VP1-G-F6R6、VP1-G-F4R4, 分别鉴定出vp-like8和vp1杂合体, 利用杂合体植株再次进行等位测验。授粉后30 d, 检查穗发芽情况, 发现无论是正交(vp-like8/+ × vp1/+), 还是反交(vp1/+ × vp- like8/+), 杂交果穗都出现穗发芽表型的分离。统计分析, 发现正常与穗发芽籽粒符合3∶1分离比(表3)。进一步确认vp-like8突变体就是Vp1基因的等位突变体。

Table 3
表3
表3vp-like8与vp1突变体等位测验
Table 3Test of vp-like8 with vp1

父母本基因型 Parental genotype	籽粒表型 Kernel phenotype
	正常籽粒 Normal	穗发芽籽粒 Viviparous	总数 Total	χ2 (3:1)
vp-like8/+ × vp1 /+	208	72	280	0.042
vp1 /+ × vp-like8/+	158	48	206	0.233

χ² _(0.05)(1)=3.84.

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2.5 Vp1基因在vp-like8突变体中的表达检测

选取vp-like8和vp1杂合体, 分别提取其自交果穗中正常和穗发芽籽粒的总RNA, 采用实时荧光定量PCR的方法, 检测Vp1基因的转录水平。如图5所示, 在突变体vp-like8和vp1中, 穗发芽籽粒Vp1基因的表达量都显著低于正常籽粒, 表明vp-like8和vp1中不同方式的突变都影响了Vp1基因正常转录。

图5

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图5实时定量PCR检测Vp1基因分别在vp-like8、vp1突变体的正常(normal)和穗发芽(vp)籽粒中的表达量

Fig. 5Gene expression level of Vp1 in normal and viviparous (vp) kernels of vp-like8 and vp1 mutants by quantitative real- time PCR analysis

3 讨论

玉米穗发芽性状受种子内各内源激素水平的影响, 其中植物激素ABA可促进未成熟种子中胚的发育及成熟种子的休眠等过程^[25]。近年来, 玉米穗发芽突变体的研究已相对深入, 发现ABA与玉米穗发芽表型密切相关, 无论ABA 信号转导途径异常还是ABA合成途径受阻, 都会发生穗发芽突变。目前所发现的玉米穗发芽突变体大多是ABA合成途径异常所致, 而ABA信号转导异常导致的相对较少。

已有研究报道, Vp1是单拷贝基因, 编码分子质量为73,335道尔顿的蛋白质, 特异地在种子发育过程中的胚和胚乳里表达^[7]。玉米VP1激活胚成熟和胚休眠相关基因的表达, 参与玉米胚成熟发育进程的调控^[19], 且抑制与种子萌发相关基因的表达^[26]。玉米VP1是拟南芥ABI3的同源蛋白, 是种子发育进程中重要的转录调节因子, 拟南芥ABI3调控胚发育过程。研究表明, ABI3调控胚芽休眠、质体发育和开花等过程^{[27,28,29,30,31]}。本研究中vp-like8在第2内含子处缺失343 bp碱基, 并第3内含子处有222 bp重复序列的插入, 与所报道的vp1突变体只在第2个外显子有343 bp碱基缺失的突变方式不同, 因此, vp-like8是一个新的未见报道的Vp1基因等位突变体。对于vp-like8中222 bp的插入序列, 该序列末端有17 bp的重复序列, 经序列检索比对分析发现, 222 bp序列为类逆转录转座子, 且在高粱、水稻、谷子等作物中均存在。我们检测到vp-like8突变体中Vp1基因mRNA的表达量显著降低, 推测可能就是由于第2内含子的缺失以及第3内含子的222 bp插入序列, 导致了Vp1基因不能正常转录和剪切, 进而不能翻译成正常的VP1蛋白, 造成了其功能的缺失。综上, vp-like8突变体的表型鉴定与基因克隆, 为进一步深入研究玉米Vp1基因的功能提供了新的实验材料。

4 结论

新发现一个玉米穗发芽突变体vp-like8, 受单隐性核基因控制。vp-like8中Vp1基因在第2内含子处缺失343 bp碱基, 在第3内含子处插入222 bp重复序列, 是Vp1基因的一个新等位突变体, 为探讨玉米穗发芽的分子机制提供了新的试材。

The authors have declared that no competing interests exist.

