Effects of Whole Plant Corn Silage Ratio in Diet on Growth Performance, Rumen Fermentation, Nutrient Digestibility and Serological Parameters of Dorper×Hu Crossbred Female Lambs
WANG JinFei,1, YANG GuoYi2, FAN ZiHan2, LIU Qi2, ZHANG PengCheng1, REN YouShe1, YANG ChunHe1, ZHANG ChunXiang,1通讯作者:
责任编辑: 林鉴非
收稿日期:2020-04-13接受日期:2020-08-28网络出版日期:2021-02-16
基金资助: |
Received:2020-04-13Accepted:2020-08-28Online:2021-02-16
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王金飞,Tel:15003444648;E-mail:
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王金飞, 杨国义, 樊子菡, 刘旗, 张鹏程, 任有蛇, 杨春合, 张春香. 饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔生长性能、瘤胃发酵、养分消化率及血清学指标的影响[J]. 中国农业科学, 2021, 54(4): 831-844 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2021.04.014
WANG JinFei, YANG GuoYi, FAN ZiHan, LIU Qi, ZHANG PengCheng, REN YouShe, YANG ChunHe, ZHANG ChunXiang.
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0 引言
【研究意义】优质青粗饲料资源短缺是限制畜牧业发展的重要因素之一[1,2],“干草+精料”仍是目前我国肉羊育肥的主要饲喂模式,高精料的饲喂模式不仅增加了饲养成本,而且容易引发肉羊营养代谢疾病。断奶后羔羊正处于快速生长发育阶段,饲粮营养水平及组成直接影响着育肥羊的生长速度、健康状况及羊肉品质。因此,充分发掘和利用农区潜在的青粗饲料资源,已成为保障肉羊产业可持续健康发展的关键。全株玉米青贮作为高产奶牛的饲粮中广泛使用的优质青粗饲料[3],如果将其用于肉羊规模化养殖,解决优质青粗饲料资源短缺问题,必将推动肉羊产业快速发展。【前人研究进展】与干草相比,全株玉米青贮可以有效降低饲粮纤维含量,改善适口性,且其籽实中富含淀粉等营养成分,饲粮中添加全株玉米青贮可以显著提高日增重、降低料重比[4,5,6];全株玉米青贮饲料中富含乳酸菌[7]等益生菌,有效抑制了霉菌和腐败菌的生长,使青贮中的蛋白质、维生素和胡萝卜素等营养成分得以大量保存,在一定程度上增强了动物机体的抗氧化力和免疫力[8]。【本研究切入点】青贮饲料在奶牛上已经广泛应用,但在羊饲粮中应用还处于起步阶段,由于全株玉米青贮较低pH,长期单一饲喂、高比例饲喂或者饲养不当可引起瘤胃酸中毒、腹泻等症状,不利于肉羊健康生产[9]。因此,寻求合理的全株玉米青贮添加比例,对保证羊的高效安全生产有重要意义。【拟解决的关键问题】本试验旨在研究饲粮中添加不同比例全株玉米青贮对杜湖杂种羔羊生长性能、瘤胃发酵特性及养分消化率的影响,并通过比较试验羊在不同试验阶段血清学指标的变化来反映机体的健康状况和组织器官功能,寻求既能使动物高效生产又不影响动物健康的最佳全株玉米青贮添加比例,为全株玉米青贮在肉羊产业中的推广利用提供科学依据。1 材料与方法
1.1 试验时间与地点
试验时间为2018年12月至2019年4月。试验地点位于山西省晋中市太谷区北洸乡北洸村山西保森畜牧有限公司。试验共115 d,其中预试期15 d,正试期100 d,包括饲养试验90 d和消化代谢试验10 d。1.2 试验材料
全株玉米青贮由山西保森畜牧有限公司提供,于2018年9月,使用美迪9QZ-2800自走式青饲料收割机对全株玉米(大京九26)进行刈割,留茬高度为14 cm左右,全株粉碎至2 cm,窖储至2018年12月开封使用。经测定全株玉米青贮的营养成分如下:干物质(DM)24.10 %、粗蛋白质(CP)7.96% DM、中性洗涤纤维(NDF)37.44% DM、酸性洗涤纤维(ADF)26.15% DM、钙(Ca)0.47% DM、磷(P)0.16% DM。1.3 试验设计
采用单因素试验设计,选择健康状况良好、体重相近(16±1.5)kg杜湖(杜泊羊♂×湖羊♀)杂一代断奶母羔羊72只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复3只羊,Ⅰ组为对照组,饲喂以花生秧作为粗饲料来源的基础饲粮,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组为试验组,分别添加用20%、40%和60%(DM)全株玉米青贮代替基础饲粮中花生秧。1.4 试验饲粮
试验饲粮参考NRC[10](2007)中体重20 kg,日增重300 g的母羊营养需要量,按照等能等氮的原则配制4种饲粮,试验饲粮组成及营养水平见表1。Table 1
表1
表1试验饲粮组成及营养水平(干物质基础,%)
Table 1
项目 Items | Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ |
---|---|---|---|---|
原料 Ingredients | ||||
全株玉米青贮 Whole-plant corn silage | 0.0 | 20.0 | 40.0 | 60.0 |
花生秧 Peanut seedling | 51.3 | 33.3 | 16.3 | 2.1 |
玉米 Maize | 27.5 | 24.8 | 23.0 | 24.2 |
麸皮 Wheat bran | 9.0 | 10.4 | 8.6 | 0.0 |
豆粕 Soybean meal | 4.0 | 4.0 | 3.8 | 6.5 |
豆饼 Bean cake | 6.8 | 5.9 | 6.5 | 5.3 |
食盐 Salt | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
石粉 Limestone | 0.0 | 0.1 | 0.2 | 0.0 |
磷酸氢钙 CaHPO4 | 0.0 | 0.1 | 0.2 | 0.5 |
