10%乙霉威·腐霉利微粉剂的研制及其对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果

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揣红运¹, 石延霞¹, 柴阿丽¹, 杨杰², 谢学文^,¹, 李宝聚^,¹

1 中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京100081

2 西藏自治区农牧科学院,拉萨850032

Development of 10% Diethofencarb·Procymidone Micropowder and Its Control Efficacy to Cucumber Corynespora Leaf Spot

CHUAI HongYun¹, SHI YanXia¹, CHAI ALi¹, YANG Jie², XIE XueWen^,¹, LI BaoJu^,¹

1 Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081

2 Tibet Academy of Agricultural and Animal Husbandry Sciences, Lhasa 850032

通讯作者: 谢学文，E-mail：xiexuewen@caas.cn 李宝聚，E-mail：libaoju@caas.cn

责任编辑: 岳梅
收稿日期:2018-10-31接受日期:2019-01-9网络出版日期:2019-03-16

基金资助:

国家重点研发计划.2017YFD0200603
国家重点研发计划.2016YFD0201000

农业部园艺作物遗传改良重点开放实验室

Received:2018-10-31Accepted:2019-01-9Online:2019-03-16
作者简介 About authors
揣红运,E-mail： 805724482@qq.com。

摘要
【目的】获得对多主棒孢（Corynespora cassiicola）抑菌活性高的杀菌剂乙霉威和腐霉利的最佳混配比例,将其加工成微粉剂并确定其对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果。【方法】采用菌丝生长速率法,测定乙霉威与腐霉利不同配比混合物对多主棒孢的毒力,以Wadley公式评价其协同作用,明确最佳增效组合;通过单因素试验、正交试验筛选载体、助剂及最优配比,确定其最佳配方后,利用气流粉碎机超微粉碎加工成微粉剂,测定其对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果。【结果】乙霉威与腐霉利以质量比1﹕1、1﹕4进行混配时,对多主棒孢菌株HG09112606、FQ07091401、HG11011509均表现为毒力增效作用,增效系数分别为3.19、2.53、1.68;1.99、1.77、1.98,其中1﹕1的混配组合增效作用较为明显。以质量分数为10%的乙霉威·腐霉利为有效成分,3%的萘磺酸钠盐甲醛缩合物NNO为分散剂,3%的十二烷基硫酸钠K12为表面活性剂,1%的聚氧乙烯烷基醚为稳定剂,15%的白炭黑和补足至100%的硅藻土为载体而研制的10%乙霉威·腐霉利微粉剂粒径为6.18 μm,分散指数95.18%,浮游性指数86.26,含水率1.24%,坡度角67°,热贮分解率4.12%,各项检测结果均符合标准。在盆栽试验中,10%乙霉威?腐霉利微粉剂在用药量为100 g a.i./hm²时喷粉对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果为89.82%,显著高于对照药剂35%苯甲·咪鲜胺水乳剂、43%氟菌·肟菌酯悬浮剂在推荐用量时喷雾的防治效果;在田间试验中,10%乙霉威·腐霉利微粉剂在用量为100 g a.i./hm ²时喷粉对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果为84.39%,与35%苯甲·咪鲜胺水乳剂在用量为300 g a.i./hm ²、43%氟菌·肟菌酯悬浮剂在用量为90 g a.i./hm ²时的喷雾防治效果无显著性差异。【结论】乙霉威和腐霉利混配使用对多主棒孢具有不同程度的毒力增效作用;按照选定的配方加工成的10%乙霉威?腐霉利微粉剂粒径小,分散指数、浮游性指数高,贮存稳定,在黄瓜棒孢叶斑病的防治方面具有广阔的应用前景。
关键词： 多主棒孢;黄瓜棒孢叶斑病;微粉剂;乙霉威;腐霉利;防治效果

Abstract

【Objective】 The objective of this study is to obtain the optimal mixing ratio of diethofencarb and procymidone, which had high inhibitory activity against Corynespora cassiicola, the micropowder was prepared and its control efficacy on cucumber leaf spot was determined in the field. 【Method】 The inhibitory activity of the mixtures at different mixing ratios to C. cassiicola was determined by mycelial growth rate method. The synergistic effect was evaluated according to the Wadley formula and the best synergism combination was defined. Through single factor test, orthogonal test, the carrier, additives and optimal ratio were screened, the best formula was determined and then micropowder was processed by using air jet mill. The control efficacy of micropowder on cucumber leaf spot was determined. 【Result】 When the mass ratio of diethofencarb and procymidone was 1﹕1 and 1﹕4, the virulence synergistic effect against C. cassiicola strains HG09112606, FQ07091401 and HG11011509 was observed, with the synergistic ratios of 3.19, 2.53, 1.68; 1.99, 1.77, 1.98, respectively. Among which, the ratio of 1﹕1 had a significant synergistic effect. Active ingredient diethofencarb and procymidone account for 10%, dispersant NNO accounts for 3%, surfactant K12 accounts for 3%, stabilizer polyoxyethylene alkyl ether accounts for 1%, carrier carbon-white is 15% and diatomite make up to 100%. The results showed that the above formulation had excellent characteristics, and the particle size is 6.18 μm, the dispersion index is 95.18%, the planktonic index is 86.26, the water content is 1.24%, the slope angle is 67°, and the thermal storage decomposition rate is 4.12%. All above test results are in accordance with standard. In the pot experiment, the control efficacy of 10% diethofencarb and procymidone micropowder on the cucumber leaf spot by powder injection method was 89.82% when the dosage was 100 g a.i./hm ², which was significantly higher than that of the control agent 35% difenoconazole·prochloraz emulsion in water (EW) and 43% fluopyram·trifloxystrobin suspension concentrate (SC) agent spray at the recommended dosage. In the field test, the control efficacy of 10% diethofencarb and procymidone micropowder on the cucumber leaf spot by powder injection method was 84.39% when the dosage was 100 g a.i./hm ², which had no significant difference with that of spray with 35% difenoconazole·prochloraz EW in the amount of 300 g a.i./hm ², 43% fluopyram·trifloxystrobin SC in the amount of 90 g a.i./hm ². 【Conclusion】Diethofencarb and procymidone used in combinations had different degrees of synergistic interaction against cucumber Corynespora leaf spot. The 10% diethofencarb·procymidone micropowder prepared according to the selected formula has the advantages of small particle size, high dispersion index and planktonic index, and storage stability. It has a broad application prospect in the control of cucumber Corynespora leaf spot.

Keywords：Corynespora cassiicola;cucumber Corynespora leaf spot;micropowder;diethofencarb;procymidone;control efficacy

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揣红运, 石延霞, 柴阿丽, 杨杰, 谢学文, 李宝聚. 10%乙霉威·腐霉利微粉剂的研制及其对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果[J]. 中国农业科学, 2019, 52(6): 1009-1020 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.06.005
CHUAI HongYun, SHI YanXia, CHAI ALi, YANG Jie, XIE XueWen, LI BaoJu. Development of 10% Diethofencarb·Procymidone Micropowder and Its Control Efficacy to Cucumber Corynespora Leaf Spot[J]. Scientia Acricultura Sinica, 2019, 52(6): 1009-1020 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.06.005

0 引言

【研究意义】由多主棒孢（Corynespora cassiicola）引起的黄瓜棒孢叶斑病是一种世界性分布的重要植物真菌病害,一般田间叶片发病率为10%—25%,严重时可达70%,甚至100%^[1]。随着设施黄瓜的大量种植,棚室内高温高湿的小气候环境十分有利于黄瓜棒孢叶斑病的发生与流行,使得棒孢叶斑病逐渐发展成为危害我国黄瓜生产的主要病害之一^[2],目前化学防治是控制该病最有效的手段。保护性杀菌剂在发病前使用,防治效果相对较差,治疗性杀菌剂防治效果较好,但作用位点单一,病原菌的抗药性问题不容忽视^[3]。乙霉威（diethofencarb）和腐霉利（procymidone）为对多主棒孢具有较高抑菌活性的内吸性杀菌剂^[4],尽管目前有研究报道多主棒孢对乙霉威产生抗药性,但是抗性频率较低,且该药剂与苯并咪唑类杀菌剂具有负交互抗药性^[5],腐霉利作用位点单一,属于高抗药性风险药剂^[4]。因此将乙霉威和腐霉利混配加工成具有粒径小,分散性好,流动性强,贮存稳定,农药利用率高且施药不需兑水等优点的微粉剂^[6],并明确其对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果,对于更好地防治黄瓜棒孢叶斑病及延长这2种药剂的使用寿命和降低田间苯并咪唑类杀菌剂抗性的产生具有重要意义。【前人研究进展】乙霉威是由日本住友公司在1984年开发的一种苯氨基甲酸酯类内吸性杀菌剂,广泛应用于多种蔬菜病害的防治,具有较强的保护和治疗效果^[7],其作用机理是通过与菌体细胞的微管蛋白相结合,进而抑制细胞分裂,使菌体死亡。HASAMA等^[8]研究表明,乙霉威能够明显降低田间棒孢叶斑病的发生,且具有明显增产效应。但是近年来,黄大野^[4]对浙江、辽宁、河北、北京、海南、内蒙古等地区的163个多主棒孢菌株研究发现,其对乙霉威抗性频率达11%。腐霉利是由德国巴斯夫公司开发生产的一种二甲酰亚胺类内吸性杀菌剂,该药剂对孢子萌发和菌丝生长均具有较高的抑制作用,已被广泛地用于控制多主棒孢、灰葡萄孢（Botrytis cinerea）、核盘菌（Sclerotinia spp.）和链格孢菌（Alternaria spp.）等引起的植物真菌病害^[3]。该类药剂的作用机制尚不明确,推测可能是干扰渗透压上组氨酸激酶和活化蛋白激酶而呈现抗菌活性^[9]。谌江华等^[10]研究表明,腐霉利单独使用极易诱发病原菌产生抗药性。微粉剂是在吸油率高的矿物微粉和黏土微粉所组成的填料中加入原药、助剂混合后,再经气流粉碎机粉碎到10 μm以下的一种粉剂。撒布时粒子不凝集,以单一颗粒在空中浮游、扩散,然后均匀地附着于植株各个部位,因而防治效果较好^[11]。目前,我国有关农药微粉剂的研究较少,粉尘剂、可湿性粉剂的报道较多,秦宝福^[11]通过单因素试验确定了苦皮藤素微粉剂的最佳载体为高岭土,助剂为萘磺酸钠盐甲醛缩合物（NNO）;赵卫松等^[12]通过单因素试验确定了枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）粉尘剂的最佳配方为滑石粉20%、分散剂GY-D900 2%、菌株BAB-1原药补足至100%;李姝江等^[13]通过正交试验确定了解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）可湿性粉剂的最佳配方。正交试验是研究多因素多水平的一种设计方法,能提高剂型配方筛选的科学性。日本农药学会^[6]通过试验研究筛选出微粉剂的最佳配方,结果表明加入一定量的分散剂、表面活性剂、稳定剂,能提高微粉颗粒在植株叶片上的附着效应,降低农药分解效率,显著提高农药的有效利用率。【本研究切入点】农药复配是病原菌抗性治理的有效途径,目前还未见10%乙霉威·腐霉利微粉剂的研制及其对黄瓜棒孢叶斑病田间防治效果的研究报道。【拟解决的关键问题】测定乙霉威和腐霉利不同比例混合物对多菌灵/乙霉威双高抗菌株、多菌灵高抗乙霉威敏感菌株以及多菌灵敏感乙霉威高抗菌株的毒力,确定其增效作用最佳组合,通过载体、助剂的筛选,采用单因素试验、正交试验等方法制备稳定的10%乙霉威·腐霉利微粉剂,并通过药效试验探究其对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果。