作者已声明无竞争性利益关系。

参考文献 View Option 原文顺序
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被引期刊影响因子

[1] Eyster W H . A primitive sporophyte in maize
Am J Bot, 1924,11:7-14.
DOI:10.1002/j.1537-2197.1924.tb05754.xURL [本文引用: 1]

[2] Eyster W H . A second factor for primitive sporophyte in maize
Am Nat, 1924,58:436-439.
DOI:10.1086/279994URL [本文引用: 1]

[3] Lindstrom E W . Heritable characters of maize: XIII. Endosperm defects-sweet defective and flint-defective
J Hered, 1923,14:127-135.
DOI:10.1093/oxfordjournals.jhered.a102292URL [本文引用: 1]

[4] Mangelsdorf P C . The inheritance of defective seeds in maize
J Hered, 1923,14:119-125.
DOI:10.1093/oxfordjournals.jhered.a102290URL [本文引用: 1]

[5] Mangelsdorf P C . The genetics and morphology of some endosperm characters in maize
Conn Agric Exp Stn Bull, 1926,279:513-614.
[本文引用: 1]

[6] Robertson D S . The genetics of vivipary in maize
Genetics, 1955,40:745.
[本文引用: 1]

[7] McCarty D R, Hattori T, Carson C B, Vasil V, Lazar M, Vasil I K . The Viviparous1 developmental gene of maize encodes a novel transcriptional activator
. Cell, 1991,66:895-905.
[本文引用: 4]

[8] Suzuki M, Kao C Y, Cocciolone S , McCarty D R . Maize VP1 complements Arabidopsis abi3 and confers a novel ABA/auxin interaction in roots
Plant J, 2001,28:409-418.
[本文引用: 1]

[9] Suzuki M, Latshaw S, Sato Y, Settles A M, Koch K E, Hannah L C , McCarty D R . The maize Viviparous8 locus, encoding a putative ALTERED MERISTEM PROGRAM1-like peptidase, regulates abscisic acid accumulation and coordinates embryo and endosperm development
Plant Physiol, 2008,146:1193-1206.
[本文引用: 1]

[10] Porch T G, Tseung C W, Schmelz E A, Settles A M . The maize Viviparous10/Viviparous13 locus encodes the Cnx1 gene required for molybdenum cofactor biosynthesis
Plant J, 2006,45:250-263.
[本文引用: 1]

[11] Schwartz S H, Tan B C, Gage D A, Zeevaart J A , McCarty D R . Specific oxidative cleavage of carotenoids by VP14 of maize
Science, 1997,276:1872-1874.
[本文引用: 1]

[12] Suzuki M, Mark Settles A, Tseung C W, Li Q B, Latshaw S, Wu S , McCarty D R . The maize viviparous15 locus encodes the molybdopterin synthase small subunit
Plant J, 2006,45:264-274.
[本文引用: 1]

[13] Hable W E, Oishi K K, Schumaker K S . Viviparous-5 encodes phytoenedesaturase, an enzyme essential for abscisic acid (ABA) accumulation and seed development in maize
Mol General Genet, 1998,257:167-176.
[本文引用: 1]

[14] Singh M, Lewis P E, Hardeman K, Bai L, Rose J K, Mazourek M, Brutnell T P . Activator mutagenesis of the pink scutellum1/viviparous7 locus of maize
Plant Cell, 2003,15:874-884.
[本文引用: 1]

[15] Maluf M P, Saab I N, Wurtzel E T, Mark Settles A . The viviparous12 maize mutant is deficient in abscisic acid, carotenoids, and chlorophyll synthesis
J Exp Bot, 1997,48:1259-1268.
[本文引用: 1]

[16] Mayfield S P, Nelson T, Taylor W C, Malkin R . Carotenoid synthesis and pleiotropic effects in carotenoid-deficient seedlings of maize
Planta, 1986,169:23-32.
DOI:10.1007/BF01369771URL [本文引用: 1]

[17] Treharne K J, Mercer E I, Goodwin T W . Carotenoid biosynthesis in some maize mutants
Phytochemistry, 1966,5:581-587.
DOI:10.1016/S0031-9422(00)83636-5URL [本文引用: 1]