小苏打 NaHCO3 | 0.4 | 0.4 | 0.4 | 0.4 |
预混料 Premix1) | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
合计 Total | 100 | 100 | 100 | 100 |
营养水平 Nutrient levels3) | ||||
代谢能 ME (Mcal·kg-1) | 11.51 | 11.52 | 11.53 | 11.52 |
粗蛋白 CP | 14.88 | 14.84 | 14.89 | 14.90 |
非纤维性碳水化合物 NFC2) | 32.77 | 34.46 | 35.99 | 38.34 |
中性洗涤纤维 NDF | 42.57 | 41.08 | 39.29 | 37.46 |
酸性洗涤纤维 ADF | 26.56 | 26.14 | 25.62 | 22.15 |
钙 Ca | 0.63 | 0.62 | 0.59 | 0.59 |
磷 P | 0.42 | 0.41 | 0.38 | 0.38 |
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1.5 饲养管理
试验前进行免疫注射(羊传染性胸膜肺炎、羊口蹄疫疫苗、羊三联四防疫苗、羔羊大肠杆菌疫苗及小反刍兽疫疫苗)、体内驱虫和打耳标等工作。采用全舍饲TMR日粮饲养方式。每天07:00和17:00饲喂两次。自由采食、自由饮水,并保证饮用水新鲜清洁。饲喂时观察试验羊的健康情况,如有羊只突发疾病,及时隔离治疗。每隔15 d对羊圈消毒一次,保证环境干净、卫生,预防疾病。1.6 测定指标及方法
1.6.1 生长性能测定 正试期开始第1天早晨空腹称重,记录为羊只的初始体重,之后每个月早晨空腹称重一次,记录羊只体重,计算平均日增重(average daily gain, ADG);称量和记录每天饲粮投喂量与剩料量,以计算干物质采食量(dry matter intake, DMI)和饲料转化率。1.6.2 消化代谢指标的测定及饲料分析 在正试期第91天,每组选择6只体重接近平均体重的试验羊置于代谢笼内,采用全收粪尿法进行为期10 d消化代谢试验,其中适应期5 d,正试期5 d。记录消化代谢试验期间试验羊的每天采食量、剩料量、总排粪量以及总排尿量,正试期时每天每只羊取总排粪量10%作为粪样,尿桶内每天加入10%稀硫酸100 mL用于固定尿氮,收集尿样前先将尿液进行过滤,按总排尿量10%进行取样,收集的粪、尿样于-20℃冷冻保存。
利用电热鼓风干燥箱(GZX-9240MEB,博讯实业有限公司,上海)对所收集全株玉米青贮、饲粮样品以及粪样进行水分含量测定,经粉碎过筛(0.4 mm)后制成分析样品,用于常规营养成分的测定。全株玉米青贮、饲粮样品以及粪样的中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量采用半自动分析仪(A200i,ANKOM,美国)进行测定[11],粗蛋白(CP)含量采用全自动凯氏定氮仪(KDY-9830,科普顺科技有限公司,北京)进行测定[12],粗灰分(Ash)含量使用马弗炉进行测定并计算有机物(OM)含量[13];全株玉米青贮和饲粮样品中钙(Ca)含量采用原子吸收光谱仪(AA-7020,岛津,日本)进行测定,磷(P)含量采用分光光度计(UV1100,天美科学仪器有限公司,上海)进行测定;饲粮、粪样和尿样中总能(GE)采用氧弹量热仪(TJHY-5000,天健电子科技有限公司,鹤壁,河南)进行测定。养分消化率及氮代谢计算公式如下:
某养分表观消化率=(该养分摄入量–粪中该养分排出量)/该养分摄入量
总排泄氮=粪氮+尿氮
可消化氮=摄入氮–粪氮
氮沉积率=[摄入氮–(粪氮+尿氮)]/摄入氮
1.6.3 瘤胃发酵样品采集与测定 在正试期第101天,晨饲3 h后,通过口腔采集瘤胃液,并用4层无菌纱布过滤,立即测定瘤胃液pH(便携式pH计,雷磁PHS-3G),然后分装于15 mL离心管中,液氮保存,带回实验室,用于测定挥发性脂肪酸(VFA)和氨态氮(NH3-N)浓度,采用日本岛津GC-200气相色谱仪测定瘤胃液中VFA浓度,采用靛蓝比色法测定NH3-N浓度。
1.6.4 血清样品采集与测定 在第30、60和90天晨饲前,经颈静脉采血,经3 500 r/min离心15 min,收集血清,于-80℃保存备用。
采用迈瑞BS-420全自动生化仪测定总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(UREA)、葡萄糖(GLU)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP);采用北京华英生物技术研究所试剂盒测定免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。
1.7 数据统计与分析
采用SAS 9.2统计软件中one-way ANOVA模型进行体重、瘤胃发酵数据、消化代谢数据分析,并采用Duncan氏法进行多重比较。统计模型(1)如下:式中:μ为平均数;T为处理效应(i=1、2、3、4);ε为残差。数据均以平均值±标准差(Mean±SD)表示,P<0.05为差异显著标准,P<0.01为差异极显著标准。
采用SAS 9.2统计软件中重复测量数据的MIXED模型进行平均日增重、干物质采食量、饲料转化率及血清学数据的分析,并采用Duncan氏法进行多重比较,统计模型(2)如下:
式中:μ为平均数;T为处理(i=1、2、3、4),固定效应;M为饲喂时间(j=1、2、3),固定效应;当进行干物质采食量、饲料转化率数据分析时以每个重复为单位,C为重复组(k=1、2…24);当进行平均日增重和血清学数据分析时以每个试验羊为单位,C为试验羊个体(k=1、2…72),随机效应;ε为残差。
2 结果
2.1 对杜湖杂交母羔生长性能的影响
饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂种母羔生长性能影响的试验结果见表2。从表2看出,试验第1天时,各组试验羊体重差异不显著(P>0.05)。Ⅲ组试验羊体重在60、90 d时最高,显著高于Ⅳ组(P<0.05);Ⅲ组试验羊ADG在1—30 d、61—90 d及1—90 d显著高于Ⅳ组(P<0.05);Ⅲ组羊饲料转化率在1—30 d、1—90 d均显著低于Ⅰ组和Ⅳ组(P<0.05),Ⅳ组羊饲料转化率在31—60 d显著低于其他组(P<0.05)。但饲粮中不同比例全株玉米青贮对各组羊30 d体重、31—60 d ADG、61—90 d饲料转化率及试验期内DMI无显著影响。Table 2
表2
