綦江皱皮木瓜果实有机酸特征性成分鉴定与不同发育期变化规律

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刘世尧^,, 冉慧, 毛运芝, 陈欣瑜西南大学园艺园林学院/南方山地园艺学教育部重点实验室,重庆 400715

Identification of the Fruit Characteristic Organic Acids of Chaenomeles speciosa from Qijiang, Chongqing by GC-MS and Their Dynamic Change Researching During Its Fruit Developing Period

LIU ShiYao^,, RAN Hui, MAO YunZhi, CHEN XinYuCollege of Horticulture and Landscape Architecture, South West University/Key Laboratory of Horticulture Science for Southwest Mountainous Regions, Ministry of Education, Chongqing 400715

通讯作者: 刘世尧,E-mail： cqliushiyao@126.com

收稿日期:2018-06-28接受日期:2018-10-18网络出版日期:2019-01-01

基金资助:

国家自然科学基金.31400272
中央高校基本业务费.XDJK2015C165

Received:2018-06-28Accepted:2018-10-18Online:2019-01-01

摘要
【目的】鉴定重庆綦江皱皮木瓜果实有机酸特征性成分,解析果实不同发育期有机酸变化规律,为皱皮木瓜果实发育期有机酸代谢研究提供基础数据。【方法】以重庆綦江皱皮木瓜(‘大罗’木瓜)为研究对象,采用溶剂提取、甲酯化衍生与气相色谱-质谱联用仪检测,进行不同发育期果实有机酸组成及含量测定,药典委2012版中药色谱指纹图谱相似度分析软件进行共有特征性成分峰匹配,SigmaPlot 10.0进行果实发育过程总有机酸、强酸味和弱酸味成分变化规律分析,Simca-P 11.5与SPSS 20.0结合进行果实发育期共有特征性成分PCA分析与HCA聚类。【结果】经甲醇提取、甲酯化衍生、氯仿萃取和GC-MS检测,从綦江皱皮木瓜8个发育期果实中共分离出共有特征性成分41种,包括低碳羧酸10种、长链脂肪酸21种、芳香族有机酸5种、一元酚酸类3种和氨基酸2种,TIC图基线平稳,成分峰分布均匀且分离度高,分离效果好。綦江木瓜从盛花后90 d至果实完熟（160 d）总有机酸含量呈先下降再上升再下降的倒“之”字型,总有机酸与强酸味（r=0.970）、弱酸味成分（r=0.998）极显著正相关;而强酸味成分与低碳羧酸极显著正相关（r=0.999）,与一元酚酸显著正相关（r=0.747）;弱酸味成分与长链脂肪酸极显著正相关（r=0.999）。綦江木瓜完熟期检出的强酸味有机酸以苹果酸、乙酰丙酸、柠檬酸为主,累计相对含量占检出总强酸味成分的90%以上;苹果酸在发育期经历了含量下降、略有上升然后再下降的变化过程,呈从盛花后90—120 d逐渐下降,到130 d略有上升,然后再下降的倒“之”字型;柠檬酸与苹果酸变化规律相似,但乙酰丙酸与苹果酸截然相反,总体呈现上升趋势,到盛花后130 d增至最高点,之后略有下降（150 d降至最低）,进入完熟期再次升高。相关性分析表明,果实强酸味有机酸总量与苹果酸、柠檬酸呈极显著正相关,但与乙酰丙酸、异柠檬酸和水杨酸弱负相关。弱酸味成分变化规律分析表明,在果实发育期,油酸、亚油酸、棕榈酸和10-羟基-十六烷酸等多数弱酸味成分均经历了迅速下降、缓慢上升再下降的变化过程,而十九烷酸却呈缓慢上升,然后下降再上升的相反过程;相关性分析表明,以油酸、亚油酸等多数弱酸味有机酸与总弱酸味有机酸极显著正相关,与十九烷酸和硬脂酸弱负相关。Simca-P主成分分析表明PC1和PC2分别解释了总变量40.00%和23.20%,样品主成分得分图显示,S1和S2聚为一类,α-酮戊二酸、苹果酸、奎尼酸、莽草酸、棕榈酸、亚油酸对样品此类有机酸组成起决定性作用;S3、S4、S5聚在一起,油酸、10-羟基-十六烷酸对这3个发育期样品起决定性作用;S6和S7聚在一起,丙二酸、乙酰丙酸、异柠檬酸、水杨酸是其主要贡献性成分;S8单独存在,琥珀酸、十九烷酸、二十四烷酸是其主要贡献性成分;该结果与基于SPSS平方欧氏距离的离差平方和聚类分析结果基本一致。【结论】綦江皱皮木瓜属苹果酸型水果,果实发育过程中有机酸的积累模式由盛花后90 d的苹果酸-柠檬酸积累型向完熟期（160 d）乙酰丙酸-苹果酸-柠檬酸积累型转变,酸积累模式的转变在重庆皱皮木瓜果实酸度与风味品质决定中具有重要作用。
关键词： 皱皮木瓜;有机酸;气相色谱-质谱联用仪;特征性成分;变化规律

Abstract

【Objective】 The study was carried out to identify characteristic organic acids and disclosing their dynamic changing law of Chaenomeles speciosa fruit from Qijiang, Chongqing during its fruit developing period, so as to provide the basic data for the C. speciosa fruit organic acids metabolic research. 【Method】 By methanol extracting, methyl derivating and GC-MS detecting, the organic acids composition and their content of 8 developing period C. speciosa cv. Daluo fruit samples of Qijiang was measured. The 2012 chromatographic similarity analysis software of Chinese Pharmacopoeia Commission was used to match their common constituent peaks. The dynamic law of the total organic acids, strong-sour and weak-sour organic acids were showed in SigmaPlots10.0 software and the PCA and HCA of all the samples was processed separately by Simca-P 11.5 and SPSS 20.0 softwares. 【Result】 The total 41 common characteristic constituents, including 10 short-chain carboxylic acids, 21 long-chain fatty acids, 5 aromatic-organic acids, 3 monobasic-phenol acids and 2 amino-acids, were successfully matched among 8 TICs of different period fruit samples C. speciosa cv. Daluo from Qijiang. The baseline of all the TICs were smooth and stable, the organic acid derivatives peaks' distribution were well-distributed, and the separating-degree of samples’ peaks was high. All target components were well separated. The total organic acids content of Qijiang C. speciosa cv. Daluo fruit from 90 ^th day after its full-bloom stage to 160 ^th days showed the changing on reversed ‘Z’ that including the sharply decreasing, slowly increasing and then decreasing again. The total organic acids content was significant positive correlated with the strong sour (r=0.970) and the weak sour taste organic acids (r=0.998). At the same time, the strong sour taste organic acids were significant positive correlated with short-chain carboxylic acids (r=0.999) and positive correlated with monobasic phenol acids (r=0.747). The weak sour taste organic acids were significant positive correlated with long chain fatty acids (r=0.999). The malic acid, laevulic acid and citric acid, whose relative content sum was more than 90%, were the key ingredients of strong sour organic acids. The malic acid content had experienced a reverse ‘Z’ trend that decreased firstly (90 ^thd-120 ^thd), increased slightly (120 ^thd-130 ^thd) and decreased finally (130 ^thd-160 ^thd). The citric acid had a similar process, but the levulic acid had an obviously reverse process of changing with malic acid. Actually the levulic acid showed the increasing progress gradually. The correlation analysis showed that the strong sour taste organic acids had significant positive correlation with malate and citrate, but weakly negative correlation with levulic acid, isocitric acid, and salicylic acid. The analyzing result showed that most of the weak sour organic acids including 9-octadecenoic acid, 9,12-octadecadienoic acid, hexadecanoic acid and 10-hydroxy-hexadecanoic acid experienced the similar accumulating progress which was rapidly decreasing firstly, then slowly increased and decreased in the final stage. However, nonadecanoic acid showed an opposite process that was gradually increasing. Correlation analysis showed that the total weak sour organic acids were positively related to most of them such as 9-Octadecenoic acid and 9, 12-Octadecadienoic acid but negative to nonadecanoic acid. The PCA result by Simca-p 11.5 disclosed that PC1 and PC2 separately distributed 40.00% and 23.20% of the total variance contribution rate. The main component score of each sample showed that: S1 and S2 clustered together which decided by α-Ketoglutaric acid, malic acid, quinic acid, shikimic acid, hexadecanoic acid and linoleic acid. The S3, S4 and S5 got into one branch that mainly because of oleinic acid and 10-hydroxy-Hexadecanoic acid. The S6 was closer to S7 largely because of malonic acid, levulic acid, isocitric acid, salicyluric acid. The S8 formed a unit alone that mostly decided by succinic acid, nonadecanoic acid, tetracosanoic acid. This result was very similar to the other one that clustered by Ward's method with Squared Euclidean Distance in SPSS. 【Conclusion】 C. speciosa cv. Daluo in Qijiang,Chongqing is a typical malate-accumulating fruit. During its developing period of C. speciosa fruit, the accumulating pattern of organic acids changed from Malate-Citrate accumulating type on 90 ^th days to Levulinic acid-Malic acid - Citric acid accumulating type on 160 ^th days after its flower-blooming. The change of acid accumulation pattern played a key role in the determination of acidity and flavor quality of C. speciosa fruit in Chongqing.