[18] Qi W, Zhu J, Wu Q, Wang Q, Li X, Yao D, Jin Y, Wang G, Wang G, Song R . Maize rea1 mutant stimulates ribosome use efficiency and triggers distinct transcriptional and translational responses
Plant Physiol, 2016,170:971-988.
DOI:10.1104/pp.15.01722URL [本文引用: 1]

[19] McCarty D R, Carson C B, Stinard P S, Robertson D S . Molecular analysis of viviparous-1: an abscisic acid-insensitive mutant of maize
Plant Cell, 1989,1:523-532.
[本文引用: 2]

[20] Hattori T, Vasil V, Rosenkrans L, Cocciolone S M, Vasil I K, Quatrano R S , McCarty D R . The Viviparous1 gene and abscisic acid activate the C1 regulatory gene for anthocyanin biosynthesis during seed maturation in maize
Gene Dev, 1992,6:609-618.


[21] Carson C B, Hattori T, Rosenkrans L, Vasil V, Vasil I K, Peterson P A , McCarty D R . The quiescent/colorless alleles of viviparous1 show that the conserved B3 domain of VP1 is not essential for ABA-regulated gene expression in the seed
Plant J, 1997,12:1231-1240.
[本文引用: 1]

[22] Liu S, Yeh C T, Tang H M, Nettleton D, Schnable P S . Gene mapping via bulked segregant RNA-Seq (BSR-Seq)
PLoS One, 2012,7:e36406.
DOI:10.1371/journal.pone.0036406URL [本文引用: 2]

[23] 王瑞, 张秀艳, 陈阳松, 杜依聪, 汤继华, 王国英, 郑军 . 一个新的玉米Vp15基因等位突变体的遗传分析与分子鉴定
作物学报, 2018,44:370-376.
[本文引用: 5]

Wang R, Zhang X Y, Chen Y S, Du Y C, Tang J H, Wang G Y, Zheng J . Genetic analysis and molecular characterization of a new allelic mutant of vp15 gene in maize
. Acta Agron Sin, 2018,44:370-376 (in Chinese with English abstract).
[本文引用: 5]

[24] 王关林, 方宏筠 . 植物基因工程(第2版). 北京: 科学出版社, 2002. pp 742-744.
[本文引用: 1]

Wang G L , Fang H J . Plant Genetic Engineering, 2nd edn. Beijing: Science Press, 2002. pp 742-744(in Chinese).
[本文引用: 1]

[25] Li C, Ni P, Francki M, Hunter A, Zhang Y, Schibeci D, Li H, Tarr A, Wang J, Cakir M, Yu J, Bellgard M, Lance R, Appels R . Genes controlling seed dormancy and pre-harvest sprouting in a rice-wheat-barley comparison
Funct Integr Genomic, 2004,4:84-93.
DOI:10.1007/s10142-004-0104-3URL [本文引用: 1]

[26] Rohde A, Van Montagu M, Boerjan W . The ABSCISIC ACID- INSENSITIVE 3 (ABI3) gene is expressed during vegetative quiescence processes in Arabidopsis
Plant Cell Environ, 1999,22:261-270.
[本文引用: 1]

[27] Hoecker U, Vasil I K , McCarty D R . Integrated control of seed maturation and germination programs by activator and repressor functions of Viviparous 1 of maize
Gene Dev, 1995,9:2459-2469.
[本文引用: 1]

[28] Rohde A, De Rycke R, Beeckman T, Engler G, Van Montagu M, Boerjan W . ABI3 affects plastid differentiation in dark-grown Arabidopsis seedlings
Plant Cell, 2000,12:35-52.
[本文引用: 1]

[29] Rohde A, Kurup S, Holdsworth M . ABI3 emerges from the seed
Trends Plant Sci, 2000,5:418-419.
DOI:10.1016/S1360-1385(00)01736-2URL [本文引用: 1]

[30] Rohde A, Prinsen E, De Rycke R, Engler G, Van Montagu M, Boerjan W . PtABI3 impinges on the growth and differentiation of embryonic leaves during bud set in poplar
Plant Cell, 2002,14:1885-1901.
DOI:10.1105/tpc.003186URL [本文引用: 1]

[31] Brady S M, Sarkar S F, Bonetta D , McCourt P . The ABSCISIC ACID INSENSITIVE 3 (ABI3) gene is modulated by farnesylation and is involved in auxin signaling and lateral root development in Arabidopsis
Plant J, 2003,34:67-75.
[本文引用: 1]