林厦菁, 陈芳, 蒋守群, 蒋宗勇^,广东省农业科学院动物科学研究所/畜禽育种国家重点实验室/农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室/广东省畜禽育种与营养研究重点实验室,广州 510640

Effects of Soybean Isoflavones on Growth Performance, Antioxidant Performance and Intestinal Morphology of Early-Weaned Piglets

LIN XiaJing, CHEN Fang, JIANG ShouQun, JIANG ZongYong^,Institute of Animal Science, Guangdong Academy of Agricultural Sciences/State Key Laboratory of Livestock and Poultry Breeding/Key Laboratory of Animal Nutrition and Feed Science in South China, Ministry of Agriculture and Rural Affairs /Guangdong Key Laboratory of Animal Breeding and Nutrition, Guangzhou 510640

通讯作者: 蒋宗勇,Tel：020-87596262;Fax：020-87503358;E-mail： jiangz38@hotmail.com

林厦菁与陈芳为同等贡献作者。
责任编辑: 林鉴非
收稿日期:2019-09-18接受日期:2020-02-19网络出版日期:2020-05-16

基金资助:

广东省科技计划项目.2019A050505007 国家生猪产业技术体系建设专项.CARS-35 畜禽育种国家重点实验室研究配套专项 广东省畜禽育种与营养研究重点实验室运行经费.2014B030301054 十三五国家重点研发计划.2018YFD0501101 广东省农业科学院科技计划项目.201601TD 广东省农业科学院科技计划项目.201601TD

Received:2019-09-18Accepted:2020-02-19Online:2020-05-16
作者简介 About authors
林厦菁,E-mail：93783419@qq.com。

陈芳,E-mail：chenfanggz@126.com。





摘要
【目的】 研究饲粮中添加大豆异黄酮对早期断奶仔猪生长性能和抗氧化作用及免疫功能的影响。【方法】 选用160只5.5 kg 21日龄断奶的（杜×长×大）三元杂交仔猪,根据体重和性别随机分成5组,每组4个重复（公母各4只）。各处理组饲粮大豆异黄酮添加水平分别为0（空白对照组）、10、20、40、80 mg·kg^-1。试猪饲养至7、42d时每个重复分别选取平均体重的试猪屠宰并取样测定。【结果】 断奶后8—42 d和整个试验期阶段,大豆异黄酮40 mg·kg^-1组平均日采食量显著高于空白对照组、10 mg·kg^-1大豆异黄酮组和20 mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）。断奶后8—42 d时,大豆异黄酮20 mg·kg^-1组料重比显著低于空白对照组和80 mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）。断奶后7d,肝脏中丙二醛（MDA）含量随大豆异黄酮添加水平提高有降低的趋势,其中添加大豆异黄酮40和80 mg·kg^-1 组试验猪肝脏中的MDA含量显著低于空白对照组和10 mg·kg^-1 大豆异黄酮组。添加大豆异黄酮20 mg·kg^-1 组仔猪血清超氧化物歧化酶（SOD）活性显著高于空白对照组、40 mg·kg^-1 大豆异黄酮组和80 mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）。添加大豆异黄酮10 mg·kg^-1 组肝脏组织谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性显著高于对照组和80 mg·kg^-1 大豆异黄酮组（P<0.05）。断奶后8—42 d时,20 mg·kg^-1大豆异黄酮组试验猪料重比显著低于空白对照组和80 mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）。断奶42d时,添加大豆异黄酮40 mg·kg^-1 组血清SOD活性显著高于空白对照组、10 mg·kg^-1 大豆异黄酮组和80 mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）。大豆异黄酮20 mg·kg^-1组肝脏的GSH-Px活性显著高于空白对照组和80 mg·kg^-1 大豆异黄酮组（P<0.05）。断奶后42d,大豆异黄酮40和80 mg·kg^-1组的空肠SOD活性显著高于对照组（P<0.05）;添加大豆异黄酮40 mg·kg^-1组空肠的GSH-Px活性显著高于对照组和10 mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）;饲粮大豆异黄酮对空肠的金属硫蛋白（MT）含量有显著影响作用,其中大豆异黄酮10 mg·kg^-1组空肠的MT含量显著高于空白对照组（P<0.05）。断奶后7、42d对照组仔猪十二指肠绒毛成舌状排列,绒毛顶端凹陷且脱落严重,各处理组与对照组相比,十二指肠绒毛损伤程度降低,其中40 mg·kg^-1组仔猪十二指肠绒毛最完整,成柱状排列。添加大豆异黄酮对断奶仔猪42d的血液中CD4⁺的水平有显著影响作用,对淋巴细胞转化率、CD8⁺、CD4⁺/ CD8⁺无显著影响（P>0.05）,其中大豆异黄酮10和20 mg·kg^-1组血液中CD4⁺水平显著低于空白对照组和80 mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）。【结论】 饲粮中添加大豆异黄酮能够提高断奶仔猪的生长性能,增强机体的抗应激能力,对肠绒毛有一定的保护作用,早期断奶仔猪大豆异黄酮适宜添加量为40mg·kg^-1。
关键词： 大豆异黄酮;早期断奶仔猪;抗氧化作用;肠绒毛形态结构

Abstract
【Objective】This experiment was conducted to investigate the effects of soy isoflavone (SI) on growth performance and its antioxidation of early-weaned piglets. 【Method】One hundred and sixty weaned piglets (Duroc×Landrace×Yorkshire) were divided by body weight and sex into five treatments with four replicates of eight piglets in each treatment. The piglets were fed either a control diet or the control diet supplemented with 10, 20, 40 and 80 mg·kg^-1 of soy isoflavone, respectively. Two piglets per pen were slaughtered on the first and sixth week. 【Result】The average daily feed intake of 40 mg·kg^-1 SI group was significantly higher than that of the control group (P<0.05) on day 8-42 after weaning and the whole experimental period. On day 8-42 after weaning, the feed to gain ratio of 40 mg·kg^-1 SI group was significantly lower than that of the control, 10 and 20 mg·kg^-1 SI groups (P<0.05). The MDA content of liver under the 40 and 80 mg·kg^-1 SI groups was significantly lower than that in the control and 10 mg·kg^-1 groups. The serum SOD activity of piglets under the 20 mg·kg^-1 SI group was significantly higher than that under the control group, 40 and 80 mg·kg^-1 SI groups (P<0.05). The GSH-px activity of liver tissue under the 10 mg·kg^-1 SI group was significantly higher than that under the control group and 80 mg·kg^-1 SI group (P<0.05). On day 42 after weaning, the SOD of activity serum under the 40 mg·kg^-1 SI group was significantly higher than that under the control group, 10 and 80 mg·kg^-1 SI groups (P<0.05). The GSH-px activity of liver under 20 mg·kg^-1 SI group was significantly higher than that under the control group and 80 mg·kg^-1 SI group (P<0.05). On day 42 after weaning, the SOD activity of jejunal under the 40 and 80 mg·kg^-1 groups was significantly higher than that under the control group (P<0.05).The GSH-px activity of jejunum under the 40 mg·kg^-1 SI group was significantly higher than that under the control group and 10 mg·kg^-1 SI group (P<0.05). Dietary SI had a significant effect on MT content in jejunum, and the MT content of jejunum under the 10 mg·kg^-1 SI group was significantly higher than that under the control group (P<0.05). On day 7 and 42 after weaning, the duodenal villi of piglets under the control group were arranged in tongue shape, and the top of the villi were dented and shed seriously. Compared with the control group, the damage degree of the duodenal villi in each treatment groups were reduced, the duodenal villi of piglets under the 40 mg·kg^-1 group were the most complete villi. The addition of SI had a significant effect on the CD4⁺ level of the blood, but had no significant effect on lymphocyte conversion, CD8⁺, CD4⁺/ CD8⁺ (P>0.05) on day 8-42 after weaning. The CD4⁺ level of the 10 and 20 mg·kg^-1 SI group was significantly lower than that under the control group and 80 mg·kg^-1 SI group (P<0.05). 【Conclusion】 Dietary SI could improve the growth performance, antioxidant levels of 21-day-old weaned piglets, and the optimal level of SI was 40 mg·kg^-1.
Keywords：soy isoflavone;early-weaned piglets;antioxidation;intestinal villus morphology