Keywords：Chaenomeles speciosa cv. Daluo;organic acids;GC-MS;fruit developing period;changing law

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刘世尧, 冉慧, 毛运芝, 陈欣瑜. 綦江皱皮木瓜果实有机酸特征性成分鉴定与不同发育期变化规律[J]. 中国农业科学, 2019, 52(1): 111-128 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.01.011
LIU ShiYao, RAN Hui, MAO YunZhi, CHEN XinYu. Identification of the Fruit Characteristic Organic Acids of Chaenomeles speciosa from Qijiang, Chongqing by GC-MS and Their Dynamic Change Researching During Its Fruit Developing Period[J]. Scientia Acricultura Sinica, 2019, 52(1): 111-128 doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2019.01.011

0 引言

【研究意义】皱皮木瓜营养丰富、药效显著,是一种药食兼用型果树资源^[1]。中国是皱皮木瓜的起源地和栽培中心,种质资源极为丰富,是全球优质皱皮木瓜主产地^[2]。我国皱皮木瓜人工栽培面积超过6.67万公顷,鲜果年产量达3×10⁶ t,并在逐年增加^[3]。重庆綦江是中国皱皮木瓜主产区之一,拥有0.67万公顷标准化栽培基地,年产鲜果2×10⁵ t,产品深受市场欢迎。在中国传统医学中皱皮木瓜以药用为主,但其鲜果营养丰富,富含超氧化物歧化酶（SOD）、萜类、黄酮等多种活性成分,是一种开发潜力巨大的保健型水果。但皱皮木瓜鲜食酸味浓重、口感较差,因此高酸是发展皱皮木瓜鲜食产品的主要障碍^[4]。有机酸是构成水果风味的重要因子,在果实食用风味中具有决定性作用,多年来一直是果实品质研究领域的重要主题^[5,6,7,8]。因此,揭示皱皮木瓜果实有机酸积累规律对探索皱皮木瓜果实高酸积累机制与果实品质改良,具有重要的实践价值。【前人研究进展】皱皮木瓜（Chaenomeles speciosa （Sweet）Nakai.）是蔷薇科（Rosaceae）木瓜属（Chaenomeles Lindl.）多年生落叶小乔木,特色果树资源,全国各地广范分布^[9]。刘世尧等^[10]采用滴定法测得皱皮木瓜鲜果总酸含量高达6.1%,果汁pH为2.6,果汁可滴定酸含量超过3.57 g/100 mL,仅次于尤力克柠檬（约为4.5 g/100 mL）,是苹果亚科典型高酸水果。前人研究结果表明,皱皮木瓜中含有六类有机酸,包括低碳羧酸、长链脂肪酸、芳香族有机酸、五环三萜有机酸、酚酸及氨基酸^[11],其中低碳羧酸和酚酸对果实酸度起决定作用,长链脂肪酸与氨基酸是果实结构组成与能源贮藏物质,五环三萜有机酸是果实活性成分,芳香族有机酸则是成熟果实香气构成物质^[12,13]。近年,通过HPLC法、UPLC法、GCMS法从皱皮木瓜果实中分离鉴定出的有机酸约60余种,主要是苹果酸、柠檬酸、异柠檬酸、a-酮戊二酸、富马酸、奎尼酸、草酸、乌头酸、丙二酸等低碳羧酸^[14],高诚伟等^[12]采用甲基化衍生与GCMS检测从云南西双版纳皱皮木瓜中鉴定出有机酸29种,主要有柠苹酸、苯甲酸、羟基丁二酸、棕榈酸和苹果酸以及C9-C18脂肪酸和芳香酸,其中二元酸占41.47%,芳香酸占25.20%;龚复俊等^[13]利用相同方法从湖北长阳皱皮木瓜中分离鉴定有机酸27种,主要有苹果酸、柠檬酸、苯甲酸、琥珀酸、a-酮基戊二酸、苯基乳酸、乌头酸、4-氧-庚二酸、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸等,并明确指出皱皮木瓜为苹果酸型水果。果实有机酸代谢是一个复杂的生理过程,揭示果实发育过程有机酸代谢规律可为果实品质改良及果树遗传育种提供理论支撑^[15]。果实发育期有机酸代谢在柑橘^[16]、梨^[17]、杏^[18]、李^[19]等大宗果树上早已展开,皱皮木瓜作为蔷薇科苹果亚科典型高酸水果,揭示其果实高酸积累规律可为皱皮木瓜果实品质改良奠定依据,也可为丰富苹果亚科果树有机酸代谢路径研究提供参考。【本研究切入点】皱皮木瓜果实有机酸组成复杂且含量较高,受遗传背景、产地环境和发育期等多重因素影响,但当前皱皮木瓜果实有机酸研究尚处在组分鉴定的初级阶段,我国各主产区与主要地方品种皱皮木瓜果实发育期有机酸代谢规律研究尚未开展。【拟解决的关键问题】以我国主产区重庆綦江皱皮木瓜为对象,采用溶济提取、甲酯化衍生与GCMS检测,开展綦江‘大罗’木瓜发育期果实有机酸组成及含量变化规律研究,明确綦江皱皮木瓜果实酸性风味特征性构成因子与发育期有机酸代谢规律,旨在为我国皱皮木瓜果实品质改良提供基础数据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

样果于2017年6月16日至8月26日采自重庆綦江三角镇桐垭村皱皮木瓜标准化栽培基地。按代表性原则,在同一果园内选择生长势中等、生态条件和树型基本一致的5龄以上健康成年植株各5株作为样株,每次每株选典型大小健康外膛果各1枚,合并样果作为1个生物学重复,共重复3次。样果取回、编号并称重后,沿纵轴“X”型切开,留取果实向阳与背阳面部分,除去果核后把果肉和果皮部分切成0.5 cm³小块,混合均匀,称重后立即放入90℃热激处理2 min去酶活,再放入-80℃超低温冰箱保存。整个发育期取样结束后,将全部样品转入45℃恒温鼓风干燥箱烘至恒重,计算烘干率后用小型粉碎机粉碎,过80目筛的果粉干燥器保存备用。材料经西南大学李先源副教授鉴定为皱皮木瓜（Chaenomeles speciosa（Sweet）Nakai.）,品种为綦江‘大罗’木瓜（C. speciosa cv. Daluo）。

1.2 试剂与仪器

浓硫酸、甲醇、氯仿、石油醚、无水硫酸钠为分析纯;试验用水为超纯水。994L型双门超低温冰箱（美国Thermo公司）,Delta320型pH酸度计（瑞士Mettler-Toledo公司）,N-1100S-WD型旋转蒸发仪（EYELA东京理化）,DHG-9240A电热恒温鼓风干燥箱（上海齐欣科学仪器有限公司）,FE-10高速药材粉碎机（浙江温岭市百乐粉碎设备厂）,TA2003A型台式离心机（上海哈菲尔分析仪器有限公司）,SHB-III型数显恒温水浴锅（郑州长城科工贸有限公司）,Molgene 210a型超纯水机（上海摩尔科学仪器有限公司）,万分之一电子天平（瑞士Mettler-Toledo公司）,SE-812型氮吹仪（北京帅恩科技有限责任公司）,Shimadzu 2010 QP Ultra 气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）、配AOC 2000型三位一体自动进样器,GCMS Real Time Analysis工作站,GCMS Postrun Analysis解析软件,NIST2008、NIST2008（S）质谱库（日本岛津公司）。

1.3 试验方法

1.3.1 果实采样时期划分綦江皱皮木瓜每年3月初开花,花期从3月1日至3月31日持续开放30 d左右,盛花期为3月15日。果实从坐果到完熟的总发育期为160 d,包括幼果期（盛花期—盛花后45 d）,子房缓慢膨大,经历一次生理落果;膨大前期（盛花后45—90 d）,果实缓慢增长;膨大后期（盛花后90—130 d,果实迅速增大）;转色期（盛花后130—160 d）,果型和单果重缓慢增加;完熟期（盛花后160 d）等5个主要发育时期,果实完熟60 d以后落叶,然后进入休眠期。本文从皱皮木瓜果实膨大后期（盛花后90 d）开始采样,每隔10 d取样1次,经过转色期直到果实完全成熟（160 d）。其中,果实膨大后期取样5次（采样时间分别是盛花后90、100、110、120和130 d）,果实转色期取样3次（盛花后140、150和160 d）,共取样8次,分别记作S1、S2、S3、S4、S5、S6、S7、S8。

1.3.2 果实有机酸甲酯化处理方法样品分析于2017年9月在南方山地园艺学教育部重点实验室完成,参考刘世尧、高诚伟等^[10,12]方法并稍作改动。精确称取各供试样品粉末0.5 g于25 mL具塞刻度大试管中,分别加入20 mL 硫酸—甲醇（7﹕100）,密闭0℃、400 W超声处理30 min,60℃恒温水浴甲酯化衍生处理24 h,冷却至室温,补足蒸发损失甲醇,密闭0℃、400 W超声处理30 min,3 000 r/min离心弃去沉淀。上清液转移到盛有20 mL超纯水的分液漏斗中,混匀,再加入20 mL氯仿,剧烈振荡后静置2 h,收集下相（氯仿层）即得皱皮木瓜果实有机酸甲酯化衍生物提取液,3 g无水硫酸钠干燥过夜后,0.22 μm有机滤膜过滤2 mL至进样瓶,1 μL进样。

