删除或更新信息,请邮件至freekaoyan#163.com(#换成@)

等离子体活化水灭活金黄色葡萄球菌生物膜

本站小编 Free考研考试/2021-12-31

汪家权1,,,
周小霞1,
许子牧1,
胡淑恒1,
俞志远1,
蔡秋晨1,
程诚2,
沈洁2,
兰彦2
1.合肥工业大学资源与环境工程学院,合肥 230009
2.中国科学院等离子体物理研究所,合肥 230031
作者简介: 汪家权(1957—),男,博士,教授。研究方向:水处理技术。E-mail:13965121128@163.com.
通讯作者: 汪家权,13965121128@163.com ;

中图分类号: X33


Inactivation of Staphylococcus aureus biofilm byplasma-activated water

Jiaquan WANG1,,,
Xiaoxia ZHOU1,
Zimu XU1,
Shuheng HU1,
Zhiyuan YU1,
Qiuchen CAI1,
Cheng CHENG2,
Jie SHEN2,
Yan LAN2
1.School of Resources and Environmental Engineering, Hefei University of Technology, Hefei 230009, China
2.Institute of Plasma Physics, Chinese Academy of Sciences, Hefei 230031, China
Corresponding author: Jiaquan WANG,13965121128@163.com ;

CLC number: X33

-->

摘要
HTML全文
(6)(0)
参考文献(16)
相关文章
施引文献
资源附件(0)
访问统计

摘要:利用大气压空气等离子体诱导生成的活化水(PAW)对金黄色葡萄球菌生物膜的失活效果和机制开展研究。采用菌落形成单位方法对生物膜失活效果进行了评价;采用刃天青荧光染色方法研究了细胞的新陈代谢能力;采用H2- DCFDA荧光染色法检测了细胞内活性氧的浓度;采用分光光度法检测了活化水中具有代表性长寿命活性组分浓度。结果表明,60 min产生的活化水浸泡30 min后,菌落形成单位从107.4减少到102.6;生物膜中约70%的细菌丧失了新陈代谢能力;活化水处理后,生物膜细菌胞内活性氧(ROS)的浓度有明显升高趋势;随着等离子体处理时间的延长,活性基团H2O2、NO2-、O3的浓度均有不同幅度地提高。综合以上分析,等离子体活化水具有良好的灭菌效果,而且活化水中积累的大量活性基团与细胞内ROS协同作用可能是生物膜失活的主要原因。
关键词: 等离子体活化水/
生物膜失活/
金黄色葡萄球菌生物膜

Abstract:The deactivation effect and antimicrobial mechanism of Staphylococcus aureus biofilm by the plasma activated water (PAW) induced by atmospheric pressure air plasma were studied. The colony forming units (CFU) method was used to estimate the deactivation effect of biofilm, and the resazurin fluorescence staining method was used to study the metabolic rate of cells. The intracellular reactive oxygen and concentration of representative long-life active components in plasma activated water were detected by H2-DCFDA fluorescence staining and spectrophotometry, respectively. The results showed that after 30 minutes immersion in activated water generated in 60 minutes, the number of CFU decreased from 107.4 to 102.6, about 70% bacteria in the biofilm lose their metabolism. The concentration of intracellular reactive oxygen species (ROS) in biofilm significantly increased after plasma activated water treatment. With the extension of plasma treating time, the concentrations of H2O2, NO2- and O3 in plasma activated water increased in varying degrees. Based on the above analysis, the plasma activated water has a good sterilization performance, and the synergistic effect of a large number of active groups accumulated in activated water and intracellular ROS may be the main reason for biofilm inactivation.
Key words:plasma activated water (PAW)/
biofilm inactivation/
Staphylococcus aureus biofilm.

加载中

图1实验装置示意图
Figure1.Experimental device diagram


下载: 全尺寸图片幻灯片


图2等离子体源发射光谱
Figure2.Plasma source emission spectra


下载: 全尺寸图片幻灯片


图3活性物质含量随等离子体时间的变化
Figure3.Changes of active substance content with plasma treatment time


下载: 全尺寸图片幻灯片


图4等离子体活化水处理金黄色葡萄球菌生物膜后细菌存活曲线
Figure4.Bacterial survival curve of staphylococcus aureus biofilm treated by plasma-activated water


下载: 全尺寸图片幻灯片


图5活化水处理后具有新陈代谢能力细菌所占百分比
Figure5.Percentage of bacteria with metabolic capacity after plasma-activated water treatment


