0 引言
【研究意义】奶牛经过漫长的泌乳期,机体损耗大量营养物质,需经回乳期,进入干奶期,蓄积机体储备,更新乳腺组织及优化内分泌系统。为分娩后高效泌乳做物质准备。回乳期奶牛的回乳效果将直接影响产后泌乳量及乳汁品质。当下次泌乳期再次来临,乳腺细胞必须具有较强活力才能够支撑大量泌乳而引起的营养损耗[1]。若乳腺上皮细胞持续分泌乳汁,乳腺细胞无法休整,不仅影响下一个泌乳期的泌乳量,且对之后胎次的泌乳均有不利影响[2]。因此,缩短回乳期,使奶牛快速进入干乳期,对奶牛乳腺的保护具有重要意义。目前还未见专一缩短奶牛回乳期的药物,复方天然植物制剂因具有多种功效,无抗药性和耐药性,无药物残留和不良反应少等独特优势,自古以来一直被广泛应用于提高免疫、促进生长、催乳和回乳等[3]。探究复方天然植物制剂对回乳期奶牛回乳效果及血清泌乳激素、因子的影响,有助于奶牛乳房保健产品的开发,改进奶牛回乳方法,降低回乳期奶牛乳房炎发生率。【前人研究进展】影响奶牛乳腺合成、乳汁分泌的因素很多,如饲养管理、遗传育种、营养代谢、内分泌因素等[4]。但在相同的饲养管理模式下,奶牛乳腺合成、乳汁分泌主要受到泌乳激素和因子的调控,其中直接调控乳腺发育和泌乳的激素主要有胰岛素（insulin, INS）、氢化可的松（hydrocortisone,HC）、生长激素（growth hormone,GH）、催乳素（prolactin, PRL）、雌激素（estrogen, E）和孕酮（progesterone,P4）等[5-6],其通过与胰岛素样生长因子1（Insulin-like growth factor 1,IGF-1）、转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF-β1）和信号转导和转录激活因子5（signal transduction and transcriptional activation factor of 5,STAT5）等[7]细胞因子相互作用而形成乳腺发育和泌乳的调控网络。运用复方天然植物制剂可提高人、小鼠、大鼠、兔、肉牛等动物机体INS、HC、GH、IGF-1含量[3,8-13]以及促进人和小鼠等动物回乳或泌乳已有研究[14-16],并显示均与泌乳激素及因子呈一定的相关性[17-18]。【本研究切入点】奶牛经过泌乳期,机体消耗严重,需要干奶期恢复体质,更新乳腺组织,为下一个泌乳期做充分准备,而传统回乳方法效果差,容易造成乳房炎、流产、抗生素残留等副作用[19],回乳复方天然植物制剂在奶牛回乳期的运用有巨大研究前景[20]。因此本文旨在研究复方天然植物制剂对回乳期奶牛回乳效果及血清泌乳激素、因子的影响。为进一步研究复方天然植物制剂对回乳期奶牛泌乳相关激素的调控机理,以及为寻求更安全有效的回乳技术措施提供理论依据。【拟解决的关键问题】通过对回乳期奶牛饲喂复方天然植物制剂,探究血清INS、HC、GH和IGF-1含量变化,以期为复方天然植物制剂在回乳期奶牛的应用提供理论依据,确保复方天然植物制剂在奶牛回乳期的应用正确合理。1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验动物 2016年1—6月,选择四川省某规模化奶牛场半封闭统一舍饲,体重（582±41）kg、2—4胎中国荷斯坦奶牛150头。从中选取体况良好,健康,乳房、乳汁均正常,即将进入回乳期,产奶量为（15.42±0.71）kg的妊娠后期奶牛80头。随机分为A、B、C、D 4组,每组20头。各组均采用逐渐干奶法进行回乳,回乳当天记为第0天,从回乳第1天,A组为对照组,不饲喂复方天然植物制剂,B、C、D组每日上午8:00分别饲喂复方天然植物制剂400、500、600g,直至停奶,停止饲喂。1.1.2 试验药物 复方天然植物制剂由四川农业大学动物医学院奶牛疾病研究中心研发。由麦芽,朴硝,升麻,柴胡,香附,薏仁,蚕蜕,白术,黄芩,知母,苏梗,芡实,五味子,蒲公英和甘草等组成。均购自成都荷花池中药材专业市场（一等品）。按比例配方,粉碎过60目筛,塑料袋500 g/袋分装备用。
1.1.3 试验试剂 牛胰岛素、氢化可的松、生长激素和胰岛素样生长因子1双抗体夹心酶联免疫吸附检测（ELISA）试剂盒,均由美国RD公司提供。
1.2 试验方法