1.3.3 果实有机酸GC—MS检测条件气相色谱条件：色谱柱岛津Rxt-5MS弱极性毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm,0.25 μm）,进样时间为2.5 min,34.1 cm·sec^-1恒定线速度,进样口温度280℃, 程序升温（起始温度70℃,保持1 min,以10℃·min^-1的速率升至290℃并保持10 min）,传输线温度 230℃,载气为氦气,载气流速50 mL·min^-1,柱流量0.87 mL·min^-1,吹扫流量3 mL·min^-1,色谱分离时间33 min。

质谱条件：电离方式：电子轰击电离（EI源）;电离能量：70 eV;离子源温度230℃;质量范围（m/z）：30—800 Da;检测器增益1.0×10⁵;采集方式Scan;溶剂延迟时间：2.5 min。样品有机酸衍生物GC—MS检测：供试液经0.25 μm有机滤膜过滤后,液体进样1 μL,不分流进样,质谱检测时间为32.5 min,得到样品有机酸衍生物TIC图。

1.4 数据处理方法

綦江皱皮木瓜每个发育期样品均重复3次,结果以平均值±标准差来表示。检测所得GCMS数据成分峰利用Shimadzu GC/MS Postrun Analysis软件在NIST2008、NIST2008S质谱库自动检索,结合人工文献检索定性。共有特征性成分峰匹配采用中国药典委2012版色谱指纹图谱相似度分析软件完成,利用SigmaPlot 10.0进行綦江皱皮木瓜不同发育期有机酸代谢规律分析,主成分分析与系统聚类分别在SIMCA-P 11.5和SPSS 20.0中完成。

2 结果

2.1 有机酸甲基化衍生物GC-MS分离鉴定

样品干粉经甲醇超声提取与甲酯化衍生、GC-MS检测,得总离子流色谱图见图1-A（盛花后90 d）,质谱溶剂剪切时间2.5 min,检测截止时间为35 min。所得TIC基线较稳定,有机酸衍生物谱峰分布均匀,成分峰基线分离度良好;主要成分峰保留时间RSD均在1%以下,表明仪器精密度良好。本文从綦江皱皮木瓜盛花后90—160 d发育期间的8个果实TIC图（图1-B）匹配得到共有有机酸成分峰41个,说明样品发育期果实有机酸组成稳定。41种共有有机酸分别隶属于低碳羧酸、长链脂肪酸、芳香族有机酸、一元酚酸类和氨基酸,其中低碳羧酸10种,包括草酸、丙二酸、乙酰丙酸、富马酸、a-酮戊二酸、苹果酸、琥珀酸、反式乌头酸、柠檬酸、异柠檬酸;长链脂肪酸21种,包括月桂酸、杜鹃花酸、肉豆蔻酸、十五烷酸、棕榈油酸、棕榈酸、亚油酸、油酸、硬脂酸、山嵛酸、顺-11-二十碳烯酸、花生酸、顺式-5,8,11-二十碳三烯酸、7,10,13-二十碳三烯酸、10,13-二十碳二烯酸、10-羟基-十六烷酸、7-羟基-十八烷酸、十九烷酸、二十四烷酸、9,10-二羟基-十八烷酸、二十一烷酸;芳香族有机酸5种,分别是苯甲酸、DL-扁桃酸、肉桂酸、糠酸、香草酸;匹配奎尼酸、水杨酸、莽草酸等一元酚酸3种,氨基酸2种（L-天冬氨酸、L-苯丙氨酸）。由此可见,经甲醇提取、甲酯衍生化和GCMS检测,皱皮木瓜发育期8个样品检出有机酸种类,以长链脂肪酸和低碳羧酸为主,检出一元酚酸、芳香族羧酸与氨基酸较少。在所有检出成分中（表1）,低碳羧酸与一元酚酸是皱皮木瓜果实的主要酸味贡献性成分,长链脂肪酸和氨基酸是果实细胞结构构成物质和能量贮存载体,而芳香族有机酸是果实香味的决定性成分。根据各成分酸度系数差异,检出有机酸又可分为强酸味成分（低碳羧酸和一元酚酸）和弱酸味成分（长链脂肪酸、芳香族有机酸和氨基酸）两大类。可见,GCMS法检出指标数量多,精确度高,对綦江皱皮木瓜发育期果实主要和微量酸性成分均有较好的检出效果。

图1

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图1綦江皱皮木瓜果实有机酸甲基化衍生处理GC-MS总离子流图

A：盛花后90 d样品TIC积分图;B：8个发育期样品TIC对照图
Fig. 1The GC-MS total ion current chromatograms of organic acids methylized derivatives of Chaenomeles speciosa cv. Daluo fruit in Qijiang, Chongqing

A: TIC peak integral of the fruits sampled on the 90^th d day after flower-blooming; B: The TIC matching figure of 8 C.speciosa cv. Daluo fruit samples

Table 1
表1
表1重庆綦江皱皮木瓜发育期果实共有有机酸检出信息解析表
Table 1MS analyzing result of organic acids methylized derivatives of 8 C. speciosa fruit samples from Qijiang, Chongqing

成分名称 Component name		分子式 Formula	分子量 Molecular weight	平均保留时间 Mean reservation time (min)	相对标准差RSD (%)	平均相对含量 Mean relative content (%)	相对标准差 RSD (%)	酸度系数 pKa1
一	总低碳羧酸 Short-chain carboxylic acid					33.125	6.55
1	草酸 Oxalic acid	C₂H₂O₄	90.04	2.906	0.07	0.723	0.25	1.23
2	丙二酸 Malonic acid	C₃H₄O₄	104.06	4.048	0.09	0.214	0.11	2.86
3	乙酰丙酸 4-oxo-pentanoic acid	C₅H₈O₃	106.12	4.920	0.12	6.558	5.55	4.05
4	富马酸 Fumaric acid	C₄H₄O₄	116.07	5.444	0.01	0.232	0.10	3.02
5	α-酮戊二酸 2-oxo-Pentanedioic acid	C₅H₆O₅	146.1	5.582	0.07	0.188	0.09	2.47
6	苹果酸 Malic acid	C₄H₆O₅	134.09	7.064	0.21	21.473	5.56	3.46
7	琥珀酸 Succinic acid	C₄H₆O₄	118.09	7.367	0.24	0.859	0.36	4.21
8	反式乌头酸 1-Propene-1,2,3-tricarboxylic acid	C₆H₆O₆	174.11	11.618	0.30	0.067	0.04	1.95
9	柠檬酸 Citric acid	C₆H₈O₇	192.12	12.050	0.04	2.776	0.78	3.13
10	异柠檬酸 1-hydroxy-1,2,3-Propanetricarboxylic acid	C₆H₈O₇	192.14	12.614	0.08	0.036	0.02	3.13
二	总长链脂肪酸long-chain fatty acid					61.727	6.91
11	月桂酸 Dodecanoic acid（12C:0）	C₁₂H₂₄O₂	200.32	12.788	0.61	0.246	0.16	5.11
12	杜鹃花酸 Azelaic acid （9C:0）	C₉H₁₆O₄	188.22	13.089	0.82	0.153	0.06	5.07
成分名称 Component name		分子式 Formula	分子量 Molecular weight	平均保留时间 Mean reservation time (min)	相对标准差RSD (%)	平均相对含量 Mean relative content (%)	相对标准差 RSD (%)	酸度系数 pKa1
13	肉豆蔻酸 Tetradecanoic acid（14C:0）	C₁₄H₂₈O₂	228.83	15.267	0.30	0.215	0.09	5.14
14	十五烷酸 Pentadecanoic acid（15C:0）	C₁₅H₃₀O₂	242.4	16.416	0.65	0.105	0.06	5.15
15	棕榈油酸 9-Hexadecenoic acid（16C:1）	C₁₆H₃₀O₂	254.41	17.315	0.75	0.447	0.45	5.17
16	棕榈酸 Hexadecanoic acid（16C:0）	C₁₆H₃₂O₂	256.42	17.512	0.80	6.785	0.94	5.18
17	亚油酸 9,12-Octadecadienoic acid（18C:2）	C₁₈H₃₂O₂	280.45	19.287	0.55	12.079	1.98	5.20
18	油酸 9-Octadecenoic acid（18C:1）	C₁₈H₃₄O₂	282.46	19.334	0.32	25.136	7.60	5.16
19	硬脂酸 Stearic acid（18C:0）	C₁₈H₃₆O₂	284.48	19.553	0.81	0.042	0.05	5.17
20	山嵛酸 Docosanedioic acid（22C:0）	C₂₂H₄₄O₂	340.58	20.383	0.31	0.224	0.07	5.25
21	顺-11-二十碳烯酸 cis-11-Eicosenoic acid（20C:1）	C₂₀H₃₀O₂	302.45	21.219	0.24	0.532	0.24	5.21
22	花生酸 Eicosanoic acid（20C:0）	C₂₀H₄₀O₂	312.53	21.419	0.18	0.872	0.28	5.22
23	顺式-5,8,11-二十碳三烯酸（20C:3） cis-5,8,11-Eicosatrienoic acid	C₂₀H₃₄O₂	306.43	21.893	0.15	0.143	0.15	5.20
24	7,10,13-二十碳三烯酸（20C:3） 7,10,13-Eicosatrienoic acid	C₂₀H₃₄O₂	306.43	21.931	0.15	0.235	0.11	5.20
25	10,13-二十碳二烯酸（20C:2） 10,13-Eicosadienoic acid	C₂₀H₃₆O₂	308.43	22.016	0.23	1.269	0.53	5.21
26	羟基-十六烷酸（16C:0） 10-hydroxy-Hexadecanoic acid	C₁₆H₃₂O₃	262.42	22.235	0.18	5.420	2.76	5.17
27	7-羟基-十八烷酸（18C:0） 7-hydroxy-Octadecanoic acid	C₁₈H₃₄O₃	298.46	22.543	0.16	1.102	0.25	5.19
28	十九烷酸 Nonadecanoic acid（19C:0）	C₁₉H₃₈O₂	298.5	23.141	0.11	1.666	1.45	5.22
29	二十四烷酸 Tetracosanoic acid（24C:0）	C₂₄H₄₈O₂	368.64	24.998	0.20	2.411	1.02	5.27
30	9,10-二羟基-十八烷酸（18C:0） 9,10-dihydroxy-Octadecanoic acid	C₁₈H₃₄O₄	314.46	25.791	0.21	2.646	1.42	5.19
31	二十一烷酸 Heneicosanoic acid （21C:0）	C₂₁H₄₂O₂	326.56	26.110	0.30	1.663	0.41	5.23
三	芳香族有机酸Aromatic dicarboxylic acid					2.846	1.64
32	糠酸 2-Furancarboxylic acid	C₅H₄O₃	112.08	4.789	0.27	0.127	0.04	3.16
33	苯甲酸/安息香酸 Benzoic acid	C₇H₆O₂	122.12	6.656	0.12	2.079	1.31	4.21
34	DL-扁桃酸 alpha.-hydroxy-benzeneacetic acid	C₈H₈O₃	152.15	9.645	0.32	0.122	0.03	3.37
35	肉桂酸 Cinnamic acid	C₉H₈O₂	148.16	11.011	0.12	0.478	0.41	4.44
36	香草酸 vanillic acid	C₈H₈O₄	168.15	12.827	0.27	0.040	0.01	4.45
四	总一元酚酸Monobasic phenol acid					0.639	0.24
37	水杨酸 p-Hydroxybenzoic acid	C₇H₆O₃	138.12	11.874	0.32	0.228	0.17	2.98
38	奎尼酸 Quinic acid	C₇H₁₂O₆	192.17	14.010	0.68	0.333	0.17	3.70
39	莽草酸 Shikimic acid	C₇H₁₀O₅	174.15	14.808	0.79	0.079	0.05	3.87
五	总氨基酸Amino acid					0.153	0.06
40	L-天冬氨酸 L-Aspartic acid	C₄H₇NO₄	133.1	7.628	0.96	0.118	0.06	2.77
41	L-苯丙氨酸 L-Phenylalanine	C₁₀H₁₃NO₂	179.22	11.504	0.71	0.036	0.03	5.48
六	总有机酸Total organic acid					100.000