1 材料与方法

试验于2016—2018年在中国农业科学院蔬菜花卉研究所完成。

1.1 供试材料

菌株：供试多主棒孢菌株HG09112606（对多菌灵高抗,对乙霉威敏感）、FQ07091401（对多菌灵敏感,对乙霉威高抗）、HG11011509（对多菌灵、乙霉威双高抗）^[4],保存于中国农业科学院蔬菜花卉研究所菜病综防组4℃冰箱马铃薯葡萄糖琼脂（potato dextrose agar,PDA）培养基。

仪器：GYF-100气流粉碎机（昆山密友粉碎设备有限公司）;GHP-9160隔水式恒温培养箱（上海一恒科技有限公司）;GCMS-TQ8040三重四极杆气相色谱质谱联用仪（岛津有限公司）;PL203分析天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）;BT-9300Z激光粒度分析测定仪（丹东市百特仪器有限公司）;IKA研磨机（艾卡广州仪器设备有限公司）;XB-K-25血球计数板（北京普益华科技有限公司）;3FB-03-AE-1精量电动弥粉机（中农丰茂植保机械有限公司）;3WBD-16背负式电动喷雾器（青岛至信永成商贸有限公司）;自制超微量叶面喷雾器。

供试药剂：98.5%腐霉利原药,江西禾益化工股份有限公司;95%乙霉威原药,江苏蓝丰生物化工股份有限公司;10%乙霉威·腐霉利可湿性粉剂,中国农业科学院蔬菜花卉研究所自主研制;43%氟菌·肟菌酯（fluopyram·trifloxystrobin）悬浮剂,拜耳股份公司;35%苯甲·咪鲜胺（difenoconazole·prochloraz）水乳剂,山东省青岛瀚生生物科技股份有限公司。

供试载体及助剂：硅藻土、白炭黑、膨润土、煅烧高岭土、凹凸棒土、滑石粉,均由河北石家庄灵寿县天昊矿产品加工厂提供;萘磺酸钠盐甲醛缩合物（formaldehyde condensates of sodium naphthalene sulfonate salt,NNO）、萘磺酸盐类（naphthalene sulfonate,D10）、聚羧酸盐类（carboxylates,T36）等分散剂均由南京捷润科技有限公司提供;烷基萘磺酸盐（alkyl naphthalene sulfonate,Morwet EFW）、木质素磺酸盐（lignosulfonate,DM02）、十二烷基硫酸钠（sodium dodecyl sulfate,K12）等表面活性剂均由南京捷润科技有限公司提供;聚氧乙烯烷基醚（polyoxyethylene alkyl ether）、聚氧乙烯芳基硫酸盐（polyoxyethylene aryl sulfate）、聚氧乙烯脂肪酸酯（polyoxyethylene fatty acid ester）等稳定剂均由南京捷润科技有限公司提供。

供试植物及培养基：黄瓜品种为易感病的中农6号,由中国农业科学院蔬菜花卉研究所提供,待黄瓜植株长至2—4片真叶时,供室内盆栽试验测定。待黄瓜植株长至10片真叶时,供田间试验测定。PDA培养基：200 g马铃薯、20 g葡萄糖、20 g琼脂、1 L蒸馏水。

1.2 方法

1.2.1 菌丝生长速率法筛选最佳药剂组合采用菌丝生长速率法筛选最佳药剂组合^[14]。将乙霉威和腐霉利原药用少量丙酮溶剂溶解后,用无菌水分别配制成质量浓度为1×10⁴μg·mL^-1的母液,按不同质量比（9﹕1、8﹕2、7﹕3、6﹕4、5﹕5、4﹕6、3﹕7、2﹕8、1﹕9）混合,得到不同配比的混合液。再用无菌水将各单剂及混剂稀释成质量浓度为1 000、100、10、1、0.1、0.01 μg·mL^-1的药液,分别与PDA培养基按体积比1﹕9的比例混合,制成含药量分别为100、10、1、0.1、0.01、0.001 μg·mL^-1的PDA平板。在无菌条件下,用打孔器将预培养5 d的多主棒孢菌株沿菌落边缘打取直径5 mm的菌饼,菌丝面向下接种到含系列浓度的乙霉威·腐霉利PDA平板中央。每个处理4次重复,并设空白和溶剂对照。28℃黑暗培养5 d后,测量菌落直径,建立回归方程,并计算EC₅₀。根据Wadley公式^[15]计算增效系数（SR）,确定最佳混配比例。EC₅₀（th）=（a+b）/[a/EC₅₀（A）+b/EC₅₀（B）];SR=EC₅₀（th）/EC₅₀（ob）。式中,A、B为单剂,a、b为相应单剂在混剂中的比例,ob为实际观察值,th为理论值。SR>1.5为增效作用;0.5≤SR≤1.5为相加作用;SR<0.5为拮抗作用。

1.2.2 单因素试验筛选载体与助剂载体筛选体系为10 g。分别称取90%的硅藻土、白炭黑、膨润土、煅烧高岭土等载体（9 g）,每种载体中加入10%（1 g）乙霉威·腐霉利原药（按照筛选出的最佳混配比例称取）经研磨机混合均匀,即制得有效成分为10%的乙霉威·腐霉利制剂。助剂筛选体系为10 g。分别称取90%的萘磺酸钠盐甲醛缩合物（NNO）、萘磺酸盐类（D10）、聚羧酸盐类（T36）分散剂（9 g）,每种分散剂中加入10%（1 g）的乙霉威·腐霉利原药经研磨机混合均匀,即制得不同制剂;分别称取90%的烷基萘磺酸盐（Morwet EFW）、木质素磺酸盐（DM02）、十二烷基硫酸钠（K12）表面活性剂（9 g）,每种表面活性剂中加入10%（1 g）的乙霉威·腐霉利原药经研磨机混合均匀,即制得不同制剂;分别称取90%的聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯芳基硫酸盐、聚氧乙烯脂肪酸酯稳定剂（9 g）,每种稳定剂中加入10%（1 g）的乙霉威·腐霉利原药经研磨机混合均匀,即制得不同制剂。每个处理重复4次。比较各个不同制剂的分散性、浮游性、稳定性、吸附性^[16]等因素,确定最优载体和助剂。

1.2.3 正交试验确定载体、助剂的最佳配比利用初筛的载体和助剂进行正交试验^[17],分别检测分散指数、浮游性指数、坡度角确定其各组分的最优配比含量。设计采用4因素3水平正交试验[L9(3⁴)],即载体含量分别为15%、20%、25%;分散剂含量分别为2%、3%、4%;表面活性剂含量分别为2%、3%、4%;稳定剂含量分别为0.5%、1%、1.5%。

1.2.4 样品的加工与性能指标的测定^[18] 按照本研究的筛选结果,称取一定量的有效成分为95%乙霉威原药和98.5%腐霉利原药、载体、分散剂、表面活性剂、稳定剂加入研磨机中研磨1 min,再经气流粉碎机超微粉碎制成微粉剂。

样品加工后热贮稳定性测定（GB/T 19136—2003）：将5 g 10%乙霉威·腐霉利微粉剂加入到洁净的安瓿瓶中,用酒精喷灯进行封口,封口后分别称重。称重后将封好的安瓿瓶置于GHP-9160隔水式恒温培养箱中,（54±2）℃贮存,14 d后取出安瓿瓶,称重测量。质量未发生变化的试样,于24 h内对其进行有效成分含量测定,计算分解率,试验重复4次。

有效成分含量测定：准确称取有效成分为0.1 g乙霉威、腐霉利标准品（乙霉威、腐霉利按照筛选出的最佳混配比例混配）,于50 mL离心管中,用丙酮溶剂定容至20 mL,用蒸馏水稀释浓度至50 μg·mL^-1,待测;分别准确称取10%乙霉威·腐霉利微粉剂热贮前及热贮后试样1 g,于50 mL离心管中,用丙酮溶剂定容至20 mL,用蒸馏水稀释浓度至50 μg·mL^-1,待测。分解率=（有效成分原始含量-热贮后有效成分含量）/有效成分原始含量×100%。气质联用色谱仪测定条件为柱箱温度：40.0℃;进样口温度：65.0℃;进样方式：分流;载气：He;总流量：26.0 mL·min^-1;柱流量：1.0 mL·min^-1;线速度：36.1 cm·s^-1;离子源温度：250.0℃;接口温度：280.0℃;溶剂延迟时间6.0 min。

分散指数测定：准确称取定量混合均匀的样品后,采用干筛法过筛,铺平到分散器底部,接通电源并开始计时,30 s后停止,称取分散后残余粉体质量,分散指数=（样品量-残余样品量）/样品量×100%,试验重复5次。

浮游性指数测定：将混合均匀的样品在散粉箱内散粉30 s后,再将浮游在箱内的粗微粒子捕集到盛水的集尘管内,在波长610 nm处测定透光率,浮游性指数=100-透光率。