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本文引用格式
林厦菁, 陈芳, 蒋守群, 蒋宗勇. 大豆异黄酮对早期断奶仔猪生长性能、抗氧化功能及肠粘膜形态结构的影响[J]. 中国农业科学, 2020, 53(10): 2101-2111 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2020.10.016
LIN XiaJing, CHEN Fang, JIANG ShouQun, JIANG ZongYong. Effects of Soybean Isoflavones on Growth Performance, Antioxidant Performance and Intestinal Morphology of Early-Weaned Piglets[J]. Scientia Acricultura Sinica, 2020, 53(10): 2101-2111 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2020.10.016

0 引言

【研究意义】仔猪在正常生理状态下,体内活性氧的产生与清除处于动态平衡,当体内自由基稳衡态异常,自由基产生增多,机体清除自由基损伤的能力降低,使体内自由基进一步蓄积,导致生长抑制并可诱发疾病或者死亡^[1]。目前集约化养猪生产中普遍采用的早期断奶技术易引起断奶仔猪产生氧化应激^[2],而仔猪的生长性能和存活率是影响猪场经济效益的重要因素,如何降低仔猪断奶应激是提高养猪生产效率的关键。【前人研究进展】机体氧化应激会导致断奶仔猪肝脏抗氧化酶活性的降低和抑制羟自由基能力,降低空肠绒毛高度、增加隐窝深度,提高脾脏MDA水平、减少淋巴细胞数量,影响养分的吸收与利用,降低机体免疫能力^[3,4]。大豆异黄酮是存在于大豆中具有多酚结构的化合物,以3-苯并吡喃酮为基本母核,由于其侧链上具有活性羟基,能够有效清除自由基,抗氧化效果显著^[5,6]。大豆异黄酮具有调控动物机体养分代谢,增强免疫力和提高生产性能等作用^[7,8,9]。【本研究切入点】目前大豆异黄酮在猪上的研究关注点主要集中在生长性能、机体抗氧化方面,而大豆异黄酮对早期断奶仔猪肠道抗氧化作用的报道较少。【拟解决的关键问题】本试验通过在饲粮中添加不同水平大豆异黄酮,探讨其对早期断奶仔猪机体与肠道抗氧化性能的影响,为大豆异黄酮在早期断奶仔猪生产中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验原料

大豆异黄酮由广东省农业科学院动物科学研究所研制开发,纯度为98.5%。大豆浓缩蛋白购于广州菲傲生物科技有限公司,乳清粉购于Glanbia公司,白鱼粉购于CFG公司。

1.2 试验动物分组与设计

试验选用160只胎次相近、体况良好的21日龄断奶的杜×（大×长）三元杂交仔猪（平均重为5.5 kg）,采用单因子随机区组设计,根据体重和性别随机分成5个处理,每个处理4个重复,每重复8头仔猪（公母各半）。各处理组饲粮中分别添加0（对照组）、10、20、40和80 mg·kg^-1异黄酮。试验猪在同一猪舍内饲养,各处理组的饲养管理和环境条件一致。试验期为42d,试猪自由采食、饮水,饲料少量多次投喂,保持饲料的新鲜。饲养试验于2017年在广东省农业科学院动物科学研究所试验基地进行。

1.3 试验饲粮

试验基础饲粮营养水平参考NRC（1998）和中国《猪饲养标准》（2004版）仔猪的饲养标准。基础饲粮组成和营养水平见表1。

Table 1
表1
表1基础饲粮组成和营养水平
Table 1Composition and nutrient levels of the basal diet (as fed basis)

饲粮组成Ingredients	含量Content(%)	营养水平Nutrition level
玉米 Corn	68.48	消化能DE（MJ·kg-1）	13.80
大豆浓缩蛋白soy protein concentrate	16.10	粗蛋白 CP (%)	20.00
乳清粉 Whey	6.00	钙 Ca (%)	0.80
白鱼粉 Fish meal	6.00	总磷 TP (%)	0.61
L-赖氨酸盐酸盐 L-Lysine hydrochloride	0.16	有效磷 AP (%)	0.40
磷酸氢钙 Calcium hydrophosphate	0.48	赖氨酸 Lys (%)	1.34
石粉 Limestone	0.98	蛋氨酸 Met (%)	0.40
食盐 Salt	0.25	苏氨酸Thr (%)	0.86
氯化胆碱 Choline chloride	0.15	色氨酸Trp (%)	0.23
预混料1) Vitamin-mineral premix	1.40
合计 Total	100.00

¹⁾通过预混料向每kg饲粮中提供：铁 100 mg、铜 80 mg、锌 100 mg、锰 60 mg、碘 0.3 mg、硒 0.25 mg、维生素A 10 000 IU、维生素D 1 400 IU、维生素E 40 mg、维生素K₃ 2.50 mg、维生素B₁ 1.50 mg、维生素B₂ 5.0 mg、维生素B₆ 4.0 mg、维生素B₁₂ 0.02 mg、烟酸 25.0 mg、泛酸钙 12.0 mg、叶酸 0.60 mg、生物素 0.10 mg
¹⁾Supplied the following per kilogram of completed diet: Fe 100 mg, Cu 80 mg,Zn 100 mg,Mn 60 mg, I 0.3 mg, Se 0.25 mg, Vitamin A 10 000 IU, Vitamin D₃ 1 400 IU, Vitamin E 40 mg, Vitamin K₃ 2.50 mg, thiamin 1.50 mg, riboflavin 5.0 mg, pyridoxine 4.0 mg, vitamin B₁₂ 0.02 mg, niacin 25 mg, pantothenic calcium 12 mg, folacin 0.60 mg, biotin 0.10 mg

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1.4 测定指标及方法

1.4.1 生长性能 试验开始、断奶7d及结束时,仔猪空腹16h称个体重,统计每重复耗料量,计算试验7及42d仔猪平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。1.4.2 抗氧化指标测定和方法 试验7d及结束时每重复选取体重接近的试验猪2只（公母各1只）,前腔静脉采血,分离血清,分装于Ep管中,-20℃冻存;采血后屠宰取肝脏组织和空肠上段组织,-20℃冻存;使用南京建成生物工程有限公司试剂盒测定血清、肝脏和肠道组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性以及丙二醛（MDA）含量,肝脏组织金属硫蛋白（MT）含量采用镉饱和法测定^[10]。1.4.3 十二指肠粘膜形态结构电镜观察 试验猪屠宰后,小心截取十二指肠中段约1 cm,用冰冷的生理盐水冲洗干净,剪成长宽约为3 mm的正方形小块,以戊二醛溶液固定24 h后,用0.1 mol·L^-1磷酸缓冲液（pH 7.35）漂洗3次,每次15min,然后用1%锇酸固定1 h,再次用0.1 mol·L^-1磷酸缓冲液漂洗,用酒精梯度脱水（50%-70%-80%-90%-100%）两次。第二次脱水后加入无水硫酸铜。再用醋酸异戊酯过渡2次,每次15min,临界点干燥。装台,粘样,IB.5喷金,用电镜（XL30ESEM,日立,日本）扫描、拍照观察十二指肠粘膜形态结构。1.4.4 十二指肠粘膜形态结构光镜观察 试验猪屠宰后,小心截取十二指肠中段约1 cm,用冰冷的生理盐水冲洗干净,经甲醛固定、修整、水洗、脱水、浸蜡、包埋、切片、贴片、烤片,苏木素、伊红染色后,光镜（Nikon Eclipse E100,尼康公司,日本）拍照测量绒毛长度和隐窝深度,详细方法参照文献[11]。1.4.5 外周血液T淋巴细胞亚群参数及淋巴细胞转化率 试验猪前腔静脉采血,使用武汉博士德生物工程公司提供的即用型SABC免疫化染色试剂盒及方法（AEC显色试剂盒染色）测定血液中T淋巴细胞CD₄⁺、CD₈⁺亚群比例,采用MTT法^[12]测定淋巴细胞转化率（CX5型,Beckman仪器公司,美国）。

