普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生新品种抗赤霉病基因的分子鉴别

删除或更新信息，请邮件至freekaoyan#163.com(#换成@)

本站小编 Free考研考试/2021-12-26

刘新伦, 王超, 牛丽华, 刘志立, 张录德, 陈春环, 张荣琦, 张宏, 王长有, 王亚娟, 田增荣, 吉万全. 普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生新品种抗赤霉病基因的分子鉴别[J]. , 2017, 50(20): 3908-3917 https://doi.org/10.3864/j.issn.0578-1752.2017.20.007
LIU XinLun, WANG Chao, NIU LiHua, LIU ZhiLi, ZHANG LuDe, CHEN ChunHuan, ZHANG RongQi, ZHANG Hong, WANG ChangYou, WANG YaJuan, TIAN ZengRong, JI WanQuan. Molecular Identification of FHB Resistance Gene in Varieties Derived from Common Wheat-Thinopyrum ponticum Partial Amphiploid[J]. Scientia Acricultura Sinica, 2017, 50(20): 3908-3917 https://doi.org/10.3864/j.issn.0578-1752.2017.20.007

0 引言

【研究意义】小麦赤霉病（Fusarium head blight,FHB）是由禾谷镰孢（Fusarium graminearum）引起的一种小麦重要穗部病害,主要发生于潮湿及半潮湿地区^[1]。在小麦赤霉病大流行年份,可以造成70%,甚至是100%的产量损失^[2]。小麦赤霉病的发生不仅造成严重的产量损失,而且感病的小麦籽粒还含有各种毒素（尤其是DON毒素）,严重威胁人和动物^[3-4]的食品安全。近年来,随着全球气候变暖以及耕作制度的变化,小麦赤霉病逐渐由偶发病害上升为常发病害,发生面积也不断扩大。在中国,赤霉病已由常发的长江中下游麦区扩展到黄淮麦区和华北麦区^[5-6]。目前还没有彻底防治小麦赤霉病的化学药剂,最为经济环保的控制小麦赤霉病危害的途径就是培育和选用抗赤霉病品种。对普通小麦-长穗偃麦草（Thinopyrum ponticum）衍生小麦新品种进行赤霉病抗性鉴定和抗性基因的分子鉴别,可为深入研究和应用长穗偃麦草的赤霉病抗性基因提供理论依据,对于小麦赤霉病抗性育种具有重要意义。【前人研究进展】赤霉病抗源相对较少,国内外****通过大量的基因资源研究,迄今从普通小麦及其近缘种属中仅鉴定出7个赤霉病抗性主效基因,分别是来自苏麦3号的Fhb1^[7]和Fhb2^[8]、大赖草的Fhb3^[9]、望水白的Fhb4^[10]和Fhb5^[11]、披碱草属的Fhb6^[12]和十倍体长穗偃麦草的Fhb7^[13]。中国工作者经多年努力,培育出了扬麦系列、宁麦系列和鄂麦系列等优良抗性品种,但大面积生产中缺乏抗赤霉病的高产小麦品种^[14]。纵观国内数十年的小麦抗赤霉病育种,其抗源仍然主要局限于苏麦3号、望水白和它们的衍生系。赤霉病抗源基础狭窄是小麦育种工作取得突破性进展的瓶颈,发掘新的小麦赤霉病抗源成为提高小麦赤霉病抗性的关键^[15]。由此可见,鉴定和利用小麦近缘种属的赤霉病抗性基因尤为重要^[16]。长穗偃麦草是小麦的近缘植物,其E基因组含有许多优异的抗性基因,如抗旱、抗寒能力很强,对白粉病^[17]和锈病完全免疫（7E染色体）^[18],高抗条纹花叶病和小麦黄矮病（2E、7E染色体）^[19-20],对赤霉病表现较强的耐病性（1E、7E染色体）^[18,21-23],且又能与小麦进行远缘杂交,实现抗病基因的遗传转移。因此,长穗偃麦草是小麦抗病育种的重要抗源亲本之一^[24]。八倍体小偃麦小偃693和小偃7430染色体总数均为56条,但是它们分别含有8对和6对长穗偃麦草染色体,还分别含有4条和2条小麦-长穗偃麦草易位染色体^[25]。小偃7430与普通小麦杂交、回交选育而成了许多抗白粉病和条锈病、秆锈病的小偃麦衍生新品种（系）^[26-28]。然而,目前关于小偃693衍生后代抗病性的研究鲜有报道。小偃597是利用小偃693与普通小麦杂交、回交选育成功的含有十倍体长穗偃麦草遗传物质的普通小麦品种,对赤霉病表现抗性^[29]。研究表明,长穗偃麦草中已发现3个赤霉病抗性主效基因,分别定位于二倍体长穗偃麦草1E染色体^[30-32]和7E染色体^[22,32],十倍体长穗偃麦草7E染色体^[13,18,23]。其中十倍体长穗偃麦草7E染色体长臂上赤霉病抗性基因被正式命名为Fhb7^[13],可解释抗赤霉病表型变异的30.46%^[18]。GUO等^[13]将Fhb7定位在7EL染色体末端1.7 cM范围内,且两侧紧密连锁的分子标记分别为Xcfa2240和XsdauK66;该抗病区间对应于水稻、短柄草和高粱的基因组大小分别为18.8、37.1和27.0 kb,并开发出与Fhb7紧密连锁的特异分子标记,如XsdauK60、XsdauK71等,这些分子标记可用于该基因的分子标记辅助选择。【本研究切入点】西农509、西农511和西农529是由西北农林科技大学农学院培育出的含有十倍体长穗偃麦草遗传物质的高产、优质、抗病的普通小麦新品种^[33-34],田间赤霉病表现轻^[6,33-34]。这些品种已在黄淮冬麦区南片的河南省（南部稻茬麦区除外）、安徽省沿淮及淮北地区、江苏省淮北地区和陕西省关中地区示范推广种植。2014—2016年在河南南阳和驻马店、江苏省徐州和安徽淮北生态区域等赤霉病重发区,这些品种赤霉病轻度发生,发病率仅为1%—3%,属于中抗或中感抗性水平^[6,35-37]。然而,目前它们赤霉病的抗性遗传基础并不清楚。【拟解决的关键问题】对3个衍生新品种进行赤霉病抗性进行人工接种鉴定,然后用偃麦草E组染色体特异标记对西农509、西农511和西农529及其主要亲本小偃693、小偃597和十倍体长穗偃麦草进行分子鉴定,初步确定其赤霉病抗性基因的来源,在此基础上利用长穗偃麦草7EL染色体上的特异分子标记及与抗性基因Fhb7紧密连锁的分子标记对实验材料进一步进行分子鉴别,为这些抗赤霉病的长穗偃麦草衍生新品种的推广和利用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