流动性测定：采用坡度角测定方法,将试料通过筛网孔径约0.5 mm、直径30 mm的小筛,加入下口内径5 mm的漏斗中,漏斗下口对准直径2 cm的小圆片,使试样均匀加到圆片上堆成小圆锥体,当锥体高度不再增加时,停止加料,由用作外罩的玻璃管壁上的标尺观察椎体的高度,重复测定5次,求平均值。计算公式：tanθ= H/1.0。式中,H为锥体高度（cm）。

含水率测定：按照GB/T 1600—1989农药水分的测定方法中的共沸蒸馏法进行。

粒径测定：按照GB/T 16150—1995农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法中的干筛法进行。

1.2.5 10%乙霉威·腐霉利微粉剂室内盆栽药效试验在中国农业科学院蔬菜花卉研究所玻璃温室进行盆栽防治效果测定试验。共设9个药剂处理：10%乙霉威·腐霉利微粉剂喷粉处理,施药剂量分别为100、150 g a.i./hm²;10%乙霉威·腐霉利微粉剂喷雾处理,施药剂量分别为100 g a.i./hm²（0.0035 g a.i./株）、150 g a.i./hm²（0.005 g a.i./株）;10%乙霉威·腐霉利可湿性粉剂喷雾处理,施药剂量分别为100 g a.i./hm²（0.0035 g a.i./株）、150 g a.i./hm²（0.005 g a.i./株）;35%苯甲·咪鲜胺水乳剂喷雾处理,施药剂量为300 g a.i./hm²（0.01 g a.i./株）;43%氟菌·肟菌酯悬浮剂喷雾处理,施药剂量为90 g a.i./hm²（0.003 g a.i./株）;空白对照喷施清水。喷粉处理使用精量电动弥粉机^[19],喷雾处理使用微量喷雾器。每个处理4次重复,每个重复20株黄瓜苗。在施药前,将喷粉处理的黄瓜苗放置到一个密闭的玻璃温室中以防止微粉飘散,喷粉结束4 h后,将喷粉处理的黄瓜苗与喷雾处理的黄瓜苗放置一起,以保证整个环境条件一致。

将多主棒孢菌株HG11011509在PDA培养基上培养15 d,用毛刷将孢子刷下,用血球计数板调配,获得1×10⁵孢子/mL悬浮液。待盆栽黄瓜苗长至2—4片真叶时采用叶面喷雾的方式接种多主棒孢孢子悬浮液（保证黄瓜植株所有叶片上孢子悬浮液分布均匀）,接菌后将黄瓜苗放在相对湿度为90%,温度28℃保湿柜中保湿培养24 h,接种24 h后进行药剂处理,同时转入正常育苗温室培养,培养5 d后空白对照充分发病,然后进行病情指数调查并计算防治效果。每个处理调查80株黄瓜苗,每株黄瓜苗调查全部叶片。黄瓜棒孢叶斑病病情指数调查按如下标准^[20]：0级,无病斑;1级,病斑面积占整个叶面积5%以下;3级,病斑面积5%—25%;5级,病斑面积26%—50%;7级,病斑面积51%—75%;9级,病斑面积75%以上。病情指数=∑（各级病叶数×相对级数值）/（调查总叶数×9）×100;防治效果=（CK-PT）/CK×100%。式中,CK为空白对照区施药后病情指数;PT为药剂处理区施药后病情指数。

1.2.6 10%乙霉威·腐霉利微粉剂田间药效试验参考《农药田间药效试验准则》进行田间药效试验,于2018年12月在山东寿光日光温室进行。黄瓜棒孢叶斑病为人工接种：待黄瓜植株长至10片真叶时,采用叶面喷雾的方式接种1×10⁵孢子/mL的多主棒孢菌株HG11011509孢子悬浮液（保证黄瓜植株所有叶片上孢子悬浮液分布均匀）,24 h后再进行药剂处理。试验共设9个药剂处理：10%乙霉威·腐霉利微粉剂喷粉处理,施药剂量分别为100、150 g a.i./hm²;10%乙霉威·腐霉利微粉剂喷雾处理,施药剂量分别为100、150 g a.i./hm²（用水量750 L·hm^-2）;10%乙霉威·腐霉利可湿性粉剂喷雾处理,施药剂量分别为100、150 g a.i./hm²（用水量750 L·hm^-2）;35%苯甲·咪鲜胺水乳剂喷雾处理,施药剂量为300 g a.i./hm²（用水量750 L·hm^-2）;43%氟菌·肟菌酯悬浮剂喷雾处理,施药剂量为90 g a.i./hm²（用水量750 L·hm^-2）;空白对照喷施清水。喷粉处理使用精量电动弥粉机,喷雾处理使用背负式电动喷雾器。采用随机区组排列,4次重复,共36个小区,小区面积为29 m²,用塑料薄膜纵向分割温室大棚形成小区,以保证每个棚室的密封效果。每隔7 d施药一次,共施药3次,于第3次施药后7 d调查病情指数并计算防治效果,每小区对角线5点取样调查,每点调查2株,每株调查全部叶片。病情指数调查及防治效果计算同1.2.5。

2 结果

2.1 不同混配比例对多主棒孢的毒力增效

采用菌丝生长速率法测定乙霉威与腐霉利以不同比例混配对多主棒孢的联合毒力,结果表明乙霉威与腐霉利大多数比例混合物对菌株HG09112606、FQ07091401具有增效作用,其中当乙霉威与腐霉利以1﹕1混配时增效作用最明显,增效系数分别为3.19和2.53;当乙霉威与腐霉利以1﹕1和1﹕4混配时对菌株HG11011509有增效作用,增效系数分别为1.68和1.98。综合考虑3个供试菌株的增效程度及用药成本,选定1﹕1作为乙霉威与腐霉利最佳混配比例进行制剂及田间药效研究（图1）。

图1

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图1乙霉威和腐霉利混配对多主棒孢的毒力增效作用

Fig. 1Synergistic interactions of diethofencarb·procymidone mixtures against mycelial growth of C. cassiicola

2.2 不同载体、助剂的筛选

2.2.1 载体的筛选基于单因素试验测定6种不同载体对10%乙霉威·腐霉利制剂的影响。白炭黑分散指数大,坡度角小,分别为91.16%,67°,但浮游性指数较小,为60.67;硅藻土分散指数较小,为85.85%,但浮游性指数大,为78.11,坡度角为69°。综合考虑各制剂的分散指数、浮游性指数、坡度角等因素,确定最优载体为白炭黑和硅藻土（表1）。

Table 1
表1
表1不同载体对10%乙霉威·腐霉利混配制剂的影响
Table 1The effect of different carriers on the mixture of 10% diethofencarb·procymidone

处理Treatment	分散指数Dispersion index (%)	浮游性指数Planktonic index	坡度角Slope angle (°)
凹凸棒土Attapulgite	85.13±0.04b	68.55±0.78b	76.00
硅藻土Diatomite	85.85±0.05b	78.11±2.07a	69.00
白炭黑Carbon-white	91.16±0.04a	60.67±0.88c	67.00
煅烧高岭土Kaolin	90.23±0.04a	61.88±0.98c	71.00
膨润土Bentonite	90.76±0.05a	71.88±0.98b	73.00
滑石粉Talc	87.08±0.06b	53.22±1.63d	69.00

Data in the table are mean±SE; According to a Duncan’s least-significant difference, different lowercases after data in the same column indicate significant difference (P<0.05). The same as Table 2, Table 5, Table 6
表中数据为平均数±标准误;根据Duncan’s最小显著性差异测定,同列数值后不同字母表示差异显著（P<0.05）。表2、表5、表6同

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2.2.2 助剂的筛选 3种常见的分散剂对10%乙霉威·腐霉利制剂有不同程度的影响,其中萘磺酸钠盐甲醛缩合物（NNO）分散指数最大,分散性最强,与其他两种分散剂具有显著性差异（P<0.05）;3种表面活性剂对10%乙霉威·腐霉利制剂同样具有不同程度的影响,其中十二烷基硫酸钠（K12）吸附时间最短,吸附能力最强,与其他两种表面活性剂具有显著性差异（P<0.05）;常见的3种稳定剂对10%乙霉威·腐霉利制剂有不同程度的影响,其中聚氧乙烯烷基醚分解率最小,稳定性最强,与其他两种稳定剂具有显著性差异（P<0.05）。因此,分散剂萘磺酸钠盐甲醛缩合物（NNO）、表面活性剂十二烷基硫酸钠（K12）及稳定剂聚氧乙烯烷基醚可作为配方中的有效组分进行最佳配比的优化（图2）。

图2

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图2助剂的筛选

1：萘磺酸钠盐甲醛缩合物Formaldehyde condensates of sodium naphthalene sulfonate salt (NNO);2：萘磺酸盐类Naphthalene sulfonate (D10);3：聚羧酸盐类 Carboxylates (T36);4：烷基萘磺酸盐Alkyl naphthalene sulfonate (Morwet EFW);5：木质素磺酸盐Lignosulfonate (DM02);6：十二烷基硫酸钠Sodium dodecyl sulfate (K12);7：聚氧乙烯烷基醚Polyoxyethylene alkyl ether;8：聚氧乙烯芳基硫酸盐Polyoxyethylene aryl sulfate;9：聚氧乙烯脂肪酸酯Polyoxyethylene fatty acid ester。1—3影响值为分散指数The influence value of 1-3 is dispersion index;4—6影响值为吸附时间The influence value of 4-6 is adsorption time;7—9影响值为分解率The influence value of 7-9 is decomposition rate 根据Duncan’s最小显著性差异测定,柱上不同小写字母表示差异显著（P<0.05）According to a Duncan’s least-significant difference, different lowercases on the bars indicate significant difference (P<0.05)
Fig. 2Screening of additives