下载: 全尺寸图片幻灯片


图6活化水处理金黄色葡萄球菌生物膜后胞内ROS含量变化图
Figure6.Changes of ROS content in bacterial cells after treatment with plasma activated water


下载: 全尺寸图片幻灯片


[1] 陈梦越, 李乐之.慢性伤口细菌生物膜相关微环境的研究进展[J].中华护理杂志, 2016, 51(12): 1483-1486. doi: 10.3761/j.issn.0254-1769.2016.12.015
[2] CLINTON L, CARTER T. Chronic wound biofilms: Pathogenesis and potential therapies[J]. Laboratory Medicine, 2015, 46(4): 277-284. doi: 10.1309/LMBNSWKUI4JPN7SO
[3] HAERTEL B, VON WOEDTKE T, WELTMANN K D, et al. Non-thermal atmospheric-pressure plasma possible application in wound healing[J]. Biomolecules & Therapeutics, 2014, 22(6): 477-490.
[4] 聂红, 王云英.细菌生物膜形成与慢性难愈性创面相关性的研究进展[J].中国微生态学杂志, 2012, 24(7): 661-664.
[5] 徐元玲, 蒋琪霞, 王建东.慢性伤口细菌生物膜处理方法的研究进展[J].中华护理杂志, 2014, 49(11): 1382-1386. doi: 10.3761/j.issn.0254-1769.2014.11.023
[6] 施德仕, 邵海枫.细菌生物膜感染的研究进展[J].医学研究生2011, 24(12): 1319-1323. doi: 10.3969/j.issn.1008-8199.2011.12.023
[7] PERCIVAL S L, HILL K E, MALIC S, et al. Antimicrobial tolerance and the significance of persister cells in recalcitrant chronic wound biofilms[J]. Wound Repair and Regeneration, 2011, 19: 1-9. doi: 10.1111/j.1524-475X.2010.00651.x
[8] 许子牧.大气压低温等离子体失活金黄色葡萄球菌及其机理研究[D].合肥: 中国科学技术大学, 2015.http://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-10358-1015581034.htm
[9] XIANG Q S, KANG C D, ZHAO D B, et al. Influence of organic matters on the inactivation efficacy of plasma-activated water against E. coli O157:H7 and S. aureus[J]. Food Control, 2019, 99: 28-33. doi: 10.1016/j.foodcont.2018.12.019
[10] XIANG Q S, KANG C D, NIU L Y, et al. Antibacterial activity and a membrane damage mechanism of plasma-activated water against Pseudomonas deceptionensis CM2[J]. LWT-Food Science and Technology, 2018, 96: 395-401. doi: 10.1016/j.lwt.2018.05.059
[11] CHEN T P, SU T L, LIANG J T. Plasma-activated solutions for bacteria and biofilm inactivation[J]. Current Bioactive Compounds, 2017, 13(1): 59-65.
[12] 李新圃, 罗金印, 杨峰, 等.金黄色葡萄球菌生物膜形成机制及中药调控作用的研究进展[J].中兽医医药杂志, 2018, 37(6): 21-25.
[13] 胡晓丰, 史云, 戚丽华, 等.金黄色葡萄球菌生物膜形成机制研究进展[J].生物技术通讯, 2014, 25(5): 714-718. doi: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.05.026
[14] ZHANG Z L, SHEN J, CHENG C, et al. Generation of reactive species in atmospheric pressure dielectric barrier discharge with liquid water[J]. Plasma Science and Technology, 2018, 20(4): 61-66.
[15] QI Z H, TIAN E Q, SONG Y, et al. Inactivation of Shewanella putrefaciens by plasma activated water[J]. Plasma Chemistry and Plasma Processing, 2018, 38(5): 1035-1050. doi: 10.1007/s11090-018-9911-5
[16] PAN J, LI Y L, LIU C M, et al. Investigation of cold atmospheric plasma-activated water for the dental unit waterline system contamination and safety evaluation in vitro[J]. Plasma Chemistry and Plasma Processing, 2017, 37(4): 1091-1103. doi: 10.1007/s11090-017-9811-0