1.2.1 回乳方式 采用逐渐干奶法[10-11],方法为：停喂多汁饲料,减少精料喂量,以青干草为主,控制饮水,适当加强运动。在回乳第1天,挤奶次数由3次改为2次,第2天改为1次,逐渐减少挤奶次数,当日产奶量为3—4 kg时,停止挤奶。1.2.2 血清收集 试验奶牛回乳开始当天记为第0天,依次采集第0、1、3、5、7、9和11天尾静脉血10mL,置于未加抗凝剂的离心管中,室温下静置1h,离心352×g离心10min,转移上层血清于EP管中,-20℃冻存,待检。
1.2.3 ELISA检测 采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术（ELISA）测定牛胰岛素、氢化可的松、生长激素和胰岛素样生长因子1的水平,步骤严格按照说明书进行。血清样品的检测于2016 年7—8月在四川农业大学动物医学院动物疫病与人类健康四川省重点实验室和奶牛疾病研究中心进行。
1.3 统计分析
SPSSl9.0软件进行统计学分析,K-S检验计量资料是否服从正态分布,以平均数±标准差（?X±S）表示,两组间采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,相关性分析采用双变量Pearson相关分析,P<0.05为差异有统计学意义,P<0.01为差异性极显著。2 结果
2.1 复方天然植物制剂对回乳期奶牛产奶量的影响
如表1所示,A、B、C、D 4组奶牛回乳期需要时间分别是11、7、5和5d,回乳第0天,各组间奶产量差异不显著（P>0.05）;第1天,B组产奶量极显著高于D组（P<0.01）;第3—5天,A、B组产奶量均极显著高于C、D组（P<0.01）,且A组产奶量极显著高于B组（P<0.01）;第7天,A组产奶量极显著高于B组;C、D组产奶量在整个回乳期差异均不显著（P>0.05）。Table 1
表1
表1复方天然植物制剂对回乳期奶牛奶产量的影响（kg·d-1,$\bar{X}$±S）
Table 1The effects of compound natural plant preparation on the milk production of dairy cows during the period of milk withdrawal
| 时间 Time | 分组Group | |||
|---|---|---|---|---|
| A（n=20） | B（n=20） | C（n=20） | D（n=20） | |
| 第0天0th day | 15.43±0.60 | 15.22±0.71 | 15.27±0.72 | 15.76±0.84 |
| 第1天1st day | 15.30±0.92 | 15.91±0.57A | 15.22±0.75 | 14.45±0.68B |
| 第3天3rd day | 13.33±0.42A | 10.23±1.16B | 9.38±0.92BC | 8.47±0.88C |
| 第5天5th day | 10.44±0.74A | 7.45±0.94B | 4.85±2.00C | 3.94±0.51C |
| 第7天7th day | 8.08±0.74A | 4.31±0.68B | - | - |
| 第9天9th day | 6.73±1.06 | - | - | - |
| 第11天11th day | 4.38±0.73 | - | - | - |
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2.2 复方天然植物制剂对回乳期奶牛血清INS含量的影响
如表2所示,在奶牛回乳期,各组INS含量均随时间推移呈上升趋势,回乳第0—1天,各组INS含量差异均不显著（P>0.05）;第3—5天,A组INS含量极显著低于B、C、D组（P<0.01）,B组显著低于C组（P<0.05）;第7天,A、B组INS含量极显著低于C、D组（P<0.01）,A组极显著低于B组（P<0.01）;第9天,A组INS含量极显著低于B、C、D组（P<0.01）,B组显著低于C、D组（P<0.05）;第11天,A组极显著低于B、C组（P<0.01）,A组显著低于D组（P<0.05）;C、D组INS含量在整个回乳期均差异性不显著（P>0.05）。2.3 复方天然植物制剂对回乳期奶牛血清HC含量的影响