表2饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔生长性能的影响
Table 2
项目 Item | 组别 Groups | 固定效应P值 P values of fixed effects | |||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
Ⅰ组 | Ⅱ组 | Ⅲ组 | Ⅳ组 | 组别 Groups | 时间 Time | 组别×时间 Groups×Time | |
体重 BW (kg) | |||||||
1 d | 18.70±1.10 | 18.44±1.09 | 19.08±1.16 | 19.01±0.96 | 0.4498 | ||
30 d | 21.56±1.27 | 22.10±2.21 | 23.26±2.28 | 21.90±1.87 | 0.1760 | ||
60 d | 27.92±1.49ab | 28.53±2.38ab | 29.75±2.89a | 26.70±2.52b | 0.0256 | ||
90 d | 34.81±2.15a | 35.40±2.60a | 36.95±3.01a | 32.64±2.42b | 0.0019 | ||
平均日增重 ADG (g·d-1) | |||||||
1-90 d | 179.07±24.92a | 188.43±29.23a | 198.57±26.14a | 151.39±26.91b | 0.0010 | <0.0001 | 0.6596 |
1-30 d | 95.42±31.89b | 121.81±41.85ab | 139.45±46.59a | 96.39±52.88b | 0.0500 | ||
31-60 d | 211.94±48.92 | 214.31±94.51 | 216.11±46.47 | 159.86±42.92 | 0.0889 | ||
61-90 d | 229.86±43.89a | 229.17±27.89a | 240.14±22.18a | 197.92±32.86b | 0.0175 | ||
干物质采食量 DMI (g·d-1) | |||||||
1-90 d | 1.01±0.08 | 1.00±0.07 | 0.97±0.14 | 0.93±0.07 | 0.5492 | <0.0001 | 0.1053 |
1-30 d | 0.66±0.06 | 0.65±0.08 | 0.69±0.16 | 0.68±0.13 | 0.9157 | ||
31-60 d | 1.10±0.10 | 1.06±0.05 | 0.98±0.16 | 0.94±0.08 | 0.0759 | ||
61-90 d | 1.29±0.13 | 1.28±0.13 | 1.25±0.15 | 1.19±0.10 | 0.5408 | ||
饲料转化率 F/G | |||||||
1-90 d | 5.89±0.48ab | 5.30±0.39bc | 4.91±0.78c | 6.29±0.55a | 0.0020 | <0.0001 | 0.0550 |
1-30 d | 6.89±0.61a | 5.34±0.68b | 4.97±1.11b | 6.99±1.33a | 0.0025 | ||
31-60 d | 5.18±0.48b | 4.95±0.25b | 4.54±0.74b | 5.90±0.47a | 0.0017 | ||
61-90 d | 5.60±0.58 | 5.60±0.58 | 5.20±0.64 | 6.00±0.53 | 0.1689 |
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全株玉米青贮饲喂的持续时间极显著影响试验期内ADG、DMI及饲料转化率(P<g4790.01),但饲喂持续时间与试验处理之间无显著互作效应(P>0.05)。
2.2 对杜湖杂交母羔瘤胃发酵的影响
如表3所示,各组试验羊瘤胃液pH及TVFA浓度随着全株玉米青贮添加比例的升高而降低,但差异不显著(P>0.05);Ⅳ组试验羊瘤胃液中NH3-N浓度显著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05)。挥发性脂肪酸中Ⅲ组和Ⅳ组瘤胃液中丙酸比例显著高于Ⅱ组(P<0.05),极显著高于Ⅰ组(P<0.01);而Ⅲ组和Ⅳ组乙酸比例、丁酸比例极显著低于Ⅰ组和Ⅱ组(P<0.01),乙酸/丙酸数值显著低于Ⅱ组(P<0.05),极显著低于Ⅰ组(P<0.01);全株玉米青贮添加比例对瘤胃液中异丁酸比例、戊酸比例及异戊酸比例无显著的影响(P>0.05)。Table 3
表3
表3饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔瘤胃发酵的影响
Table 3
项目 Item | 组别 Groups | P值 P value | |||
---|---|---|---|---|---|
Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ | ||
pH | 6.60±0.19 | 6.57±0.16 | 6.55±0.13 | 6.45±0.18 | 0.6757 |
氨态氮 NH3-N (mg·dL-1) | 8.23±1.39b | 8.51±2.81b | 9.00±1.84b | 13.26±4.08a | 0.0144 |
总挥发性脂肪酸 TVFA (mmol·L-1) | 110.88±10.78 | 103.39±9.72 | 101.69±9.74 | 99.99±7.70 | 0.5581 |
乙酸 Acetate (%) | 68.06±1.07a | 67.20±0.89a | 65.28±1.67b | 64.90±1.43b | 0.0036 |
丙酸 Propionate (%) | 14.74±1.23c | 17.06±0.89b | 21.28±1.14a | 21.37±0.52a | <0.0001 |
丁酸 Butyrate (%) | 14.41±1.78a | 13.00±1.51a | 10.86±0.74b | 11.03±1.45b | 0.0030 |
异丁酸 Isobutyrate (%) | 0.92±0.05 | 0.86±0.08 | 0.74±0.04 | 0.84±0.08 | 0.0696 |
戊酸 Valerate (%) | 0.81±0.07 | 0.84±0.09 | 0.78±0.09 | 0.84±0.05 | 0.8435 |