普通小麦中国春（Triticum aestivum）,十倍体长穗偃麦草;普通小麦-十倍体长穗偃麦草远缘杂交后代材料和品种：八倍体小偃麦小偃693（染色体组成为AABBDDEE）和普通小麦品种小偃597;新培育的普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生品种西农509、西农511和西农529。赤霉病抗性鉴定的对照品种苏麦3号、扬麦158、宁麦9号和安农8455。小偃693是本研究中3个普通小麦-长穗偃麦草衍生新品种的间接亲本,普通小麦品种小偃597是西农529和陕麦159的直接亲本,是西农511的间接亲本（图1）。

显示原图|下载原图ZIP|生成PPT
图1普通小麦-长穗偃麦草衍生小麦新品种长穗偃麦草遗传基因溯源
-->Fig. 1The source of Thinopyrum genes in three derived varieties of common wheat-Th. ponticum
-->

1.2 赤霉病人工接种鉴定

抗赤霉病人工接种鉴定由江苏省农业科学院植物保护研究所在南京鉴定完成,赤霉菌菌株为F0301、F0609、F0980和F1126,鉴定方法和调查记载标准参见“小麦抗病虫性评价技术规范”系列标准（NY/T 1443—2007）^[38]。苏麦3号、扬麦158和宁麦9号为抗病对照品种,安农8455为感病对照品种。抗性分级标准：抗（R）,平均严重度<1.5（苏麦3号的平均反应级+标准差）;中抗（MR）,1.5≤平均严重度<2.5（扬麦158的平均反应级+标准差）;中感（MS）,2.5≤平均严重度<3.5,感（S）,平均严重度≥3.5。

1.3 抗赤霉病基因的分子鉴别

小麦幼叶基因组DNA采用微量CTAB法提取,干燥后溶于TE缓冲液。由于长穗偃麦草中已发现的赤霉病抗性主效基因均被定位于E基因组^{[13,18,21-23,30-32]},本研究选用长穗偃麦草E组染色体特异分子标记^[22,39-47]及7EL上Fhb7连锁的分子标记^{[13,18,48-49]}对参试材料进行长穗偃麦草遗传物质和Fhb7的检测（附表1）。引物由生物工程（上海）有限公司合成。PCR扩增反应在GeneAmp 9700型热循环仪（ABI,USA）上进行,反应混合液总体积为10 μL,其中包括0.25 U Taq酶、1.0 μL 10×Buffer、1.5 mmol·L^-1 MgCl₂、0.2 mmol·L^-1 dNTPs、0.5 μmol·L^-1 primer（上下游引物）、50—100 ng模板DNA。扩增程序：94℃ 2 min;94℃ 1 min,50—60℃ 1 min,72℃ 1 min,35个循环;72℃ 5 min。PCR产物用8.0%的非变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳检测,银染后照相观察并记录。
Table 1
表1
表13个普通小麦-长穗偃麦草衍生小麦新品种的赤霉病病情指数和抗性评价
Table 1The disease index of resistance to FHB of three derived varieties of common wheat-Th. ponticum

小麦品种 Wheat variety	病情指数和抗性评价 Disease index and resistance*
小麦品种 Wheat variety	2009	2010	2014	2015	2016
西农509 Xinong 509	1.44 R	2.35 MR
西农529 Xinong 529			2.42 MR	2.45 MR
西农511 Xinong 511					2.47 MR
扬麦158 Yangmai 158	1.82 MR	3.67 S	2.11 MR	2.27 MR	2.22 MR
苏麦3号 Sumai 3	1.65 R	1.62 R	1.39 HR	1.27 HR	1.16 HR
宁麦9号 Ningmai 9	1.67 MR	2.36 R	1.90 MR	1.65 MR	1.65 MR
安农8455 Annong 8455	3.98 S	3.95 S	3.83 HS	3.56 HS	3.02 HS

*本试验数据来源于小麦国家区域试验赤霉病抗性鉴定结果 The data of this table were derived from the results of wheat regional resistance test for Fusarium head blight。R：抗病Resistant;MR：中抗Moderately resistant;S：感病Susceptible;HS：高感 Highly susceptible

新窗口打开

2 结果

2.1 3个普通小麦-长穗偃麦草衍生新品种的赤霉病抗性表现

江苏省农业科学院植物保护研究所先后对西农509（陕麦509）（2008—2010）、西农529（2013—2015）和西农511（2015—2016）进行了赤霉病抗性人工接种鉴定。由表1调查结果可以看出,西农509、西农529和西农511的赤霉病鉴定结果均与中抗对照品种扬麦158的抗性水平相当,表现为中抗。

2.2 普通小麦-长穗偃麦草衍生新品种外源遗传物质的分子标记检测

用105个长穗偃麦草E基因组的特异标记（其中1E、2E、3E、4E、5E、6E和7E染色体上特异标记分别有29、12、10、5、14、10和25个）分别对中国春、十倍体长穗偃麦草、西农509、西农511和西农529进行分子检测。结果显示,71个标记在中国春和十倍体长穗偃麦草间有多态性,但只有Xcfa2040（图2-A）、Xcfa2106、Xmag1759、Xpsp3123、Xwmc273（图2-B）、Xbarc154和Xgwm156等7个标记在3个普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生新品种中均扩增出长穗草的特异产物,其中前5个标记都位于7E长臂,Xbarc154和Xgwm156则位于7E短臂。E基因组分子标记分析结果表明,西农509、西农511和西农529携带来自于十倍体长穗偃麦草7E染色体的遗传物质。