1.5 统计分析

所有数据采用SAS软件GLM进行统计分析,差异显著者进行DUNCAN多重比较,以P<0.05作为差异显著性判断标准,其中差异显著的指标再进行回归分析,得出回归方程,其中y为检测指标,x为大豆异黄酮添加水平。本试验中所有数据表示方式为：平均值±标准误（Means±S.E.）。

2 结果

2.1 大豆异黄酮对断奶仔猪生长性能的影响

由表2可见,添加大豆异黄酮未显著影响仔猪平均日增重（P>0.05）,整个试验阶段添加大豆异黄酮40 mg·kg^-1组平均日增重高于其它各组（15.45 %—32.59 %）;断奶后8—42 d和整个试验期阶段,大豆异黄酮40 mg·kg^-1组试猪平均日采食量显著高于空白对照组、10 mg·kg^-1大豆异黄酮组和20 mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）,8—42 d 平均日采食量回归方程为：y = -0.1x² +1.57x +340.08（R2 = 0.410 P=0.590）;0—42 d平均日采食量回归方程为：y = -0.008x²+ 1.235x + 312.79（R2 = 0.393 P=0.607）。断奶后8—42 d时,20 mg·kg^-1大豆异黄酮组试验猪料重比显著低于空白对照组和80 mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）,回归方程为：y = 0.0001x² - 0.007x + 1.684（R2 = 0.392 P=0.608）。

Table 2
表2
表2大豆异黄酮对断奶仔猪生长性能的影响
Table 2Effects of dietary soy isoflavone supplementation on growth performance of early-weaned piglets

组别 Group	大豆异黄酮添加水平 Dietary soy isoflavone addition level (mg·kg-1)
	0	10	20	40	80
平均日增重ADG（g）
0-7d	157.91±19.93	158.13±23.53	160.00±20.55	146.37±19.63	144.29±24.07
8-42d	236.12±53.16	221.64±42.26	237.14±35.97	286.92±47.81	249.18±41.59
0-42d	221.71±44.28	205.29±37.61	206.27±38.65	263.83±41.35	228.53±39.03
平均日采食量ADFI（g）
0-7d	176.34±7.09	169.64±9.15	173.66±9.21	162.05±7.00	162.95±6.75
8-42d	366.57±11.92b	334.13±8.73b	332.97±12.43b	421.98±11.57a	396.32±22.08ab
0-42d	334.87±10.96b	306.72±8.14b	306.42±10.25b	378.66±10.15a	357.42±19.51ab
料重比 F/G
0-7d	1.18±0.07	1.11±0.07	1.08±0.07	1.12±0.04	1.15±0.05
8-42d	1.79±0.40a	1.53±0.17ab	1.47±0.13b	1.70±0.28ab	1.77±0.20a
0-42d	1.55±0.08	1.50±0.07	1.51±0.10	1.45±0.02	1.58±0.02

同行数据标不同小写字母表示差异显著P<0.05。下同
In the same line, values followed with different superscript lowercases mean significant difference (P<0.05). The same below

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2.2 大豆异黄酮对断奶仔猪血清及肝脏组织抗氧化性能的影响

由表3可见,添加大豆异黄酮对断奶7天仔猪血清MDA含量无显著影响（P>0.05）。肝脏中MDA含量随大豆异黄酮添加水平提高有降低的趋势,其中添加大豆异黄酮40和80 mg·kg^-1 组试验猪肝脏中的MDA含量显著低于空白对照组和10 mg·kg^-1 大豆异黄酮组,回归方程为：y= 0.001x² - 0.255x + 31.32（R2 = 0.955 P=0.027）,得到大豆异黄酮最适宜添加量为127.5mg·kg^-1。添加大豆异黄酮20mg·kg^-1 组仔猪血清SOD活性显著高于空白对照组、40mg·kg^-1大豆异黄酮组和80mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）,回归方程为：y= -0.005x² + 0.119x + 61.47（R2 = 0.665 P=0.335）。饲粮中添加大豆异黄酮对仔猪血清GSH-Px 活性、肝脏中的SOD活性和MT含量无显著影响（P>0.05）。添加大豆异黄酮10 mg·kg^-1 组肝脏组织GSH-Px 活性显著高于对照组和80 mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）,回归方程为：y= -0.002x² + 0.051x + 65.14（R2 = 0.493 P=0.507）。

Table 3
表3
表3大豆异黄酮对仔猪断奶后7d血清和肝脏抗氧化指标的影响
Table 3Effects of dietary soy isoflavone supplementation on antioxidative indices of early-weaned piglets on day 7 after weaning

组别 Group	大豆异黄酮添加水平 Dietary soy isoflavone addition level (mg·kg-1)
	0	10	20	40	80
丙二醛含量 MDA content
血清 Serum (nmol·L-1)	5.29±0.54	4.40±0.66	4.15±0.90	3.31±0.53	4.38±0.48
肝脏 Liver (nmol·mg-1 protein)	30.34±4.53a	31.07±3.31a	25.16±5.69ab	22.16±3.06b	15.15±2.25b
超氧化物歧化酶活性 SOD activity
血清 Serum (U·L-1)	56.58±3.17bc	64.87±6.28abc	70.37±3.27a	51.43±4.01bc	42.84±5.46c
肝脏 Liver (U·mg-1 protein)	42.48±1.00	43.08±2.88	46.62±2.28	42.85±2.29	42.61±1.66
谷胱甘肽过氧化物酶活性 GSH-Px activity
血清 Serum (U·L-1)	248.80±7.03	249.70±6.76	258.40±5.15	265.41±7.18	251.62±10.39
肝脏 Liver (U·mg-1 protein)	61.79±3.16b	71.59±3.09a	63.60±4.56ab	62.80±2.41ab	57.37±2.49b
金属硫含量 MT content
肝脏 Liver (nmol·g-1 protein)	0.114±0.004	0.153±0.021	0.119±0.012	0.132±0.028	0.170±0.030

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由表4看出,添加大豆异黄酮添加对断奶42d仔猪血清和肝脏组织的MDA含量没有显著影响（P>0.05）,其中添加大豆异黄酮20mg·kg^-1组肝脏组织中MDA含量较空白对照组降低38.98%。添加大豆异黄酮40mg·kg^-1组血清SOD活性显著高于空白对照组、10 mg·kg^-1大豆异黄酮组和80mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）,回归方程为：y= -0.012x²+0.91x + 69.42（R2 = 0.964 P=0.027）,得到大豆异黄酮最适宜添加量为37.92 mg·kg^-1。添加大豆异黄酮20 mg·kg^-1 组肝脏的GSH-Px活性显著高于空白对照组和80 mg·kg^-1 大豆异黄酮组（P<0.05）,回归方程为：y= -0.006x²+0.415x + 62.53（R2 = 0.669 P=0.331）。添加大豆异黄酮对断奶42d仔猪肝脏的MT含量没有显著影响（P>0.05）。

