2．非依赖RhO的转录终止 在λ（lambda）噬菌体中，又发现一些蛋白质有协助RNA
聚合酶跨越终止部位的作用。这些蛋白质称为抗转录终止蛋白，例如λ噬菌体的N基因
产物。N基因开放，转录就会继续。但无论Rho因子或抗终止蛋白，都是在模板之外发
生影响的。现在发现，DNA模板上靠近终止处有些特殊碱基序列，转录出RNA后．
RNA产物形成特殊的结构来终止转录。这就是非依赖RhO因子的转录终止的作用方式。
首先是DNA模板接近终止转录的区域内，发现有较密集的A-T配对区或G-C配对
区。据此线索分析转录产物的3’一末端，发现常有若干个连续的地把连续的U区。把连续U区的5’．端前方的一级结构加以排列，在接近终止区发现这些碱基又可形成鼓相状的茎环（stem－loop）或称发夹（hairpin）结构。
图 12－13是大肠杆菌核蛋白体蛋白 Ipl－L（ribosomal protein large subunit）基因 3’一末端的碱基序列。可以形成局部双链的碱基用黑底线画出，碱基英文字母的上方和下方的黑线，分别对应于转录产物二级结构的左图及右图。鼓出的单链用弧线画出。可见，这个
转录终止区产物有两种形成发夹结构的可能。研究其他转录单位，也发现接近终止区的
转录产物有形成发夹结构的情况。
非依赖Rho因子的转录终止模式如图12－14。RNA链延长至接近终止区时，转录出
的碱基序列随即形成茎-环结构。这种二级结构是阻止转录继续向下游推进的关键。其
机制可从两方面理解：一是茎环结构在RNA分子中形成，可能改变RNA聚合酶的构
象。注意RNA聚合酶的分子量大，它不仅覆盖转录延长区，也覆盖部分3’-端新合成的
RNA链，包括RNA的茎环结构。由酶的构象改变导致酶一模板结合方式的改变，可使酶不再向下游移动，于是转录停顿。其二，转录复合物（酶-DNA-RNA）上有局部的RNA：
DNA杂化短链。此时，RNA分子上要形成自己的局部双链（茎环的茎），DNA分子也要
回复双链。DNA和RNA各自形成自身双链，杂化链只能比应有的长度来得更短，本来
不稳定的杂化链更为不稳定，转录复合物趋于解体。至于接着一串寡聚U，则更是使RNA链从模板上脱落的促进因素。因为所有的碱基配对中，以rU：dA配对最为不稳定。
（二）真核生物的转录终止
真核生物的转录终止，是和转录后修饰密切相关的。真核生物mRNA带有聚腺苷酸（
polyA）尾巴的结构，是转录后才加进去的，因为在模板链上没有相应的聚胸苷酸（poly dT）。转录不是在 poly A的位置上终止，而是超出数百个乃至上千个核苷酸后才停顿。已发现，在模板链读码框架的3’端之后，常有一组共同序列AATAAA，再下游还有相当多的GT序列。这些序列称为转录终止的修饰点（图12－15）。
转录越过修饰点后， rnRNA在修饰点处被切断，随即加入poly A尾及5’-帽子结构。
余下的RNA虽继续转录，但很快被RNA酶降解。因此有理由相信，帽子结构是保护RNA免受降解的，因为修饰点以后的转录产物无帽子结构。
第三节真核生物的转录后修饰
转录生成的 RNA是初级转录产物（primary transcripts）。原核生物和真核生物初级转
录产物都需经～定程度的加工才具有活性。真核生物转录和翻译的位置被核膜隔开，转
录后修饰较为复杂。对转录后修饰的研究发现不少与生命活动有重大关系的现象，如真
核生物的断裂基因、内含子的功能、RNA可能是酶等等。本节主要介绍真核生物转录
后修饰（post-transcnptional modification）o
一、真核生物 rnRNA的转录后加工
真核生物mRNA转录后，需进行5’一端和3’一端（首、尾部）的修饰，以及对mRNA链进行剪接（Splicing）。
（－）首、层的修饰
mRNA的帽子结构（GpppmG－）是在5’一端形成的。转录产物第一个核苷酸往往是
又三磷酸鸟苷pppG。mRNA成熟过程中，先由磷酸酶把5’-pppG――水解，生成5’一
ppG——或 5’－pG－－，释放出无机焦磷酸。然后， 5’一端与另一三磷酸鸟苷（pppG）反应，生成三磷酸双鸟苷。在甲基化酶作用下，第一或第二个鸟嘌呤碱基发生甲基化反应，形成帽子结构，其反应过程如图12－16．
帽子结构常出现于核内的hnRNA，说明5’一端的修饰是在核内完成的，而且先于对
mRNA链中段的剪接过程。帽子结构的功能，是和翻译过程有关的。真核生物细胞中已
发现一种能特异性结合mRNA帽子结构的蛋白质(见第十三章表13－4》并作为翻译起始必
需的一种因子。原核生物mRNA没有帽子结构。
3’一端的修饰主要是加上聚腺苷酸尾巴（polyA tail）。根据在大多数已研究过的基因
中，都没有 3’一端多聚 T相应序列的事实，可以说明 poly A的出现是不依赖 DNA模板
的。转录最初生成的 mRNA 3’一末端往往长于成熟的 mRNA。因此认为，加入 poly A之
前，先由核酸外切酶切去3’一末端一些过剩的核苷酸，然后加入polyA。在hnRNA上也
发现 poly A尾巴，推测这一过程也应在核内完成，而且先于mRNA中段的剪接。尾部修
饰是和转录的终止同时进行的过程，见图12－15。
poly A的长度很难确定，因其长度随 mRNA的寿命而缩短，而且都经过提取阶段才
进行测定，能否准确从数量反映体内情况是个问题。随着 poly A缩短，翻译的活性下
降。因此推测 poly A的有无与长短，是维持 mRNA作为翻译模板的活性，以及增加 m