2.3 普通小麦-长穗偃麦草衍生新品种及其亲本的分子检测

用定位于7E染色体长、短臂上的75和22个分子标记（包括DArT标记、SSR标记、EST标记）^{[13,36,43,45,48-49]}分别对中国春、十倍体长穗偃麦草、3个普通小麦-长穗偃麦草衍生新品种及它们重要的亲本小偃693和小偃597进行分子标记分析。结果表明,7ES 64.63到7EL 153.27长约89 cM之间共有20对引物在小偃693、小偃597和3个新品种中均能扩增出稳定的长穗偃麦草的特异条带,其中12个引物定位于7E长臂,8个定位于7E短臂（表2）。由此进一步推断西农509、西农511和西农529这3个普通小麦-长穗偃麦草衍生新品种含有十倍体长穗偃麦草7E染色体跨着丝粒区域的中段遗传物质。

2.4 普通小麦-长穗偃麦草衍生新品种抗赤霉病基因的分子检测

用定位于7EL 140.03到160.00处的与Fhb7紧密连锁的40个XsdauK系列标记、7个TNAC系列标记、4个SSR标记（Xcfa2040、Xcfa2240、Xmag1932和Xswes19）^{[13,36,43,45]}分别对中国春、十倍体长穗偃麦草、3个普通小麦-长穗偃麦草衍生新品种以及赤霉病抗性基因的供体亲本小偃693和小偃597进行基因标记分型分析。结果表明（表2）,XsdauK8（图2-C）、XsdauK144（7EL 149.51）、XsdauK27（图2-D）、XsdauK99（图2-E）、XsdauK116和Xcfa2040（7EL 153.27）（图2-A）等6个标记在3个新品种及小偃693和小偃597两亲本中具有十倍体长穗偃麦草的特异性条带;XsdauK60（7EL 153.77）、Xmag1932（7EL 154.70）、Xcfa2240（7EL 156.27）（图2-F）和XsdauK66（7EL 158.02）（图2-G）4个标记能在八倍体小偃麦小偃693中扩增产生十倍体长穗偃麦草的特异性条带,而在小偃597和3个小麦新品种中没有十倍体长穗偃麦草的特异条带;XsdauK71（7EL 158.97）和Xsews19（7EL 160.00）（图2-H）在小偃693、小偃597和3个小麦新品种中均没有十倍体穗偃麦草的特异条带。
Table 2
表2
表27E染色体上部分分子标记对3个小麦新品种及其主要亲本的扩增片段大小
Table 2Amplified fragment size of markers on 7E ?anking Fhb7 in three derived varieties of common wheat-Th. ponticum and their major donor parents

标记 Marker	标记位置Position	共线基因Orthologous genes	中国春 Chinese Spring	长穗偃麦草 Th. ponticum	小偃 693 Xiaoyan 693	小偃 597 Xiaoyan 597	西农 509 Xinong 509	西农511 Xinong 511	西农 529 Xinong 529
Xcfa2174	64.63		230	240	240	240	240	230	240
Xgwm44	71.35		160	140	160, 140	160, 140	160, 140	160, 140	160, 140
Xwmc653	75.10		160	190	160, 190	160, 190	160, 190	160	160, 190
Xcfd31	86.10		320	340	340	340	340	340	340
Xgwm350	87.32		130	160	130, 160	130, 160	130, 160	130, 160	130, 160
Xbarc154	89.76		600	520	600, 520	600, 520	600, 520	600, 520	600
Xcfd21	92.36		280	260	280, 260	280, 260	280, 260	280, 260	280, 260
Xgwm333	96.59		290	300	300	300	300	300	300
Xmag1759	98.22		200	250, 620	250, 620	250, 620	250	250, 620	250, 620
Xcfa2106	104.89		220	240	220, 240	220, 240	220, 240	220, 240	220, 240
Xpsp3123	110.39		150	120	150, 120	150, 120	150, 120	150, 120	150, 120
Xgwm635	111.32		110	130	130	130	130	130	130
Xgwm130	116.93		120	250	250	250	250	250	250
Xwmc273	131.76		210	200, 150	200, 150	200	200	200	210, 150
XsdauK8		Bradi1g29460	765	985	765, 985	985	985	985	985
XsdauK144	149.51	Bradi1g29441	460	440	440	460, 440	460, 440	440	440
XsdauK27		Os06g51420 Bradi1g29390 Sb10g031190	430	465	430, 465	430, 465	430, 465	430, 465	430, 465
XsdauK99		Os06g51440 Bradi1g29140	580	660, 700	660, 700	660, 700	660	660	660
XsdauK116		Os06g514370 Bradi1g29210	250	230	230	230	230	230	230
Xcfa2040	153.27		260	280, 240	280, 240	280, 240	280, 240	280, 240	280, 240
XsdauK60	153.77	Os06g51490 Bradi1g29250 Sb10g031265	420	430	420, 430	420	420	420	420
Xmag1932	154.70		275	285, 235	285, 275	275	275	275	275
Xcfa2240	156.27		280	250	280, 250	280	280	280	280
XsdauK66	158.02	Os06g51500 Bradi1g29290 Sb10g031250	350	330	350, 330	350	350	350	350
XsdauK71	158.97	Os06g51510 Bradi1g29300 Sb10g031240	430	440	430	430	430	430	430
Xsews19	160.00		195	275, 195	195	195	205, 192	205, 192	205, 192

新窗口打开

显示原图|下载原图ZIP|生成PPT
图27E染色体上部分标记PCR 扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱
M：DEL2000;1：中国春Chinese Spring (CS);2：十倍体长穗偃麦草Th. ponticum;3：小偃693 Xiaoyan 693;4：小偃597 Xiaoyan 597;5：西农509 Xinong 509;6：西农511 Xinong 511;7：西农529 Xinong 529。左侧为分子量标记条帯大小（bp）。箭头所示为偃麦草染色体的特异条带
-->Fig. 2Polyacrylamide gels of PCR products obtained with some specific markers located on the chromosome 7E of Th. Ponticum
The numbers at the top of the gels are lane numbers. The numbers on each photo is the marker bands size in bp. Arrows indicated the Thinopyrum specific bands linked to Fhb7
-->