如表3所示,在奶牛回乳期,各组HC含量均随时间推移呈下降趋势,回乳第0—1天,各组HC含量差异均不显著（P>0.05）;第3—7天,A组HC含量极显著高于B、C、D组（P<0.01）;第9天,A、D组HC含量均显著高于C组（P<0.05）;第11天,A组HC含量极显著低于B、C、D组（P<0.01）,且B组显著低于C、D组（P<0.05）;C、D组HC含量在整个回乳期差异均不显著（P>0.05）。Table 2
表2
表2复方天然植物制剂对回乳期奶牛血清INS含量的影响（nIU·mL-1, $\bar{X}$±S）
Table 2The effects of compound natural plant preparation on the insulin of dairy cows during period of milk withdrawal
| 时间 Time | 分组Group | |||
|---|---|---|---|---|
| A（n=20） | B（n=20） | C（n=20） | D（n=20） | |
| 第0天0th day | 421.76±33.53a | 428.78±24.11a | 423.89±18.25a | 415.67±18.10a |
| 第1天1st day | 430.35±26.56a | 437.19±26.45a | 416.31±14.43a | 420.19±25.58a |
| 第3天3rd day | 482.43±11.67A | 526.57±35.49Ba | 563.19±21.54Bb | 544.01±27.28B |
| 第5天5th day | 535.81±18.20A | 629.90±30.74Ba | 672.54±38.16Bb | 664.37±35.82B |
| 第7天7th day | 593.19±21.36A | 694.67±21.03B | 742.82±13.47C | 741.97±23.37C |
| 第9天9th day | 638.95±20.62A | 734.08±16.29Ba | 756.81±23.16Bb | 756.55±20.26Bb |
| 第11天11th day | 702.92±27.26Aa | 737.49±9.39Bb | 732.98±21.45Bb | 731.31±15.53b |
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Table 3
表3
表3复方天然植物制剂对回乳期奶牛血清HC含量的影响（ng·mL-1, $\bar{X}$±S）
Table 3The effects of compound natural plant preparation on the HC of dairy cows during the period of milk withdrawal
| 时间 Time | 分组Group | |||
|---|---|---|---|---|
| A（n=20） | B（n=20） | C（n=20） | D（n=20） | |
| 第0天0th day | 958.90±40.92a | 981.29±57.41a | 960.09±67.99a | 938.87±52.52a |
| 第1天1st day | 946.20±54.49a | 954.57±69.67a | 1019.20±162.53a | 972.01±33.26a |
| 第3天3rd day | 1181.77±67.44A | 854.32±41.80B | 860.87±36.05B | 824.02±32.76B |
| 第5天5th day | 855.35±46.27A | 599.41±40.30B | 623.55±25.86B | 609.79±23.76B |
| 第7天7th day | 752.94±26.60A | 554.12±31.23B | 554.37±25.70B | 547.45±8.96B |
| 第9天9th day | 689.82±27.15a | 660.12±29.49ab | 642.74±21.25b | 680.51±36.74a |
| 第11天11th day | 556.67±25.27A | 806.14±44.73Ba | 849.29±24.93Bb | 854.80±32.60Bb |