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2.2 发育期果实有机酸积累动态

从重庆綦江皱皮木瓜果实在盛花后90 d（果实膨大后期）到盛花后160 d（果实完全成熟）,以各样品有机酸共有峰面积累加值为指标,在相同供试液提取、甲酯化衍生、仪器检测与总离子流图积分条件下,各共有成分峰面积和变化趋势与各样品总有机酸含量变化规律相一致。由图2-A可知,綦江皱皮木瓜在盛花后90 d,果实有机酸含量很高,但从盛花后90 d至100 d,其果实总有机酸含量突然下降,到盛花后100 d降至最低点;从盛花后100 d开始,果实总有机酸含量又缓慢上升,至盛花后130 d升至最高点,该时间段为果实膨大期的后半程;而到盛花后130 d即进入果实转色期,总有机酸含量再次下降,到盛花后160 d（果实完熟）,含量降至最低点。由图2-B可知,在本文所选綦江皱皮木瓜果实发育期,低碳羧酸和长链脂肪酸类成分相对含量较高,占检出有机酸的主体,芳香族有机酸、一元酚酸和氨基酸类成分的占比较少。由图2-C和2-D可知,果实发育期包括低碳羧酸和一元酚酸在内的果实强酸味贡献性成分与包括长链脂肪酸、芳香族有机酸和氨基酸在内的弱酸味贡献性成分,均与总有机酸变化趋势相一致。Pearson相关系数计算结果表明,綦江皱皮木瓜发育期果实总有机酸含量变化趋势与强酸味有机酸含量、弱酸味类成分含量均呈极显著正相关,相关系数分别为0.970和0.998;同时强酸味贡献性成分与低碳羧酸（r=0.999）极显著正相关,与一元酚酸（r=0.747）显著正相关;弱酸味贡献性成分与长链脂肪酸（r=0.999）极显著正相关（表2）。

图2

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图2皱皮木瓜发育期有机酸组成、总有机酸、强酸味和弱酸味有机酸变化规律

A：发育期总有机酸含量变化;B：发育期五类检出有机酸平均百分比堆积柱形图;C：发育期强酸味成分含量;D：发育期弱酸性成分含量变化
Fig. 2Organic acids composition, total organic acids, strong and weak-sour organic acid changing law during its fruits developing period

A: Total organic acids content changing figure during its developing period; B: Percentage stacked column diagram of 5 type organic acids during its developing period; C: Strong-sour ingredients content changing figure during its developing period; D: Weak-sour ingredients content changing figure during its developing period

Table 2
表2
表2发育期皱皮木瓜果实各类有机酸皮尔逊相关性分析（n=8）
Table 2Pearson’s correlation coefficient between each organic acid types during the fruit developing period of C. speciosa (n=8)

	低碳羧酸 Short-chain carboxylic acids	长链脂肪酸 Long-chain fatty acids	芳香族有机酸 Aromatic organic acids	一元酚酸 Monobasic phenol acids	氨基酸 Amino acids	强酸味贡献成分Strong-sour taste contributing components	弱酸味贡献成分Weak-sour taste contributing components	总有机酸 Total organic acids
低碳羧酸 Short-chain carboxylic acids	1.000**	0.947**	0.314	0.732*	0.692	0.999**	0.943**	0.963**
长链脂肪酸 Long-chain fatty acids	0.947**	1.000**	0.395	0.860**	0.690	0.955**	0.999**	0.998**
芳香族有机酸 Aromatic organic acids	0.314	0.395	1.000**	0.441	-0.068	0.325	0.440	0.419
一元酚酸 Monobasic phenol acids	0.732*	0.860**	0.441	1.000**	0.747*	0.755*	0.865**	0.848**
氨基酸 Amino acids	0.692	0.690	-0.068	0.747*	1.000**	0.709*	0.672	0.683
强酸味贡献成分 Strong-sour taste contributing components	0.999**	0.955**	0.325	0.755*	0.703	1.000**	0.951**	0.970**
弱酸味贡献成分 Weak-sour taste contributing components	0.943**	0.999**	0.440	0.865**	0.672	0.951**	1.000**	0.998**
总有机酸 Total organic acids	0.963**	0.998**	0.419	0.848**	0.683	0.970**	0.998**	1.000**

* indicates correlation is significant at P ≤ 0.05 level of two-tailed test. ** indicates correlation is strongly significant at P≤0.01 level of two-tailed test. The Pearson correlation coefficient critical value of two-tailed test is 0.707 when α=5% and 0.834 when α=1% (df=6). The same as below
*表示在P≤0.05水平（双尾检验）上显著相关;**表示在P≤0.01水平（双尾检验）上极显著相关;df=6时,α=5%时皮尔逊相关系数临界值为0.707,α=1%时皮尔逊相关系数临界值为0.834。下同

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2.3 果实发育期强酸味成分变化

在綦江皱皮木瓜发育期果实检出有机酸中,低碳羧酸与一元酚酸酸度系数低而酸性强,是皱皮木瓜果实酸性风味主要贡献成分,含量高低对果实酸味强弱具有决定作用^[20],在一定程度上果实发育期各样品强酸味成分峰面积和的差异可反映果实酸度变化规律。本研究结果表明,在綦江皱皮木瓜发育期果实高酸味贡献性成分中,苹果酸占有绝对优势,8个时期样品的平均相对含量达到21.47%,其次是乙酰丙酸（6.56%）、柠檬酸（2.78%）、琥珀酸（0.86%）、草酸（0.72%）、奎尼酸（0.33%）、富马酸（0.23%）、水杨酸（0.23%）、丙二酸（0.21%）、α-酮戊二酸（0.19%）、莽草酸（0.08%）、反式乌头酸（0.07%）、异柠檬酸（0.04%）。綦江皱皮木瓜果实发育过程中,单位鲜果重苹果酸含量从盛花后90 d到果实完熟（160 d）总体呈逐渐下隆趋势,其中在盛花后130 d有一个略升高的峰值出现,与果实总有机酸含量变化趋势基本一致。乙酰丙酸变化规律与苹果酸截然相反,总体呈现上升趋势,到盛花后130 d增至最高点,之后略有下降,到盛花后150 d降至最低,而进入果实完熟期再次升高。柠檬酸也是皱皮木瓜鲜果的重要酸味贡献成分,其相对含量较苹果酸少很多,但其含量变化趋势却与苹果酸相似,二者都是总体递减同时在盛花后130 d有一个升高再下降的转折过程。琥珀酸则表现为下降（盛花后90—120 d）,上升（盛花后120 d—130 d）,然后下降（盛花后130—140 d）再上升（盛花后140—160 d）的“W”字型变化过程。草酸表现为上升（盛花后90—110 d）、下降（盛花后110—150 d）,再上升（盛花后150—160 d）的倒“之”字型变化过程。而一元羧酸类奎尼酸则表现为快速下降（盛花后90—110 d）,略有上升（盛花后110—130 d）,然后再下降（盛花后130—160 d）的“W”字型变化过程,总体变化趋势则与苹果酸和柠檬酸相一致（图3）。其他检出有机酸代谢前体和中间成分变化规律各不相同。皮尔逊相关性分析结果表明,在皱皮木瓜盛花后90 d到果实成熟过程中各有机酸之间及其与总强酸味成分总含量都存在不同程度的相关性,綦江皱皮木瓜发育期果实强酸味有机酸总量与苹果酸（r=0.960）极显著正相关,与奎尼酸（r=0.8）、莽草酸（r=0.733）、柠檬酸（r=0.813）、α-酮戊二酸（r=0.757）显著正相关,但与乙酰丙酸（r=-0.381）、异柠檬酸（r=-0.292）和水杨酸（r=-0.136）弱负相关（表3）。

