目前已经发现eIF4A在B细胞淋巴瘤、T细胞急性淋巴细胞白血病、宫颈癌、黑色素瘤、直肠癌和非小细胞肺癌等恶性肿瘤中均出现异常表达，且多种肿瘤对eIF4A的抑制剂表现出一定的敏感性。此外，研究发现eIF4A的表达也与乳腺癌和宫颈癌的恶性程度及预后有着很强的正相关。但是，由于目前实验手段的限制，难以研究eIF4AI的动态构象变化与催化功能的关系，故目前对eIF4AI的催化机理认识较少，尤其是eIF4AI催化ATP水解与RNA解旋偶联的机制尚不明确，并且无法解释为何某些保守基序的突变（如SAT基序）会导致ATP水解与RNA解旋的去偶联（Decoupling）。
上海药物所与复旦大学研究人员采用分子动力学模拟与生物实验相结合的手段，研究了eIF4AI的构象与功能循环，并首次揭示了eIF4AI两个保守结构域之间的柔性Linker区域在调控ATP水解与RNA解旋偶联中扮演的重要作用。常规分子动力学模拟结果显示，eIF4AI两结构域紧密靠近的构象（Closed conformation）可以被ATP或ADP+Pi的结合所稳定。然而，Pi释放后的ADP结合状态却导致eIF4AI整体结构发生变化，不能稳定在Closed构象。
这一模拟结果成功再现了前期研究所报道的eIF4AI可以感受不同的核苷酸状态，从而产生构象变化这一特性。进一步的模拟与实验研究发现连接eIF4AI两个结构域的Linker区域在其ATP水解偶联的RNA解旋活性中扮演着重要而多样的角色。一方面，Linker区域与eIF4AI两个结构域形成的疏水核心通过延缓Pi的释放，防止eIF4AI无效的水解循环，保证ATP水解与RNA解旋的偶联；另一方面，Linker区域对eIF4AI的酶活性还具有自抑制的作用，而这种自抑制作用可能对eIF4AI的翻译起始功能具有重要意义。鉴于DEAD盒家族成员的高度保守性，这一发现对进一步研究其他DEAD盒家族蛋白质的功能也具有重要指导意义。该研究成果于2015年10月12日在线发表于著名国际期刊《核酸研究》（Nucleic Acids Research）。
论文第一作者为上海药物所的卢俊彦博士以及复旦大学的蒋晨晓和李晓静同学，通讯作者为上海药物所药物发现与设计中心罗成研究员和复旦大学基础医学院生物化学与分子生物学系党永军教授。该研究工作得到了基金委、复旦大学启动基金、科技部重大科学研究计划和药靶发现与药物分子设计863计划课题和抗毒药物与毒理学国家重点实验室开放课题的资助。该研究也获得了中科院网络中心、上海超算中心和天津超算中心在计算资源上的大力支持。
论文全文链接：
http://nar.oxfordjournals.org/content/early/2015/10/11/nar.gkv1033.full
A.分子动力学模拟发现，eIF4AI在ATP和ADP+Pi结合状态下，Linker区域主链原子RMSD值随时间的波动。RMSD值增大的时段代表了Linker区域的瞬时构象波动；B.eIF4AI结合ADP+Pi时，模拟轨迹的平均构象与950 ns处Linker波动构象时，磷酸释放通道的开放情况。通道周围的残基使用棍棒模型显示；C.eIF4AI突变体的ATP水解酶活性测试；D. eIFAI突变体的RNA解旋酶活性测试。
（供稿部门：蒋华良研究组）