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Table 4
表4
表4复方天然植物制剂对回乳期奶牛血清GH含量的影响（ng·mL-1,$\bar{X}$±S）
Table 4The effects of compound natural plant preparation on GH of dairy cows during the period of milk withdrawal
| 时间 Time | 分组Group | |||
|---|---|---|---|---|
| A（n=20） | B（n=20） | C（n=20） | D（n=20） | |
| 第0天0th day | 360.90±11.61 | 343.98±47.04 | 351.61±12.79 | 364.59±27.39 |
| 第1天1st day | 349.96±16.33 | 360.31±21.31 | 361.68±23.24 | 347.46±33.05 |
| 第3天3rd day | 328.12±11.57A | 307.15±7.30B | 282.73±6.59C | 287.61±10.44C |
| 第5天5th day | 287.75±14.07A | 209.16±16.85B | 181.50±8.73C | 182.01±10.28C |
| 第7天7th day | 247.75±15.45A | 169.92±10.95B | 209.50±14.23C | 207.99±18.52C |
| 第9天9th day | 210.74±15.50A | 204.41±10.05A | 268.23±12.05B | 277.22±12.36B |
| 第11天11th day | 177.14±12.89A | 251.14±22.23Ca | 268.24±10.33Bb | 280.15±6.66B |
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2.4 复方天然植物制剂对回乳期奶牛血清GH含量的影响
如表4所示,在奶牛回乳期,各组奶牛血清GH含量均呈下降趋势,并在回乳期后上升。第0—1 天,GH含量在四组间差异均不显著（P>0.05）;第3—7天,A组GH含量均极显著高于B、C、D组（P<0.01）;第9天,A、B组GH含量均极显著低于C、D组（P<0.01）;第11天,A组GH含量极显著低于B、C、D组（P<0.01）,B组GH含量显著低于C组（P<0.05）,B组GH含量极显著低于D组（P<0.01）;C、D组GH含量在整个回乳期差异均不显著（P>0.05）。2.5 复方天然植物制剂对回乳期奶牛血清IGF-1含量的影响
如表5所示,在奶牛回乳期,各组IGF-1含量均随时间推移呈下降趋势,并在回乳期后回升,回乳第0天,B组IGF-1含量显著高于C组（P<0.05）;第1天,各组IGF-1含量差异均不显著（P>0.05）;第37天,A组IGF-1含量极显著高于B、C、D组（P<0.01）;第9天,A、B组IGF-1含量均极显著低于C、D组（P<0.01）,A组极显著高于B组（P<0.01）;第11天,A组IGF-1含量极显著低于B、C、D组（P<0.01）;C、D组IGF-1含量在整个回乳期均差异性不显著（P>0.05）。Table 5
表5
表5复方天然植物制剂对回乳期奶牛血清IGF-1含量的影响（ng·mL-1,$\bar{X}$±S）
Table 5The effects of compound natural plant preparation on IGF-1 of dairy cows during the period of milk withdrawal
| 时间 Time | 分组Group | |||
|---|---|---|---|---|
| A（n=20） | B（n=20） | C（n=20） | D（n=20） | |
| 第0天0 th day | 56.04±3.81ab | 57.34±3.24a | 53.55±3.12b | 55.88±3.14ab |
| 第1天1st day | 54.88±3.93a | 54.99±4.24a | 54.08±2.69a | 54.74±2.45a |
