（二）凡与儿的意义

    l。当反应速度为最大速度一半时，米氏方程式可以变换如下：

                          V。  V。［SI

                          W“n：：－－－－－－－－一

阶步整理得Km＝【S］。由此可见，Km值等于酶促反应速度为最大速度

放度。

反应达最大速

半时的底物

            K，＋  K’。。。

  2．Km ＝一生＊尘，当 KZDeK3，即 ES解离成 E和 S的速度大大超过分解成 E和 P的速

    一”K’““””“”’一’——’””’””一’”—”“““”““”——一”“’———一’”“”“一

刎， K3可以忽略不计。此时见值近似于 ES的解离常数民。在这种情况下，凡值可

用来表示酶对底物的亲和力。

                        v＿＆——＿v

                            Km二二一ryl？Fcr二K

                                  “”－ KI－     ES “”

恻，凡值愈小，酶与底物的亲和力愈大。这表示不需要很高的底物浓度便可容易地

B到最大反应速度。但岛值并非在所有酶促反应中都远小于匈，所以，此时房值和

九值的涵义不同，不能互相代替使用。

  3．Km值是酶的特征性常数之一，只与酶的结构、酶所催化的底物和反应环境（如温

室小儿离子强度）有关，与酶的浓度无关。各种酶的几值范围很广，大致在10－6－10’‘nUnol／L之间。对于同一底物，不同的酶有不同的几值；多底物反应的酶对于不p

底物也有不同的Km值。

    4．Vin是酶完全被底物馆和时的反应速度，与酶浓度呈正比。如果酶的总浓度已

知，便可从＊。计算酶的转换数（mm上议）。例如，1沪mde L的碳酸酥酶溶液在

一秒钟内催化生成 0．6mol／L HZCO3，则每秒钟每 1分子酶可催化生成 6 XI护个分子at

HZcQ。

                                Vmax        0． 6’lrolxl／8－。。 l

                      KI二天空一守兰生坐失望二6XI08－‘

                      “，－LEJ 10－6InOUL””

    动力学常数K3称为酶的转换数，其定义是：当酶被底物充分饱和时，单位时间内

每个酶分子（或活性中心）催化底物转变为产物的分子数。对于生理性底物，大多数酶的

转换数在l－l0／秒之间。

    （三）Xi值和Vmax值的测定

    如图44所示，底物浓度曲线是矩形双曲线，其图形为渐进线，很难准确地测得见

值和Vin值。过高的底物浓度不仅不易测得Vin值，在实验中还会出现很多困难。若将

米氏方程式进行种种变换，将曲线作图改为直线作图，便可容易地用图解法准确求得

Km值和Vra值。

    双倒数作图法（double reeled pfo）又称为林一贝氏（lineweavenButk）作图法，是最常

用的作图法。它将米氏方程式等号两边取倒数，所得到的双倒数方程式称做林．贝氏方

程式：

                                  IKmll

                                        下一7一”Wi7平方二（）

                          V Vin  LsJ’ V。。u’

    若以  1／V对  1／   LS］作图（图个5），可得一直线，其纵轴上的截距为  1／Vin，横轴上

的截距为一l／Km。此作图法除用于求取Km值和 Vmax值外，还可用于判断可逆性抑制反

应的性质（见后）。

    此外，Hanes作留法（图个6）也是从米氏方程式衍化来的，其方程式为