HILIC-MS/MS法鉴别肝素和硫酸乙酰肝素

刘冬科¹,王凤山^1,2

发布日期:2021-04-06
通讯作者:王凤山. E-mail:fswang@sdu.edu.cn

Identification of heparin and heparan sulfate by HILIC-MS/MS

LIU Dongke¹, WANG Fengshan^1,2

1. Key Laboratory of Chemical Biology(Ministry of Education), Institute of Biochemical and Biotechnological Drug, School of Pharmaceutical Sciences, Cheeloo College of Medicine, Shandong University, Jinan 250012, Shandong, China;
2. Laboratory of Carbohydrate Chemistry and Glycobiology of Shandong Province, National Glycoengineering Research Center, Shandong University, Jinan 250012, Shandong, China

Published:2021-04-06

摘要/Abstract

摘要： 目的 建立亲水相互作用色谱-三重四极杆质谱法(HILIC-MS/MS)同时测定肝素及硫酸乙酰肝素经肝素酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ酶切后产生的双糖含量,为肝素及硫酸乙酰肝素的鉴别提供方法和数据参考。 方法 采用PC HILIC色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以10 mmol/L乙酸铵-水溶液(A)、10 mmol/L乙酸铵-90%乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速0.9 mL/min,柱温40 ℃,进样量10 μL,采用电喷雾电离源、负离子多反应检测模式对肝素及硫酸乙酰肝素酶切后产生的8种双糖进行定量,比较二者的差异。 结果 所测成分在测定摩尔浓度范围内线性关系良好(r²>0.996 0),平均加样回收率为90.34%~99.62%,RSD为4.7%~6.7%,样品测定结果显示肝素与硫酸乙酰肝素双糖组成及比例差异明显。肝素中占比最大的双糖为ΔUA2S-GlcNS6S(TriS),约69.8%;硫酸乙酰肝素中占比最大的双糖为ΔUA-GlcNAc(0S),约51.0%。 结论 该法灵敏度高、稳定性好,简单快捷、准确可靠,可作为肝素与硫酸乙酰肝素的鉴别方法之一。


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