异戊酸 Isovalerate (%) | 1.06±0.13 | 1.04±0.15 | 1.05±0.10 | 1.07±0.17 | 0.9924 |
乙酸/丙酸 Acetate/Propionate | 4.72±0.19a | 3.95±0.18b | 3.07±0.23c | 3.05±0.16c | <0.0001 |
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2.3 对杜湖杂交母羔营养物质表观消化率的影响
如表4所示,添加全株玉米青贮显著提高了饲粮中DM、OM和GE表观消化率(P<0.05),其中Ⅲ、Ⅳ组DM、GE表观消化率显著高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组OM表观消化率显著高于Ⅰ组(P<0.05),对NDF表观消化率无显著影响(P>0.05);饲粮中添加全株玉米青贮显著降低了粪氮排出量(P<0.05),提高了氮表观消化率(P<0.05);Ⅳ组尿氮排出量显著高于Ⅲ组(P<0.05),Ⅲ组氮沉积率显著高于Ⅰ和Ⅳ组(P<0.05);对摄入氮、总排泄氮及可消化氮无显著影响(P>0.05)。Table 4
表4
表4饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔营养物质表观消化率的影响
Table 4
项目 Item | 组别 Groups | P值 P value | |||
---|---|---|---|---|---|
Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ | ||
干物质 DM (%) | 59.40±2.50b | 66.00±4.08ab | 67.67±3.45a | 67.33±2.85a | 0.0482 |
有机物 OM (%) | 65.83±3.18b | 71.83±3.27a | 73.33±3.10a | 73.50±3.45a | 0.0238 |
中性洗涤纤维 NDF (%) | 51.83±3.67 | 56.17±4.72 | 52.33±4.63 | 50.83±4.18 | 0.5641 |
总能 GE (%) | 64.17±2.26b | 70.33±3.86ab | 71.67±2.23a | 72.50±3.19a | 0.0446 |
摄入氮 Nitrogen intake (g·d-1) | 30.48±3.13 | 30.36±3.15 | 29.56±3.67 | 28.09±2.48 | 0.5417 |
粪氮 Fecal nitrogen (g·d-1) | 11.08±1.98a | 8.69±1.26b | 7.93±0.93b | 7.59±1.15b | 0.0014 |
尿氮 Urinary nitrogen (g·d-1) | 6.46±1.76ab | 6.21±1.64ab | 5.28±1.10b | 8.28±1.06a | 0.0456 |
总排泄氮 Total nitrogen excretion (g·d-1) | 17.54±3.02 | 14.90±2.12 | 13.21±2.50 | 15.87±2.96 | 0.1189 |
可消化氮 Digestible nitrogen (g·d-1) | 19.41±3.23 | 21.67±3.65 | 21.63±2.98 | 20.50±3.20 | 0.5922 |
氮表观消化率 Apparent digestibility of nitrogen (%) | 63.17±3.68b | 71.17±3.18a | 73.00±2.19a | 72.67±2.54a | 0.0156 |
氮沉积率 Nitrogen retention rate (%) | 41.87±4.08b | 50.38±3.04ab | 54.97±2.65a | 43.40±2.98b | 0.0441 |
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2.4 对杜湖杂交母羔血清学指标的影响
2.4.1 对杜湖杂交母羔血清生化指标的影响 由表5可知,在90 d时Ⅲ组试验羊血清中GLU水平显著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ组(P<0.05);饲粮中添加不同比例全株玉米青贮对试验羊血清中AST、ALT和ALP活性及UREA、TC、TG、TP和ALB水平无显著影响(P>0.05)。随全株玉米青贮饲喂持续时间延长极显著降低血清中AST、ALT、ALP活性(P<0.01),显著降低血清中TG水平(P<0.05);但饲喂持续时间与试验处理之间无显著互作效应(P>0.05)。Table 5
表5
表5饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔血清生化指标的影响
Table 5
项目 Item | 组别 Groups | 固定效应P值 P values of fixed effects | |||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ | 组别 Groups | 时间 Time | 组别×时间 Groups×Time | |
谷草转氨酶 AST (U·L-1) | |||||||
1-90 d | 101.76±13.83 | 103.39±11.90 | 101.19±11.05 | 101.70±11.22 | 0.9496 | <0.0001 | 0.4419 |
60 d | 101.57±12.30 | 100.57±14.45 | 98.37±15.78 | 98.96±12.41 | 0.9418 | ||
90 d | 91.89±8.36 | 99.33±11.99 | 98.53±12.41 | 99.70±11.76 | 0.3247 | ||
谷丙转氨酶 ALT (U·L-1) | |||||||
1-90 d | 21.39±4.33 | 20.28±3.91 | 22.41±5.34 | 18.91±4.96 | 0.1526 | <0.0001 | 0.2301 |
30 d | 24.27±4.34 | 23.42±4.44 | 24.87±5.75 | 21.22±6.10 | 0.2364 | ||
60 d | 20.89±3.21 | 18.89±3.97 | 22.23±6.07 | 18.80±5.09 | 0.1609 | ||
90 d | 19.01±4.65 | 18.55±3.51 | 20.14±2.93 | 16.73±5.02 | 0.0845 | ||