图3

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图3綦江皱皮木瓜不同发育期强酸味有机酸成分峰面积变化规律

A：三羧酸循环相关有机酸;B：生长调节剂类有机酸;C：酚酸类有机酸
Fig. 3The component peak area changing laws of the strong-sour organic acid C. speciosa from Qijiang during its fruit developing period

A: The organic acids related to the TCA cycle; B: Growth regulator organic acids; C: Phenolic organic acids

Table 3
表3
表3果实发育期强酸味成分皮尔逊相关系数分析表（n=8）
Table 3The Pearson’s correlation analysis table of strong-sour organic acids during the fruit developing period of C. speciosa (n=8)

	草酸	丙二酸	乙酰丙酸	富马酸	a-酮戊二酸	苹果酸	琥珀酸	反式乌头酸	柠檬酸	异柠檬酸	水杨酸	奎尼酸	莽草酸	强酸味成分
	Oxalic	Malonic acid	Pentanoic acid	Fumaric acid	2-oxo-	Malic acid	Succinic acid	Trans-aconitic acid	Citric acid	Isocitric acid	p-Hydroxybenzoic acid	Quinic acid	Shikimic acid	Strong-sour components
	acid				pentanedioic acid
草酸	1.000**	0.013	-0.22	0.683	0.647	0.537	0.354	0.245	0.185	-0.008	-0.317	0.257	0.192	0.516
Oxalic acid	1.000**	0.013	-0.22	0.683	0.647	0.537	0.354	0.245	0.185	-0.008	-0.317	0.257	0.192	0.516
丙二酸	0.013	1.000**	-0.385	-0.001	0.446	0.62	0.2	0.799*	0.935**	-0.539	-0.017	0.938**	0.94**	0.686
Malonic acid	0.013	1.000**	-0.385	-0.001	0.446	0.62	0.2	0.799*	0.935**	-0.539	-0.017	0.938**	0.94**	0.686
乙酰丙酸	-0.22	-0.385	1.000**	-0.619	-0.47	-0.606	0.148	-0.048	-0.617	0.838*	0.757*	-0.52	-0.63	-0.381
Pentanoic acid	-0.22	-0.385	1.000**	-0.619	-0.47	-0.606	0.148	-0.048	-0.617	0.838*	0.757*	-0.52	-0.63	-0.381
富马酸/延胡索酸	0.683	-0.001	-0.619	1.000**	0.684	0.662	0.372	-0.068	0.268	-0.368	-0.727*	0.179	0.228	0.504
Fumaric acid	0.683	-0.001	-0.619	1.000**	0.684	0.662	0.372	-0.068	0.268	-0.368	-0.727*	0.179	0.228	0.504
α-酮戊二酸	0.647	0.446	-0.47	0.684	1.000**	0.796*	0.213	0.434	0.575	-0.538	-0.598	0.573	0.596	0.757*
2-oxo-pentanedioic acid	0.647	0.446	-0.47	0.684	1.000**	0.796*	0.213	0.434	0.575	-0.538	-0.598	0.573	0.596	0.757*
苹果酸	0.537	0.62	-0.606	0.662	0.796*	1.000**	0.451	0.629	0.818*	-0.462*	-0.363	0.772*	0.744*	0.960**
Malic acid	0.537	0.62	-0.606	0.662	0.796*	1.000**	0.451	0.629	0.818*	-0.462*	-0.363	0.772*	0.744*	0.960**
琥珀酸	0.354	0.2	0.148	0.372	0.213	0.451	1.000**	0.452	0.208	0.249	0.152	0.155	0.072	0.554
Succinic acid	0.354	0.2	0.148	0.372	0.213	0.451	1.000**	0.452	0.208	0.249	0.152	0.155	0.072	0.554
反式乌头酸	0.245	0.799*	-0.048	-0.068	0.434	0.629	0.452	1.000**	0.731*	-0.176	0.226	0.787*	0.688	0.773*
Trans-aconitic acid	0.245	0.799*	-0.048	-0.068	0.434	0.629	0.452	1.000**	0.731*	-0.176	0.226	0.787*	0.688	0.773*
柠檬酸	0.185	0.935**	-0.617	0.268	0.575	0.818*	0.208	0.731*	1.000**	-0.611	-0.19	0.978**	0.98**	0.813*
Citric acid	0.185	0.935**	-0.617	0.268	0.575	0.818*	0.208	0.731*	1.000**	-0.611	-0.19	0.978**	0.98**	0.813*
异柠檬酸	-0.008	-0.539	0.838*	-0.368	-0.538	-0.462	0.249	-0.176	-0.611	1.000**	0.785*	-0.53	-0.681	-0.292
Isocitric acid	-0.008	-0.539	0.838*	-0.368	-0.538	-0.462	0.249	-0.176	-0.611	1.000**	0.785*	-0.53	-0.681	-0.292
水杨酸	-0.317	-0.017	0.757*	-0.727*	-0.598	-0.363	0.152	0.226	-0.19	0.785*	1.000**	-0.094	-0.25	-0.136
p-Hydroxybenzoic acid	-0.317	-0.017	0.757*	-0.727*	-0.598	-0.363	0.152	0.226	-0.19	0.785*	1.000**	-0.094	-0.25	-0.136
奎尼酸	0.257	0.938**	-0.52	0.179	0.573	0.772*	0.155	0.787*	0.978**	-0.53	-0.094	1.000**	0.978**	0.800*
Quinic acid	0.257	0.938**	-0.52	0.179	0.573	0.772*	0.155	0.787*	0.978**	-0.53	-0.094	1.000**	0.978**	0.800*
莽草酸	0.192	0.94**	-0.63	0.228	0.596	0.744*	0.072	0.688	0.98**	-0.681	-0.25	0.978**	1.000**	0.733*
Shikimic acid	0.192	0.94**	-0.63	0.228	0.596	0.744*	0.072	0.688	0.98**	-0.681	-0.25	0.978**	1.000**	0.733*
强酸性成分	0.516	0.686	-0.381	0.504	0.757*	0.96**	0.554	0.773*	0.813*	-0.292	-0.136	0.8	0.733*	1.000**
Stroung sour components	0.516	0.686	-0.381	0.504	0.757*	0.96**	0.554	0.773*	0.813*	-0.292	-0.136	0.8	0.733*	1.000**

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2.4 果实发育期弱酸味成分变化规律

长链脂肪酸、芳香族有机酸和氨基酸类成分酸度系数相对较高,不是果实酸味的主要贡献物质,但却是皱皮木瓜果肉细胞的结构性成分、能量贮存物质和香气风味基础,属弱酸味有机酸。本文从重庆綦江皱皮木瓜全发育期的样品中分离出长链脂肪酸、芳香族有机酸和氨基酸种类分别为21种、5种和2种,占平均检出总有机酸成分峰总面积的68.45%。其中以油酸、亚油酸、棕榈酸和10-羟基-十六烷酸最高,分别占检出有机酸总量的25.136%、12.079%、6.785%和5.420%,相对含量居中的有9,10-二羟基-十八烷酸（2.646%）、二十四烷酸（2.411%）、苯甲酸（2.079%）、十九烷酸（1.666%）、二十一烷酸（1.663%）、10,13-二十碳二烯酸（1.269%）、7-羟基-十八烷酸（1.102%）、花生酸（0.872%）、顺-11-二十碳烯酸（0.532%）、肉桂酸（0.478%）、棕榈油酸（0.447%）。月桂酸、山嵛酸、杜鹃花酸等其他13种检出有机酸相对含量均小于0.3%,属微量成分。在綦江皱皮木瓜发育过程中,果实油酸、亚油酸、棕榈酸和10-羟基-十六烷酸均呈整体下降趋势,盛花后90 d果实油酸含量最高,但到盛花后100 d下降至原来的1/2,后又逐渐升高,至盛花后130 d再次下降,盛花后160 d果实完熟期降至最高含量的14%左右。亚油酸、棕榈酸和10-羟基-十六烷酸相对含量虽有差异,但总体变化趋势相同,即盛花后90 d最高,至盛花后100 d迅速降低,然后逐渐升高,到盛花后120 d可升至90 d含量水平的1/2—2/3,然后再次下降,完熟期（160 d ）降至最低点,约为最高含量水平的1/5（图4）。除硬脂酸外的其他12个微量弱酸性有机酸在果实发育期均具有与上述成分相似的变化规律。这可能与果实完熟期弱酸味成分向酯类等香气成分转化有关。

