, 张立娜 保定市第二中心医院, 河北 保定 072750
2020-09-21 收稿, 2020-12-08 录用
*通讯作者: 王海虹
摘要: 本文探讨了颈动脉超声检查联合CT和血清微小RNA-124（miR-124）、微小RNA-155（miR-155）对颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险预测价值。以43例颈动脉狭窄患者为颈动脉狭窄组，正常志愿者43例为正常组，用RT-PCR法检测miR-124、miR-155表达，采用颈动脉超声检查颈动脉狭窄，采用CT检查颈部血管。结果显示，与正常组相比，颈动脉狭窄组miR-124、miR-155表达升高（P < 0.05）。与超声、CT检查相比，超声检查联合CT检查颈动脉狭窄准确率、诊断价值较高（P < 0.05）。本研究认为，颈动脉超声、CT、miR-124、miR-155对颈动脉狭窄的诊断价值较高，且可用于预测继发性脑梗的风险，预测价值较为理想。
关键词: 颈动脉超声检查CTmiR-124miR-155颈动脉狭窄继发性脑梗
Value of Carotid Ultrasound Combined with CT and Serum miR-124 and miR-155 in Predicting the Risk of Secondary Cerebral Infarction in Patients with Carotid Stenosis
WANG Shida, WANG Haihong
, ZHANG Lina Baoding No. 2 Central Hospital, Baoding 072750, Hebei, P. R. China
*Corresponding author: WANG Haihong
Abstract: This study explored the value of carotid ultrasound combined with CT and serum microRNA-124 (miR-124) and microRNA-155 (miR-155) in predicting the risk of secondary cerebral infarction in patients with carotid stenosis.Forty-three patients with carotid stenosis were selected as carotid stenosis group, and 43 normal volunteers were selected as normal group. The expression of miR-124 and miR-155 was detected by RT-PCR. Carotid artery stenosis was examined by carotid ultrasound. The blood vessels in the neck were examined by CT. The results showed that compared with the normal group, the expression of miR-124 and miR-155 in carotid stenosis group was increased (P < 0.05).Compared with ultrasound and CT, ultrasound combined with CT had higher accuracy and diagnostic value (P < 0.05).It is found that carotid ultrasound, CT, miR-124 and miR-155 have high diagnostic value for carotid artery stenosis, and can be used to predict the risk of secondary cerebral infarction.
Key words: carotid ultrasoundCTmiR-124miR-155carotid artery stenosissecondary cerebral infarction
脑血管病是严重威胁中老年健康的疾病之一，颈动脉狭窄和动脉粥样硬化是脑血管病的主要危险因素[1]。颈动脉狭窄是一种常见的动脉粥样硬化性疾病，常见于中老年人，它是由颈动脉粥样硬化、纤维肌肉发育不良、血液病和血管硬化引起的[2]。颈动脉狭窄可能会引起脑部缺血，其主要症状为眩晕、黑蒙、视物不清、头疼、失眠、头晕等[3]。有眼缺血表现为视力丧失、偏盲，患者会感到头晕、不清醒、反应迟钝，有麻木感和肿胀感，严重时有针刺感。约30%~60%的脑梗死患者是由颈动脉狭窄引起的[4]。颈动脉不稳定斑块破裂或狭窄部位形成局部血栓，可导致远端动脉栓塞，从而引起脑梗死，可累及泌尿、血液循环、语言系统等, 严重者可引起致命性疾病[5]。本文旨在研究CT、超声检查、miR-124、miR-155对颈动脉狭窄的诊断价值及相关影像学特征。