3 讨论

在抗赤霉病育种方面,自20世纪70年代,中国研究者从普通小麦及其近缘物种3万多份材料中筛选出苏麦3号和望水白两个抗性强而稳定的普通小麦品种,但其农艺性状较差^[50],应用过程中赤霉病抗性很难和丰产性结合起来,生产上亟需高产抗赤霉病的小麦品种。然而,自扬麦158后,大面积推广的品种均未解决好赤霉病抗性与丰产性负相关的问题^[14]。因而开拓新的抗源以及如何高效利用小麦近缘种的抗病基因已成为小麦抗赤霉病育种亟待解决的重要问题^[51]。
长穗偃麦草是小麦远缘杂交育种的重要亲本材料之一,研究表明其1E和7EL染色体上携带有抗赤霉病基因^{[13,18,21-23,26]}。JAUHAR等^[31]将抗赤霉病的长穗偃麦草与硬粒小麦杂交,获得了赤霉病抗性提高显著的衍生系。张璐璐等^[52]利用偃麦草7E染色体特异分子标记筛选结合GISH验证培育了小麦-长穗偃麦草7EL异位系和7ES附加系,赤霉病抗性鉴定表明7EL易位系的赤霉病抗性明显较好。西北农林科技大学培育的普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生新品种西农509、西农511和西农529目前已成为黄淮冬麦区南片和陕西省关中地区示范推广的高产优质的小麦新品种。据报道,上述3个小麦新品种在河南、安徽、江苏等赤霉病重发地田间表现赤霉病很轻^[6,31-33]。本研究中,通过人工抗性鉴定,这3个品种的赤霉病抗性与扬麦158相当,属于中抗水平,且抗性稳定。西农509、西农511和西农529赤霉病轻且综合性状和丰产性好,有望在黄淮冬麦区南片赤霉病常发区和重发区大面积推广种植。
本研究利用长穗偃麦草E基因组特异的引物初步确定3个小麦新品种的长穗偃麦草的遗传物质来自7E染色体跨着丝粒区域的中段,说明其抗赤霉病基因来源于7E染色体,研究结果与前人的研究一致^{[13,18,22-23,52]}。来自十倍体长穗偃麦草的抗赤霉病基因Fhb7已定位于7EL染色体上,Xcfa2240（7EL 156.27）和XsdauK66（7EL 158.02）分别与其紧邻^[13]。为了探究上述3个小麦新品种中赤霉病抗性基因与Fhb7的关系,选用偃麦草7EL染色体（7EL 140.03—7EL 160.00）上与Fhb7连锁的分子标记对这3个新品种及其主要亲本小偃693、小偃597和十倍体长穗偃麦草进一步进行分子标记分析。结果发现,7EL上6个与Fhb7紧密连锁的分子标记在3个新品种中扩增产生长穗偃麦草的特异产物,其中,XsdauK99、XsdauK116和Xcfa2040（7EL 153.27）3个标记与Fhb7的遗传距离仅3.0—4.0 cM。GUO等^[13]利用与抗赤霉病基因Fhb7紧密连锁的分子标记（Xcfa2240和XsdauK66）进行分子辅助选择,从济麦22与小麦-长穗偃麦草抗赤霉病短片段易位系SDAUl881杂交、回交后代中成功获得2个新的改良系SDAU2003和SDAU2028。然在本研究中,与Fhb7紧邻的4个标记XsdauK60（7EL 153.27）、Xmag1932（7EL 154.70）、Xcfa2240（7EL 156.27）和XsdauK66（7EL 158.02）,在小偃597和3个长穗偃麦草衍生小麦新品种中均没有扩增出长穗偃麦草的特异性条带,只在八倍体小偃麦小偃693中有长穗偃麦草的特异性条带。同时,7EL末端的标记XsdauK71（7EL 158.97）和Xsews19（7EL 160.00）不仅在3个小麦新品种中没有偃麦草特异条带,而且在小偃693和小偃597中也没有。何方^[25]以十倍体长穗偃麦草总基因组DNA为探针对小偃693根尖细胞染色体进行GISH分析,发现小偃693中不仅含有4对E^e组染色体和4对E^b组染色体,同时还含有4条小麦-长穗偃麦草异位染色体。本研究中,西农509、西农511和西农529 这3个普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生新品种中含有长穗偃麦草7E染色体跨着丝粒区域的中段的遗传物质,但缺失了Fhb7相关联的7EL末端片段,究其原因,也许是在八倍体小偃麦小偃693与普通小麦杂交、回交选育过程中,7E染色体与普通小麦染色体发生了异位,导致7EL末端片段丢失,这个推测有待借助GISH和FISH等技术进一步验证。

4 结论

西农509、西农511和西农529等3个普通小麦-十倍体长穗偃麦草衍生新品种在黄淮南片麦区赤霉病重发地区表现赤霉病很轻,同时人工接种鉴定表现为中抗赤霉病。赤霉病抗性基因分子鉴定表明,长穗偃麦草7ES 64.63—7EL 153.27之间有20对引物在3个新品种和它们的主要亲本小偃693和小偃597中均扩增出稳定清晰的长穗偃麦草特异条带,然而在这3个普通小麦-长穗偃麦草衍生新品种及小偃597中没有检测到7EL末端抗赤霉病主效QTL Fhb7的分子标记产物。推测这3个普通小麦-长穗偃麦草衍生新品种含有来自于十倍体长穗偃麦草的不同于Fhb7的抗赤霉病基因。
Table S1
附表1
附表1所利用的长穗偃麦特异分子标记
Table S1 Specific molecular markers of Thinopyrum ponticum and their sequences used in this study