Table 4
表4
表4大豆异黄酮对仔猪断奶后42d血清和肝脏抗氧化指标的影响
Table 4Effects of soy isoflavone on antioxidation parameters of weaned piglets on day 42 after weaning

组别 Group	大豆异黄酮添加水平 Dietary soy isoflavone addition level (mg·kg-1)
	0	10	20	40	80
丙二醛含量 MDA content
血清 Serum (nmol·L -1)	4.21±0.43	4.19±0.36	3.61±0.37	4.20±0.37	4.38±0.46
肝脏 Liver (nmol·mg-1 protein)	5.90±1.38	6.28±0.51	3.60±0.77	5.35±1.14	5.50±1.10
超氧化物歧化酶活性 SOD activity
血清 Serum (U·L -1)	71.08±2.92bc	75.53±7.34bc	80.92±1.78ab	88.05±1.75a	64.73±2.45c
肝脏 Liver (U·mg-1 protein)	42.16±2.50	41.20±1.80	44.96±2.31	41.61±1.07	42.08±1.57
谷胱甘肽过氧化物酶活性 GSH-Px activity
血清 Serum (U·L -1)	234.50±9.99	232.71±8.79	236.29±5.85	249.57±8.67	242.22±7.70
肝脏 Liver (U·mg-1 protein)	61.35±2.46b	65.11±3.40ab	73.46±2.76a	66.87±2.87ab	60.10±2.51b
金属硫含量 MT content
肝脏 Liver (nmol·g-1 protein)	0.119±0.014	0.129±0.016	0.125±0.016	0.100±0.009	0.096±0.013

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2.3 大豆异黄酮对断奶仔猪空肠抗氧化性能的影响

由表5可知,在断奶后7d,饲粮添加大豆异黄酮对断奶仔猪空肠MDA含量、SOD活性、GSH-Px活性,MT含量无显著影响（P>0.05）。断奶后42d,添加大豆异黄酮40和80mg·kg^-1组的空肠SOD活性显著高于对照组（P<0.05）,回归方程为：y= -0.005x²+ 0.484x + 40.66（R2 = 0.860 P=0.140）。添加大豆异黄酮40mg·kg^-1组空肠的GSH-Px活性显著高于对照组和10mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）,回归方程为：y= -0.007x²+0.635x + 19.27（R2 = 0.863 P=0.137）。饲粮大豆异黄酮对空肠的MT含量有显著影响作用,其中添加大豆异黄酮10mg·kg^-1组空肠的MT含量显著高于空白对照组（P<0.05）,回归方程为：y= -0.002x²+ 0.139x + 11.16（R2 = 0.250 P=0.750）。

Table 5
表5
表5大豆异黄酮对断奶仔猪小肠抗氧化指标变化的影响
Table 5Effects of soy isoflavone on small intestinal antioxidation indices of weaned piglets

组别 Group	大豆异黄酮添加水平 Dietary soy isoflavone addition level (mg·kg-1)
	0	10	20	40	80
断奶后7 d Day 7 after weaning
丙二醛含量MDA content (nmol·mg-1 protein)	0.21±0.02	0.25±0.04	0.25±0.03	0.18±0.02	0.21±0.03
超氧化物歧化酶活性SOD activity (U·mg-1 protein)	38.22±3.11	51.51±5.23	53.41±6.37	40.83±4.25	39.97±3.54
谷胱甘肽过氧化物酶活性GSH-Px activity (U·mg-1 protein)	26.08±2.88	29.28±3.03	22.10±1.93	19.99±1.98	25.25±2.22
金属硫蛋白含量MT content (nmol·g-1protein)	5.81±0.74	7.07±1.08	6.48±1.95	4.66±0.53	4.97±1.14
断奶后42 d Day 42 after weaning
丙二醛含量MDA content (nmol·mg-1 protein)	0.27±0.06	0.18±0.04	0.17±0.02	0.20±0.02	0.21±0.03
超氧化物歧化酶活性SOD activity (U·mg-1 protein)	39.04±4.49b	48.21±3.84ab	47.28±2.90ab	52.26±1.90a	50.37±3.40a
谷胱甘肽过氧化物酶活性GSH-Px activity (U·mg-1 protein)	21.07±2.67b	23.68±3.20b	26.62±2.21ab	36.19±2.99a	25.70±3.14ab
金属硫蛋白含量MT content (nmol·g-1 protein)	8.79±0.95b	15.95±1.18a	13.30±1.53ab	12.22±1.78ab	11.05±1.76ab

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2.4 大豆异黄酮对断奶仔猪十二指肠绒毛形态结构的影响

由图1可以看出,断奶后7、42d对照组仔猪十二指肠绒毛成舌状排列,绒毛顶端凹陷且脱落严重,各处理组与对照组相比,十二指肠绒毛损伤程度降低,其中添加大豆异黄酮40mg·kg^-1组仔猪十二指肠绒毛最完整,成柱状排列。

图1

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图1大豆异黄酮对断奶7或42d仔猪十二指肠绒毛形态结构的影响

A: 对照组仔猪十二指肠绒毛（断奶后7d）;B: 10 mg·kg^-1组仔猪十二指肠绒毛（断奶后7d）;C: 20 mg·kg^-1组仔猪十二指肠绒毛（断奶后7d）;D: 40 mg·kg^-1组仔猪十二指肠绒毛（断奶后7d）;E: 80mg·kg^-1组仔猪十二指肠绒毛（断奶后7d）;F: 对照组仔猪十二指肠绒毛（断奶后42d）;G: 10 mg·kg^-1组仔猪十二指肠绒毛（断奶后42d）;H: 20 mg·kg^-1组仔猪十二指肠绒毛（断奶后42d）;I: 40 mg·kg^-1组仔猪十二指肠绒毛（断奶后42d）;J: 80 mg·kg^-1组仔猪十二指肠绒毛（断奶后42d）
Fig. 1Effects of soy isoflavone on duodenum mucosa morphology on day 7 or 42 after weaning

A: Duodenum mucosa morphology of control group on day 7 after weaning; B: Duodenum mucosa morphology of 10·kg^-1 ISO group on day 7 after weaning; C: Duodenum mucosa morphology of 20 mg·kg^-1 ISO group on day 7 after weaning; D: Duodenum mucosa morphology of 40 mg·kg^-1 ISO group on day 7 after weaning; E: Duodenum mucosa morphology of 80 mg·kg^-1 ISO group on day 7 after weaning; F: Duodenum mucosa morphology of control on day 42 after weaning; G: Duodenum mucosa morphology of 10 mg·kg^-1 ISO group on day 42 after weaning; H: Duodenum mucosa morphology of 20 mg·kg^-1 ISO group on day 42 after weaning; I: Duodenum mucosa morphology of 40 mg·kg^-1 ISO group on day 42 after weaning; J: Duodenum mucosa morphology of 80 mg·kg^-1 ISO group on day 42 after weaning

2.5 大豆异黄酮对断奶仔猪免疫指标的影响

由表6可见,添加大豆异黄酮对断奶仔猪7d血液中淋巴细胞转化率、CD₄⁺、CD₈⁺、CD₄⁺/ CD₈⁺无显著影响（P>0.05）。添加大豆异黄酮对断奶仔猪42d的血液中CD₄⁺的水平有显著影响作用,对淋巴细胞转化率、CD₈⁺、CD₄⁺/ CD₈⁺无显著影响（P>0.05）,其中添加大豆异黄酮10、20 mg·kg^-1组血液中CD₄⁺水平显著低于空白对照组和80mg·kg^-1大豆异黄酮组（P<0.05）,回归方程为：y= 0.002x²-0.128x + 31.42（R2 = 0.288 P=0.712）。