加载中


Turn off MathJax -->
WeChat 点击查看大图



图( 6)
计量

文章访问数:1235
HTML全文浏览数:1210
PDF下载数:42
施引文献:0
出版历程

收稿日期:2019-01-24
录用日期:2019-03-15
网络出版日期:2019-09-30
-->刊出日期:2019-07-26




-->








等离子体活化水灭活金黄色葡萄球菌生物膜

汪家权1,,,
周小霞1,
许子牧1,
胡淑恒1,
俞志远1,
蔡秋晨1,
程诚2,
沈洁2,
兰彦2
通讯作者: 汪家权,13965121128@163.com ;
作者简介: 汪家权(1957—),男,博士,教授。研究方向:水处理技术。E-mail:13965121128@163.com 1.合肥工业大学资源与环境工程学院,合肥 230009
2.中国科学院等离子体物理研究所,合肥 230031
收稿日期: 2019-01-24
录用日期: 2019-03-15
网络出版日期: 2019-09-30
基金项目: 国家自然科学基金资助项目51777206 国家自然科学基金资助项目51541807 国家自然科学基金资助项目41372246 安徽省自然科学基金资助项目1708085MB47 安徽省自然科学基金资助项目1708085MA13 合肥工业大学博士专业研究基金资助项目JZ2016HGBZ0768 合肥工业大学博士专业研究基金资助项目JZ2017HGBZ0944
关键词: 等离子体活化水/
生物膜失活/
金黄色葡萄球菌生物膜
摘要:利用大气压空气等离子体诱导生成的活化水(PAW)对金黄色葡萄球菌生物膜的失活效果和机制开展研究。采用菌落形成单位方法对生物膜失活效果进行了评价;采用刃天青荧光染色方法研究了细胞的新陈代谢能力;采用H2- DCFDA荧光染色法检测了细胞内活性氧的浓度;采用分光光度法检测了活化水中具有代表性长寿命活性组分浓度。结果表明,60 min产生的活化水浸泡30 min后,菌落形成单位从107.4减少到102.6;生物膜中约70%的细菌丧失了新陈代谢能力;活化水处理后,生物膜细菌胞内活性氧(ROS)的浓度有明显升高趋势;随着等离子体处理时间的延长,活性基团H2O2、NO2-、O3的浓度均有不同幅度地提高。综合以上分析,等离子体活化水具有良好的灭菌效果,而且活化水中积累的大量活性基团与细胞内ROS协同作用可能是生物膜失活的主要原因。

English Abstract






--> --> --> 慢性伤口(chronic wounds)是接受超过四周的治疗,不能愈合、也无愈合倾向的伤口[1]。它的特征是容易反复感染、久治不愈,还会导致很高的发病率和死亡率[2]。近几年有关细菌生物膜在慢性伤口形成中的作用引起了人们关注,有相当多的报告表明,细菌生物膜存在于慢性创面,是阻碍愈合过程的一个重要因素,是治疗感染一个主要问题[3-5]。目前临床上多使用抗生素治疗细菌生物膜感染。抗生素对浮游细菌有强大的杀灭能力,但对于存在于慢性伤口的生物膜,即使长期使用抗生素,也可能不能被完全清除。这是因为生物膜(biofilm)是细菌在生长过程中附着于非生物或生物表面的被细菌自身产生的多聚基质包裹的菌细胞群[6]。作为特殊的生长方式它可保护细菌抵抗抗菌药物的作用,形成特异性和非特异性的耐药性[7]。这使得慢性伤口感染治疗成本急剧增加,因此,急需找到一种高效灭活生物膜细菌的方法,这对伤口感染治疗和慢性伤口愈合具有重大意义。
等离子体放电可产生电离气体、分子、带电粒子、负离子/正离子、电子、光子和自由基组等活性组分[8],因为高效、快速、无污染、可直接作用于人体等优点,被越来越多地被应用于医疗灭菌和消毒研究中。其中活性氧和活性氮被认为在灭菌工作中起主导作用。感染的慢性伤口通常被生物膜和渗出组织液覆盖,有限的穿透力使等离子诱导产生的活性物质极难穿透渗出组织液与细菌生物膜充分接触,这可能极大地限制了等离子体在慢性伤口治疗中的应用。根据最新的报道,除了气态等离子体具有抗菌作用外,由等离子体诱导产生的活化水也能有效失活多种细菌、生物膜[9-11]。与直接等离子处理相比,溶液的均匀性和流体的良好流动性使得活化水中活性组分均匀覆盖于受感染伤口生物膜上,同时,活化水还可以避免电流和紫外线辐射,而且操作方便,利于临床使用。
金黄色葡萄球菌生物膜是自然界、住院病房和人体内最常见的革兰氏阳性病原菌之一[12-13],特别是在人体皮肤伤口上容易形成金黄色葡萄球菌生物膜。本研究以金黄色葡萄球菌生物膜为模型,研究了活化水对金黄色葡萄球菌生物膜的失活效果。通过细胞代谢能力、细胞内活性氧含量等生物学效应测定和长寿命活性组分含量检测,探讨了活化水的杀菌机理,以期为有效抑制金黄色葡萄球菌生物膜的感染提供有价值的参考。