| 第3天3rd day | 49.03±1.53A | 43.78±2.42Ba | 41.24±2.37BCb | 40.29±1.60C |
| 第5天5 th day | 46.78±1.70A | 39.80±2.48B | 39.43±1.56B | 40.80±2.30B |
| 第7天7 th day | 43.25±2.59A | 38.17±1.48Ba | 39.14±1.01B | 40.38±1.06Bb |
| 第9天9 th day | 42.20±2.76A | 38.59±1.02B | 45.79±2.85C | 45.82±2.09C |
| 第11天11 th day | 38.20±1.08A | 45.20±1.30B | 46.84±2.13B | 45.79±3.24B |
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2.6 回乳期奶牛血清INS、HC、IGF-1含量和产奶量间的相关性
利用对照组进行相关性分析,结果如表6所示,在奶牛回乳期,产奶量、HC、GH和IGF-1两两间均呈极显著正相关（P<0.01）,INS与产奶量、HC、GH和IGF-1均呈极显著负相关（P<0.01）。Table 6
表6
表6回乳期奶牛血清INS、HC、IGF-1含量和产奶量的相关性
Table 6Correlation between the expression levels of INS, HC and IGF-1 milk yield during the period of withdrawal
| 指标 Index | 产奶量 Milk yield (kg·d-1) | 胰岛素 INS(nIU·mL-1) | 氢化可的松 HC(ng·mL-1) | 生长激素 GH(ng·mL-1) | 胰岛素样生长因子1IGF-1(ng·mL-1) | |||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| r值 r value | P值 P value | r值 r value | P值 P value | r值 r value | P值 P value | r值 r value | P值 P value | r值 r value | P值 P value | |
| 产奶量 Milk yield | - | - | -0.965** | <0.001 | 0.828** | <0.001 | 0.957** | <0.001 | 0.922** | <0.001 |
| 胰岛素 INS | - | - | -0.812** | <0.001 | -0.956** | <0.001 | -0.885** | <0.001 | ||
| 氢化可的松 HC | - | - | 0.824** | <0.001 | 0.693** | <0.001 | ||||
| 生长激素 GH | - | - | 0.901** | <0.001 | ||||||
| 胰岛素样生长因子1 IGF-1 | - | - | ||||||||
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3 讨论
3.1 对回乳期奶牛产奶量的影响
目前,人医运用麦芽口服,芒硝外敷等回乳方式已不少见[14,16]。王雄[14]使用“回乳抑增一号”（麦芽、牡蛎、浙川贝等）使妇女溢乳改善,郝振华等[15]利用麦芽治疗妇女产后溢乳有明显疗效。现有回乳复方天然植物制剂中多有麦芽,且已经人工合成麦角衍生物——卡麦角林能明显抑制PRL生成,进而控制泌乳[22]。然而,复方天然植物制剂运用于奶牛回乳还鲜有报道,本研究结果显示,在奶牛回乳过程中,各组奶牛产奶量均随时间推移呈降低趋势,回乳第1天,400g组产奶量极显著高于500g组（P<0.01）;第3—5天,对照组和400g组产奶量极显著高于500、600g组（P<0.01）,且对照组产奶量极显著高于400g组（P<0.01）,表明了复方天然植物制剂具有较好回乳效果,缩短了奶牛回乳期,且有效减少了日产奶量,推测其机理可能是复方天然植物制剂以炒麦芽消食、回乳[14,16];升麻、柴胡、香附、白术疏肝理气;黄芩、知母、苏梗安胎;五味子、蒲公英固精敛阴,清热解毒,统筹全局,断其生化之源,使肝气调达四运,有效抑制乳汁分泌而回乳,500、600g组产奶量在整个回乳期差异均不显著（P>0.05）,表明饲喂复方天然植物制剂达到500g/日时,回乳效果即可达到最佳。3.2 对回乳期奶牛血清INS含量的影响
