摘要： 【目的】本研究旨在克隆鉴定意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica铁蛋白基因AmFer3HCH，分析其在意大利蜜蜂应对温度胁迫时的组织表达变化，探讨铁蛋白AmFer3HCH在蜜蜂应对环境温度胁迫中的作用。【方法】PCR扩增意大利蜜蜂铁蛋白基因AmFer3HCH的cDNA序列，并对其编码氨基酸序列进行生物信息学鉴定；实时定量PCR分析该基因在不同温度(40℃和5℃)胁迫下的意大利蜜蜂工蜂成虫胸、中肠和脂肪体中的表达变化。【结果】PCR扩增获得意大利蜜蜂铁蛋白基因AmFer3HCH，cDNA片段大小为507 bp，其核苷酸序列与GenBank意大利蜜蜂基因组数据库中的铁蛋白基因Fer3HCH(GenBank登录号： GB55416)的完全一致，确认为AmFer3HCH基因序列。AmFer3HCH鉴定为重链型铁蛋白，在系统进化上聚类于重链型铁蛋白分支，其氨基酸序列具有重链型铁蛋白特有的Fe2+氧化酶活性中心，含有铁蛋白家族成员所共有的水合氧化铁成核中心和铁离子通道。实时定量PCR分析显示，与对照组相比在短时高温(40℃， 0~48 h)胁迫过程中，AmFer3HCH在意大利蜜蜂工蜂成虫胸、中肠和脂肪体中的表达水平整体呈先上升、后下降再上升的趋势；在低温(5℃， 0~6 h)胁迫处理过程中，中肠和脂肪体中AmFer3HCH基因的表达量呈先上升后下降趋势，而在胸中表达量逐渐下降。【结论】意大利蜜蜂铁蛋白AmFer3HCH为重链型铁蛋白，在意大利蜜蜂对极端温度胁迫的应答中扮演了重要的角色。
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意大利蜜蜂铁蛋白基因AmFer3HCH的克隆及其在温度胁迫下的应答
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
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