尿素氮 UREA (mmol·L-1) | |||||||
1-90 d | 2.95±0.68 | 2.86±0.63 | 2.75±0.62 | 2.92±0.50 | 0.8244 | 0.1550 | 0.8626 |
30 d | 2.99±0.47 | 2.92±0.59 | 2.96±0.65 | 2.95±0.59 | 0.9907 | ||
60 d | 2.94±0.57 | 2.86±0.59 | 2.67±0.53 | 2.95±0.62 | 0.5489 | ||
90 d | 2.92±0.95 | 2.81±0.90 | 2.61±0.87 | 2.86±0.70 | 0.8268 | ||
总胆固醇 TC (mmol·L-1) | |||||||
1-90 d | 0.58±0.18 | 0.63±0.21 | 0.62±0.20 | 0.68±0.19 | 0.5245 | 0.0791 | 0.3326 |
30 d | 0.55±0.14 | 0.63±0.18 | 0.62±0.24 | 0.69±0.24 | 0.0952 | ||
60 d | 0.59±0.23 | 0.59±0.23 | 0.64±0.23 | 0.71±0.19 | 0.3343 | ||
90 d | 0.61±0.15 | 0.66±0.17 | 0.61±0.18 | 0.64±0.14 | 0.8108 | ||
甘油三酯 TG (mmol·L-1) | |||||||
1-90 d | 0.28±0.05 | 0.26±0.05 | 0.26±0.05 | 0.27±0.04 | 0.6427 | 0.0099 | 0.9691 |
30 d | 0.30±0.06 | 0.27±0.07 | 0.28±0.08 | 0.30±0.07 | 0.5781 | ||
60 d | 0.28±0.07 | 0.26±0.07 | 0.26±0.05 | 0.28±0.07 | 0.8323 | ||
90 d | 0.27±0.07 | 0.26±0.07 | 0.25±0.05 | 0.25±0.06 | 0.8958 | ||
总蛋白 TP (g·L-1) | |||||||
1-90 d | 54.43±3.20 | 54.29±2.92 | 52.77±2.93 | 52.51±2.35 | 0.1926 | 0.9255 | 0.6605 |
30 d | 53.61±3.92 | 54.33±3.74 | 52.31±4.32 | 52.07±2.44 | 0.3674 | ||
60 d | 54.30±4.17 | 54.36±3.81 | 53.27±3.16 | 52.39±3.62 | 0.5247 | ||
90 d | 55.37±3.94 | 54.19±3.18 | 52.72±4.07 | 53.06±3.47 | 0.0970 | ||
白蛋白 ALB (g·L-1) | |||||||
1-90 d | 25.90±1.58 | 24.82±1.30 | 24.69±1.44 | 24.58±0.96 | 0.1492 | 0.8958 | 0.3019 |
30 d | 26.60±3.49 | 24.37±1.66 | 24.56±2.47 | 24.15±1.22 | 0.1003 | ||
60 d | 25.38±1.53 | 25.54±1.33 | 24.99±1.79 | 24.78±1.84 | 0.4662 | ||
90 d | 25.71±2.07 | 26.14±2.16 | 25.58±2.23 | 25.73±1.51 | 0.8788 | ||
葡萄糖 GLU (mmol·L-1) | |||||||
1-90 d | 3.03±0.38 | 3.09±0.38 | 3.30±0.41 | 3.01±0.40 | 0.1164 | 0.0784 | 0.1010 |
30 d | 3.07±0.49 | 3.16±0.37 | 3.15±0.48 | 3.00±0.50 | 0.7553 | ||
60 d | 2.84±0.47 | 2.98±0.55 | 3.28±0.51 | 3.09±0.55 | 0.1064 | ||
90 d | 2.94±0.27c | 3.12±0.36bc | 3.48±0.27a | 3.19±0.23b | 0.0041 | ||
碱性磷酸酶 ALP (U·L-1) | |||||||
1-90 d | 364.47±85.99 | 353.91±87.62 | 383.54±93.17 | 336.48±67.87 | 0.3050 | <0.0001 | 0.0791 |
30 d | 413.51±82.72 | 394.57±67.51 | 440.92±78.30 | 397.00±75.03 | 0.3452 | ||
60 d | 356.37±99.68 | 373.15±97.18 | 393.12±78.55 | 309.79±69.65 | 0.3118 | ||
90 d | 296.11±70.46 | 294.00±75.72 | 344.00±97.87 | 302.66±68.78 | 0.2233 |
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2.4.2 对杜湖杂交母羔血清抗氧化指标的影响 由表6可以看出,在30 d时各组试验羊血清T-AOC、MDA水平及CAT、SOD、GSH-Px活性无显著差异(P>0.05)。但随着饲喂持续时间的延长,肉羊血清T-AOC、MDA水平及CAT、SOD、GSH-Px活性出现极显著的变化(P<0.01);在60 d时Ⅳ组羊血清SOD和GSH-Px活性显著高于Ⅰ组(P<0.05),与Ⅱ和Ⅲ组差异不显著(P>0.05);在90 d时Ⅲ组羊血清T-AOC水平显著高于Ⅰ和Ⅱ组(P<0.05),Ⅳ组羊血清SOD活性显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅲ组羊血清MDA水平显著低于Ⅰ、Ⅱ组(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组羊血清GSH-Px活性显著高于Ⅰ组(P<0.05);在试验羊血清MDA水平(图1)和GSH-Px活性(图2)两个指标上饲喂持续时间与处理之间存在显著交互效应(P<0.05)。
Table 6
表6
表6饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔血清抗氧化指标的影响
Table 6