图4

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图4皱皮木瓜发育期果实弱酸味有机酸成分峰变化趋势图

OA：油酸;9,12-OA：亚油酸;HCA：棕榈;10-HHA：10-羟基-十六烷酸;9,10-DOA：9,10-二羟基-十八烷酸;TA：二十四烷酸;BA：苯甲酸/安息香酸;NA：十九烷酸;HAS：二十一烷酸
Fig. 4The weak-sour organic acid component peak area changing law of C. speciosa fruit of Qijiang during developing period

OA: 9-Octadecenoic acid; 9,12-OA: 9,12-Octadecadienoic acid; HCA:Hexadecanoic acid; 10-HHA: 10-hydroxy-Hexadecanoic acid; 9,10-DOA: 9,10- dihydroxy-Octadecanoic acid; TA: Tetracosanoic acid; BA: Benzoic acid; NA: Nonadecanoic acid; HSA: Heneicosanoic acid

皮尔逊相关性分析结果表明,弱酸性总有机酸含量分别与油酸（r=0.936）、亚油酸（r=0.987）、棕榈酸（r=0.959）、10-羟基-十六烷酸（r=0.902）、二十一烷酸（r=0.896）、7-羟基-十八烷酸（r=0.851）,及含量相对较低的花生酸（r=0.955）、顺-11-二十碳烯酸（r=0.934）、7-羟基-十八烷酸（0.851）、DL-扁桃酸（r=0.874）极显著正相关;与9,10-二羟基-十八烷酸（r=0.747）、10,13-二十碳二烯酸（r=0.725）,及含量相对较低的杜鹃花酸（r=0.807）、山嵛酸（r=0.819）、香草酸（r=0.781）显著正相关,与十九烷酸弱负相关（表4）。

Table 4
表4
表4果实发育期弱酸味成分皮尔逊相关系数分析表（n=8）
Table 4The Pearson’s correlation analysis table of weak-sour organic acids during the fruit developing period of C. speciosa (n=8)

	9-OA	9,12-OA	HCA	10-HHA	9,10-DOA	TA	BA	NA	HSA	10,13-EA	7-HOA	总弱酸味有机酸 Total weak-sour organic acids
9-OA	1.00**	0.887**	0.812*	0.751*	0.488	0.262	0.422	0.002	0.696	0.580	0.649	0.936**
9,12-OA	0.887**	1.00**	0.982**	0.889**	0.810*	0.583	0.338	-0.087	0.946**	0.801*	0.901**	0.987**
HCA	0.812*	0.982**	1.00**	0.923**	0.869**	0.700	0.302	-0.149	0.966**	0.783*	0.952**	0.959**
10-HHA	0.751*	0.889**	0.923**	1.00**	0.776*	0.546	0.517	-0.320	0.877**	0.611	0.855**	0.902**
9,10-DOA	0.488	0.810*	0.869**	0.776*	1.00**	0.726*	0.122	-0.114	0.913**	0.828*	0.955**	0.747*
TA	0.262	0.583	0.700	0.546	0.726*	1.00**	-0.225	-0.199	0.701	0.551	0.782*	0.490
BA	0.422	0.338	0.302	0.517	0.122	-0.225	1.00**	0.221	0.283	-0.141	0.088	0.432
NA	0.002	-0.087	-0.149	-0.320	-0.114	-0.199	0.221	1.00**	-0.141	-0.242	-0.241	-0.067
HSA	0.696	0.946**	0.966**	0.877**	0.913**	0.701	0.283	-0.141	1.00**	0.824*	0.941**	0.896**
10,13-EA	0.580	0.801*	0.783*	0.611	0.828*	0.551	-0.141	-0.242	0.824*	1.00**	0.856**	0.725*
7-HOA	0.649	0.901**	0.952**	0.855**	0.955**	0.782*	0.088	-0.241	0.941**	0.856**	1.00**	0.851**
总弱酸味有机酸 Total weak-sour organic acids	0.936**	0.987**	0.959**	0.902**	0.747*	0.490	0.432	-0.067	0.896**	0.725*	0.851**	1.00**

OA: 9-Octadecenoic acid; 9,12-OA: 9,12-Octadecadienoic acid; HCA: Hexadecanoic acid; 10-HHA: 10-hydroxy-Hexadecanoic acid; 9,10-DOA: 9,10- dihydroxy-Octadecanoic acid; TA: Tetracosanoic acid; BA: Benzoic acid; NA: Nonadecanoic acid; HSA: Heneicosanoic acid; 10,13-EA: 10,13-Eicosadienoic acid; 7-HOA: 7-hydroxy-Octadecanoic acid
OA：油酸;9,12-OA：亚油酸;HCA：棕榈酸;10-HHA：10-羟基-十六烷酸;9,10-DOA：9,10-二羟基-十八烷酸;TA：二十四烷酸;BA：苯甲酸;NA：十九烷酸;HSA：二十一烷酸;10,13-EA：10,13-二十碳二烯酸;7-HOA：7-羟基-十八烷酸

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2.5 发育期有机酸组成主成分分析和聚类分析

以全部强酸味有机酸与相对含量在1%以上的弱酸味成分数据为基础,利用Simca-p11.5进行PCA模型拟合,从图5可以看出,主成分PC1和主成分PC2分别解释了总变量40.00%和23.20%的总方差贡献率。根据样品数据的PCA模型,皱皮木瓜发育期果实有机酸组成明显聚成四类：即S1和S2聚为一类,α-酮戊二酸、苹果酸、奎尼酸、莽草酸、棕榈酸、亚油酸对此时期样品有机酸组成具有决定性作用;S3、S4、S5聚在一起,油酸、10-羟基-十六烷酸对这3个发育期样品具有决定性作用;S6和S7聚在一起,丙二酸、乙酰丙酸、异柠檬酸、水杨酸是其主要贡献性成分;S8单独存在,琥珀酸、十九烷酸、二十四烷酸是其主要贡献性成分,对本时期样品具有决定性作用。

图5

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图5綦江皱皮木瓜不同发育期果实有机酸特征性成分PCA分析

1：草酸;2：丙二酸;3：戊酸;4：富马酸;5：α-酮戊二酸;6：苹果酸;7：琥珀酸;8：反式乌头酸;9：柠檬酸;10：异柠檬酸;11：水杨酸;12：奎尼酸;13：莽草酸;14：棕榈酸;15：亚油酸;16：油酸;17：10,13-二十碳二烯酸;18：10-羟基-十六烷酸;19：7-羟基-十八烷酸;20：十九烷酸;21：二十四烷酸;22：9,10-二羟基-十八烷酸;23：二十一烷酸;24：苯甲酸。底部横座标与左侧纵座标表示两个主成分方差贡献率,顶部模座标与右侧纵座标表示自变量载荷值
Fig. 5PCA analysis based on the common organic acids components of C. speciosa fruit samples during its developing period

The numbers represent the compounds 1: Oxalic acid; 2: Malonic acid; 3: Pentanoic acid; 4: Fumaric acid; 5: α-ketoglutaric acid; 6: Malic acid; 7: Succinic acid; 8: 1-Propene-1,2,3-tricarboxylic acid; 9: Citric acid; 10: 1-hydroxy-1,2,3-Propanetricarboxylic acid; 11: p-Hydroxybenzoic acid; 12: Quinic acid; 13: Shikimic acid; 14: Hexadecanoic acid; 15: 9,12-Octadecadienoic acid; 16: 9-Octadecenoic acid; 17: 10,13-Eicosadienoic acid; 18: 10-hydroxy-Hexadecanoic acid; 19: 7-hydroxy-Octadecanoic acid; 20: Nonadecanoic acid; 21: Tetracosanoic acid; 22: 9,10-dihydroxy-Octadecanoic acid; 23: Heneicosanoic acid; 24: Benzoic acid. The coordinate axis values represents the correlation coefficients between the principal components and the original variables

以綦江木瓜发育期果实有机酸41种共有特征性成分相对含量数据为基础,利用SPSS20.0系统聚类分析,采用离差平方和法（Ward法）并按平方欧氏距离（Square Euclidean distance）构建聚类分析树（图6）。结果表明,綦江皱皮木瓜从盛花后90 d到160 d果实完全成熟,当聚类距离为5时,8个时期果实有机酸组成可聚为4枝：S1与S2聚为一枝,与S3、S4、S5、S6聚成的第二枝构成并列关系;在第二枝中S4与S5有机酸组成最为相似,二者与S6并列,再与S3构成并列关系;S7为第三枝,S8为第四枝。

图6

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图6綦江皱皮木瓜发育期果实有机酸组成聚类分析树状图

Fig. 6The fruit organic acids composition cluster analysis dendrogram during Qijiang C. speciosa during its developing period