自制等离子体反应器,高压电源,酶标仪(Varioskan Flash, Thermo-Fisher Scientific, US),纯水机,分析天平,振荡器,培养箱,PhotoLab6100分光光度计,AvaSpec-2048-8-RM光谱仪。

金黄色葡萄球菌(NCTC-8325),胰蛋白胨大豆肉汤(TSB),刃天青染料(Sigma, USA),2'7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(H2-DCFDA) (Sigma, USA),盐(NaCl,分析纯),葡萄糖(C6H12O6,分析纯),过氧化氢检测试剂盒(18789)MERCK、亚硝酸根离子检测试剂盒(00609)MERCK、臭氧检测试剂盒(00607)MERCK。

利用直流高压放电产生空气低温等离子制备活化水(PAW)。图 1为实验装置图。其中,低温等离子体装置由6根铜电极组成,与高压源、电阻相连接。工作气体为周围的空气,直流驱动电压为10 kV,放电峰值电流约为5 mA,大气压低温等离子体的气体温度约为300 K。等离子体装置的铜电极针头与水溶液(去离子水)界面之间的距离保持在1 cm,铜电极由直流高压驱动,在针头与水溶液界面之间产生等离子体,等离子中活性组分扩散进入水溶液中或与水溶液反应形成等离子体活化水。



等离子体分别处理无菌去离子水0、15、30、60 min,获得活化水。每次取1 mL活化水完全覆盖于生物膜表面,浸泡30 min后移除活化水,用无菌去离子水冲洗生物膜以避免活化水中长寿命活性组分产生的滞留效应。

从胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)培养皿中分离出单个金黄色葡萄球菌NCTC-8325菌落于1 mL的TSB溶液中,在温度为37 ℃、转速为225 r·min-1的条件下,过夜培养。过夜培养后的细菌悬液与TSBG (TSB溶液加0.6%的葡萄糖和盐)溶液按1:100比例混合后,被转移到载有玻璃片(直径为5 mm)的24孔板中(2.5 mL·孔-1)。在37 ℃培养箱中静置培养12 h后,取出生物膜于直径为35 mm的培养皿中,用无菌去离子水轻轻洗去生物膜上的浮游细菌和培养基质。然后将生物膜置于37 ℃培养箱中干燥,直至生物膜表面水分被完全蒸发,将生物膜取出备用。

采用分光度法(PhotoLab 6100, WTW, Germany)测定活化水中代表性长寿命活性组分含量(过氧化氢、亚硝酸盐、臭氧),检测试剂盒为分别为过氧化氢检测试剂盒(18789)MERCK、亚硝酸根离子检测试剂盒(00609)MERCK、臭氧检测试剂盒(00607)MERCK。

本实验通过计算培养皿上的CFU数量来观察活化水对生物膜的杀菌效果。每组实验中,将经活化水处理后的生物膜置于装有1 mL无菌去离子水的10 mL试管中,超声水浴分散15 min,得到原始细菌悬液。用连续10倍系列稀释法将其稀释至适当浓度。选择适当浓度的细菌悬液,取100 μL于TSB琼脂板上。利用涂布棒使细菌悬液均匀覆盖琼脂板。在37 ℃培养箱中静置培养12 h,对隔夜培养的琼脂板进行计数,评估活化水的抗生物膜能力。