Table 6
表6
表6大豆异黄酮对断奶仔猪免疫指标的影响
Table 6Effects of soy isoflavone on immunity index in weaned piglets

组别 Group	大豆异黄酮添加水平Dietary soy isoflavone addition level (mg·kg-1)
	0	10	20	40	80
断奶后7 d Day 7 after weaning
血液淋巴细胞转化率 Lymphocyte proliferation conversion efficiency (OD492)	0.34±0.13	0.33±0.07	0.30±0.07	0.35±0.14	0.36±0.04
CD4+ (%)	34.25±8.85	35.40±6.19	30.75±5.97	31.17±6.05	30.14±4.71
CD8+(%)	23.75±4.35	24.20±4.55	23.75±3.99	20.50±6.25	20.57±3.10
CD4+/ CD8+	1.44±0.33	1.47±0.19	1.30±0.19	1.47±0.29	1.49±0.26
断奶后42 d Day 42 after weaning
血液淋巴细胞转化率 Lymphocyte proliferation conversion efficiency	0.17±0.04	0.19±0.08	0.15±0.06	0.20±0.06	0.17±0.09
CD4+(%)	34.12±2.71a	27.33±2.50b	27.67±4.93b	32.17±4.40ab	33.00±5.34a
CD8+(%)	22.00±3.41	20.17±2.14	20.00±1.79	19.33±3.27	22.43±4.24
CD4+/ CD8+	1.58±0.22	1.36±0.12	1.38±0.21	1.68±0.15	1.51±0.34

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3 讨论

3.1 大豆异黄酮对断奶仔猪生长性能的影响

大豆异黄酮能与下丘脑、垂体中的雌二醇受体进行不同水平的结合,从而影响动物神经内分泌系统促进垂体生长激素的生成和释放以及刺激胰岛素样生长因子-1的增加^[13,14]。也有研究表明,大豆异黄酮能够通过促进转录活性增加组织的蛋白质合成水平^[15];在体外培养试验中发现大豆异黄酮能够促进离体小肠对葡萄糖的吸收和利用^[16];大豆异黄酮还能够促进甲状腺分泌,使血中三碘甲状素原氨酸（T3）、甲状腺素（T4）水平明显升高,提高机体对营养物质的代谢和利用^[17,18]。以上研究说明大豆异黄酮对于机体的生长性能具有促进作用。本试验结果显示,添加大豆异黄酮能够显著的提高断奶仔猪的采食量和饲料转化率,尤其是试验后期断奶7—42d的作用更加明显,说明大豆异黄酮调节动物机体的作用需要一定的时间,结合本试验肠道绒毛电镜的结果认为大豆异黄酮很有可能是通过保护肠道屏障的完整,促进营养物质的消化吸收而提高断奶仔猪的采食量和饲料转化率。CREINER等^[19]分别在断奶仔猪饲粮中添加三羟基异黄酮和二羟基异黄酮（0、200、400、800 mg·kg^-1）,研究其对猪生长和病毒感染的影响,结果表明三羟基异黄酮与二羟基异黄酮都能减少病毒的复制,提高仔猪增重和饲料利用率。郭慧君等^[20]给断奶去势仔猪饲喂5mg·kg^-1大豆异黄酮,仔猪体重较空白对照组增加3.7%,饲料转化率提高33.81%。程忠刚等^[21]报道仔猪日粮中添加20mg·kg^-1大豆黄酮可以提高仔猪日增重,降低料重比。这些试验结果与本试验的相一致。综合分析本试验各阶段测定结果,认为断奶仔猪饲粮中添加40mg·kg^-1大豆异黄酮最适宜。

3.2 大豆异黄酮对断奶仔猪抗氧化性能的影响

断奶后营养源由母乳改为固体饲料,但是仔猪消化系统和免疫系统均发育不完善,易引起仔猪消化能力和抗逆能力差,再加之与母猪分离,诸多因素引起仔猪产生氧化应激^[22]。组织和血清中MDA的含量增高反映了机体内脂质过氧化程度的增大,间接反映细胞受损的程度^[23]。SOD是组织细胞内自由基清除体系中最重要的物质, SOD的活性反映了细胞内清除自由基即抗氧化的能力^[24]。GSH-Px活性对于清除体内多余的自由基,恢复机体正常细胞代谢也同样具有重要作用^[25]。本试验的研究结果显示,断奶仔猪饲粮中添加大豆异黄酮可以显著的降低肝脏中MDA含量,并且随着添加剂量的提高MDA含量水平逐渐降低。低水平（10—40 mg·kg^-1）大豆异黄酮提高机体组织中SOD和GSH-Px活性,高水平（80 mg·kg^-1）反而降低组织中SOD和GSH-Px活性,试验结果说明大豆异黄酮确实对缓解断奶仔猪应激有显著的作用,但是高水平的大豆异黄酮对机体抗氧化作用有负面影响,这个结果与肠道的电镜结果相呼应,高水平的大豆异黄酮会引起小肠绒毛的损伤,造成的原因需要进一步的研究。金属硫蛋白（MT）是与金属离子具有高度亲和性的低分子含量蛋白,具有解毒和调节体积抗氧化功能^[26]。本试验数据显示,添加低水平的大豆异黄酮可以显著提高机体MT的含量,高水平大豆异黄酮反而没有明显提高作用,该结果与抗氧化酶（SOD、GDH-Px）结果一致。断奶后,肠道内环境发生各种变化：微生物、固体饲粮的刺激,使小肠吸收过程中产生大量的自由基破坏肠道细胞膜的完整性,致使肠绒毛萎缩破裂脱落,隐窝深度增大,吸收细胞减少而分泌细胞增多、营养吸收能力降低,肠道修复功能减弱,合成抗氧化酶能力减弱等^[27,28]。本试验研究发现,断奶后7—42d,空白对照组试验猪十二指肠绒毛顶端凹陷萎缩、成舌叶状且出现破裂脱落,肠绒毛密度降低,而饲粮中添加10—40mg·kg^-1大豆异黄酮可以使十二指肠绒毛损伤得到缓解,呈手指状;同时可降低空肠组织MDA含量,提高SOD、GSH-Px活性和MT含量。综合抗氧化生化检测结果和肠道绒毛电镜结果认为断奶仔猪饲粮中添加大豆异黄酮可以在机体发挥清除自由基的作用,同时增强抗氧化酶的活性、提高抗氧化蛋白MT的含量,保护肠道屏障不受到损伤,其中40 mg·kg^-1大豆异黄酮的添加效果最好。

3.3 大豆异黄酮对断奶仔猪机体免疫性能的影响

根据T淋巴细胞表型和功能的不同可分为不同的亚群,只有表达CD4⁺和CD8⁺分子才表明T淋巴细胞进入成熟阶段,检测CD4⁺和CD8⁺淋巴细胞的百分率及二者的比值是评估机体的免疫状态的重要指标^[29]。淋巴细胞转化率也是测定机体细胞免疫功能的主要方法之一^[30]。本试验结果显示,添加大豆异黄酮对于淋巴细胞转化率、CD8⁺和CD4⁺和CD8⁺两者的比值没有显著的作用,还会降低血液中的CD4⁺含量。林映才等^[31]报道大豆异黄酮提高了生长猪血液中T淋巴细胞CD₄⁺/CD₈⁺比值。张响英等^[32]对公仔猪注射乳化后的大豆黄酮,结果胸腺、脾脏重量均有增加趋势。张汤杰等^[33]试验显示,注射大豆黄酮可使公仔猪淋巴细胞增殖反应下降,机体的细胞免疫能力下降;而对母仔猪无影响,其认为植物雌激素对仔猪免疫功能的影响有性别上的差异。有研究报道大豆异黄酮提高动物免疫的机制主要可能是直接作用于免疫器官或者是免疫细胞上的雌激素受体,调节垂体生长激素或者催乳素的分泌从而间接促进免疫功能^[34]。本试验设计为公母混养,可能由于机体雌激素水平不同,导致大豆异黄酮对机体的免疫性能作用不显著,具体原因有待进一步的分析研究。

