基因枪法介导大白菜小孢子转基因技术研究初报

李菲^1,2，张淑江¹，章时蕃¹，武剑¹，王晓武¹，张慧¹，孙日飞^1,*，张振贤²

¹中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京 100081；²中国农业大学农学与生物技术学院，北京 100193

出版日期:2017-01-25发布日期:2017-01-25


基金资助:国家重点研发计划项目（2016YFD0101701）；农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室项目

Transformation of Chinese Cabbage Microspores by Particle Bombardment

LI Fei^1,2，ZHANG Shujiang¹，ZHANG Shifan¹，WU Jian¹，WANG Xiaowu¹，ZHANG Hui¹，SUN Rifei^1,*，and ZHANG Zhenxian²

¹Institute of Vegetables and Flowers，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing 100081，China；²College of Agriculture and Biotechnology，China Agricultural University，Beijing 100193，China

Online:2017-01-25Published:2017-01-25

摘要/Abstract

摘要： 围绕基因枪微粒的制备、大白菜小孢子对基因枪轰击的耐受能力以及小孢子的胚胎发生能力开展研究，初步建立了以小孢子为外植体的遗传转化体系。高胚胎发生的大白菜材料‘CC-4’的小孢子在基因枪7.58 × 10⁶ Pa爆破压力，9 cm的轰击距离下，利用直径 0.6 μm，亚精胺包裹的金粒子微弹以每次500 μg的金粒子量连续轰击5次，小孢子活力不受影响，培养1 d后GUS基因瞬时表达检测，平均每皿可获得20个以上转化小孢子；小孢子培养15 d后成功获得胚状体，GUS基因瞬时表达检测，平均每皿最多获得4个遗传转化的胚状体，40个花蕾可获得20个以上转化胚状体。初步探讨基因枪法介导大白菜小孢子结果表明：大白菜小孢子数量庞大易收集，可耐受基因枪的多次轰击，并能继续保持胚胎发生的能力，作为新尝试的遗传转化受体，有可能是解决白菜类作物再生困难，提高转基因效率的有效手段。
中图分类号:
S 643.1

引用本文

李 菲1,2，张淑江1，章时蕃1，武 剑1，王晓武1，张 慧1，孙日飞1,*，张振贤2. 基因枪法介导大白菜小孢子转基因技术研究初报[J]. 园艺学报, 2017, 44(1): 62-68.
LI Fei1,2，ZHANG Shujiang1，ZHANG Shifan1，WU Jian1，WANG Xiaowu1，ZHANG Hui1，SUN Rifei1,*，and ZHANG Zhenxian2. Transformation of Chinese Cabbage Microspores by Particle Bombardment[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2017, 44(1): 62-68.





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