刃天青(7-hydroxy-3H-phenoxazin-3-one 10-oxide)是一种对细胞无毒害、不影响细胞代谢的氧化还原染料。被灭活的细菌细胞丧失了代谢能力,不能还原刃天青染料,继而不能产生荧光信号。然而活细胞内还原酶能够将蓝色的刃天青染料转变为粉红色的荧光物质试卤灵(7-Hydroxy-3H-phenoxazin-3-one),改变了样品的荧光强度,使用荧光酶标仪检测吸光度(激发波长为560 nm/590 nm)。根据吸光度的大小可以快速判定细胞的新陈代谢能力。具有新陈代谢能力的细菌所占的百分比通过与对照组(100%)的比较来获得。在实验中,用超声水浴将细菌从被处理过的生物膜中分离出来,细菌悬液与刃天青染料(10%)(Sigma, St. Louis, MO, USA)充分混合,在振荡器中培养(37 ℃、80 r·min-1)2.5 h后。将混合悬液转移到96孔板(200 μL·孔-1),准备检测。所有染色和检测过程均在避光条件下进行。

本实验使用检测活性氧含量的荧光探针是2', 7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯(H2-DCFDA)。H2-DCFDA本身没有荧光,可以穿过细胞膜,进入细菌胞内后被细胞内的酯酶水解,脱掉双乙酸基,生成2', 7'-二氯二氢荧光素(DCFH)。DCFH不能通过细胞膜,故该探针可被装载到细胞内。无荧光强度的DCFH可以将细胞内ROS氧化生成带荧光的2', 7'-二氯荧光素(DCF)。DCF荧光强度能够定量反映细胞内ROS的水平。在每组实验中,将处理后的生物膜细菌悬液与稀释后的H2-DCFDA染液(1:1)混合后,转移到96孔板(200 μL·孔-1)。在37 ℃温度下静置培养25 min,使用酶标仪(Varioskan Flash, Thermo-Fisher Scientific, US)检测荧光强度,激发波长为488 nm/525 nm,所有染色过程在避光条件下进行。

等离子体源200~900 nm的典型发射光谱如图 2所示。在300~450 nm和600~800 nm处发现了强烈的发射峰群,在777.2 nm和844.6 nm处观察到激发的原子氧(O)。低温等离子体放电,产生的电子、离子、自由基等气相基团转移到水中,引发一系列复杂化学反应,生成活性氧(ROS)和活性氮(RNS)[10]。其中包括H2O2、NO2-、O3等长寿命组分和OH-、O2-、ONOO-等短寿命组分。过氧化氢[12]主要通过式(1)和式(2)反应生成。


臭氧主要通过式(3)~式(5)反应生成。
NO2-主要通过NO、O2、O3和H2O发生一系列络合加成反应而形成。
由于短寿命物种半衰期较短,本研究仅检测了活化水中3种代表性长效活性组分(H2O2、O3、NO2-)的浓度。如图 3所示,等离子体处理60 min后,H2O2的浓度上升趋势最为明显,从0 mg·L-1显著升高到227 mg·L-1。NO2-浓度也显著上升,以先快后慢的趋势增长到180 mg·L-1。相比较而言,O3的浓度上升较为缓慢,在等离子体处理60 min后,浓度仅有5.8 mg·L-1,这可能是臭氧较难溶于水的缘故。


活化水中的活性氧被认为在细菌失活中起主要作用,作为具有强抗菌活性的氧化剂,H2O2可以与细菌组分发生反应,造成DNA和蛋白质的氧化损伤[10],O3可以与碳氢键发生反应,使细菌的细胞壁变得薄弱。作为主要的活性氮,NO2-是造成水溶液的酸化的主要原因之一。在酸性环境中,H2O2可以与NO2-发生反应,形成ONOO-,这种物质具有高度的细胞毒性,通过细胞壁通道扩散,造成细胞壁破裂[14]。除此之外,活性物质诱导的氧化应激也是造成细菌细胞损伤和死亡的主要原因之一[15]

采用菌落计数法分析等离子体活化水对金黄色葡萄球菌生物膜的灭活效果。在图 4中,金黄色葡萄球菌生物膜的灭菌效果表现出等离子体处理与时间的依赖性,随着等离子体处理时间的增加,存活的生物膜细菌逐渐减少。等离子体处理30 min,活化水浸泡30 min时,生物膜中存活的细菌下降了2.2个数量级左右。而当等离子体处理时间延长到60 min,活化水浸泡30 min后,大约有4.8个数量级的细菌被灭活。PAN等[16]研究发现活化水的抗生物膜活性随大气压等离子体处理时间的增加而增加,经大气压等离子体活化水处理5 min后,5 d大粪肠球菌生物膜细菌减少了7个数量级,较高的灭菌效果可能是生物膜放置在水溶液中,等离子体直接处理,短寿命组分与长寿命组分共同作用的结果。