1 资料与方法1.1 研究对象选取2018年3月~2019年3月在我院就诊的颈动脉狭窄患者43例为颈动脉狭窄组：男27例、女16例；年龄47~62岁，平均(51.78±7.12)岁。选取同期在我院体检正常的志愿者43例作为正常组：男23例、女20例；年龄45~58岁，平均(48.93±6.17)岁。上述两组患者年龄比较，无统计学差异(P＞0.05)，有可比性。
本研究经我院伦理委员会批准，患者和家属均知情且签署知情同意书。纳入标准：所有患者均符合《颈动脉狭窄诊治指南》[6]诊断标准。排除标准：合并严重感染者，合并其他内科疾病或恶性肿瘤者；代谢严重紊乱者；患精神疾病无法正常交流者。
1.2 方法RT-PCR法检测miR-124、miR-155：采集两组患者治疗前、治疗后1d外周静脉血3 mL，分离出单个核细胞，提取单个核细胞总RNA, 采用Trizol法，检测RNA含量、纯度，使用Takara逆转录试剂盒行逆转录处理后得到cDNA，设计引物序列采用Primer 5.0软件，PCR反应条件: 预变性94 ℃ 4 min，变性94 ℃ 1 min，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，72℃ 10 min，30个循环。扩增产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳30 min, 拍照分析光密度值, 计算mRNA相对表达量。记录血清微小RNA-124(miR-124)、微小RNA-155(miR-155)进行对比分析。
CT检查：采用64排螺旋CT(美国CE公司)检查颈部血管。首先按照常规的颈部横断面，从主动脉弓平面扫描至颅底平面范围，将平扫序列复制。使用专业的血管成像软件，设置阀值为100 HU, 采用高压注射器以5 mL/s的速率注入50 mL非离子型370 mgI/mL对比剂碘帕醇，生理盐水注射50 mL，待阀值测定区造影剂达到阀值的浓度即可加强扫描，最后得到颈动脉CT检查的原始图像，利用专门的重建技术重建血管，进行图像分析。
颈动脉超声检查：使用飞利浦IE33超声诊断仪, 频率为7 MHz左右，患者仰卧位，头偏向另一侧检查, 将颈部完全暴露出来, 横向移动探头从颈根部向头部侧面进行，然后从颈部前部纵向检测。根据测量的表面、内部特征，以及颈动脉狭窄和阻塞的部位等来判断颈动脉直径、分析颈动脉狭窄情况。
诊断价值：敏感性=真阳性/(真阳性+假阴性)×100%。特异性=真阴性/(真阴性+假阳性)×100%。准确性=(真阳性+真阴性)/总例数×100%。
1.3 统计学处理采用SPSS 20.0软件进行数据处理。计量资料以(x±s)表示，组间比较采用独立样本t检验，计数资料采用例数和百分比进行描述，组间比较采用χ2检验，采用ROC曲线评估miR-124、miR-155、CT及超声检查对颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险预测价值，P＜0.05为差异具有统计学意义。
2 结果2.1 颈动脉狭窄组与正常组miR-124、miR-155表达比较如表 1所示，与正常组相比，颈动脉狭窄组miR-124、miR-155表达明显升高，具有统计学差异(P＜0.05)。
表1
 表 1 两组miR-124、miR-155表达比较(x±s)
| 表 1 两组miR-124、miR-155表达比较(x±s) |
2.2 超声、CT对颈动脉狭窄分级的诊断准确率比较如表 2所示，与单独超声、CT检查相比，超声联合CT检查对颈动脉狭窄分级的诊断准确率较高(P＜0.05)；CT、超声检查对颈动脉狭窄分级的诊断准确率无统计学差异(P＞0.05)。
表2
表 2 超声、CT对颈动脉狭窄分级的诊断准确率比较
| 表 2 超声、CT对颈动脉狭窄分级的诊断准确率比较 |
2.3 超声、CT对颈动脉狭窄的诊断价值比较如表 3所示，与超声、CT检查相比，超声检查联合CT检查对颈动脉狭窄的诊断价值较高，具有统计学差异(P＜0.05)。
表3
表 3 超声、CT对颈动脉狭窄的诊断价值比较(%)
| 表 3 超声、CT对颈动脉狭窄的诊断价值比较(%) |
2.4 miR-124、miR-155、CT、超声检查对颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险程度预测价值ROC曲线分析显示，四项联合AUC为0.888, 诊断价值较高(P＜0.05)。如表 4、图 1所示。
表4
表 4 miR-124、miR-155、CT、超声检查对颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险程度预测价值
