翻译出有调控功能的、在原有外显子插入了一段氨基酸序列的蛋白质；
翻译后删除内含子：这是把蛋白质翻译后加工也算入内含子的概念中来。例如图
11－17胰岛素的C肽是不存在于有活性的胰岛素分子上的，如按这一定义，C基因也可
认为是内含子。类似的翻译后加工情况，在真核生物是很常见的。
显然，最初把外显子、内含子分别定义为可翻译与不翻译的组分，是不够恰当的。
因此目前的定义应扩充为：外显子是在断裂基因及其初级转录产物上可表达的片段。内
含于是隔断基因线性表达的序列。
二、tRNA的转录后加工
真核生物的 tRNA由 RNA－po Ill催化生成初级转录产物，然后加工成熟。图 12一21是tRNA的基因及初级产物。比较初级与成熟tRNA，可以看出5’端和分子中部分核苷酸在转录后加工被除去，图中用虚线表示。
从以下实验，可以推论和证实tRNA的剪接是需酶的：①成熟的tRNA能竞争性地
抑制tRNA的剪接；这是酶促反应的特征之一；②tRNA的成熟过程对温度敏感。用这些
原理已造成可供tRNA剪接研究用的酵母细胞株，并证实tRNA的剪接过程如图12－22
所示。
此外，tRNA的转录后加工还包括各种稀有碱基的生成。
（l）甲基化：例如在tRNA甲基转移酶催化下，某些嘌呤生成甲基嘌呤
如 A～mA，G－mG。
（2）还原反应：某些尿嘧啶健还原为双氢尿嘧啶（DHU）。
（3）核苷内的转位反应：如尿嘧啶核苷酸转变为 尿嘧啶核苷酸（Ψ）。
（4）脱氨反应：某些腺苷酸脱氨成为次黄瞟吟核苷酸（I）。次黄嘌呤（inosine）是颇
常见于tRNA的稀有碱基之一。
（5）加上CCA－OH的3’一末端：在核苷酸转移酶作用下，在3’一末端除去个别碱基后，换上tRNA分子统一的CCA－OH末端，完成柄部结构。
三、rRNA的转录后加工
真核细胞的 rRNA基因（rDNA）属于一种称为丰富基因（redundant gene）族的 DNA序
列，即染色体上一些相似或完全一样的纵列串联基因（tandem gene）单位的重复。这些单
位由不能转录的间隔区（spacer）把转录片段分隔组成。注意间隔区和以前提到的内含子是不同的概念。在分类上把rDNA这种类型的序列称为高度重复序列highly repeat sequence）DNA。不同种属的生物，rDNA的大小不一，重复单位［图12－23（l）］可有数百个或至千个以上；每个重复单位（图12－23（2））的可转录片段7kb至13kb比不等，间隔区则为数千bp。尽管有间隔区与重复单位的大小不同，所有真核生物最后转录出来的r RNA大小却相同。
rDNA位于核仁之内，自成一组转录单位。大多数真核生物核内都可发现一种45S的转录产物，它是三种rRNA的前身[图1 2．23（3）]。4 5SrRNA经剪接后，先分出属于核小体小亚基18S-rRNA。余下的部分再拼接成5.8S及28S的rRNA。rRNA成熟后，就在核仁上装配，即与核蛋白体蛋白一起形成核蛋白体，输出胞浆。生长中的细胞，rRNA较稳定，静止状态的细胞，rRNA的寿命较短。
值得一提的是，属于丰富基因族的还有5S-rRNA基因，组蛋白基因，免疫球蛋白的基因等等。
研究rRNA的转录后加工，最近提出了一个生命科学中的重大问题：RNA分子有酶
的作用。这是研究一种叫四膜虫（Tetrahymena）的简单真核生物的rRNA剪接中发现的。
rRNA剪接是一种自我剪接方式。本来,剪接的化学过程应包括磷酸二酯键的断裂和再
连接。大多数的mRNA剪接需并接体参与，这种核蛋白起酶的作用。但在四膜虫rRNA
剪接中，除去了所有蛋白质，剪接仍可完成。研究rRNA的结构发现一定的规律：图
12－24是根据四膜虫rRNA的一级结构绘出的二级结构。参考第三章tRNA的结构，就可
能理解这个图，所以没有列出全部核苷酸序列。图中把5’－端和3’一端要被剪接删除的部
分用粗线表示并列出5’一端的部分碱基序列。线性的RNA分子由于有很多的反向互补序
列，在图上可见形成众多的局部双链区。这是能进行自我剪接的结构依据。
rRNA的剪接不需任何蛋白质参与即可发生，说明RNA本身就有酶的催化作用。由
于 RNA发挥酶的作用，因此把有酶促活性的 RNA命名为核酶（ribozyme）。
现在已知的一个最简单的能进行自我剪接的RNA的结构见图12－25，由于二级结构
与槌头相似而命名为相头结构（hammerhead structure），这也就是核酶能起作用的结构要
求。这是分子内的催化，同一分子上包括有催化部分和底物部分。底物部分就是箭头所
示（切口）附近的核苷酸，注意含有GU的序列。催化部分就是槌头结构：至少含有3个
茎（stem），l至3个环（loop）。碱基部分至少有13个是一致性（consensus）序列，用A，G，C，U标出，其余书写为N的是指任何碱基均可。
核酶大多在古老的生物中发现，有人认为它是现代生物物种内存在的“活”化石，
对研究生命的起源和进化有重大意义。执行生命功能最重要的两类生物大分子，到底是
先有核酸，还是先有蛋白质呢？核酶的发现，还对传统酶学提出挑战。酶沿用的定义是
“活细胞产生的有催化活性的蛋白质”。对世纪80年代中期之前已发现的数千种酶，毫
无例外都是蛋白质；酶的各种理化、动力学、生物学行为，都可以用酶是蛋白质来理解。现在又证明：RNA也可以是酶。如何给酶下～个更准确的定义呢？
更有现实意义的是：由于核酶结构的阐明，可以用人工会成的小片段RNA，配合