3.4 大豆异黄酮在断奶仔猪饲粮中的适宜添加量

添加大豆异黄酮对断奶仔猪的平均日采食量、料重比和抗氧化生化指标有显著影响,通过回归分析得出回归方程式,其中只有断奶7d仔猪的血清MDA含量和42d血清中SOD活性这两个指标能够拟合出可信度比较高（R2>0.9,P<0.05）的方程,并得出最适宜添加量分别是127.5和39.72 mg·kg^-1。结合本试验设计的添加水平和具体的试验结果,我们认为断奶仔猪大豆异黄酮最适宜添加量为40mg·kg^-1。

4 结论

饲粮中添加大豆异黄酮可提高断奶仔猪的生长性能,增强血清、肝脏和肠道抗氧化水平,对肠道屏障有一定的保护作用。断奶仔猪大豆异黄酮适宜添加量为40 mg·kg^-1。

参考文献 View Option 原文顺序
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被引期刊影响因子

[1] PIETRO C, GIANFRANCO G . Oxidant/antioxidant balance in animal nutrition and health: The role of protein oxidation
Frontiers in Veterinary Science, 2015,2:48. DOI: 10.3389/fvets.2015.00048.
[本文引用: 1]

[2] MCLAMB B L, GIBSON A J, OVERMAN E L, CHAD S . Early weaning stress in pigs impairs innate mucosal immune responses to enterotoxigenic E. coli challenge and exacerbates intestinal injury and clinical disease
PLoS One, 2013,8(4):e59838. DOI: 10.1371/journal. pone.0059838.
[本文引用: 1]

[3] 赵娇, 周招洪, 梁小芳, 毛湘冰, 陈代文, 余冰 . 葡萄籽原花青素及维生素E对氧化应激仔猪生长性能、血清氧化还原状态和肝脏氧化损伤的影响
中国农业科学, 2013,46(19):4157-4164.
[本文引用: 1]

ZHAO J, ZHOU Z H, LIANG X F, MAO X B, CHEN D W, YU B . Effects of grape seed procyanidins and vitamin E on growth performance, serum REDOX state and liver oxidative damage of piglets under oxidative stress
Scientia Agricultura Sinica, 2013,46(19):4157-4164. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[4] BHATTACHARYYA A, CHATTOPADHYAY R, MITRA S, CROWE S E . Oxidative stress: an essential factor in the pathogenesis of gastrointestinal mucosal diseases
Physiological Reviews, 2014,94(2):329-354.DOI: 10.1152/physrev.00040.2012.
[本文引用: 1]

[5] GAFFER G G, ELGAWISH R A, HMA A, EBAID H M, TAG H M . Dietary soy isoflavones during pregnancy suppressed the immune function in male offspring albino rats
Toxicology Reports, 2018,5:296. DOI: 10.1016/j.toxrep.2018.02.002. eCollection 2018.
[本文引用: 1]

[6] DHAYAKARAN R P A, NEETHIRAJAN S, XUE J, JOHN S . Characterization of antimicrobial efficacy of soy isoflavones against pathogenic biofilms
LWT- Food Science and Technology, 2015,63(2):859-865. DOI: 10.1016/j.lwt.2015.04.053
[本文引用: 1]

[7] ZHOU C, LIN H, GE X, NIU J, WANG J, WANG Y, CHEN L, HUANG Z, YU W, TAN X . The Effects of dietary soybean isoflavones on growth, innate immune responses, hepatic antioxidant abilities and disease resistance of juvenile golden pompano Trachinotus ovatus
Fish & Shellfish Immunology, 2015,43(1):158-166. DOI: 10.1016/j.fsi.2014.12.014. Epub 2014 Dec 23.
[本文引用: 1]

[8] 李方方, 朱涛涛, 张勇, 朱宇旌 . 大豆异黄酮对哺乳母猪生产性能、血液生理生化指标和粪便微生物菌群的影响
动物营养学报, 2015,27(9):2803-2810.
DOI:10.3969/j.issn.1006-267x.2015.09.018URL [本文引用: 1]
本试验旨在研究饲粮中添加大豆异黄酮(SI)对哺乳母猪生产性能、血液生理生化指标及粪便微生物菌群影响。选择平均体重为(151.05±4.53) kg、体况良好及背膘厚和分娩日龄相近的初产大白猪48头,随机分为4组,每组12个重复,每个重复1头母猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮的基础上分别添加5、10和15 mg/kg SI。试验期21 d。结果表明:1)试验组哺乳母猪平均日采食量极显著高于对照组(P<0.01);10 mg/kg SI组21 d泌乳量显著高于对照组(P<0.05),料乳比显著降低于对照组(P<0.05)。2)10 mg/kg SI组哺乳母猪血液生长激素(GH)、三碘甲状腺原氨酸(T₃)、17-β雌二醇(E₂)、催乳素(PRL)、总蛋白(TP)含量显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),四碘甲腺原氨酸(T₄)、甘油三酯(TG)、尿素氮(UN)含量显著低于对照组(P<0.05)。3)10和15 mg/kg SI组乳脂率均显著高于对照组(P<0.05);15 mg/kg SI组乳糖率显著高于对照组(P<0.05);10 mg/kg SI组乳蛋白含量显著高于对照组(P<0.05)。4)试验组粪便大肠杆菌数量均极显著低于对照组(P<0.01),双歧杆菌数量均极显著高于对照组(P<0.01)。由此可见,饲粮中添加适宜水平的SI能改善哺乳母猪的生产性能、血液生理生化指标,维持肠道微生物菌群平衡。哺乳母猪适宜的SI添加水平为10 mg/kg。
LI F F, ZHU T T, ZHANG Y, ZHU Y S . Effects of soybean isoflavones on the production performance, blood physiological and biochemical indexes and fecal microflora of mammalian sows
Chinese Journal of Animal Nutrition, 2015,27(9):2803-2810. (in Chinese)
DOI:10.3969/j.issn.1006-267x.2015.09.018URL [本文引用: 1]
本试验旨在研究饲粮中添加大豆异黄酮(SI)对哺乳母猪生产性能、血液生理生化指标及粪便微生物菌群影响。选择平均体重为(151.05±4.53) kg、体况良好及背膘厚和分娩日龄相近的初产大白猪48头,随机分为4组,每组12个重复,每个重复1头母猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮的基础上分别添加5、10和15 mg/kg SI。试验期21 d。结果表明:1)试验组哺乳母猪平均日采食量极显著高于对照组(P<0.01);10 mg/kg SI组21 d泌乳量显著高于对照组(P<0.05),料乳比显著降低于对照组(P<0.05)。2)10 mg/kg SI组哺乳母猪血液生长激素(GH)、三碘甲状腺原氨酸(T₃)、17-β雌二醇(E₂)、催乳素(PRL)、总蛋白(TP)含量显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),四碘甲腺原氨酸(T₄)、甘油三酯(TG)、尿素氮(UN)含量显著低于对照组(P<0.05)。3)10和15 mg/kg SI组乳脂率均显著高于对照组(P<0.05);15 mg/kg SI组乳糖率显著高于对照组(P<0.05);10 mg/kg SI组乳蛋白含量显著高于对照组(P<0.05)。4)试验组粪便大肠杆菌数量均极显著低于对照组(P<0.01),双歧杆菌数量均极显著高于对照组(P<0.01)。由此可见,饲粮中添加适宜水平的SI能改善哺乳母猪的生产性能、血液生理生化指标,维持肠道微生物菌群平衡。哺乳母猪适宜的SI添加水平为10 mg/kg。