项目 Item | 组别 Groups | 固定效应P值 P values of fixed effects | |||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ | 组别 Groups | 时间 Time | 组别×时间 Groups×Time | |
总抗氧化能力 T-AOC (U·mL-1) | |||||||
1-90 d | 10.40±1.32 | 10.30±1.57 | 11.49±2.15 | 10.04±1.28 | 0.0666 | <0.0001 | 0.0701 |
30 d | 8.77±1.39 | 9.20±1.56 | 10.34±2.14 | 8.85±1.59 | 0.0515 | ||
60 d | 11.19±2.01 | 10.49±1.78 | 11.51±2.88 | 9.54±1.59 | 0.1276 | ||
90 d | 11.24±0.74b | 11.22±1.61b | 12.62±1.93a | 11.73±1.63ab | 0.0433 | ||
过氧化氢酶 CAT (U·mL-1) | |||||||
1-90 d | 50.83±6.87 | 50.56±6.50 | 50.93±5.32 | 51.52±4.62 | 0.9700 | <0.0001 | 0.0751 |
30 d | 44.33±5.51 | 44.30±5.73 | 45.11±4.57 | 47.32±5.35 | 0.2514 | ||
60 d | 50.30±5.06 | 49.14±7.52 | 47.97±5.76 | 50.15±4.68 | 0.7542 | ||
90 d | 57.84±9.41 | 58.25±7.49 | 59.71±6.08 | 57.11±7.06 | 0.8067 | ||
丙二醛 MDA (nmol·mL-1) | |||||||
1-90 d | 4.17±0.74 | 4.16±0.42 | 3.90±0.43 | 4.29±0.45 | 0.1887 | <0.0001 | 0.0089 |
30 d | 4.67±0.81 | 4.42±0.74 | 4.30±0.31 | 4.92±0.75 | 0.0886 | ||
60 d | 4.00±0.87 | 4.15±0.69 | 4.05±0.57 | 4.24±0.55 | 0.7544 | ||
90 d | 3.84±0.66a | 3.89±0.41a | 3.35±0.51b | 3.71±0.51ab | 0.0169 | ||
超氧化物歧化酶 SOD (U·mL-1) | |||||||
1-90 d | 63.83±7.89 | 64.05±6.81 | 65.51±9.59 | 69.92±5.60 | 0.1143 | <0.0001 | 0.3322 |
30 d | 58.51±11.74 | 57.53±14.09 | 55.42±14.34 | 62.84±10.96 | 0.4554 | ||
60 d | 64.60±5.88b | 66.73±6.67ab | 69.29±8.03ab | 70.55±6.38a | 0.0462 | ||
90 d | 68.39±6.25b | 67.88±8.23b | 71.80±7.25ab | 76.38±8.39a | 0.0369 | ||
谷胱甘肽过氧化物酶 GSH-Px (U·mL-1) | |||||||
1-90 d | 540.99±54.65b | 564.43±51.22ab | 563.30±47.33ab | 589.49±49.89a | 0.0457 | <0.0001 | 0.0033 |
30 d | 520.76±48.33 | 520.79±53.74 | 509.51±49.74 | 536.41±40.03 | 0.5275 | ||
60 d | 517.19±81.34b | 558.50±68.09ab | 559.12±67.32ab | 607.55±56.12a | 0.0134 | ||
90 d | 585.00±35.53b | 613.99±35.56a | 621.28±34.43a | 624.53±41.40a | 0.0041 |
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图1
新窗口打开|下载原图ZIP|生成PPT图1饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔血清MDA水平的影响
*表示组间差异显著(P0.05)。下同*
Fig. 1Effects of whole-plant corn silage ratio in diet on serum MDA of Doper × Hu crossbred female lambs
indicates significant difference between groups(P0.05). The same as below
图2
新窗口打开|下载原图ZIP|生成PPT图2饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔血清GSH-Px活性的影响
Fig. 2Effects of whole-plant corn silage ratio in diet on serum GSH-Px of Doper × Hu crossbred female lambs
2.4.3 饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂种母羔血清免疫指标的影响 由表7可知,随着饲粮中全株玉米青贮添加比例的增加,Ⅳ组羊血清IgA水平在试验期内均显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅲ组羊血清IgA水平在60、90、1—90 d显著高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅳ组羊血清IgM水平在60、90、1—90 d显著高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅳ组羊血清TNF-α浓度在60、90、1—90 d显著低于Ⅰ组(P<0.05),Ⅲ组羊血清TNF-α浓度90、1—90d显著低于Ⅰ组(P<0.05)。随全株玉米青贮饲喂持续时间延长极显著增加杜湖杂种母羔血清IgA、IgG水平,降低了TNF-α浓度(P<0.01)。但饲喂持续时间与处理之间无交互效应(P>0.05)。