标记名称 Marker name	引物序列 Nucleotides sequence of markers		所在染色体 Genome location	扩增片段大小 Fragment size (bp)	参考文献 Reference
标记名称 Marker name	左引物 Left primer (5′-3′)	右引物 Right primer (5′-3′)	所在染色体 Genome location	扩增片段大小 Fragment size (bp)	参考文献 Reference
1Ee STS241	TAACTAGCACACCAAATCGTTTTTGCAAAC	AATTCATTGGGGTGGGTAAAGGAAGTGG	1E	250	[41]
1Ee STS318	GAATTCATCATAAAAACAGATCAAAGG	TAACGTAAACTTCCCGTCTGCTAC	1E	280	[41]
SP1E_No.1	TATCAAATAATATGTGCATG	CATGACAGAGATATGAAAAG	1E	276	[42]
SP1E_No.21	CATCATATAAGAATGCAGGA	TCAACAGCACGCCAAC	1E	230	[42]
SP1E_No.23	TAGGAAAGAAATCTGAAATA	TGAGACAGCAGCAAAA	1E	220	[42]
SP1E_No.27	GGCTGATGCACTGACGT	TCCGAAATCTGAAAAGGAG	1E	273	[42]
SP1E_No.29	ACTGTTTTTTTTTTCGAG	AGCGCACAAGATGAGAC	1E	151	[42]
SP1E_No.30	TTAGAAAAATTCAACCCG	AATCTTGAAACATGGGAG	1E	80	[42]
SP1E_No.31	CCGGTTTGAAAGAAGAGA	CAACAAGCAAATGAGGGA	1E	158	[42]
SP1E_No.33	TCACCTATGAGATCGCT	TATCCGAAGAACCTGTAC	1E	285, 175	[42]
SP1E_No.34	TGTTCCTTGCATCATCT	AACTCACCTATCGGTCTAT	1E	158	[42]
SP1E_No.35	TTGACAACCCAATCTG	TCACTGATAAATAACAAGAG	1E	162	[42]
SP1E_No.36	TGACGGCAACGGAGTG	TCTGCCGAACATGGAATC	1E	150	[42]
SP1E_No.37	AGCACTTGGGTTTTCAT	GGATTGGAGGGTCACTA	1E	260	[42]
SP1E_No.38	TTCAAGAAGTATAGCTCGTT	AACCATAAAGTCCCAACA	1E	300	[42]
SP1E_No.41	GGAAAGGGCACTCCAACC	GCGTCACATCCTGGTTCG	1E	210	[42]
SP1E_No.42	CTCCATCCCTCCACTT	AACATCAGCAGTTGGG	1E	190	[42]
SP1E_No.44	TTGACTTCTCCCAAGTTG	AATGGAAAGGAAAATCTG	1E	203	[42]
SP1E_No.45	TCTATTTTGCTATTTGCC	TTTTGTCTTCATCACCAT	1E	568	[42]
SP1E_No.47	TACTCGCTACTTACAATCT	GAACATTATTGTGAAGCA	1E	255	[42]
SP1E_No.48	CGGAATGTCCTCACA	ATTGGCTAATGCTATGA	1E	280	[42]
SP1E_No.8	AATATTTATGGCGCACGCAG	TCATCAGGGGAGTGAGGAGC	1E	400, 200	[42]
Xedm17	TAGCTGCATCTCTGGTTTGG	CTAGTTGTTGTTGCTGCGAAA	1E	396	[39]
Xedm74	GTAAGTCGACCGAGGAGACG	CCTTCTTGCTTGGCATTCTC	1EL	360	[39]
Xedm92	ATCCGCGACGACAATGTAAG	CTGGTGTGGATCTTGACGTG	1EL	185	[39]
Xmag2137	GAGTTCGATGACATGGCTGA	CCGATAACAAAGTGCGTGAA	1E	580, 250	[43-44]
Xmag3489	CGATGTAAAGACTGTAGCCTGTAGG	CGTCCATTTGGTTCGGTGAG	1E	330	[43-44]
Xmag834	ACGCCCTCAAACAAGAAAGA	CTTCCTCTCCTTCCCCAGAG	1E	500	[43-44]
Z34-1E200	GATGTCACCAAGCCCTAC	TCCTACGAAACACCCAAG	1E	225	[47]
2Ee STS116	TTAACCAGGGATACAAAAACACCATAATG	AATTCAATTACCTTGTGGATGCAAACAC	2E	150	[41]
2Ee STS182	AATTCATTTCTAATAGATACTCGAATGAA	TTAACTGAGGAGAGGCTACAACATCC	2E	182	[41]
SM2E-1	CAGGTCCAAAAAACCAGCC	GAATTCGAGGTTCCGCAG	2E	480, 210	[40]
SM2E-3	GTGTGTGCGCATGAACTACTT	GGAGTCGTTGGTTGGACATG	2E	225	[40]
SM2E-5	ATGCTTTTCCCTTCCAACAG	CAAACGAAAAGCTGACCAAAC	2E	173	[40]
Xmag2090	AAAGGTGTAAGCGTGGCATC	ACACGCATAATGCACTCCAG	2E	300, 255	[43-44]
Xedm28	GCTCACTCACGCATCATAGC	GTTGGCGGAATCCTTCTTC	2ES & 3EL	150	[39]
Xedm8	GACCCCCACTTCCTGCTC	GGGCAAAACTGTGGCTATTG	2ES & 3EL	145	[39]
Xedm96	TCCAAGACTGTGCCTCAAGA	GCGTTGAACTCCTGTTCCAT	2ES & 3ESL	175	[39]
Xmag3253	CTGCTGCTTGGGATCATTCT	GCTGGTGAGAGTTGGAAACC	2E	600, 310	[43-44]
Xmag3616	GTCCGTGCCATTCAACTTCT	TCTATCCACTCCATTCCAAGC	2E&3E	260, 200	[43-44]