| 表 4 miR-124、miR-155、CT、超声检查对颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险程度预测价值 |
图 1
 | 图 1 miR-124、miR-155、CT、超声检查对颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险程度预测价值ROC曲线 |
2.5 影像学特征分析典型病例影像图见图 2、图 3。如图 2所示，46岁男性患者，多排螺旋CT检查表现为右侧颈内动脉起始部见钙化及软斑块，狭窄约80%。左侧颈总动脉中段见条形软斑块，狭窄约25%，颈内动脉起始部见混合斑块，狭窄约90%。左侧椎动脉起始部见软斑块，重度狭窄。如图 3所示，男性患者年龄48岁，颈动脉超声检查的表现：左侧颈内动脉斑块形成(A)和左侧颈内动脉狭窄(B)，脂质性软斑表现为低回声，钙化性硬斑块表现为强回声伴声影，混合型斑块表现为回声强弱不等的溃疡性。
图 2
 | 图 2 颈动脉狭窄患者CT图 |
图 3
 | 图 3 颈动脉狭窄患者颈动脉超声图 |
3 讨论血管系统是人体重要的管道系统, 分为动脉系统和静脉系统, 动脉系统相当于供水管道, 静脉系统是供水系统的下水管。动脉是从心脏流出到全身器官和组织的[7]，静脉来自身体的器官和组织，回到心脏，从而形成完整的循环系统。颈动脉是向脑组织和颅内供血的重要动脉系统，分为左右颈动脉[8]。脑梗死是由脑血管狭窄引起的，但颈动脉与脑梗死有直接关系[9]。血管壁上产生动脉粥样硬化斑块，在斑块的基础上可形成血栓，使动脉管腔逐渐变窄，狭窄的直径超过50%，会导致斑块形成血栓，表面的血栓或者斑块本身脱落，斑块被冲入大脑，导致脑梗死[10]。本文研究以颈动脉超声检查联合CT检测颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险预测价值，以期为临床提供参考。
颈动脉超声可检查颈部血管走行、管腔内径、管壁结构、先天发育异常等。重要的是，颈部血管超声检查是评价全身动脉粥样硬化的一个窗口[11]，不仅对动脉粥样硬化性疾病的早期诊断和预后判断具有重要价值，而且对心血管健康和心血管疾病风险的评估与预测也有重要价值[12]。颈动脉血管超声可检查的疾病有颈动脉粥样硬化、大动脉炎、动脉夹层、真性动脉瘤、假性动脉瘤、先天发育异常、动脉血栓，以及评估血流动力学变化等。颈动脉超声检查可了解颈动脉狭窄的位置、严重程度，并有助于判断动脉粥样硬化斑块的稳定性，有方便、无创、价格低廉的优点，可以作为筛选检查的手段[13]。CT扫描的特点为有多序列和较高的空间分辨率，扫描范围较广，可在对比剂辅助下快速、清晰分辨动脉血管腔狭窄情况，完成颈部动脉血管成像，可准确分辨动脉狭窄程度[14]。CT血管造影不仅可以了解颈动脉的形态和病理变化，有助于判断斑块的稳定性，还可以了解颅内血管和脑实质的病变情况。目前，多层螺旋CT被广泛应用，可用于肌肉骨骼，覆盖更大解剖范围，可进行CT血管造影、心脏评估、脑灌注成像、大型患者检查、虚拟内镜，多层螺旋CT已达到新世纪成像技术的巅峰[15, 16]。本研究显示，与CT、超声检查相比，颈动脉超声检查联合CT准确率、诊断价值显著上升。
微小RNA-124是真核生物中保守的非编码RNA, 是调控基因表达的关键途径。研究表明，miRNA参与调节炎症反应和脑缺血反应[17]。miR-124在成人和胚胎大脑中是最丰富的miRNA，是一种脑特异性miRNA，在中枢神经功能调节、脑神经发育中起重要作用，可作为脑梗早期检测的候选生物标志物[18]。目前，已有研究表明，在脑动脉闭塞中miR-124具有保护神经、抗炎、降低神经元凋亡的作用，miR-124从梗死的脑组织中释放血, 可能在脑缺血中起到重要的保护作用[19]。血清miR-155位于人类染色体21q21.3上, 有报道称miR-155可作为结直肠癌、血液系统恶性肿瘤的血清诊断和预后的生物标志物，miR-155的上升可增强口腔鳞状细胞癌患者的细胞增殖[20]。miR-155可调控急性炎症，起到免疫抑制作用，miR-155表达量明显上升可促使机体炎症反应，特异性抗体、效应性T细胞在特异性免疫、固有免疫中起到主要的作用，并参与急性脑梗死炎性反应[21]。本研究中患者miR-124、miR-155表达明显高于正常组，说明miR-155、miR-124在脑缺血中起到保护作用。临床可根据miR-155、miR-124的表达高低评估脑梗死患者病理完全缓解及预后的价值。
综上，颈动脉超声检查、CT、miR-124、miR-155对颈动脉狭窄的诊断价值较高，且可用于预测颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险，预测价值较为理想。
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