INS具有加强糖原合成、维持血糖恒定并调控泌乳等作用[23]。其可激活胰岛素亚基受体I（IRS-I）,通过配体约束力和自动磷酸化的诱导,促使生成INS受体蛋白位点,从而调控乳腺上皮细胞乳糖、乳脂的生物合成[24]。但INS对反刍动物乳腺发育的作用仍存在争议,佟慧丽等[25]利用INS处理奶山羊乳腺上皮细胞后发现,细胞活力无明显变化,而陈建晖等[26]对奶牛乳腺上皮细胞进行类似处理后细胞活力下降,田青等[27]则表示INS对奶牛泌乳细胞生长及分化均有促进作用。本研究结果显示,在奶牛回乳过程中,血清INS含量在第0—1天变化不显著（P>0.05）,在第3—11天依次升高且差异均极显著（P<0.01）,可能由于回乳期间GH含量降低,其对INS的抑制作用减少,并且由于怀孕后期,胎犊宫内发育需要大量糖脂沉积,共同促进机体释放INS。PANG等[28]利用黄连治疗糖尿病患者取得良好效果,王璟[8]发现生地、黄芪、当归等组成的复方天然植物制剂提高了糖尿病患者INS含量,张秋华等[9]指出,黄芩、知母、白术等复方天然植物制剂可提高小鼠体内INS表达量,另有研究表明,黄连、黄芩、知母等复方天然植物制剂能够显著提高INS对糖代谢作用率[29],本研究显示,在奶牛回乳过程中,复方天然植物制剂能够极显著提高回乳期奶牛血清INS含量（P<0.01）,400g组INS含量升高趋势较500、600g组慢,但500、600g组INS含量在整个回乳期差异均不显著（P>0.05）,表明饲喂500和600g复方天然植物制剂对奶牛回乳期血清INS含量的影响不显著。可能是复方天然植物制剂中黄芩和知母等可提升奶牛血清INS含量,促进奶牛机体糖脂沉积,为满足奶牛自身及胎儿生长发育的营养和能量需要,从而减少了产奶量。
3.3 对回乳期奶牛血清HC含量的影响
HC是哺乳动物肾上腺皮质分泌的主要糖皮质激素之一,近年来,关于HC对提高奶牛泌乳量及改善乳品质逐渐成为研究热点。HC与乳腺细胞胞内核受体结合,启动并调控泌乳相关基因表达和乳蛋白合成,通过基因组机制实现其生理和药理功能[30-31]。KABOTANSKI等[32]研究发现HC能够增强PRL对酪蛋白mRNAs累积,进而对奶牛乳腺上皮细胞增殖起重要调控。本研究结果显示,在奶牛回乳过程中,血清HC含量在第0—1天变化不显著（P>0.05）,第3天极显著高于其余各天（P<0.01）,可能是由于奶牛饲粮成分改变和饲舍转换等造成的应激使HC含量升高,而第3—11天依次降低且差异均极显著（P<0.01）,提示奶牛回乳期血清PRL降低,促使乳腺减少其泌乳细胞胞内核受体表达量,反馈抑制肾上腺皮质分泌HC[33],降低泌乳量,也从正面表明了HC在奶牛回乳中的重要作用。王喜军等[10]利用六味地黄丸降低了HC致大鼠肾虚动物模型HC表达量,苏成虎等[11]利用水芹提取物减少了HC致肾阳虚小鼠体内HC含量。本研究发现,在奶牛回乳过程中,饲喂复方天然植物制剂各组均极显著降低血清HC含量（P<0.01）,说明复方天然植物制剂降HC含量效果明显,在回乳期后,中药组血清HC含量明显回升,且各中药组间差异不显著（P>0.05）,可能是由于奶牛及胎犊对糖、脂肪和蛋白质等代谢调节需求HC[34],而对照组继续下降,可能是由于对照组回乳持续时间较长,致使HC还未达到回升期,综上所述,奶牛在回乳期HC明显降低,并在回乳期后回升,表明各组复方天然植物制剂降奶牛血清HC含量均有良好效果。
3.4 对回乳期奶牛血清GH含量的影响
GH是由脑垂体分泌的一种单一肽链的蛋白质激素,有促进生长发育,调控泌乳等作用[35-36]。运用牛生长素可调节奶牛机体物质代谢,提高饲料转化率,增加产奶量[37-38], 对早期泌乳奶牛注射GH可增加产奶量[17],其主要通过JAK2/STAT5信号通路、IGF-I和GH受体等增加乳腺血流量,使营养成分向乳腺聚集,促进乳腺发育[39]。本试验结果表明,在奶牛回乳过程中,GH含量呈下降趋势,并在回乳期后回升,可能是减少了挤奶刺激,乳房GH受体表达受到抑制,进而反馈抑制垂体分泌GH,也可能是由于怀孕末期,为满足胎犊宫内快速生长发育需求导致。李嫔等[3]利用生地、黄柏和知母等制成浓缩合剂饲喂大鼠,能够调控GH蛋白表达。