Xmag4137	CTCGTGTGGCTCATCAATGT	TGACATCTGGTTGGTGGTCA	2E&3E	490	[43-44]
iPBS8	TGCAGGTCGACGA	GCGGGTATGCTTTG	3E	428	[46]
SM3E-1	CACACGCAATTCAACAACTCAAG	ACGAATTGACCGTCGATCAGA	3E	195	[40]
SM3E-2	GCAGCAGAGAACGTACACTTGTA	TGGCAAAAGTATTCTGAACCGT	3E	154	[40]
TNAC1248	ATGATGCAGCAGCAAATTACA	CTGAGGAGCCTCTCCAACTCT	3E	700	[43,45]
Xmag905	ATGTGAATGGAAGGTCGGAG	AGCACTTGCAGGCTCTTCAT	3E	260	[43-44]
SM4E-1	ATTCCTAATGGTCCTACAGC	ATCACGCACGAACAAGTC	4E	580	[40]
Xmag1682	CGAATGCCAAGCTGTTCCCT	ACATGCCCCTTGAGAGTGTGG	4E	855	[43-44]
Xmag2055	TTCCCAGCAAAGTAGCACAA	TGTGGGATCGCCTAGAAATC	4E	550	[43-44]
Xmag3733	CACACAACTCCACGGAACAG	CATAAACCAGCAGCCCAACT	4E&6E	300	[43-44]
Z8-4E374	TGTTGCCAGTGGAGGAAG	TTGAACTACTGAACCGAAT	4E	368	[47]
TNAC1503	TGAGGTTGGTTCTCATCTGGA	CGTTGGAAACAATCTGAATGG	5E	700.00	[43,45]
TNAC1559	AAACAAGGCCCTGAAACACTT	CATTGTCAGGCTATGGGACAT	5E	1180	[43,45]
Xmag1293	GATTGTTCTTGGGGAGATGCTTG	GCCTTTTGGACCGTCAGAGAC	5E	260, 300	[43-44]
Xmag1426	GCGAGTTTTCGTAGCAAAGG	TCACAGGAGTGGAGGCTCAC	5E	650, 280	[43-44]
Xmag1579	AAGGCATTTTTCTCGGTCTC	CACACTTCTTGAGGATTTGAGC	5E	550	[43-44]
Xmag4013	TCGACTCCCATCCTCAAGAC	CACCACCATTCCTTTGGAG	5E	650, 400	[43-44]
Xmag532	CGACGATCCAACCAGCTAAT	TAGCCAGCCTATGGTAACGG	5E	250	[43-44]
Xmag620	TAGTTGCATGGTCGCTTCTG	CGTAGCTTTTCGTTGATCCC	5E	295	[43-44]
Xedm54	CGTCCTTGTTCTTGCTTCAA	TGAGCAGGCCATAAGGAAAC	5ES	150	[39]
Xedm205	AGTCGCCGTTGTATAGTGCC	CGACCCGGTTCACTTCAG	5ES	240	[39,49]
Xgwm205	CGACCCGGTTCACTTCAG	AGTCGCCGTTGTATAGTGCC	5ES	180	[39]
Xedm46	CCGCCGTCCGTCCT	GCAGGAGGCCTCGTTGTAG	5EL & 7EL	215	[39]
Xedm335	CGGTCCAAGTGCTACCTTTC	CGTACTCCACTCCACACGG	5EL & 7EL	150	[39,44]
Xgwm335	CGTACTCCACTCCACACGG	CGGTCCAAGTGCTACCTTTC	5EL & 7EL	150	[39]
TNAC1674	CCACCACAGAAGCAGATGAAT	GCTAGATGGCACACCAAGTG	6E	700	[43,45]
Xedm140	CCTCCGACGAGATCTGCTAC	GCTTTGGCTTCCGGTACG	6E	271	[39]
Xgwm179	AAGTTGAGTTGATGCGGGAG	CCATGACCAGCATCCACTC	6E	162	[39]
Xmag2276	CCGCCCCGATACAGTTTATTTC	TACCGCTCCGTCGTCAACTACTG	6E	320	[43-44]
Xmag3017	GGTGAGGGAGTGCGAGAAT	AGGCTTCCTGTTGCTGTGG	6E	260, 170	[43-44]
Xmag3113	TCATGCACCCATCTGGACTA	AGCTATTCGTGGCAAACACA	6E	210	[43-44]
Xedm149	ATCCACGCCAAGCAGAAG	CTGTGGGAAGAAGTGCCTTG	6EL	186	[39]
Xedm80	ATGCTCAAGCCGAGGAAGTA	TTGATGGAGCGACTGAAATG	6ES	126, 150	[39]
Xgwm149	CATTGTTTTCTGCCTCTAGCC	CTAGCATCGAACCTGAACAAG	6ES	85	[39]
Xgwm292	TCACCGTGGTCACCGAC	CCACCGAGCCGATAATGTAC	6ES	163	[39]
Xedm158	CTACGTCGTCTACCGCTGCT	CTTGGGCATCATCGATCTTC	7E	120	[39]
Xbarc76	ATTCGTTGCTGCCACTTGCTG	GCGCGACACGGAGTAAGGACACC	7EL	210	[49]
TNAC1825	GAAGCGGTTCAGGGTGAC	ACCCATCACGTTGCTGTAGTC	7EL	750	[43,45]
TNAC1826	CACATATGATGATGACGGCAAT	GGCAGGGAGGAAACTCTACTG	7EL	152.00	[43,45]
TNAC1829	GCCACTTCCTCCCTCCTC	GTCGGTCCTCCAGTATCAGC	7EL	210	[43,45]
TNAC1834	CCGAGTGTCATCGTTAGGAAA	CCAGCAATCCTACCTGTTGAA	7EL	1900	[43,45]
TNAC1845	AATGAACAGCTTGCTTTCTGC	CAGATGCTCTGGATTTCATGG	7EL	120, 90	[43,45]
TNAC1956	ACGAAGGACAATTGCTGCTAA	GTGCACTTCTTGCCCTACTTG	7EL	1074	[43,45]
TNAC1957	TCAACATTTGCAGGATTGTCA	TTTCACAGGAACCTCTGCATC	7EL	170	[43,45]