[9] WANG B, WU C . Dietary soy isoflavones alleviate dextran sulfate sodium-induced inflammation and oxidative stress in mice
Experimental and Therapeutic Medicine, 2017,14(1):276-282. DOI: 10.3892/etm.2017.4469. Epub 2017 May 18. Epub 2017 May 18.
[本文引用: 1]

[10] 王冬兰, 程义勇, 蒋与刚, 顾景范 . 大鼠组织中金属硫蛋白测定方法的建立及应用
解放军预防医学杂志, 1995(4):282-285.
[本文引用: 1]

WANG D L, CHENG Y Y, JIANG Y G, GU J F . Establishment and application of metallothionein assay in rat tissues
Journal of Preventive Medicine of Chinese People's Liberation Army, 1995(4):282-285. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[11] 任成林, 田勇, 梁淑珍 . 动物组织HE染色石蜡切片技术的改进
河北北方学院学报(自然科学版), 2007,23(1):41-46.
[本文引用: 1]

REN C L, TIAN Y, LIANG S Z . Improvement of HE staining paraffin section technique for animal tissues
Journal of Hebei North University (Natural Science Edition), 2007,23(1):41-46. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[12] 赵嘉惠, 张华屏, 王春芳 . MTT法在检测细胞增殖方面的探讨
山西医科大学学报, 2007,38(3):262-263.
[本文引用: 1]

ZHAO J H, ZHANG H P, WANG C F . Detection of cell proliferation by MTT assay
Journal of Shanxi Medical University, 2007,38(3):262-263. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[13] 黎桂玉, 段雪琳, 林基勇, 彭岳, 赵铁建 . 大豆异黄酮对围绝经期综合征动物模型性激素水平及病理变化的影响
广西中医药大学学报, 2016,19(3):4-8.
[本文引用: 1]

LI G Y, DUAN X L, LIN J Y, PENG Y, ZHAO T J . Effects of soybean isoflavones on sex hormone levels and pathological changes in animal models of perimenopausal syndrome
Journal of Guangxi University of Traditional Chinese Medicine, 2016,19(3):4-8. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[14] 曹满湖, 罗理成, 孙佳静, 方热军, 朱静波 . 大豆异黄酮对产蛋后期蛋鸡卵巢机能的影响
动物营养学报, 2016,28(8):2458-2464.
[本文引用: 1]

CAO M H, LUO L C, SUN J J, FANG R J, ZHU J B . Effects of soybean isoflavones on ovarian function of laying hens at the late stage of egg production
Chinese Journal of Animal Nutrition, 2016,28(8):2458-2464. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[15] JI S, WILLIS G M, FRANK G R, CORNELIUS S G, SPURLOCK M E . Soybean isoflavones, genistein and genistin, inhibit rat myoblast proliferation, fusion and myotube protein synthesis
Journal of Nutrition, 1999,129(7):1291-1297. DOI: 10.1093/jn/129.7.1291.
[本文引用: 1]

[16] 林成招, 马海田, 邹思湘, 陈伟华, 王国杰 . 大豆异黄酮对大鼠小肠上皮细胞生长及葡萄糖和氨基酸吸收的影响
南京农业大学学报, 2005,1:71-75.
[本文引用: 1]

LIN C Z, MA H T, ZOU S X, CHEN W H, WANG G J . Effects of soybean isoflavones on the growth of small intestinal epithelial cells and the absorption of glucose and amino acids in rats
Journal of Nanjing Agricultural University, 2005,1:71-75. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[17] 朱志宁, 郝振荣, 王明, 蒋林书, 郭玉琴 . 大豆异黄酮对高产奶牛泌乳后期乳腺肥大细胞分泌肿瘤坏死因子-α和表面型免疫球蛋白A水平的影响
动物营养学报, 2011, (1):112-121.
DOI:10.3969/j.issn.1006-267x.2011.01.017URL [本文引用: 1]
本试验旨在研究大豆异黄酮对高产奶牛泌乳后期乳腺免疫功能的影响。选用12头胎次、体重和产奶量相近的泌乳后期中国荷斯坦奶牛，随机分为4组，每组3头。4个组中，D为对照组，饲喂全混合日粮，A、B和C组在全混合日粮的基础上分别添加10、20和30 mg/kg大豆异黄酮。为进一步探索大豆异黄酮对奶牛乳腺免疫细胞的作用，分离采自试验组和对照组奶牛的乳腺肥大细胞，并分别与0（D1）、0.25（A1）、0.50（B1）、0.75 mg/mL（C1）的大豆异黄酮共育。结果表明：1）日粮添加大豆异黄酮后，试验中后期试验组奶牛血清及乳样中的雌激素（E2）、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素（T4）含量比对照组有不同程度地提高；2）试验组乳样中表面型免疫球蛋白A（sIgA）含量呈显著上升趋势（P&lt;0.05），并于试验后期下降至与对照组相当水平，乳腺中sIgA含量试验组显著高于对照组（P&lt;0.05）；3）试验组血清和乳样中的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）明显下降，并于试验后期显著低于对照组（P&lt;0.05），乳腺中TNF-α的含量显著低于对照组（P&lt;0.05）；4）细胞共育试验表明，添加一定浓度的大豆异黄酮（0.50 mg/mL）能够显著降低奶牛乳腺肥大细胞的TNF-α mRNA表达量（P&lt;0.05）。由此得出，本试验条件下，奶牛全混合日粮中添加不同浓度大豆异黄酮能够提高奶牛的乳腺免疫功能，且大豆异黄酮添加量为30 mg/kg 时，能够得到较好的免疫效果。
ZHU Z N, HAO Z R, WANG M, JIANG L S, GUO Y Q . Effects of soybean isoflavones on tumor necrosis factor-ii and surface type immunoglobulin A levels secreted by mammary cells in high-yielding dairy cows at late lactation stage
Chinese Journal of Animal Nutrition 2011, (1):112-121. (in Chinese)
DOI:10.3969/j.issn.1006-267x.2011.01.017URL [本文引用: 1]
本试验旨在研究大豆异黄酮对高产奶牛泌乳后期乳腺免疫功能的影响。选用12头胎次、体重和产奶量相近的泌乳后期中国荷斯坦奶牛，随机分为4组，每组3头。4个组中，D为对照组，饲喂全混合日粮，A、B和C组在全混合日粮的基础上分别添加10、20和30 mg/kg大豆异黄酮。为进一步探索大豆异黄酮对奶牛乳腺免疫细胞的作用，分离采自试验组和对照组奶牛的乳腺肥大细胞，并分别与0（D1）、0.25（A1）、0.50（B1）、0.75 mg/mL（C1）的大豆异黄酮共育。结果表明：1）日粮添加大豆异黄酮后，试验中后期试验组奶牛血清及乳样中的雌激素（E2）、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素（T4）含量比对照组有不同程度地提高；2）试验组乳样中表面型免疫球蛋白A（sIgA）含量呈显著上升趋势（P&lt;0.05），并于试验后期下降至与对照组相当水平，乳腺中sIgA含量试验组显著高于对照组（P&lt;0.05）；3）试验组血清和乳样中的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）明显下降，并于试验后期显著低于对照组（P&lt;0.05），乳腺中TNF-α的含量显著低于对照组（P&lt;0.05）；4）细胞共育试验表明，添加一定浓度的大豆异黄酮（0.50 mg/mL）能够显著降低奶牛乳腺肥大细胞的TNF-α mRNA表达量（P&lt;0.05）。由此得出，本试验条件下，奶牛全混合日粮中添加不同浓度大豆异黄酮能够提高奶牛的乳腺免疫功能，且大豆异黄酮添加量为30 mg/kg 时，能够得到较好的免疫效果。