2.3 载体、助剂最佳配比的确定

综合考虑白炭黑和硅藻土两种载体的分散性、浮游性、流动性等因素,选取载体白炭黑进行配比的优化,载体硅藻土补足至100%。不同组成成分对于制剂的分散性、浮游性、流动性有不同程度的影响。其中对10%乙霉威·腐霉利制剂分散指数影响顺序为白炭黑>分散剂>表面活性剂>稳定剂;对10%乙霉威·腐霉利制剂浮游性指数影响顺序为白炭黑>分散剂>表面活性剂>稳定剂;对10%乙霉威·腐霉利制剂坡度角影响顺序为白炭黑>稳定剂>分散剂>表面活性剂。粉剂的分散指数大,则粒子间凝聚力小,易分散;浮游性指数大,粉剂易漂移;坡度角小,粉剂流动性强。因此,将此3种因素作为衡量粉剂载体与助剂最佳配比的重要指标。由表2可知,分散指数大、浮游性指数大、坡度角小的组分为第2组,确定最佳配比为载体白炭黑15%,分散剂萘磺酸钠盐甲醛缩合物（NNO）3%,表面活性剂十二烷基硫酸钠（K12）3%,稳定剂聚氧乙烯烷基醚1%,载体硅藻土补足至100%。

Table 2
表2
表2载体和助剂配比优化的正交试验结果
Table 2Proportioning optimization result of the carriers and additives in orthogonal test

序号 Number		因素Factor				分散指数 Dispersion index (%)	浮游性指数 Planktonic index	坡度角 Slope angle (°)
序号 Number		载体 Carrier (%)	分散剂 Dispersant (%)	表面活性剂 Surfactant (%)	稳定剂 Stabilizer (%)	分散指数 Dispersion index (%)	浮游性指数 Planktonic index	坡度角 Slope angle (°)
1		15.00	2.00	2.00	0.50	93.56±0.15b	83.17±0.27a	68.00
2		15.00	3.00	3.00	1.00	95.18±0.34a	86.26±0.37a	67.00
3		15.00	4.00	4.00	1.50	92.47±1.23b	83.18±1.16a	67.00
4		20.00	2.00	3.00	1.50	81.26±1.26d	80.16±0.94b	74.00
5		20.00	3.00	4.00	0.50	83.39±0.79c	79.45±1.26b	70.00
6		20.00	4.00	2.00	1.00	80.17±0.87d	78.16±0.36b	76.00
7		25.00	2.00	4.00	1.00	78.56±0.60e	78.12±0.95b	79.00
8		25.00	3.00	2.00	1.50	80.17±1.15d	75.36±1.56c	77.00
9		25.00	4.00	3.00	0.50	75.25±0.42f	75.27±0.18c	75.00
分散指数Dispersion index	K1	281.21	253.38	253.90	252.20
	K2	244.82	258.74	251.69	253.91
	K3	233.98	247.89	254.42	253.90
	k1	93.74	84.46	84.63	84.07
	k2	81.61	86.25	83.90	84.64
	k3	77.99	82.63	84.81	84.63
	极差R	15.74	3.62	0.91	0.57
浮游性指数 Planktonic index	K1	252.61	241.45	236.69	237.89
	K2	237.77	241.07	241.69	242.54
	K3	228.75	236.61	240.75	238.70
	k1	84.20	80.48	78.90	79.30
	k2	79.26	80.36	80.56	80.85
	k3	76.25	78.87	80.25	79.57
	极差R	7.95	1.61	1.67	1.55
坡度角 Slope angle	K1	202.00	221.00	221.00	213.00
	K2	220.00	214.00	216.00	222.00
	K3	231.00	218.00	216.00	218.00
	k1	67.33	73.67	73.67	71.00
	k2	73.33	71.33	72.00	74.00
	k3	77.00	72.67	72.00	72.67
	极差R	9.67	2.33	1.67	3.00

Ki is the sum of suspensibility values when the level of the corresponding factor is coded by i. ki= Ki/s. s means the replication number of each level in each column (the replication number is three in the article)
Ki表示任一列上水平号为i时所对应的试验结果之和。ki=Ki/s,其中s为任一列上各水平出现的次数（文中为3次）

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2.4 样品的加工与性能指标测定

2.4.1 样品的加工通过载体、助剂的筛选,确定了10%乙霉威·腐霉利微粉剂最佳配方为乙霉威·腐霉利原药10%,载体白炭黑15%,分散剂萘磺酸钠盐甲醛缩合物（NNO）3%,表面活性剂十二烷基硫酸钠（K12）3%,稳定剂聚氧乙烯烷基醚1%,载体硅藻土补足至100%。

2.4.2 热贮稳定性测定热贮后10%乙霉威·腐霉利微粉剂没有结块现象。经气质联用色谱仪检测未热贮标样有效成分含量为9.22%,54℃热贮后有效成分含量为8.84%,分解率为4.12%,符合标准（表3）。

Table 3
表3
表310%乙霉威·腐霉利微粉剂热贮稳定性
Table 3Determination of the thermal storage stability of 10% diethofencarb·procymidone micropowder

样品 Sample	名称 Name	保留时间 Keep time (min)	浓度 Concentration (μg·mL^-1)	峰面积 Peak area	热贮分解率 Thermal storage decomposition rate (%)
标样98.5%腐霉利和95%乙霉威 Standard 98.5% procymidone· 95% diethofencarb	乙霉威Diethofencarb	18.07	50.00	57666.00	—
	腐霉利Procymidone	19.14	50.00	36991.00	—
热贮前10%乙霉威·腐霉利微粉剂 Before thermal storage 10% diethofencarb· procymidone micropowder	乙霉威Diethofencarb	18.07	45.38	52167.00	—
	腐霉利Procymidone	19.14	46.76	127708.00	—
热贮后10%乙霉威·腐霉利微粉剂 After thermal storage 10% diethofencarb· procymidone micropowder	乙霉威Diethofencarb	18.07	42.10	49756.00	4.12
	腐霉利Procymidone	19.14	46.28	129915.00	4.12

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2.4.3 其他性能指标测定参照中华人民共和国农药粉剂及凌世海^[18]农药剂型加工相关检测方法进行测定,结果显示制备的10%乙霉威·腐霉利微粉剂粒径为6.18 μm,分散指数95.18%,浮游性指数86.26,含水率1.24%,坡度角67°,热贮分解率4.12%,各项检测结果均符合标准（表4）。

Table 4
表4
表410%乙霉威·腐霉利微粉剂主要性能指标
Table 4Main performance indexes of 10% diethofencarb· procymidone micropowder

性能指标 Performance index	微粉剂标准 Micropowder standard	测定结果 Determination result
有效成分Active ingredient (%)	—	10.00
细度Fineness (μm)	≤10.00	6.18
含水率Water content (%)	<1.50	1.24
分散指数 Dispersion index (%)	>20.00	95.18
浮游性指数Planktonic index	>85.00	86.26
坡度角 Slope angle (°)	65.00-75.00	67.00
分解率Decomposition rate (%)	<5.00	4.12

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2.5 10%乙霉威·腐霉利微粉剂室内盆栽试验防治效果

接种2 d后清水对照开始发病,5 d后病情指数为63.87。10%乙霉威·腐霉利微粉剂在施药剂量为100、150 g a.i./hm²时喷粉、喷雾对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果分别为89.82%和90.99%;80.27%和87.95%。10%乙霉威·腐霉利可湿性粉剂在施药剂量为100、150 g a.i./hm²时喷雾对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果分别为78.58%和84.83%。10%乙霉威·腐霉利微粉剂在施药剂量为100 g a.i./hm²时喷粉防治效果显著高于对照药剂35%苯甲·咪鲜胺水乳剂、43%氟菌·肟菌酯悬浮剂在推荐用量时喷雾的防治效果（表5）。

Table 5
表5
表510%乙霉威·腐霉利微粉剂对黄瓜棒孢叶斑病的盆栽防治效果
Table 5Control efficacy of 10% diethofencarb·procymidone micropowder on cucumber leaf spot disease in potted trials

处理 Treatment	使用剂量 Dosage (g a.i./hm²)	施药方式 Processing method	病情指数 Disease index	防治效果 Control efficacy (%)
10%乙霉威·腐霉利微粉剂 10% diethofencarb·procymidone DL	100	喷粉Powder injection	6.50	89.82±0.73a
10%乙霉威·腐霉利微粉剂 10% diethofencarb·procymidone DL	150	喷粉Powder injection	5.76	90.99±0.32a
10%乙霉威·腐霉利微粉剂 10% diethofencarb·procymidone DL	100	喷雾Spray	12.60	80.27±0.29c
10%乙霉威·腐霉利微粉剂 10% diethofencarb·procymidone DL	150	喷雾Spray	7.7	87.95±0.56b
10%乙霉威·腐霉利可湿性粉剂 10% diethofencarb·procymidone WP	100	喷雾Spray	13.68	78.58±1.12c
10%乙霉威·腐霉利可湿性粉剂 10% diethofencarb·procymidone WP	150	喷雾Spray	9.69	84.83±1.72d
35%苯甲·咪鲜胺水乳剂 35% difenoconazole·prochloraz EW	300	喷雾Spray	8.56	86.60±1.15b
43%氟菌·肟菌酯悬浮剂 43% fluopyram·trifloxystrobin SC	90	喷雾Spray	9.33	85.39±1.46d
CK	—	—	63.87	—

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2.6 10%乙霉威·腐霉利微粉剂田间药效

田间试验结果表明,10%乙霉威·腐霉利微粉剂喷粉施药对黄瓜棒孢叶斑病有很好的防治效果,用量为100、150 g a.i./hm²时喷粉防治效果分别为84.39%、90.74%。10%乙霉威·腐霉利微粉剂、可湿性粉剂在用量为100、150 g a.i./hm²时喷雾防治效果分别为76.80%和83.11%;69.42%和82.24%。10%乙霉威·腐霉利微粉剂在用量为100 g a.i./hm²时喷粉防治效果与35%苯甲·咪鲜胺水乳剂在用量为300 g a.i./hm²、43%氟菌·肟菌酯悬浮剂在用量为90 g a.i./hm²时的喷雾防治效果无显著性差异（表6）。

Table 6
表6
表610%乙霉威·腐霉利微粉剂对黄瓜棒孢叶斑病的田间防治效果
Table 6Control efficacy of 10% diethofencarb·procymidone micropowder on cucumber leaf spot disease in fields