3 讨论

3.1 綦江皱皮木瓜发育期果实有机酸类成分鉴定

高诚伟等^[12]利用95%乙醇提取、甲基化衍生结合GCMS检测,从云南西双版纳皱皮木瓜中分离出22种有机酸,以柠苹酸最高（20.74%）,其次是苯甲酸（16.51%）、2-羟基丁二酸（12.05%）、棕榈酸（7.55%）、4-甲氧基苯甲酸（5.82%）、丁二酸（5.94%）、苹果酸（1.66%）、壬二酸（1.08%）和硬脂酸（0.95%）。龚复俊等^[13]通过70%乙醇提取、阴离子柱层析纯化、甲基化衍生结合GCMS检测,从长阳皱皮木瓜中分离出苹果酸（64%）、柠檬酸（30%）、苯甲酸、琥珀酸、α-酮基戊二酸、苯基乳酸、乌头酸、4-氧-庚二酸、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸等。本研究利用甲醇提取、甲酯化衍生和GCMS检测,从綦江皱皮木瓜果实中分离出41种有机酸,检出数量远超已往报道。不分流进样保证了不同发育期果实有机酸含量的可比性,恒定线速度保证了后流出化合物峰形和保留时间的稳定。綦江皱皮木瓜主要成分是苹果酸、柠檬酸和乙酰丙酸等,柠苹酸未被检出,而首次检出相对含量较高的乙酰丙酸。乙酰丙酸又名4-氧化戊酸（4-Oxopentanoic acid）、左旋糖酸,或戊隔酮酸,是六糖酸性水解的主要产物,其分子中含有一个羰基、一个梭基和多个α氢,活性很高,而且其不同官能团上的氢原子具有不同的活性,既可作为羧酸又可作为酮参与反应^[21]。除以往报道的棕榈酸和油酸外,本研究还检出了大量的C9—C24长链高级脂肪酸类成分,如棕榈油酸、亚油酸、杜鹃花酸、月桂酸。首次通过溶剂提取、甲基化衍生的方法检出L-天冬氨酸与L-苯丙氨酸。

3.2 綦江皱皮木瓜果实发育期总有机酸变化

以往研究表明成熟果实有机酸的组成与含量不仅受遗传背景控制,也受产地环境和栽培管理方法影响,其积累和变化模式各不相同^[19]。多数果树有机酸通常是在果实生长早期积累,在成熟过程中逐步降低^[5]。稀释作用、呼吸代谢、合成量减少、输入果实有机酸减少,以及糖异生作用均能导致果实成熟期有机酸含量下降^[22]。桃、杏、李、葡萄、柑橘等果实发育过程中有机酸含量逐渐升高,生长停止转入成熟阶段有机酸含量下降^[23]。但完熟果实中有机酸含量的多寡最终取决于果实中有机酸的合成、转移、液泡贮藏和分解之间的平衡^[24],这种代谢平衡直接影响着果实酸度。本研究结果表明,重庆綦江皱皮木瓜果实膨大期后期（盛花后100 d）,果实总有机酸含量缓慢上升,至膨大后期结束时（盛花后130 d）升至最高点;而进入果实转色期,总有机酸含量再次呈下降趋势变化,到果实完熟时（盛花后160 d）,含量降至最低点,结果与以往其他多数果实发育过程总有机酸变化规律相一致。同时本研究结果与靳李娜^[25]和李娜^[26]报道的药用皱皮木瓜采收期基本一致,但与齐红^[27]研究结果有差异,该文采用75%乙醇提取、碱溶酸沉结合电位滴定法检测山东临沂皱皮木瓜,从8月1日（12%）至9月15日（20%）果实总有机酸含量持续增加,9月15日（20%）至9月24日（17%）转为下降。该差异可能是由于重庆与山东的气候差异引起的,相对重庆綦江,山东临沂皱皮木瓜盛花期延迟时间约为45 d。本研究结果与邵文豪等^[28]对湖北长阳皱皮木瓜发育期可滴定酸测定结果基本一致,但其报道的长阳皱皮木瓜酸度峰值比重庆早了25 d,约为花后105 d。

3.3 綦江皱皮木瓜果实发育期有机酸代谢规律

有机酸在果实自身代谢中不仅参与了光合作用、吸吸作用,还参与合成酚类、氨基酸、酯类和芳香物质代谢^[15]。本研究首次揭示了我国皱皮木瓜发育期果实有机酸组成变化规律,结果表明綦江皱皮木瓜在坐果后,苹果酸和柠檬酸含量极为丰富,属苹果酸-柠檬酸积累型果实;在果实发育期总有机酸与多数有机酸主要组分含量总体呈下降,而如乙酰丙酸等部分有机酸组分却逐渐上升,到果实完熟期乙酰丙酸超过苹果酸和柠檬酸,形成乙酰丙酸-苹果酸-柠檬酸积累型果实。綦江皱皮木瓜苹果酸、柠檬酸、奎尼酸、琥珀酸等主要酸味贡献性成分及油酸、亚油酸、棕榈酸和10-羟基-十六烷酸等弱酸味贡献成分与总有机酸变化规律具有较高的一致性,而乙酰丙酸、草酸、异柠檬酸和硬脂酸的变化规律却与总有机酸截然相反,呈负相关关系。在本文检出的綦江皱皮木瓜特征性共有有机酸成分中,苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、富马酸、a-酮戊二酸、乌头酸、异柠檬酸是皱皮木瓜果肉细胞线粒体三羧酸循环代谢途径的合成前体和中间产物,在三羧酸循环途径中,柠檬酸是异柠檬酸的底物,继而生成琥珀酸、α-酮戊二酸、富马酸和苹果酸^[29],但并没有呈现出此消彼长的代谢规律,而是除异柠檬酸外,均呈现出较高的正相关关系,这是否与果实发育过程碳源供应流的变化具有相关性,需要进一步验证。在TCA循环过程中,丙二酸为琥珀酸类似物,是琥珀酸脱氢酶强有力的竞争性抑制物,可通过阻断三羧酸循环而促进琥珀酸积累^[30],但本文在果实发育过程中并未发现丙二酸与琥珀酸积累量的互抑关系。莽草酸和奎尼酸分别是莽草酸循环途径酚酸类成分的最初底物和中间产物,是肉桂酸、芳香族氨基酸和其他多酚化合物的重要前体^[31],在果实发育过程中不断下降,进而促进了果实成熟过程中其他香味物质的合成与含量增加。乙酰丙酸（LA）是新一代平台化合物,其重要衍生素5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）,是植物体内所有卟啉类化合物合成的关键前体,不仅是一种代谢产物,也参与植物的生长发育,具有类似于植物激素的生理活性,低浓度时能够调节植物生长发育、提高抗性、促进果实着色^[32],但乙酰丙酸在皱皮木瓜果实中出现的生物学意义仍不清楚,有待于进一步深入研究。水杨酸是植物体普遍存在的内源激素,与植物体抗病反应和非生物协迫应答密切相关^[33],在皱皮木瓜果实膨大期含量不断增加,而在转色至完熟期不断下降,可能与皱皮木瓜发育期保障果实克服不良条件并顺利发育成熟关系密切。以长链高级脂肪酸为主的多数弱酸味有机酸成分在果实膨大后期含量上升,从转色期到完熟期含量逐渐下降,这可能是由果实成熟过程中弱极性有机酸向酯类等香气物质转化引起的。

4 结论

从重庆綦江皱皮木瓜（‘大罗’）发育期果实中分离得到共有特征性成分41种,所鉴定成分以低碳羧酸与长链高级脂肪酸为主,还包括一元酚酸、芳香族有机酸和氨基酸,相对含量较高成分主要有油酸（25.136%）、苹果酸（21.473%）、亚油酸（12.079%）、棕榈酸（6.785%）、乙酰丙酸（6.558%）、10-羟基-十六烷酸（5.420%）、柠檬酸（2.776%）、9,10-二羟基-十八烷酸（2.646%）、二十四烷酸（2.411%）、苯甲酸（2.079%）、十九烷酸（1.666%）、二十一烷酸（1.663%）、10,13-二十碳二烯酸（1.269%）、7-羟基-十八烷酸（1.102%）。从盛花后90 d到果实成熟（盛花后160 d）,果实总有机酸含量呈现快速下降、缓慢上升再缓慢下降的变化趋势,在整个发育期总强酸性有机酸和总弱酸性有机酸均与总有机酸显著正相关。

綦江皱皮木瓜检出苹果酸、柠檬酸等多数强酸性有机酸均与总强酸性有机酸极显著正相关;綦江皱皮木瓜检出油酸、亚油酸、棕榈酸和10-羟基-十六烷酸等多数弱酸性有机酸均与总弱酸性有机酸极显著正相关。綦江皱皮木瓜果实发育过程中有机酸的积累模式由苹果酸-柠檬酸积累型向完熟期乙酰丙酸-苹果酸-柠檬酸积累型转变,酸积累模式的转变在重庆皱皮木瓜果实酸度与风味品质决定中具有重要作用。

参考文献原文顺序
文献年度倒序
文中引用次数倒序
被引期刊影响因子

[1]

MIAO

, ZHAO C

, LI

, CHEN X

, MAOX

, HUANG H

, WANG T

, GAO W

. Chemical composition and bioactivities of two common Chaenomeles fruits in China: Chaenomeles speciosa and Chaenomeles sinensis
Journal of Food Science, 2016,81(8):2049-2058.