XBE399084	CCTACCTACGACGCAAGTCC	AGCGAGCAGAAAGCATCAAG	7EL	132	[13]
Xcfa2040	TCAAATGATTTCAGGTAACCACTA	TTCCTGATCCCACCAAACAT	7EL	280, 240	[49]
Xcfa2106	GCTGCTAAGTGCTCATGGTG	TGAAACAGGGGAATCAGAGG	7EL	240	[49]
Xcfa2240	TGCAGCATGCATTTTAGCTT	TGCCGCACTTATTTGTTCAC	7EL	250	[49]
Xedm105	ACCGCCAGGGAGCTCTGC	GATGTCCTTCTGGCCGTACT	7EL	240	[39]
Xedm154	GGAGAGGCCACTGTTTTTGA	GGCACATCACTCCCTTCTTC	7EL	230	[39]
Xgwm130	AGCTCTGCTTCACGAGGAAG	CTCCTCTTTATATCGCGTCCC	7EL	250	[49]
Xgwm295	CGTACTCCACTCCACACGG	CGGTCCAAGTGCTACCTTTC	7EL	288	[49]
Xgwm333	GCCCGGTCATGTAAAACG	TTTCAGTTTGCGTTAAGCTTTG	7EL	300	[49]
Xgwm344	CAAGGAAATAGGCGGTAACT	ATTTGAGTCTGAAGTTTGCA	7EL	130	[49]
Xgwm573	AAGAGATAACATGCAAGAAA	TTCAAATATGTGGGAACTAC	7EL	182	[49]
Xgwm635	TTCCTCACTGTAAGGGCGTT	CAGCCTTAGCCTTGGCG	7EL	130	[49]
Xksum052	GTCGCTGAGTGCGAACTCCG	CAGAGGAAGCCGTCTACTGG	7EL	240	[49]
Xmag1759	GTACGAGTATGGCAACAGC	CCAACTCTAGGGGCAGATG	7EL	620, 250	[13,43-44]
Xmag1932	TGGCGTCCTGCTGAAAAC	CCGAGCACAAACCCTTGG	7EL	285,235	[13,43-44]
Xmag2931	GGGGGCAGAACTTGTATGAA	TCTTGAGGGACGTGAGGAAC	7EL	300	[13,43-44]
Xmag3283	TGCCTGACCTACTGCAACAC	GAATAGCCATCAACCGCAAG	7EL	1820	[13,43-44]
Xpsp3003	GATCGACAAGGCTCTAATGC	CAGGAGGAGAGCCTCTTGG	7EL	200	[13]
Xpsp3123	AGATTAGATGGCATAAGCAAAGAGC	GATTAATCACCGCCCTTGGTCC	7EL	120	[49]
Xpsr680	GCTCCACTACTTCATCATCC	TGTTTCCTCTATCACTGACTTG	7EL	246	[49]
XsdauK107	AAGACGCAGTGTCTCGAGGT	TGCATCCTCAACATTCTCCA	7EL	100	[13,48]
XsdauK116	TCTGCGCCTTGTATCCTTCT	GGAGTTCCTGGATGTCGTGT	7EL	230	[13,48]
XsdauK118	GTTCAGTTCCACGCCCAATA	ATTATGCGCCGGGCTTCT	7EL	170	[13,48]
XsdauK124	CAGTGCTGCAGGAGCTACAA	AGAACCCTTCGGTGGAAACT	7EL	500	[13,48]
XsdauK13	GCCCTGTTACAGTCCACGAT	GAGCTCCTTGCTCTGATTGG	7EL	300	[13,48]
XsdauK130	TCACACAACCTGCATTGGAT	ATGCCATACGCATTTCCAG	7EL	900, 800	[13,48]
XsdauK138	GCAACCCAGTACGCCTAGTT	CAAATTCGAAAGCCCACATT	7EL	400	[13,48]
XsdauK140	AGGGTCTGTTTGGTTGGATG	AGGCGTGAGAAGTCAATGCT	7EL	390	[13,48]
XsdauK142	GTCTCGTTGCAATTGAGGTG	GAGGCGAGCTGGAAATACAA	7EL	375	[13,48]
XsdauK144	GGGCAGGAAAGACAACACTT	TTCCCAGCTTTGCTCTTCAT	7EL	440	[13,48]
XsdauK159	GTCTCGTTGCAATTGAGGTG	GAGGCGAGCTGGAAATACAA	7EL	370	[13,48]
XsdauK165	ACTGCGTCAGATCCGAAGTT	TGCAGCAATGAAGTCAGGAA	7EL	1600	[13,48]
XsdauK176	AGGAGGCCTTCATGCAGATA	TCGCCATGACTTCCTCTTCT	7EL	775	[13,48]
XsdauK27	TAAGGTGGCTCCGTTGTCTC	CCTCCAGAGCCTCTTTCTCC	7EL	465	[13,48]
XsdauK32	AGGCCGGAGTCGATTCTATT	ATCACAGTGCGCTCATCAAA	7EL	250	[13,48]
XsdauK336	TCATGTATTTGGACAATGTTAAACG	AGACAGCTCCATCGGAAAAA	7EL	400	[13,48]
XsdauK339	CAATTTGCTTCAAGGGGCTA	TTGGGCTCTTCTTCCCCTAT	7EL	425	[13,48]
XsdauK340	ACACTCATGGGAGGACGAAG	GCTACTAGCAATGGCGGAAC	7EL	357	[13,48]
XsdauK341	TCAGTCCCGTCACTGTCAAC	GTCGCCTGCAGGTAGGAGTA	7EL	250	[13,48]
XsdauK342	TTTACCAAGTGGGTGGAAGC	TCCATAAAACGGAAGGCAAC	7EL	325	[13,48]
XsdauK343	ACGAGGGTGGGAAGAAAGAT	AGCCAATTTCGCTGCTTAAA	7EL	324	[13,48]
XsdauK345	GAAACTAGGGGGTCGGGTAG	TCAATTTACCAGGGGCATTC	7EL	500, 410	[13,48]
XsdauK348	GCCAGATAAGAACCCCGTTT	GTGGTAATTTTTAGGGAGTGC	7EL	280, 145	[13,48]