LO等[31]对大鼠灌服大黄衍生物使GH表达增加。王金合等[12]对肉牛拌喂柴胡、当归等提高肉牛血清GH含量。本研究表明,在奶牛回乳过程中,对照组血清GH含量在回乳第1—11天均呈下降趋势,且在第3—7天,对照组血清GH含量极显著高于中药组（P<0.01）,400g组在第3—5天极显著高于500、600g组（P<0.01）,随后,复方天然植物制剂组GH含量均上升,且500与600g组在整个回乳期差异性不显著（P>0.05）。说明复方天然植物制剂对回乳期奶牛降GH效果明显,饲喂500g/日即可达到最佳效果,且在回乳期后,复方天然植物制剂组GH含量回升,推测复方天然植物制剂对胎儿生长发育有促进作用,而对照组GH在回乳期呈现逐渐下降趋势,可能是由于对照组奶牛回乳速度较慢,GH还未达到回升期。表明复方天然植物制剂能够使奶牛快速回乳,使血清GH含量快速回升,进而间接促进胎犊生长发育。
3.5 对回乳期奶牛血清IGF-1含量的影响
IGF-1是一类功能复杂的多肽因子,可促进乳腺泌乳,特别是介导GH的催乳作用[7]。研究表明,乳腺组织中存在IGF-1及其受体,对早期泌乳奶牛注射GH,增加了IGF-1及其受体表达量[17],另外,IGF-1可直接通过受体作用于乳腺,对乳腺最终分化完全、发育成熟与乳汁生成以及新生儿的生长发育具有调控作用[41],MURNEY等[42]和HERNANDEZ等[43]也表示IGF-1与奶牛产奶量相关性显著。本研究结果表示,在奶牛回乳过程中,血清IGF-1含量依次呈阶梯式下降,而第0和1天、第3和5天、第7和9天、第9和11天之间差异均不显著（P>0.05）,与上述结果趋势一致,可能是由于GH降低,其与IGF-1结合减少,反馈抑制乳腺泌乳细胞分泌。表明奶牛IGF-1不仅在奶牛青春期乳腺生长和泌乳期起正向调控,且在奶牛回乳期可降低IGF-1含量,促进回乳进行。王昶[44]和唐中生等[45]发现丹参可使大鼠血清和肝组织IGF-1表达量上升,张弛等[46]利用丹参、黄芩等组成的复方天然植物制剂在兔上的研究结果类似,石宝明等[13]利用益母草、王不留行、黄芩等组成的复方天然植物制剂显著增加泌乳大鼠产奶量及IGF-1含量。本试验结果显示,在奶牛回乳过程中,对照组血清IGF-1含量较复方天然植物制剂组下降慢,复方天然植物制剂500和600g组血清IGF-1含量下降较400g组快,而复方天然植物制剂组500和600g差异不显著（P>0.05）。表明复方天然植物制剂降IGF-1效果明显,其中500、600g组效果较好,在回乳期后复方天然植物制剂IGF-1含量均上升,表明复方天然植物制剂可使奶牛快速回乳,减少IGF-1低含量持续时间,间接促进IGF-1对GH的介导作用,加快胎犊生长发育。
3.6 血清INS、HC、GH、IGF-1含量和产奶量间的相关性
神经内分泌的多种激素与乳腺外组织及乳腺分泌的多种生长因子相互协同,以内分泌、旁分泌和自分泌等方式共同调节乳腺的生长发育和泌乳[5]。有研究表明,IGF-1可介导GH的催乳作用,提高奶牛产奶量[47],而INS与GH在泌乳过程中存在拮抗,当血清中存在高浓度的INS,其调控葡萄糖转运至非乳腺组织,使乳腺对葡萄糖的摄取不敏感,而IGF-1介导的GH在低水平INS下可调节乳腺和乳腺外营养竞争,使营养向乳腺转移,促进乳腺发育和乳的合成[48]。本研究显示,奶牛回乳期,GH含量与HC含量、IGF-1含量和产奶量呈极显著正相关（P<0.01）,INS含量与IGF-1、HC含量、GH含量和奶产量呈极显著负相关（P<0.01）,另有研究资料表明,HC可促进乳腺对葡萄糖的摄取,提升血清IGF-1含量,增加泌乳量[47],本研究显示,奶牛回乳期,IGF-1含量、HC含量和产奶量两两间呈极显著正相关（P<0.01）,表明在奶牛回乳期,IGF-1、GH和HC对奶牛回乳起负向调控功能,而INS对奶牛回乳起正调控作用。4 结论
复方天然植物制剂能显著促进回乳期奶牛回乳,饲喂500g/日复方天然植物制剂,奶牛回乳时间为5d,回乳效果即可达到最佳。回乳期奶牛血清胰岛素、氢化可的松、胰岛素样生长因子1含量和产奶量变化两两间均呈极显著相关,生长激素、胰岛素样生长因子1和氢化可的松对奶牛回乳起负向调控作用,而胰岛素对奶牛回乳起正调控作用。The authors have declared that no competing interests exist.