[18] 陈丽 . 大豆异黄酮对雌性巴马香猪子宫发育和血清免疫指标的影响及其机理
[D]. 长沙:湖南农业大学, 2017.
[本文引用: 1]

CHEN L . Effects of soybean isoflavones on uterine development and serum immunity of female ba-xiang pigs and its mechanism
[D]. Changsha: Hunan Agricultural University, 2017. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[19] GREINER L L, STAHLY T S, STABEL T J . The effect of dietary soy genistein on pig growth and viral replication during a viral challenge
Journal of Animal Science, 2001,79(12):3113-3119. DOI: 10.2527/ 2001.79123113x.
[本文引用: 1]

[20] 郭慧君, 韩正康, 王国杰 . 日粮添加大豆黄酮对去势仔猪生长性能及有关内分泌的影响
中国畜牧杂志, 2002,38(2):17-18.
[本文引用: 1]

GUO H J, HAN Z K, WANG G J . Effects of dietary flavonoids on growth performance and endocrine of castrated piglets
Chinese Journal of Animal Science, 2002,38(2):17-18. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[21] 程忠刚, 林映才, 周桂莲, 余德谦, 蒋守群, 蒋宗勇 . 大豆黄酮对仔猪生产性能及血液生化指标的影响
河南科技大学学报:农学版, 2003,23(4):44-48.
[本文引用: 1]

CHENG Z G, LIN Y C, ZHOU G L, YU D Q, JIANG S Q, JIANG Z Y . Effects of soybean flavonoids on the performance and blood biochemical indexes of piglets
Journal of Henan University of Science and Technology: Agronomy, 2003,23(4):44-48. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[22] 赵莹 . 早期断奶对仔猪消化系统的影响
国外畜牧学-猪与禽, 2014(3):52-53.
[本文引用: 1]

ZHAO Y . Effect of early weaning on digestive system of piglets
Pigs and Poultry, 2014(3):52-53. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[23] 刘永祥, 刘艳丽, 姜东风, 朱宽佑 . 共轭亚油酸和鱼油组合对雄性肉鸡屠体性状、肌肉脂肪酸组成和脂质过氧化状态的影响
动物营养学报, 2015,27(8):2517-2526.
[本文引用: 1]

LIU Y X, LIU Y L, JIANG D F, ZHU K Y . Effects of conjugated linoleic acid and fish oil combination on carcass characteristics, muscle fatty acid composition and lipid peroxidation state of male broilers
Chinese Journal of Animal Nutrition, 2015,27(8):2517-2526. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[24] 张笑天, 郑晓瑛 . 氧化自由基清除剂超氧化物歧化酶与疾病
中国公共卫生, 2014,30(10):1349-1352.
[本文引用: 1]

ZHANG X T, ZHENG X Y . Oxidative radical scavenger superoxide dismutase and disease
China Public Health, 2014,30(10):1349-1352. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[25] YAO X, EI-SAMAHY M A , FAN L , ZHENG L, JIN Y, PANG J, ZHANG G, LIU Z, WANG F . In vitro, influence of selenium on the proliferation of and steroidogenesis in goat luteinized granulosa cells
Theriogenology, 2018,1(114):70-80. DOI: 10.1016/j.theriogenology.2018.03.014.Epub 2018 Mar 20.
[本文引用: 1]

[26] PARK J D, LIU Y, KLAASSEN C D . Protective effect of metallothionein against the toxicity of cadmium and other metals
Toxicology, 2001,163(2-3):93-100. DOI: 10.1016/S0300-483X(01) 00375-4.
[本文引用: 1]

[27] CAIRO P L G, GOIS F D, SBARDELLA M, ALLAMAN I, CANTARELLI V, COSTA L B . Effects of dietary supplementation of red pepper (\r, Schinus terebinthifolius\r, Raddi) essential oil on performance, small intestinal morphology and microbial counts of weanling pigs
Journal of the Science of Food and Agriculture, 2018,98(2):541-548. DOI: 10.1002/jsfa.8494.
[本文引用: 1]

[28] JIAO L F, KE Y L, XIAO K, SONG Z, HU C H, SHI B . Effects of cello-oligosaccharideon intestinal microbiota and epithelial barrierfunction of weanling pigs
Journal of Animal Science, 2015,93(3):1157-1164. DOI: 10.2527/jas2014-8248.
DOI:10.2527/jas.2014-8248URL [本文引用: 1]

[29] GREGORCZYK I MA?LANKA T . Significant expression of Foxp3 in murine extrathymic CD4⁺CD8⁺ double positive T cells
Polish Journal of Veterinary Sciences, 2017,20(4):815-817. DOI: 10.1515/pjvs-2017-0102.
[本文引用: 1]

[30] MAREK S, MARZENA L, MAGDALENA R, SURMAN M, MYTAR B, MATYJA A, SIEDLAR M, KULIG J . Preoperative Neutrophil-Lymphocyte and Lymphocyte-Monocyte Ratios Reflect Immune Cell Population Rearrangement in Resectable Pancreatic Cancer
Annals of Surgical Oncology, 2016,24(3):1-8. DOI: 10.1245/ s10434-016-5634-0. Epub 2016 Oct 21.
[本文引用: 1]

[31] 林映才, 蒋宗勇, 刘建中, 陈建新, 杨晓建, 余德谦, 郑黎, 程忠刚 . 大豆黄素对生长猪的生产性能和血液免疫指标的影响
饲料博览, 2001,6:4-6.
[本文引用: 1]

LIN Y C, JIANG Z Y, LIU J Z, CHEN J X, YANG X J, YU D Q, ZHENG L, CHENG Z G . Effect of daidzein on the production performance and blood immune index of growing pigs
Feed Review, 2001,6:4-6. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[32] 张响英, 王根林, 唐现文, 黄金明 . 大豆黄酮对仔公猪细胞免疫功能的影响
黑龙江畜牧兽医, 2005(1):31-32.
[本文引用: 1]

ZHANG X Y, WANG G L, TANG X W, HUANG J M . effects of soybean flavonoids on cellular immunity in young boars
Heilongjiang Animal Husbandry and Veterinary Medicine, 2005(1):31-32. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[33] 张汤杰, 陈伟华, 陈杰 . 注射大豆黄酮对仔猪淋巴细胞转化率影响的研究
江苏农学院学报, 1998,19(4):86-88.
[本文引用: 1]

ZHANG T J, CHEN W H, CHEN J . Effect of soybean flavone injection on lymphocyte conversion in piglets
Jiangsu Journal of Agricultural Sciences, 1998,19(4):86-88. (in Chinese)
[本文引用: 1]

[34] 张蕊, 姜义宝, 杨玉荣, 梁宏德 . 大豆异黄酮的特性及其应用研究进展
动物营养学报, 2011,23(11):1884-1890.
[本文引用: 1]

ZHANG R, JIANG Y B, YANG Y R, LIANG H D . Characteristics and application of isoflavones in soybean
Chinese Journal of Animal Nutrition, 2011,23(11):1884-1890. (in Chinese)
[本文引用: 1]