利用刃天青染料量化具有代谢能力的活细胞数量百分比。如图 5所示,随着等离子体处理时间的延长,具有代谢能力的活细菌数量百分比呈下降趋势。未经等离子体处理时(对照组),活化水浸泡30 min后,生物膜中具有代谢能力的活细菌为100%,等离子体处理延长到30 min,活化水浸泡30 min后,生物膜中具有代谢能力的活细菌数量百分比快速下降到44%。等随着离子体处理时间继续延长,最终具有新陈代谢能力活细菌比例只有30%。



ROS包括多种活性含氧离子、分子和自由基。在维持细胞功能稳定、细胞信号传递中起重要作用。利用荧光探针2', 7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯,使用酶标仪对生物膜中细菌的胞内ROS浓度进行定量检测。图 6显示了胞内ROS含量与等离子体处理时间对应的函数关系。随着等离子体处理时间的延长,细胞内ROS浓度逐渐上升,60 min后最终达到初始细菌ROS浓度的1.16,有明显上升趋势。



活化水中活性基团浓度随着等离子体处理时间的增长而积累,高浓度的活性基团会与细胞组分发生反应,破坏细胞膜结构,造成细菌DNA和蛋白质的氧化损伤。除此之外,作为外源ROS的信号分子,活性氧和活性氮诱导了细菌发生氧化应激反应。干扰了细胞内正常氧化还原系统的平衡,刺激细胞内ROS的产生。胞内ROS积累到一定量后,也会攻击细胞结构,造成细菌的失活。胞内ROS与胞外活性基团协同作用可能是造成细菌失活的主要原因。值得注意的是失活实验中,将菌落计数法的结果与新陈代谢能力测定结果比较发现,有一部分细菌不能够培养发育但是却拥有新陈代谢能力。这可能是可能进入假死(VBNC)的状态,当细菌面临氧化应激、低温、低营养、渗透胁迫等环境压力时,会进入VBNC状态。此状态下细菌不能发育繁殖,但能够利用营养物质维持自身新陈代谢。作为不利的环境因素,活化水中的长效活性组分(H2O2、NO2-、O3)会抑制细菌的生长,破坏细菌结构,同时诱导细菌发生氧化应激反应,促使一部分细菌进入了假死状态。VBNC细菌具有完整的细胞膜结构和遗传信息,通过产生信使RNA进行基因转录。活化水中活性组分在不同程度上抑制了相关基因的表达,这可能是数据出现差异的主要原因。

1) 等离子体活化水处理对金黄色葡萄球菌生物膜有明显的抗生物膜作用,延长等离子体的处理时间可以加强失活效果。
2) 等离子体处理60 min后,水中长寿命活性组分浓度有不同程度地提高,生物膜中有4.8个数量级的细菌被灭活。刃天青检测表明,还有30%细菌保持新陈代谢能力。差异性结果表明,一些细菌可能进入了可存活不能培养的(VBNC)的状态。
3) 活化水处理后,细菌胞内ROS含量升高,随着等离子体处理时间的增加,细菌胞内ROS含量持续增加,在等离子体处理60 min后达到最大值。
4) 活化水中积累的大量活基团与细胞内ROS协同作用可能是生物膜细菌失活的主要原因。