处理 Treatment	使用剂量 Dosage (g a.i/hm²)	施药方式 Processing method	病情指数 Disease index	防治效果 Control efficacy (%)
10%乙霉威·腐霉利微粉剂 10% diethofencarb·procymidone DL	100	喷粉Powder injection	6.69	84.39±0.98b
10%乙霉威·腐霉利微粉剂 10% diethofencarb·procymidone DL	150	喷粉Powder injection	3.97	90.74±0.39a
10%乙霉威·腐霉利微粉剂 10% diethofencarb·procymidone DL	100	喷雾Spray	9.94	76.80±1.52f
10%乙霉威·腐霉利微粉剂 10% diethofencarb·procymidone DL	150	喷雾Spray	7.07	83.11±0.95c
10%乙霉威·腐霉利可湿性粉剂 10% diethofencarb·procymidone WP	100	喷雾Spray	13.10	69.42±0.99e
10%乙霉威·腐霉利可湿性粉剂 10% diethofencarb·procymidone WP	150	喷雾Spray	7.61	82.24±1.30c
35%苯甲·咪鲜胺水乳剂 35% difenoconazole·prochloraz EW	300	喷雾Spray	6.13	85.69±0.60b
43%氟菌·肟菌酯悬浮剂 43% fluopyram·trifloxystrobin SC	90	喷雾Spray	6.65	84.48±0.41b
CK	—	—	42.85	—

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3 讨论

黄瓜棒孢叶斑病主要依靠化学药剂进行防治^[21]。国内外已报道的对多主棒孢引起的病害有效的化学药剂主要有琥珀酸脱氢酶抑制剂类杀菌剂（SDHIs,啶酰菌胺、氟吡菌酰胺、氟唑菌酰胺）、甾醇生物合成抑制剂类杀菌剂（SBIs,如咪鲜胺、苯醚甲环唑和戊唑醇）、苯醌外部抑制剂（QoIs,嘧菌酯、吡唑醚菌酯和唑菌酮）、β-微管蛋白抑制剂类杀菌剂（MBCs,多菌灵、甲基硫菌灵、苯菌灵等）、二甲酰亚胺类杀菌剂（DCFs,异菌脲、腐霉利）以及氨基甲酸酯类杀菌剂（霜霉威、乙霉威等）^[22]。上述药剂用于防治黄瓜棒孢叶斑病以来,关于多主棒孢对化学药剂的抗药性问题不断出现。因此,生产上迫切需要利用现有杀菌剂筛选具有增效作用的组合。邢光耀^[23]研究表明,四氟醚唑和咪鲜胺混配对多主棒孢的毒力具有增效作用,对黄瓜棒孢叶斑病具有明显的防治效果;郑雪松等^[24]将苯醚甲环唑和嘧菌酯混配药剂在黄瓜棒孢叶斑病发病初期喷施,明显抑制了多主棒孢的蔓延和流行。本研究选用两种不同作用机理的化学农药杀菌剂乙霉威、腐霉利混配,测定了对多菌灵和乙霉威双高抗菌株、多菌灵高抗乙霉威敏感菌株、多菌灵敏感乙霉威高抗菌株的室内毒力,并采用菌丝生长速率法和Wadley法相结合筛选最佳配比,最终获得当乙霉威与腐霉利最佳配比为1﹕1时,具有明显的增效作用。推测这种增效可能与药剂作用机理有关,腐霉利的作用机制主要是干扰渗透压信号转导途径中组氨酸激酶和MAP激酶,这两种酶在细胞生长分裂信号转导途径中起着关键性作用,乙霉威主要抑制纺锤体的形成,两种药剂共同作用促进了抑制细胞或菌丝的生长分裂,从而表现出增效作用。ISHII^[25]研究报道,在多种致病菌中苯并咪唑类杀菌剂与乙霉威具有负交互抗药性。因此选用乙霉威作为复配的一种成分可以间接降低苯并咪唑类杀菌剂田间抗性的产生。

近年来,复配药剂在农药中所占的比例迅速增加^[26,27]。在未来的农业生产中,不仅需要更多的药剂复配,还需要解决复配药剂应用中的剂型问题。将复配药剂加工成施药量小、利用率高的剂型是解决复配药剂应用的一个重要问题^[15]。载体在微粉剂中占较大比例,因此载体对微粉剂的影响较大。在农药剂型生产中,通常采用单一的载体以减低实际加工的复杂化。但是在本研究中单一的载体并不能取得良好的效果,所以采用复合载体白炭黑和硅藻土,结果表明复合载体可以增加微粉剂的分散性、流动性。刘振华等^[28]研究表明,采用复合载体能够改变可湿性粉剂的物理性能,增强其制剂的润湿性、悬浮性。选择适合的助剂可以提高防治效果,秦宝福^[11]筛选出萘磺酸钠盐甲醛缩合物（NNO）为苦皮藤素微粉剂的最佳助剂。本研究采用单因素试验筛选最优载体和助剂,方便快捷,成功率高;通过正交试验,确定载体助剂的最优配比,科学可信,全面高效。试验发现萘磺酸钠盐甲醛缩合物可以提高微粉剂的分散性,既能保证微粉剂在贮存时不聚结,又能使其在施药时均匀喷出,对病害的防治效果好;通过增加表面活性剂,可提高其抗静电能力。试验中遇到的关键性问题为热贮有效成分的降解问题,采用添加稳定剂来调节,很大程度上减小了药剂有效成分的分解率,增强稳定性。

微粉剂在施药时不需要兑水,因此不会增加棚室湿度^[29,30],操作方便,施药过程中无高温引起的农药损失,且药剂喷出后能在棚室内均匀弥散并附着于植株表面,持效期长,减少了用药量,提高了农药有效利用率,增强了其对病害的防治效果^[31]。在盆栽试验中,本试验所研制的10%乙霉威?腐霉利微粉剂在用药量为100 g a.i./hm²时喷粉对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果为89.82%,显著高于对照药剂35%苯甲·咪鲜胺水乳剂、43%氟菌·肟菌酯悬浮剂在推荐用量时喷雾的防治效果;在田间试验中,10%乙霉威·腐霉利微粉剂在用量为100 g a.i./hm²时喷粉对黄瓜棒孢叶斑病的防治效果为84.39%,与35%苯甲·咪鲜胺水乳剂在用量为300 g a.i./hm²、43%氟菌·肟菌酯悬浮剂在用量为90 g a.i./hm²时的喷雾防治效果无显著差异。病害发生之前或之初,喷粉施用10%乙霉威·腐霉利微粉剂,在用药量减少33.3%的情况下也能够抑制孢子萌发及病斑的扩展,对黄瓜新生叶片具有良好的保护作用。

4 结论

乙霉威和腐霉利混配使用对多主棒孢具有明显的毒力增效作用,可供研制防治黄瓜棒孢叶斑病的新型混剂。按选定配方加工的10%乙霉威·腐霉利微粉剂各项指标符合标准,且在用药量小、施药不需兑水、不增加棚室湿度的条件下对田间黄瓜棒孢叶斑病的防治效果较好,实用性强。

参考文献原文顺序
文献年度倒序
文中引用次数倒序
被引期刊影响因子

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为筛选防治黄瓜靶斑病的有效药剂,采用菌丝生长速率法、孢子萌发法和芽管伸长法测定了19种杀菌剂对黄瓜靶斑病菌的毒力,探究了4种毒力较高杀菌剂对病原菌菌丝形态的影响。结果表明:氟啶胺、吡唑萘菌胺、咯菌腈和四霉素对黄瓜靶斑病菌菌丝生长、孢子萌发和芽管伸长各生长发育阶段均有较强的抑制活性,其中,4种药剂抑制菌丝生长的平均EC_(50)值分别为0.516 3、1.538、1.605和0.648 2 mg/L,抑制孢子萌发的平均EC_(50)值分别为0.164 4、1.359、1.127和0.002 5 mg/L,抑制芽管伸长的平均EC_(50)值分别为0.189 6、0.144 7、0.060 4和0.001 5 mg/L;啶酰菌胺、百菌清和肟菌酯3种不同作用机制杀菌剂对黄瓜靶斑病菌孢子萌发和芽管伸长的抑制活性较强,3种药剂抑制孢子萌发的平均EC_(50)值分别为1.564、0.373 0和0.021 3 mg/L,抑制芽管伸长的平均EC_(50)值分别为0.629 5、0.233 4和0.405 0 mg/L,但对菌丝生长的抑制作用较弱,平均EC_(50)大于16 mg/L;氟啶胺、吡唑萘菌胺、咯菌腈和四霉素可引起黄瓜靶斑病菌菌丝不同程度的异常生长,主要表现为菌丝隔膜间距变小、菌丝节间肿大、主菌丝上二次分枝发生频繁、菌丝变形黏连、菌丝新分枝处生长受抑制或分生孢子生长变形。研究表明,氟啶胺、吡唑萘菌胺、咯菌腈和四霉素对黄瓜靶斑病菌具有较高的毒力,在黄瓜靶斑病的田间防治中具有较好的开发应用潜力。

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由多主棒孢（Corynespora cassiicola）侵染引起的黄瓜棒孢叶斑病已成为我国黄瓜生产上的重要新流行病害,目前尚缺乏抗性品种,病原菌侵染机制及与寄主的互作关系尚不清楚。为了开展多主棒孢的病原学研究,本试验采用农杆菌基因介导技术（ATMT）,获得了红色荧光蛋白（RFP）标记的多主棒孢转化株,转化株在PDA培养基转接6次后仍能在菌丝和分生孢子上发出强烈的红色荧光,生物学测定和致病性测定结果表明该转化株与野生型菌株无显著差异。

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詹家绥, 吴娥娇, 刘西莉, 陈凤平 . 植物病原真菌对几类重要单位点杀菌剂的抗药性分子机制
中国农业科学, 2014,47(17):3392-3404.

DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2014.17.007 URL Magsci [本文引用: 2]

单位点杀菌剂是植物病害管理的重要组成部分，随着单位点杀菌剂的大量、广泛使用，抗性问题也随之产生。目前为止，有植物病原菌对各大类单位点杀菌剂均具抗性的报道。本文作者主要阐述了生产中常用的5类单位点杀菌剂，包括苯并咪唑类杀菌剂（MBCs）、二甲酰亚胺类杀菌剂（DCFs）、14α-脱甲基酶抑制剂（DMIs）、QoIs和琥珀酸脱氢酶抑制剂（SDHIs）的作用机理及抗性分子机制的研究进展，并进一步论述了抗药性产生的机理及抗性治理原则。MBCs作用于β-微管蛋白，抗性主要与靶标蛋白基因的点突变有关，突变造成的氨基酸变化多集中于第50、167、198、200和240等5个位置，主要突变位点为第198位，同一菌株通常只发生一个氨基酸变异，不同位点的点突变甚至同一位点的不同氨基酸替代均会引起抗性水平的差异；DCFs的作用靶标尚不清楚，病原真菌对其抗性可能与双元组氨酸激酶OS基因的点突变有关；DMIs通过抑制14α-脱甲基酶最终影响麦角甾醇的合成，抗性主要与Cyp51的点突变或过量表达或运输体的过量表达相关，Cyp51点突变是抗DMI的主要机制，同一突变对不同的三唑类杀菌剂敏感性表现不尽相同，不同位置的点突变在同一病原菌中对不同三唑类杀菌剂的敏感性影响也不同。点突变数量在不同的真菌中表现不同，有单个发生，也有多个同时发生，且对抗药性具有积累效应；QoIs作用于电子传递链的复合物III，抗性主要与Cytb的点突变有关，与抗性相关的点突变主要发生在Cytb的120—155和255—280两个编码区，其中G143A和F129L为最主要的点突变；SDHIs作用于电子传递链的复合物II，抗性主要与SdhB、SdhC或SdhD的点突变有关，大部分病原真菌对SDHIs的抗性与SdhB点突变有关，SdhB点突变发生位置比较单一，在多种病原菌中突变均发生在相同的组氨酸上即H272, 而SdhC和SdhD突变位点比较多。

ZHAN J

, WU E

, LIU X

, CHEN F

. Molecular basis of resistance of phytopathogenic fungi to several site-specific fungicides
Scientia Agricultura Sinica, 2014,47(17):3392-3404. (in Chinese)

DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2014.17.007 URL Magsci [本文引用: 2]

黄大野 . 基于微管蛋白靶标的几种蔬菜主要病原真菌耐药性与抗药性机理的研究
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HUANG D

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[本文引用: 4]

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ISHII

, YANO

, DATE

, FURUTA

, SAGEHASHI

, YAMAGUCHI

, SUGIYAMA

, NISHIMURA

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. Molecular characterization and diagnosis of QoI resistance in cucumber and eggplant fungal pathogens
Phytopathology, 2007,97(11):1458-1466.

DOI:10.1094/PHYTO-97-11-1458 URLPMID:18943516 [本文引用: 1]

ABSTRACT The molecular mechanism of QoI fungicide resistance was studied using isolates of cucumber Corynespora leaf spot fungus (Corynespora cassiicola) and the eggplant leaf mold (Mycovellosiella nattrassii). In both pathogens, a mutation at position 143 from glycine to alanine (G143A) was detected in the cytochrome b gene that encodes for the fungicide-targeted protein. Moreover, the nucleotide sequence at amino acid position 143 was converted from GGT or GGA in sensitive (wild-type) to GCT or GCA in resistant (mutant-type) isolates. The methods of polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism commonly used for QoI resistance monitoring were employed successfully, leading to the amplified gene fragment from resistant isolates being cut with the restriction enzyme ItaI. However, heteroplasmy (the coexistence of wild-type and mutated alleles) was found when the resistant isolates of C. cassiicola, M. nattrassii, and Colletotrichum gloeosporioides (strawberry anthracnose fungus) were subcultured in the presence or absence of QoI fungicides. QoI resistance of cucumber powdery and downy mildew isolates persisted for a few years following the removal of the selection pressure imposed by the fungicide under both laboratory and commercial greenhouse conditions. The proportion of mutated sequences in cytochrome b gene decreased over time in the pathogen population. The protective efficacy of the full dose of azoxystrobin decreased when the populations of powdery and downy mildews contained resistant isolates at 10%. Using FMBIO, a fluorescence bio-imaging analyzer, the mutant allele from the QoI-resistant isolates could be detected at the level of 1%, whereas the detection sensitivity of ethidium-bromide-stained gels was approximately 10 times lower.

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小林羲明, 蒋忠锦 . 农药新型—“DL粉剂”和“FD粉剂”
精细化工中间体, 1983(4):52-55.

URL [本文引用: 2]

正在确定管式■粉器达到省力防治技术的同时、利用粉剂防治水稻病虫害，已作为一咱省力技术而得到了普及。另一方

XIAOLIN X

, JIANG Z

. New pesticides-‘DL Powder’ and ‘FD Powder’
.Fine Chemical Intermediates, 1983(4):52-55. (in Chinese)

URL [本文引用: 2]

正在确定管式■粉器达到省力防治技术的同时、利用粉剂防治水稻病虫害，已作为一咱省力技术而得到了普及。另一方

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王美琴, 刘慧平, 韩巨才, 高俊明 . 番茄叶霉病菌对多菌灵、乙霉威及代森锰锌抗性检测
农药学学报, 2003,5(4):30-36.

DOI:10.3321/j.issn:1008-7303.2003.04.005 URL [本文引用: 1]

The sensitive baseline of were 0.101,2.475 and 9.067 μg/mL,respectively. These data could be taken as relative sensitive baseline because no fungicide had been used before in that area.. The resistant frequencies of isolates from Shanxi Lüliang and Taiyuan regions were relatively lower,but both of them were more than 30%. North and south parts of Shanxi Province were higher than 70%. The resistant frequencies of Shenyang,Shouguang Shandong and Baoding Hebei to the three fungicides were high, except the isolates to diethofencarb (10%) in Baoding Hebei. The resistant levels of all detected isolates were the highest to carbendazim,more than 5 000 times. It was impossible to measure MIC value;The resistant levels of 50% isolates were high resistance,and they were more than 100 times. Most of isolates to mancozeb belonged to low level resistance and middle level resistance, and the resistant levels were about 50 times. 49.9% isolates have developed resistance to carbendazim and diethofencarb. Besides,multiple resistant. Isolates (resistance to carbendazim、diethofencarb and mancozeb )were found in the filed.

WANG M

, LIU H

, HAN J

, GAO J

. Detecting the resistance of
Fulvia fulva to carbendazim, diethofencarb and mancozeb. Chinese Journal of Pesticide Science, 2003,5(4):30-36. (in Chinese)

DOI:10.3321/j.issn:1008-7303.2003.04.005 URL [本文引用: 1]

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谌江华, 姚红燕, 王丽丽, 柴伟纲, 孙梅梅 . 宁波设施蔬菜灰霉病菌对2种杀菌剂的抗性检测
长江蔬菜, 2016(4):82-84.

DOI:10.3865/j.issn.1001-3547.2016.04.032 URL [本文引用: 1]

为明确宁波市设施蔬菜灰霉病菌的抗药性现状,采用菌丝生长速率法测定了宁波市6个不同地区共46个菌株对腐霉利和嘧霉胺2种常规防治药剂的抗药性。试验结果表明,测试的灰霉病菌对腐霉利已产生了很高的抗性,整体抗性频率为80.43%,高抗频率为22.84%,对嘧霉胺的抗性则相对较低,整体抗性频率为34.78%,高抗频率为1.67%;不同地区间灰霉病菌的抗药性差异较大,6个地区以镇海的抗药性最为严重,慈溪、鄞州两地的抗药性则相对较轻。结果还发现,部分灰霉病菌株对腐霉利和嘧菌胺2种杀菌剂产生了双重抗性,镇海的双重抗性频率最高,达到了60%。为此,在设施蔬菜生产上应合理更换并交替使用与此2种药剂无交互抗性的药剂,以有效控制灰霉病。

CHEN J

, YAO H

, WANG L

, CHAI W

, SUN M

. Resistance detection ofBotrytis cinerea to two fungicides on protected vegetables of Ningbo City
Journal of Changjiang Vegetables, 2016(4):82-84. (in Chinese)

DOI:10.3865/j.issn.1001-3547.2016.04.032 URL [本文引用: 1]

秦宝福 . 苦皮藤素微粉剂的研制及应用
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. Studies on formulation of celangulin flo-dust and its application
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赵卫松, 鹿秀云, 郭庆港, 王培培, 商俊燕, 年冠臻, 张晓云, 董丽红, 李社增, 马平 . 防治番茄灰霉病的枯草芽胞杆菌BAB-1粉尘剂研制
中国生物防治学报, 2018,34(1):99-108.

DOI:10.16409/j.cnki.2095-039x.2018.01.012 URL [本文引用: 1]

目前我国农药登记的微生物杀菌剂主要为水剂和可湿性粉剂两种剂型。为了克服常规喷雾导致温室大棚内湿度增加给防病带来的不利影响,本文以枯草芽胞杆菌BAB-1为有效成分开展了粉尘剂研究,通过对载体和助剂的筛选,明确了最佳的载体、助剂种类及其比例,最终确定100亿CFU/g枯草芽胞杆菌BAB-1粉尘剂的配方为:滑石粉20%、分散剂GY-D900 2%、菌株BAB-1原药补足至100%。该制剂具有很好的悬浮效果(30 min时悬浮率50%)。室内盆栽试验表明,菌株BAB-1粉尘剂对番茄灰霉病防效达到57.14%~71.43%,对黄瓜灰霉病的保护作用优于治疗作用,施用1次的防病效果分别为48.80%和1.65%;温室大棚试验结果表明,该制剂在番茄大棚中施用3次后对灰霉病的防效达到79.04%,对照化学药剂嘧菌酯800倍水溶液的防效为82.55%。该研究结果为枯草芽胞杆菌BAB-1粉尘剂的进一步产业化开发和应用提供了科学依据。

ZHAO W

, LU X

, GUO Q

, WANG P

, SHANG J

, NIAN G

, ZHANG X

, DONG L

, LI S

, MA

. A preparation of
Bacillus subtilis BAB-1 DPC against tomato gray mold. Chinese Journal of Biological Control, 2018,34(1):99-108. (in Chinese)

DOI:10.16409/j.cnki.2095-039x.2018.01.012 URL [本文引用: 1]

李姝江, 方馨玫, 曾艳玲, 樊苏恒, 朱天辉 . 解淀粉芽孢杆菌BA-12可湿性粉剂研制及对核桃根腐病的防治效果
中国生物防治学报, 2016,32(5):619-626.