XsdauK350	GAAAGGCAACGAAAATGGAA	GGTACATGATTTCCCCATGC	7EL	240	[13,48]
XsdauK351	AGTCACCCACAAGGACCAAC	TGGTGCCCATCTTCTGGTAT	7EL	775	[13,48]
XsdauK352	CTTTCCAACGCCGTATCATT	ATTGCGCTGACTGTTGTTTG	7EL	440	[13,48]
XsdauK353	GGCAGGCACCATATTGAAGT	TTGCCAACCACGTAGTGAAA	7EL	272	[13,48]
XsdauK355	GCGAGAACAATAGCCTGATTT	TTTTAATGCATGTTCAGCATTTTT	7EL	400	[13,48]
XsdauK356	ATAGGTTTCTCCCGGCTTTG	AAATCTTCACGAATTCAAAACA	7EL	140	[13,48]
XsdauK36	CCCTGCATGAGTTGTCAATG	CATCCTCCAAGGTCATCACA	7EL	286	[13,48]
XsdauK38	GAAGATGGCGAAGGTGTAGC	TTACACTGTCATCGCCGTCT	7EL	345	[13,48]
XsdauK4	CATCAAGTACGGCGTCGAG	ATCGGTCACAAGGCTATTCG	7EL	745, 640	[13,48]
XsdauK45	GGGTTCCTGCTCAAGTTCCT	GGCCTCCTTATGACCACAAA	7EL	860	[13,48]
XsdauK6	CGCGCTCTTCTACTGGTTCT	GTAGAAATCGTGGCCCTTGA	7EL	555	[13,48]
XsdauK60	TGGCGAAGATTTCTTCAAGTC	CTGATCGCACGCTATCATGG	7EL	430	[13,48]
XsdauK66	ATTTGGCTGCGATCGATAAG	CCATCTTGTTGTTGCCCTCT	7EL	330	[13,48]
XsdauK71	GGAGCCAAATCATCCTTGAA	TGTGCTTCAGTTTCGACAGG	7EL	440	[13,48]
XsdauK75	TCTGCACCCTAGTGTTGTGG	GATCAGGATCCAATGCAGGT	7EL	520	[13,48]
XsdauK8	CGAAGCAGAAGCACCTGAAG	CGCTGAATCGATTACGGAAC	7EL	985	[13,48]
XsdauK99	GTGATGGGCAACATGTTCTG	CCGGTAATGGAAACCAAGAA	7EL	700, 660	[13,48]
Xsews19	AAGGCAATGGAGATGTTCG	CCCGTTGATGACCGTGTT	7EL	275, 195	[49]
Xwmc273	AGTTATGTATTCTCTCGAGCCTG	GGTAACCACTAGAGTATGTCCTT	7EL	200, 150	[49]
Xwmc702	GAATCACATCGAATGGATCTCA	GAGGCCTTTTTCGATATTCTGC	7EL	194	[49]
Xwmc606	CCGATGAACAGACTCGACAAGG	GGCTTCGGCCAGTAGTACAGGA	7EL/7ES	175	[49]
Xbarc154	GTAATTCCGGTTCCACTTGACATT	GGATGGGCAGCTTCAAGGTATGTT	7ES	520	[49]
Xbarc70	GCGAAAAACGATGCGACTCAAAG	GCGCCATATAATTCAGACCCACAAAA	7ES	100	[49]
Xcfa2049	TAATTTGATTGGGTCGGAGC	CGTGTCGATGGTCTCCTTG	7ES	257	[49]
Xcfa2174	ACGGCATCACAGGTTAAAGG	GGTCTTTGCACTGCTAGCCT	7ES	240	[49]
Xcfd14	CCACCGGCCAGAGTAGTATT	TCCTGGTCTAACAACGAGAAGA	7ES	103	[49]
Xcfd21	CCTCCATGTAGGCGGAAATA	TGTGTCCCATTCACTAACCG	7ES	260	[49]
Xcfd31	GCACCAACCTTGATAGGGAA	GTGCCTGATGATTTTACCCG	7ES	340	[49]
Xcfd66	AGGTCTTGGTGGTTTTGGTG	TTTTCACATGCCCACAGTTG	7ES	119	[49]
Xedm109	ATGAGGCACAAGTGGATGGT	CTCCTGAAGGGAAAAGCTCA	7ES	446	[39]
Xedm16	TCACCTAACAGCACCACGAG	GCCGAGTACCAGCAGTACCA	7ES	195	[39]
Xedm34	TTGTTTCTTGGCTGGGTTTC	GATCTGCCAAAGCCTTCATAA	7ES	150	[39]
Xgwm154	TCACAGAGAGAGAGGGAGGG	ATGTGTACATGTTGCCTGCA	7ES	325	[49]
Xgwm156	CCAACCGTGCTATTAGTCATTC	CAATGCAGGCCCTCCTAAC	7ES	158	[39]
Xgwm350	ACCTCATCCACATGTTCTACG	GCATGGATAGGACGCCC	7ES	160	[49]
Xgwm44	GTTGAGCTTTTCAGTTCGGC	ACTGGCATCCACTGAGCTG	7ES	140	[49]
Xgwm471	CGGCCCTATCATGGCTG	GCTTGCAAGTTCCATTTTGC	7ES	141	[15]
Xgwm473	TCATACGGGTATGGTTGGAC	CACCCCCTTGTTGGTCAC	7ES	230, 200	[49]
Xmag2934	TGTTCACAAGCGATTCAAGG	AATGCAAGATGGTGGCTTCT	7ES	280	[13,43-44]
Xwmc83	TGGAGGAAACACAATGGATGCC	GAGTATCGCCGACGAAAGGGAA	7ES	153	[49]
Xwmc653	AGTGTTTTAGGGGTGGAAGGGA	CGGAACCCTAAACCCTAGTCG	7ES	190	[49]
Xwmc809	CAGGTCGTAGTTGGTACCCTGAA	TGAACACGGCTGGATGTGA	7ES	360	[49]

新窗口打开
The authors have declared that no competing interests exist.