参考文献 (16)
相关话题/生物 细胞 实验 培养 物质

  • 领限时大额优惠券,享本站正版考研考试资料!
    大额优惠券
    优惠券领取后72小时内有效,10万种最新考研考试考证类电子打印资料任你选。涵盖全国500余所院校考研专业课、200多种职业资格考试、1100多种经典教材,产品类型包含电子书、题库、全套资料以及视频,无论您是考研复习、考证刷题,还是考前冲刺等,不同类型的产品可满足您学习上的不同需求。 ...
    本站小编 Free壹佰分学习网 2022-09-19
  • 人工湿地型微生物燃料电池处理啤酒生产废水
    吴玥1,,董军1,李文德1,王云1,秦传玉11.吉林大学新能源与环境学院,长春130021基金项目:国家自然科学基金资助项目41572213国家自然科学基金资助项目(41572213)Treatmentofbrewerywastewaterbyconstructedwetlandmicrobialf ...
    本站小编 Free考研考试 2021-12-31
  • 反硝化生物滤池反冲洗周期优化及水力特性
    金秋1,,陈昊1,崔敏华1,2,3,张衍1,2,3,郑志永1,2,刘和1,2,31.江南大学环境与土木学院,无锡2141222.江苏省厌氧生物技术重点实验室,无锡2141223.江苏省水处理技术与材料协同创新中心,苏州215009基金项目:江苏省太湖水环境综合治理科研课题资助项目TH2016201江 ...
    本站小编 Free考研考试 2021-12-31
  • 单室双阳极微生物电解池利用氢发酵废水产氢
    何盛东1,,陈思2,樊耀亭21.郑州航空工业管理学院土木建筑学院,郑州4500062.郑州大学化学与分子工程学院,郑州450001基金项目:国家自然科学基金资助项目21171147,50578148河南省高等学校重点科研项目17A560012国家自然科学基金资助项目(21171147,5057814 ...
    本站小编 Free考研考试 2021-12-31
  • 非缓冲微生物燃料电池运行性能及无机碳积累
    陈金丽1,,吕莹1,王悦1,李秀芬1,王新华11.江南大学环境与土木工程学院,江苏省厌氧生物技术重点实验室,江苏省水处理技术与材料协同创新中心,无锡214122基金项目:江苏省自然科学基金面上项目BK20171141江苏省自然科学基金面上项目(BK20171141)Operationperforma ...
    本站小编 Free考研考试 2021-12-31
  • 黑麦草修复重金属污染土壤与废水及富集植物的微生物降解
    敬路淮1,,肖伟1,田甲1,戚鑫1,肖诗琦1,晏婷婷1,张祥辉11.西南科技大学生命科学与工程学院,绵阳621010基金项目:国家核设施退役及放射性废物治理科研重点项目16ZG6101国民核生化灾害防护国家重点实验室开放基金项目SKLNBC2015-04四川省科技厅项目18YYJC0927国家核设施 ...
    本站小编 Free考研考试 2021-12-31
  • 壳聚糖/磁性生物碳对重金属Cu(Ⅱ)的吸附性能
    肖芳芳1,,张莹莹1,程建华1,2,,杨草1,胡勇有11.华南理工大学环境与能源学院,广州5100062.华南理工大学华南协同创新研究院,东莞523808基金项目:国家自然科学基金资助项目U1401235广东省应用型科技研发项目2016B020240005中央高校基本科研业务费专项基金D217260 ...
    本站小编 Free考研考试 2021-12-31
  • 生物基质对SWIS脱氮效果及微生物的影响
    严群1,,丁越1,2,温慧凯1,2,刘馥雯1,2,胡晋博1,2,蔡若宇1,21.江西理工大学建筑与测绘工程学院,赣州3410002.江西理工大学赣江流域水质安全保障工程技术研究中心,赣州341000Effectofbiologicalmatrixondenitrificationandmicroor ...
    本站小编 Free考研考试 2021-12-31
  • 城镇有机垃圾热解生物炭对水中亚甲基蓝的吸附
    高豆豆1,,郭敏辉2,王侃1,于洁1,,叶丁璐1,祝怡臻11.宁波大学建筑工程与环境学院,宁波3152112.浙江大学环境工程系,杭州310058基金项目:宁波市科技计划项目2015C110001浙江省自然科学基金资助项目Y19E080023国家级高等学校大学生创新创业训练计划项目201811646 ...
    本站小编 Free考研考试 2021-12-31
  • 含油污泥化学清洗处理实验研究与工艺参数优化
    肖楠1,,朱玲1,,王春雨1,杨子育1,张亚宁1,齐美荣21.北京石油化工学院环境工程系,北京1026172.华油惠博普科技股份有限公司,北京100011基金项目:北京市长城****资助项目CIT&TCD20190314国家自然科学基金资助项目21207006国家级大学生创新创业计划项目2019J0 ...
    本站小编 Free考研考试 2021-12-31
  • 微生物硫氧化-硫还原回收垃圾焚烧飞灰中Cu和Zn
    张瑞昌1,,邱会玲1,王婷1,冯帆1,李梦婷11.河南科技大学化工与制药学院,洛阳471023基金项目:国家自然科学基金资助项目41601520河南科技大学大学生研究训练计划(SRTP)项目2018140国家自然科学基金资助项目(41601520)河南科技大学大学生研究训练计划(SRTP)项目(20 ...
    本站小编 Free考研考试 2021-12-31