DOI:10.16409/j.cnki.2095-039x.2016.05.011 URL [本文引用: 1]

为获得对核桃根腐病具有优良防治效果的解淀粉芽孢杆菌BA-12可湿性粉剂,采用单因素法和正交试验法筛选出对菌株BA-12活性影响最小和悬浮率最佳的载体和助剂及其配比。可湿性粉剂的配方为解淀粉芽孢杆菌10%,载体高岭土30%,湿润剂十二烷基苯磺酸钠10%、分散剂三聚磷酸钠5%、保护剂腐殖酸2.5%。主要性能检测结果表明可湿性粉剂活菌含量为1×10~8 cfu/g,湿润时间为40 s,悬浮率为79%,pH 6.72,含水率2.61%。稳定性测定中,菌剂对温度、酸碱、紫外光耐受性强,30~45℃、p H 6~8、紫外照射20~30 min均对菌剂影响小。盆栽试验得到500~1000倍稀释的菌剂为防治核桃根腐病推荐使用浓度。

LI S

, FANG X

, ZENG Y

, FAN S

, ZHU T

. Preparation of wettable powder of
Bacillus amyloliquefaciens BA-12 and its control effect on walnut root rot. Chinese Journal of Biological Control, 2016,32(5):619-626. (in Chinese)

DOI:10.16409/j.cnki.2095-039x.2016.05.011 URL [本文引用: 1]

ISHII

, HOLLOMON D

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Springer, 2015.

[本文引用: 1]

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张鹏, 王文桥, 黄啟良, 孟润杰, 赵建江, 马志强, 韩秀英, 张小风 . 40%氟菌·唑醚悬浮剂的研制及其对马铃薯晚疫病田间防治效果
中国农业科学, 2013,46(15):3142-3150.

DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.15.008 Magsci [本文引用: 2]

【目的】筛选对致病疫霉（Phytophthora infestans）抑菌活性高的杀菌剂氟吡菌胺和吡唑醚菌酯的最佳混配比例，将其加工成悬浮剂（suspension concentrate，SC）并确定其在田间对马铃薯晚疫病的防治效果。【方法】采用叶盘法测定氟吡菌胺和吡唑醚菌酯的不同配比混合物对致病疫霉的毒力并根据Wadley公式计算增效系数，选择具有增效作用的混配组合；采用流点法、黏度曲线法确定润湿分散剂，通过“湿法”研磨工艺加工不同助剂含量的样品，调节样品的流变学特性，逐步优化配方；确定最终配方后，采用“湿法”研磨工艺加工悬浮剂样品，测定其对马铃薯晚疫病的田间防治效果。【结果】氟吡菌胺和吡唑醚菌酯以10﹕1和1﹕4混合时对致病疫霉毒力表现增效，增效系数分别为1.56和1.66；40%氟菌•唑醚悬浮剂的最佳配方为：氟吡菌胺≥8%、吡唑醚菌酯≥32%、1%Terwet1004、2%Tersperse2700、2%Morwet D425、0.5%硅酸镁铝、4%乙二醇、3%SAG630、水≤47.5%；在用量为480、360、288 g a.i./hm2时，40%氟菌•唑醚悬浮剂对马铃薯晚疫病的田间防治效果分别为94.38%、92.20%、88.22%。【结论】氟吡菌胺和吡唑醚菌酯混配使用对致病疫霉具有不同程度的毒力增效作用；按照选定的配方加工成的40%氟菌•唑醚悬浮剂样品粒径小，悬浮率高，贮存稳定，在田间条件下对马铃薯晚疫病有优异的防治效果。

ZHANG

, WANG W

, HUANG Q

, MENG R

, ZHAO J

, MA Z

, HAN X

, ZHANG X

. Development of 40% fluopicolide·pyraclostrobin suspension concentrate and its controlling efficacy to potato late blight in the field
Scientia Agricultura Sinica, 2013,46(15):3142-3150. (in Chinese)

DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2013.15.008 Magsci [本文引用: 2]

马涛, 汤达祯, 张贵才, 葛际江, 蒋平 . 表面活性剂在油水界面的吸附行为
应用化工, 2007,36(10):1017-1020.

DOI:10.3969/j.issn.1671-3206.2007.10.024 URL [本文引用: 1]

简要介绍了液液界面张力的由来,以及降低油水界面张力在石油工业中的意义;重点介绍了影响表面活性剂降低油水界面张力的因素,包括水相、油相、表面活性剂及使用条件。概括总结了类V型、类L型、类倒L型动态油水界面张力曲线,讨论了不同形状动态界面张力曲线与表面活性剂在油水界面处吸附、解吸行为的关系;简述了界面张力曲线形态间的相互转变。

, TANG D

, ZHANG G

, GE J

, JIANG

. Adsorption behavior of surfactant in oil-water interface
Applied Chemical Industry, 2007,36(10):1017-1020. (in Chinese)

DOI:10.3969/j.issn.1671-3206.2007.10.024 URL [本文引用: 1]

LIANG R

. Orthogonal test design for optimization of the extraction of polysaccharides from Phascolosoma esulenta and evaluation of its immunity activity
Carbohydrate Polymers, 2008,73(4):558-563.

DOI:10.1016/j.carbpol.2007.12.026 URLPMID:26048221 [本文引用: 1]

Yield of polysaccharides from Phascolosoma esulenta obtained by phosphate buffer extraction through an orthogonal experiment (L9(3)4) were investigated to get the best extraction conditions. The results showed that extraction temperature, ratio of phosphate buffer to raw material, extraction time, and ratio of trypsinase to raw material were the main four variables that influenced the yields of extracts. The highest yield was obtained when extraction temperature, ratio of phosphate buffer to raw material, extraction time and ratio of trypsinase to raw material were 40 C, 2, 5.5h and 1.6, respectively. The immunity-stimulating method showed that polysaccharides from P. esulenta could significantly raise liver, spleen and thymus index of mice and enhance Con A-stimulated mouse spleen cells proliferation. These results indicate that polysaccharides from P. esulenta had significantly higher immunity-stimulating activities.

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凌世海 . 农药剂型加工——固体制剂. 3版. 北京: 化学工业出版社, 2003.

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揣红运, 谢学文, 石延霞, 柴阿丽, 李宝聚 . 精量电动弥粉机应用技术
农业工程技术, 2017,37(31):21-23, 28.

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精量电动弥粉机是一种设施蔬菜病虫害防治专用的植保机械,该机械能够提升植保作业水平、减少用药量、提高农药利用率、安全环保,对设施蔬菜病虫害防治具有重要意义。

CHUAI H

, XIE X

, SHI Y

, CHAI A

, LI B

. Application technology of precision electric pulverized machine
Agricultural Engineering Technology, 2017,37(31):21-23, 28. (in Chinese)

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精量电动弥粉机是一种设施蔬菜病虫害防治专用的植保机械,该机械能够提升植保作业水平、减少用药量、提高农药利用率、安全环保,对设施蔬菜病虫害防治具有重要意义。

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阚琳娜, 李宝聚, 纪明山, 张宗俭, 石延霞 . 黄瓜褐斑病防治药剂的活体筛选
中国蔬菜, 2007(4):22-24.

DOI:10.3969/j.issn.1000-6346.2007.04.007 URL [本文引用: 1]

选取蔬菜上常用的11种杀菌剂,运用活体微量筛选方法,测定了供试药剂对黄瓜褐斑病的生物活性,并挑选出活性最好的4种药剂进行田间小区试验。试验结果表明:所选的4种药剂75%百菌清可湿性粉剂、50%福美双可湿性粉剂、25%咪鲜胺乳油和70%代森锰锌可湿性粉剂对黄瓜褐斑病的田间最高防效可分别达到92.71%、 89.16%、87.31%和73.20%,是防治黄瓜褐斑病的优良杀菌剂。

KAN L

, LI B

, JI M

, ZHANG Z

, SHI Y

. In vivo studies on screening effective fungicides against Corynespora cassiicola
China Vegetables, 2007(4):22-24. (in Chinese)

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邢光耀 . 几种药剂混配对黄瓜靶斑病的防治试验
长江蔬菜, 2013(8):50-51.

DOI:10.3865/j.issn.1001-3547.2013.08.018 URL [本文引用: 1]

为更加有效防治黄瓜靶斑病，开展几种药剂混配防治黄瓜靶斑病的田间药效试验。试验结果表明，供试药剂对黄瓜安全，对黄瓜生长发育无不良影响；从对黄瓜靶斑病的最终防治效果来看，4%四氟醚唑水乳剂+25%咪鲜胺水乳剂防效最好，为94.02%；其次为40%稻瘟灵可湿性粉剂+25%咪鲜胺水乳剂和10%苯醚甲环唑微乳剂+25%咪鲜胺水乳剂，二者防效都在90%以上。所以在生产实践中，建议用以上3种配方防治黄瓜靶斑病，以上全为制剂用量。

XING G

. Control efficacy of several mixed fungicides on cucumber target leaf spot
.Changjiang Vegetables, 2013(8):50-51. (in Chinese)

DOI:10.3865/j.issn.1001-3547.2013.08.018 URL [本文引用: 1]

郑雪松, 张潜坤, 陈宇, 茹李军, 张晓波, 丑靖宇, 王文桥, 李淼 . 唑菌酯及其混剂防治黄瓜靶斑病室内及田间药效试验
农药, 2015,54(5):378-380.