Table 7
表7
表7饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔血清免疫指标的影响
Table 7
项目 Item | 组别 Groups | 固定效应P值 P values of fixed effects | |||||
---|---|---|---|---|---|---|---|
Ⅰ组 | Ⅱ组 | Ⅲ组 | Ⅳ组 | 组别 Groups | 时间 Time | 组别×时间 Groups×Time | |
免疫球蛋白A IgA (g·L-1) | |||||||
1-90 d | 0.64±0.04c | 0.66±0.04bc | 0.68±0.03ab | 0.70±0.02a | <0.0001 | 0.0016 | 0.8686 |
30 d | 0.63±0.07b | 0.64±0.06b | 0.67±0.05ab | 0.69±0.04a | 0.0169 | ||
60 d | 0.65±0.03c | 0.67±0.02bc | 0.68±0.02b | 0.70±0.02a | <0.0001 | ||
90 d | 0.64±0.05c | 0.66±0.06bc | 0.69±0.04ab | 0.71±0.01a | 0.0004 | ||
免疫球蛋白M IgM (g·L-1) | |||||||
1-90 d | 1.04±0.08b | 1.07±0.06b | 1.07±0.04b | 1.11±0.03a | 0.0038 | 0.2169 | 0.0825 |
30 d | 1.09±0.09 | 1.06±0.09 | 1.05±0.04 | 1.10±0.04 | 0.3398 | ||
60 d | 1.02±0.17b | 1.12±0.14ab | 1.08±0.12a | 1.14±0.10a | 0.0355 | ||
90 d | 1.02±0.05c | 1.04±0.07bc | 1.09±0.04ab | 1.10±0.05a | 0.0013 | ||
免疫球蛋白G IgG (g·L-1) | |||||||
1-90 d | 17.42±1.88 | 17.42±1.56 | 17.63±1.42 | 18.50±1.26 | 0.1263 | <0.0001 | 0.1939 |
30 d | 17.08±1.79 | 17.08±1.40 | 16.94±0.73 | 18.10±1.39 | 0.1827 | ||
60 d | 17.28±1.93 | 17.70±1.77 | 18.07±1.98 | 18.60±1.41 | 0.2629 | ||
90 d | 17.89±1.41 | 17.49±1.67 | 17.86±1.75 | 18.80±1.24 | 0.0782 | ||
肿瘤坏死因子 TNF-α (pg·ml-1) | |||||||
1-90 d | 62.43±9.34a | 59.82±7.65ab | 55.44±7.19b | 53.94±8.24b | 0.0238 | <0.0001 | 0.0676 |
30 d | 70.83±13.56 | 64.85±13.23 | 60.61±7.23 | 60.27±9.62 | 0.0699 | ||
60 d | 61.05±6.62a | 59.87±5.80a | 57.88±5.72ab | 55.23±5.78b | 0.0491 | ||
90 d | 55.42±8.73a | 54.75±6.10a | 47.82±9.30b | 46.32±9.45b | 0.0036 |
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3 讨论
3.1 饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔生长性能的影响
青贮饲料在经过3个月发酵后进入发酵稳定期,其营养成分及菌群丰度基本不变,并会维持数月甚至一年之久[14]。本试验使用的全株玉米青贮是经过3个月发酵,其主要营养成分及菌群丰度基本稳定,因此,在本试验期115 d内,青贮保存时间对全株玉米青贮的营养成分不会产生影响。全株玉米青贮虽气味芳香、适口性好,但高比例饲喂往往会因其乳酸含量过高而限制反刍动物的采食量。本试验中各组的平均干物质采食量从数值上随青贮比例的增加而降低,但差异不显著,这说明60%全株玉米青贮比例的饲粮已经对试验羊干物质采食量产生了轻微的影响,这一结果与梁艾东等[15]研究结果一致。Ⅲ组试验羊较高的平均日增重可能与饲粮消化率提高及粗饲料间的组合效应有关。KANANI等[16]通过对比在断奶犊牛开食料中添加苜蓿干草或玉米青贮的营养物质消化率,发现玉米青贮组NDF消化率显著高于苜蓿干草组;刘泽等[17]发现,当全株玉米青贮与花生秧干物质配比为2.7﹕1时,发生了明显的正组合效应,本试验中Ⅲ组玉米青贮与花生秧干物质比为2.45﹕1,与其比例接近。3.2 饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔瘤胃发酵的影响
瘤胃液pH、NH3-N浓度及TVFA产量是反映瘤胃微生物对饲粮降解的重要参数,与饲粮组成密切相关。在本试验中不同处理间瘤胃液pH及TVFA产量无显著差异,这与KANANI等[16]结果一致。通常情况下,瘤胃液pH受TVFA产量和唾液分泌量等因素的综合影响,瘤胃中TVFA产量越多,瘤胃液pH越低;但KIJAK等[18]在后备母牛饲粮中添加高粱青贮对瘤胃发酵影响的研究结果显示随着高粱青贮比例从85%DM降低到55%DM时,瘤胃中TVFA产量和瘤胃液pH均呈显著线性下降,并将这种线性下降归因于饲粮中快速发酵淀粉含量的差异,85%组和55%组淀粉含量分别为8.25%和28.7%。而本试验结果中随全株玉米青贮比例增加pH及TVFA的数值是降低了,表1营养成分中NFC含量增加可以解释这一现象。这两个试验的差异在于饲粮选用的青贮原料不同,高粱青贮中可溶性糖含量6.08%[18],而全株玉米青贮中淀粉含量高达25%。另外表3结果显示第IV组全株玉米青贮比例60%饲喂100 d后,瘤胃液pH均值在6.45,低于其他处理组,其pH最低值6.26,这是有两个原因造成:一是玉米青贮60%饲粮组中NFC含量从数值上高于其他处理组;二是该处理组中干草比例仅2.1%,有研究发现含有干草较多的饲粮会刺激动物反刍,增加唾液分泌,提高瘤胃的缓冲能力[19],干草比例低在一定程度上降低了瘤胃缓冲能力,但是该处理组瘤胃液pH数值在羊瘤胃正常范围内,并未引起羊瘤胃酸中毒。瘤胃液中NH3-N浓度与饲粮中粗蛋白水平及菌体蛋白合成量高度相关。