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[目的]探索唑菌酯及其混剂防治黄瓜靶斑病的效果及剂量。[方法]采用菌丝生长速率法测定唑菌酯与苯醚甲环唑对靶斑病菌的联合毒力,验证20%唑菌酯SC及24%唑菌酯·苯醚甲环唑SC对黄瓜靶斑病的田间防效。[结果]唑菌酯与苯醚甲环唑对靶斑病菌的EC50值为(11.49±1.19)、(0.82±0.06)mg/L;唑菌酯与苯醚甲环唑1颐1、1颐2、1颐3三个配比有增效作用。[结论]靶斑病发病初期间隔7 d连续喷施2~3次20%唑菌酯SC或24%唑菌酯·苯醚甲环唑SC有较好防效;20%唑菌酯SC推荐剂量为150~300 g a.i./hm2,而24%唑菌酯·苯醚甲环唑SC推荐剂量为360~540 g a.i./hm2。

ZHENG X

, ZHANG Q

, CHEN

, RU L

, ZHANG X

, CHOU J

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. Lab and field efficacy of mixtures containing pyraoxystrobin against
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DOI:10.1007/978-1-4020-8804-9_3 URL [本文引用: 1]

QoI fungicides which inhibit mitochondrial respiration at the ubiquinol oxidation centre (Qo site) of the cytochrome bc1 enzyme complex, are one of the most important class of agricultural fungicides. QoI fungicides generally carry a high risk of pathogen resistance development with resistance occurring in over 30 pathogen species, such as powdery mildews, downy mildews, anthracnose, Alternaria spp., scab, and grey mould. Molecular mechanisms of QoI resistance have been intensively studied; a single point mutation which causes an amino acid change in cytochrome b , G143A in particular, was described to govern the expression of high resistance. A range of molecular methods including PCR-RFLP , allele-specific PCR, quantitative real-time PCR and pyrosequencing have been developed, enabling the rapid detection and quantification of resistance. However, the status of heteroplasmy in the mitochondrial genome which contains the cytochrome b gene can cause instability over time, making it difficult to precisely monitor QoI resistance in some pathogens. The role of the alternative oxidase pathway in QoI resistance is not clear as yet, although this enzyme is very likely involved in resistance development of grey mould in particular. Novel QoI fungicides have been developed, some of which show differential patterns of cross-resistance to pre-existing QoI fungicides. This paper summarizes QoI resistance development over the last decade as well as future research prospects.

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孟润杰, 王文桥, 吴杰, 韩秀英, 周大伟, 宁昭玉 . 噻呋酰胺与嘧菌酯混配对马铃薯黑痣病菌增效作用及其田间防效
植物保护学报, 2018,45(2):367-372.

DOI:10.13802/j.cnki.zwbhxb.2018.2016083 URL [本文引用: 1]

为明确噻呋酰胺与嘧菌酯混配对马铃薯黑痣病菌Rhizoctonia solani的增效作用及对马铃薯黑痣病的田间防效,采用菌丝生长速率法和田间药效试验测定二者混配组合对其的联合毒力,分别用Wadley法和Abbott法评价混配组合的增效作用,并比较拌种、沟施及苗期茎基部喷淋3种施药方式对黑痣病的田间防效。结果表明,噻呋酰胺与嘧菌酯以质量比3∶1、2∶1、1∶1和1∶2进行混配时抑制马铃薯黑痣病菌菌丝生长的增效系数分别为1.7、2.7、2.5和1.9,其中2∶1和1∶1的混配组合增效作用较为明显。240 g/L噻呋酰胺悬浮剂与250 g/L嘧菌酯悬浮剂1∶1桶混以240 g（a.i.）/hm2沟施对马铃薯黑痣病的防效优于拌种和苗期茎基部喷淋的防效,沟施方式下对植株黑痣病的防效为65.3%,对薯块黑痣病的防效为71.6%,增效系数为1.1,表现增效作用。表明噻呋酰胺与嘧菌酯有效成分质量比1∶1的混配组合以240 g（a.i.）/hm2为推荐剂量沟施可有效防治马铃薯黑痣病。

MENG R

, WANG W

, WU

, HAN X

, ZHOU D

, NING Z

. Synergistic interaction and field control effect of mixtures of thifluzamide with azoxystrobin against
Rhizoctonia solani. Journal of Plant Protection, 2018,45(2):367-372. (in Chinese)

DOI:10.13802/j.cnki.zwbhxb.2018.2016083 URL [本文引用: 1]

王晓坤, 郭贝贝, 高杨杨, 慕卫, 刘峰 . 六种三唑类杀菌剂对番茄叶霉病菌的毒力及其安全性和田间防效评价
植物保护学报, 2017,44(4):671-678.

URL [本文引用: 1]

为筛选出有效防治番茄叶霉病的药剂,采用生长速率法及平板涂布法测定6种三唑类杀菌剂对番茄叶霉病菌菌丝生长及分生孢子萌发和芽管伸长的毒力,评价其对番茄植株的安全性和对叶霉病的田间防效。结果表明,己唑醇、苯醚甲环唑、戊唑醇和氟硅唑对番茄叶霉病菌菌丝生长的毒力均较高,EC50分别为0.50、0.55、0.80、2.42 mg/L,其次为腈菌唑和四氟醚唑,EC50分别为6.92、15.08 mg/L。6种杀菌剂抑制病菌分生孢子萌发及芽管伸长的作用均较弱,对芽管伸长的抑制活性高于对孢子萌发的抑制活性;戊唑醇和四氟醚唑抑制孢子萌发的作用相对较强,100 mg/L处理的抑制率为60%~70%,戊唑醇、四氟醚唑和己唑醇抑制芽管伸长的作用相对较强,100 mg/L处理的抑制率均在70%以上。己唑醇和戊唑醇200 mg/L处理番茄植株,显著抑制其株高,苯醚甲环唑和腈菌唑对其影响相对较小,这4种杀菌剂对番茄植株的叶色及形态均无明显影响;且这4种杀菌剂对番茄叶霉病的田间预防效果均高于治疗效果,其中150 mg/L己唑醇的预防效果和治疗效果均最高,分别为90.67%和85.58%;苯醚甲环唑的最低,300 mg/L时预防效果为80.16%,治疗效果为71.68%。

WANG X

, GUO B

, GAO Y

, MU

, LIU

. The toxicity of six triazole fungicides to
Cladosporium fulvum and their safety and field efficacy in the control of tomato leaf mold. Journal of Plant Protection, 2017,44(4):671-678. (in Chinese)

URL [本文引用: 1]

刘振华, 张林, 罗远婵, 张道敬, 李元广 . 基于极端顶点混料试验设计的多粘类芽孢杆菌可湿性粉剂载体优化
农药学学报, 2014,16(4):445-451.

DOI:10.3969/j.issn.1008-7303.2014.04.12 URL [本文引用: 1]

Wettability is an important quality performance of wettable powder (WP). In this study, 10% (mass fraction) precipitated silica (PS) in light calcium carbonate (LCC) was used to reduce wetting time of Paenibacillus polymyxa WP (PPWP) from 416 s to 54 s. Then, extreme vertex mixture design was used to optimize PPWP formulation. Optimization results showed that suitable LCC mass fraction in PPWP carrier was 90%-92%, suitable PS mass fraction was 7.5%-9.0%. Under these conditions, mixture design predicted that wetting time of PPWP would be 85-117 s, suspensibility of PPWP would be 70.5%-71.7%, and pH value of PPWP would be 9.01-9.05. Verification test results matched well with the predicted results, which will provide reference for optimization of PPWP.

LIU Z

, ZHANG

, LUO Y

, ZHANG D

, LI Y

. Optimization of Paenibacillus polymyxa wettable powder based on the extreme vertex mixture design
Chinese Journal of Pesticide Science, 2014,16(4):445-451. (in Chinese)

DOI:10.3969/j.issn.1008-7303.2014.04.12 URL [本文引用: 1]

袁会珠, 齐淑华, 杨代斌 . 温室大棚粉尘法施药技术研究
植物保护学报, 2000,27(4):364-368.

Magsci [本文引用: 1]

粉尘法施药技术在我国保护地蔬菜病虫害防治中已得到推广应用。为了从理论是进一步说明粉尘法施药技术的可行性，研究了施药前后棚膜透光率和作物光合速率的变化，采用荧光指示剂法测定了粉尘法施药和常规大容量喷雾技术对操作者的污染程度，测定了药剂在黄瓜地表的沉积分布。结果表明，粉尘法施药前后棚膜透光率没有变化；作物叶片的光合速率变化很小；处理６６７ｍ＾２棚室，粉尘法施药后药剂在操作者身体上的沉积量是０．２１μｇ

YUAN H

, QI S

, YANG D

. Studies on cloudy-dusting in plastic tunnel
Journal of Plant Protection, 2000,27(4):364-368. (in Chinese)

Magsci [本文引用: 1]

郑建秋, 张云, 胡荣娟, 王艳梅 . 保护地蔬菜粉尘施药技术
中国植保导刊, 1995(5):20-21.

URL [本文引用: 1]

保护地蔬菜粉尘施药技术郑建秋，张云，胡荣娟，王艳梅（北京市植保站１０００２９）粉尘法施药是根据保护地生产特点研究推广的病虫防治新技术，它具有省工、省力、省药、不增加棚室湿度，施药时对棚室密闭程度要求不严格等特点，是保护地蔬菜病虫防治较理想的技术。生产...

ZHENG J

, ZHANG

, HU R

, WANG Y

. Application technology of vegetable dust in protected land
. China Plant Protection, 1995(5):20-21. (in Chinese)

URL [本文引用: 1]

保护地蔬菜粉尘施药技术郑建秋，张云，胡荣娟，王艳梅（北京市植保站１０００２９）粉尘法施药是根据保护地生产特点研究推广的病虫防治新技术，它具有省工、省力、省药、不增加棚室湿度，施药时对棚室密闭程度要求不严格等特点，是保护地蔬菜病虫防治较理想的技术。生产...

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赵国庆, 崔文德, 李朝恒, 刘纪高 . 粉尘剂在棚室蔬菜上的使用技术
长江蔬菜, 2000(7):20-21.

DOI:10.3865/j.issn.1001-3547.2000.07.013 URL [本文引用: 1]

1 粉尘法(用粉尘剂防治)优点 ①省力省时,成本低粉尘法防治病虫害一般667 m2用粉尘剂1 kg,用丰收-5型或10型喷粉器,喷粉200 g/min,667 m2大棚喷施粉尘剂需喷药时间不超过5 min(分钟),而常规喷雾一般则需要120 min,同时喷粉器的重量一般在3.5 kg,加上药剂为4.5 kg,操作轻便,粉尘剂分散性好,不需太多的药量即能在棚室内很均匀地分散,并附着在植株表面,持效期长,减少用药次数,从而减少用药量,投入少,成本低.

ZHAO G

, CUI W

, LI C

, LIU J

. Application technology of dust on greenhouse vegetables
.Changjiang Vegetables, 2000(7):20-21. (in Chinese)

DOI:10.3865/j.issn.1001-3547.2000.07.013 URL [本文引用: 1]