瘤胃液中NH3-N作为合成菌体蛋白的主要氮源,其释放速率与瘤胃微生物可利用能量释放速率相匹配,可以提高菌体蛋白的合成量,当瘤胃中能氮释放不同步,会造成瘤胃中NH3-N累积。本试验中在4种饲粮粗蛋白水平相近的情况下,Ⅳ组羊瘤胃液中NH3-N浓度显著高于其他组,可能是由于当饲粮中花生秧被全株玉米青贮替代时,会改变饲粮中的NFC/NDF(表1),而高NFC/NDF的日粮会因为能量释放速率过快,造成能氮释放不同步,影响瘤胃中的NH3-N浓度[20]。此外还有大量研究发现,饲粮中不同NFC/NDF会改变瘤胃发酵模式,当反刍动物摄入高NFC/NDF饲粮时,瘤胃主要进行丙酸发酵,摄入低NFC/NDF饲粮时,瘤胃主要进行乙酸发酵[21,22]。这也解释了随着饲粮中全株玉米青贮比例的增加,瘤胃中乙酸和丁酸比例减少、丙酸比例增加的原因,与表5中GLU变化一致。乙酸/丙酸与瘤胃中甲烷产量呈正相关,可以间接反映瘤胃中甲烷产量[23]。本试验中,随着饲粮中全株玉米青贮比例的增加,瘤胃中乙酸/丙酸显著降低,表明饲粮中添加全株玉米青贮可能有利于减少瘤胃中甲烷的排放,SABRINA等[24,25]的研究结果也证明了这一点。因此,饲粮中添加全株玉米青贮可以改善瘤胃发酵,提高饲料利用率。3.3 饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔营养物质表观消化率的影响
粗饲料作为反刍动物饲粮中的重要组分,其种类、来源及处理方式不同,在反刍动物体内的消化利用程度也不相同。全株玉米青贮在发酵过程中,可破坏部分秸秆的细胞壁结构,减少木质素对秸秆降解的抑制作用,增加细胞内容物的溶出量[26],更容易被机体消化利用。并且当瘤胃内摄入较多NDF时,会加快瘤胃的流通速率,使得饲粮中营养物质消化率下降[27]。在本研究中,随着饲粮中全株玉米青贮添加比例的升高,饲粮NDF水平逐渐降低。因此,可以解释本研究中DM、OM表观消化率随饲粮中全株玉米青贮比例的增加而升高的结果。饲粮中碳水化合物是反刍动物能量的主要来源,可分为纤维性碳水化合物(FC)和非纤维性碳水化合物(NFC),其中NFC是饲粮中较易消化的部分。有研究结果发现饲粮中NFC比例升高有利于滩羊瘤胃内既可以分解蛋白质也可以分解淀粉的栖瘤胃普雷沃氏菌繁殖,加快微生物发酵速率,从而提高了饲粮中氮和能量的表观消化率[28],本研究结果与其一致,氮和能量表观消化率随饲粮中全株玉米青贮比例的增加而显著提高。与氮表观消化率相比,氮沉积率可以更准确地反映机体对饲粮氮的消化利用程度[29]。在本研究中,粪氮排出量随饲粮中全株玉米青贮添加比例升高而逐渐降低,变化趋势与氮表观消化率相对应。尿氮排出量在饲粮中全株玉米青贮添加比例60%(DM)时显著升高,这可能与瘤胃液中NH3-N浓度显著高于其他组有关。瘤胃中的一部分NH3-N,可被瘤胃壁吸收,在肝脏中经鸟氨酸循环生成尿素随尿液排出,增加尿氮排出量,其机理需要进一步研究。3.4 饲粮中全株玉米青贮比例对杜湖杂交母羔血清学指标的影响
血清的成分变化可用来反映反刍动物的营养水平和器官功能[30,31]。血清中AST、ALT活性是评价动物肝脏功能的重要指标,正常情况下,反刍动物血清中AST、ALT活性很小,但当肝脏发生病变、肝功能受损时,血清中转氨酶活性升高[32]。本试验中不同处理对杜湖杂种母羔血清中AST、ALT活性无显著影响,但饲喂持续时间延长降低了肉羊血清AST、ALT活性,这可能与育肥羊早期代谢旺盛有关[33]。ALP是经肝脏向胆外排出的一种酶,在肝脏中活性最高。当肝胆系统发生疾病时,血清ALP活性会升高[32],但在生理性的骨骼发育期,血清中ALP活性也会升高。由本试验结果可以看出,在同一时期,各组羊血清中ALP活性无明显差异,但随着饲喂时间的增加试验羊血清ALP活性出现显著降低,这可能是由于在试验前期各组试验羊处于骨骼发育期造成的。在本试验中,除GLU外其他各项指标均未受到不同处理的影响,表明育肥羊饲粮中可以安全添加全株玉米青贮,这与前人研究结果一致[34]。与单胃动物不同,反刍动物血清中GLU主要是瘤胃微生物分解纤维产生的挥发性脂肪酸,经糖异生途径转化而来[35],本试验中,90 d时Ⅳ组羊血清中GLU水平显著高于其他组,可能是由于随着饲粮中全株玉米青贮比例的增加,肉羊瘤胃发酵产生丙酸比例升高所致。氧化应激是指当动物体内氧自由基超过抗氧化系统的防御能力时,打破了机体氧化与抗氧化能力之间的动态平衡,倾向于氧化一侧[36],并被认为是导致疾病的一个重要因素[36]。本试验结果中,饲粮添加全株玉米青贮提高了肉羊血清SOD、GSH-Px活性及T-AOC水平,降低了MDA水平,与前人研究结果一致[37]。这可能与全株玉米青贮富含多种益生菌有关,乳酸菌的抗氧化功能已被国内外多项研究证明[38,39],当乳酸菌面临氧胁迫时,其自身会产生GSH等疏醇类物质[40]及CAT、SOD等抗氧化酶来抵抗氧胁迫。另外,结果显示杜湖杂种母羔血清GSH-Px活性和MDA水平还受到饲喂时间与处理之间交互作用的显著影响,表明长期饲喂全株玉米青贮对其抗氧化能力有显著影响。张兴夫等[41]研究发现,与饲喂全株玉米青贮相比,长期饲喂单一颗粒饲粮会破坏瘤胃上皮组织结构,导致有害物质进入血液,提高肉羊机体脂质过氧化程度,降低抗氧化能力。本试验中饲喂持续时间与处理对肉羊血清中GSH-Px活性和MDA水平交互作用的机理还需进一步研究。
IgG、IgM、IgA是检查体液免疫功能最常用的方法。血清免疫球蛋白具有抗体活性,能特异地结合抗原,参与机体免疫应答过程。TNF-α是指由单核-巨噬细胞产生的一种炎性细胞因子,其表达水平的增高预示着机体有炎症反应发生。本试验中,饲粮添加全株玉米青贮可以提高杜湖杂种母羔血清IgM、IgA水平,降低TNF-α水平。这可能原因是:与花生秧相比,全株玉米青贮是在乳熟期至蜡熟期将带穗玉米刈割贮制的优质青贮饲料,极大程度地保留了玉米和茎叶中的维生素和胡萝卜素。有研究发现已制备好的干牧草会造成80%—90%β-胡萝卜素损失,而青贮后的优质牧草只有小于20%的损失[42],并且SIEBERT等[43]研究发现,饲粮中β-胡萝卜素含量及饲养条件能显著影响血清中β-胡萝卜素含量。β-胡萝卜素作为维生素A的前提物质,在提高反刍动物抗氧化力、免疫力方面作用显著。JIN等[44]在奶牛日粮中添加维生素A,可以显著提高奶牛血清中IgG、IgA水平。因此,本试验结果表明饲粮中添加全株玉米青贮可以一定程度地提高育肥羊免疫力以及降低炎症反应。
4 结论
在本试验条件下,当饲粮中添加40%(DM)全株玉米青贮时,可以显著改善肉羊瘤胃发酵,提高养分消化率,增强肉羊的抗氧化能力和免疫功能,促进肉羊健康生长。参考文献 原文顺序
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