[本文引用: 1]

[2]

王明明, 陈化榜, 王建华, 宋振巧, 李圣波 . 木瓜属品种亲缘关系的SRAP分析
中国农业科学, 2010,43(3):542-551.

DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.03.014 URL Magsci [本文引用: 1]

【目的】探讨木瓜属品种的种源、亲缘关系以及遗传多样性,旨在为木瓜属品种的分类提供科学依据。【方法】利用22个SRAP（sequence-related amplified polymorphism）引物组合对27份品种和5份野生种进行聚类分析、主坐标分析及遗传多样性的评价。【结果】共检测到152个多态性位点,平均每个引物组合6.91个多态性位点,多态性位点百分数为73.08%。聚类分析显示,32份材料可划分为毛叶木瓜种系、西藏木瓜、皱皮木瓜种系、日本木瓜种系4个类群。西藏木瓜与毛叶木瓜种系聚为一支,亲缘关系密切;日本木瓜种系和皱皮木瓜种系聚为另一支,日本木瓜种系与毛叶木瓜种系亲缘关系最远,皱皮木瓜种系位于日本木瓜种系与毛叶木瓜种系之间。遗传多样性分析显示,日本木瓜种系和皱皮木瓜种系的遗传多样性指数高于毛叶木瓜种系,可能与交配、繁殖方式有关。属的水平上,种系间的遗传分化系数GST =0.4969。【结论】SRAP分子标记是研究木瓜属栽培品种遗传关系的有效工具。结合形态特征和SRAP分析结果,花柱基部被毛的状态是鉴定木瓜属栽培品种种源的准确指标之一。C. × superba与皱皮木瓜亲缘关系较近,可作为皱皮木瓜种下的品种群。

WANG M

, CHEN H

, WANG J

, SONG Z

, LI S

. Genetic relationship of Chaenomeles cultivars revealed by SRAP analysis
Scientia Agricultural Sinica, 2010,43(3):542-551. (in Chinese)

DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2010.03.014 URL Magsci [本文引用: 1]

白志川, 刘世尧, 周志钦 . 药用木瓜规范化栽培及开发利用. 北京: 中国农业出版社, 2008: 13-17.

[本文引用: 1]

BAI Z

, LIU S

, ZHOU Z

. Standardized cultivation, development and utilization of medicinal Chaenomeles. Beijing: China Agriculture Press House, 2008: 13-17. (in Chinese)

[本文引用: 1]

[4]

王云亮, 张芬, 张华, 白志川 . 药用木瓜综合开发利用
河北农业科学, 2010,14(6):120-122.

DOI:10.3969/j.issn.1088-1631.2010.06.045 URL [本文引用: 1]

木瓜为蔷薇科木瓜属植物贴梗海棠的干燥成熟果实,具有多重开发价值。综述了木瓜的药用价值、食用价值、生态和观赏价值,分析了木瓜利用现状和开发前景,并针对当前木瓜开发利用方面存在的问题,提出了相应的建议,旨为更好地保护和合理开发利用木瓜资源提供依据。

WANG Y

, ZHANG

, BAI Z

. Comprehensive utilization of medicinal Chaenomeles speciosa fruits
Journal of Hebei Agricultural Sciences, 2010,14(6):120-122.(in Chinese)

DOI:10.3969/j.issn.1088-1631.2010.06.045 URL [本文引用: 1]

木瓜为蔷薇科木瓜属植物贴梗海棠的干燥成熟果实,具有多重开发价值。综述了木瓜的药用价值、食用价值、生态和观赏价值,分析了木瓜利用现状和开发前景,并针对当前木瓜开发利用方面存在的问题,提出了相应的建议,旨为更好地保护和合理开发利用木瓜资源提供依据。

[5]

张上隆, 陈昆松 . 果实品质形成与调控的分子生理. 北京: 中国农业出版社, 2007.

[本文引用: 2]

ZHANG S

, CHEN K

. Molecular physiology of fruit quality development and regulation. Beijing: China Agriculture Press, 2007. ( in Chinese)

[本文引用: 2]

[6]

KADER A

. Flavor quality of fruits and vegetables
Journal of the Science of Food and Agriculture, 2008,88(11):1863-1868.

DOI:10.1002/jsfa.3293 URL [本文引用: 1]

Fruits and vegetables are important sources of vitamins, minerals, dietary fiber, and antioxidants. The relative contribution of each commodity to human health and wellness depends upon its nutritive value and per capita consumption; the latter is greatly influenced by consumer preferences and degree of satisfaction from eating the fruit or vegetable. Flavor quality of fruits and vegetables is influenced by genetic, preharvest, harvesting, and postharvest factors. The longer the time between harvest and eating, the greater the losses of characteristic flavor (taste and aroma) and the development of off-flavors in most fruits and vegetables. Postharvest life based on flavor and nutritional quality is shorter than that based on appearance and textural quality. Thus, it is essential that good flavor quality be emphasized in the future by selecting the best-tasting genotypes to produce, by using an integrated crop management system and harvesting at the maturity or ripeness stage that will optimize eating quality at the time of consumption, and by using the postharvest handling procedures that will maintain optimal flavor and nutritional quality of fruits and vegetables between harvest and consumption. Copyright 2008 Society of Chemical Industry

[7]

张永平, 乔永旭, 喻景权, 赵智中 . 园艺植物果实糖代谢的研究进展
中国农业科学, 2008,41(4):1151-1157.

URL Magsci [本文引用: 1]

糖的种类与含量对果实风味和品质具有重要影响。本篇综述在两个层次上对高等植物果实糖的积累机理进行了全面综述：（1）糖在果实中的卸载及转化；（2）果实中糖积累过程的调控因子。并重点阐述了糖代谢的关键酶、耗能性无效循环、信号调节等因素在糖积累过程中的调节作用。总结了糖积累的重要因素，结合目前的研究现状，提出了糖代谢研究的主要方向。

ZHANG Y

, QIAO Y

, YU J

, ZHAO Z

. Progress of researches of sugar accumulation mechanism of horticultural plant fruits
Scientia Agricultura Sinica, 2008,41(4):1151-1157. (in Chinese)

URL Magsci [本文引用: 1]

李金龙 . 果实内糖的积累与糖代谢相关酶
中国林副特产, 2015(3):92-93.

DOI:10.13268/j.cnki.fbsic.2015.03.041 URL [本文引用: 1]

糖是果实中重要的组成成份,其含量影响果实风味。研究糖代谢酶与糖之间的关系,有助于掌握糖代谢机理,为以后应用分子育种手段,改善果实品质提供理论依据。

LI J

. Sugar accumulation in fruit and enzymes related sugar metabolism
. Forest By-Product and Speciality in China, 2015(3):92-93. (in Chinese)

DOI:10.13268/j.cnki.fbsic.2015.03.041 URL [本文引用: 1]

糖是果实中重要的组成成份,其含量影响果实风味。研究糖代谢酶与糖之间的关系,有助于掌握糖代谢机理,为以后应用分子育种手段,改善果实品质提供理论依据。

[9]

中国科学院植物研究所编. 中国植物志(第三十六卷, 被子植物门?双子叶植物纲?蔷薇科(一)绣线菊亚科-苹果亚科). 北京: 科学出版社, 1974.

[本文引用: 1]

Institute of

Botany

, the Chinese Academy of Sciences. Chinese Flora (Thirty-sixth volumes, Angiospermae?Dicotyledoneae?Rosaceae (1)Spiratheminaceae-Apple subfamily). Beijing: Science Press, 1974. ( in Chinese)

[本文引用: 1]

[10]

刘世尧, 白志川, 李加纳 . 皱皮木瓜与光皮木瓜药材品质多性状指标综合评价研究
中国中药杂志, 2012,38(5):426-430.

DOI:10.4268/cjcmm20120707 URL [本文引用: 2]

Objective: To evaluate the 8 main quality characteristic indexes of fruit-using C. sinensis and 27.40 U·mg, respectively. And the fresh fruit titratable acid content, total sugar content, ascorbic acid content separately was 0.357 g·L, 0.854 mg·L, 1.118 mg·L and 0.252 g·L, 0.845 mg·L, 1.260 mg·L, respectively. The oleanolic acid, ursolic acid, total flavones and total saponins content was 0.320%, 0.461%, 43.90 mg·g, 23.11 mg·g and 0.255%, 0.176%, 41.24mg·g, 15.01 mg·g, respectively. The C. sinensis sample quality mean comprehensive evaluation value was 0.599 and 0.367 based on the fuzzy probability method. Conclusion: The edible quality of fruit-using C. speciosa fruits are better than C. sinensis fruits produced in Chongqing. And the fuzzy probability method could be used to quality comprehensive evaluation of samples containing many trait parameters.

LIU S

, BAI Z

, LI J

. Comprehensive evaluation of multi-quality characteristic indexes of Chaenomeles speciosa and C. sinensis fruits
China Journal of Chinese Materia Medica, 2012,38(5):426-430.(in Chinese)

DOI:10.4268/cjcmm20120707 URL [本文引用: 2]

尹震花, 赵晨, 张娟娟, 张勇, 张伟 . 光皮木瓜的化学成分及药理活性研究进展
中国实验方剂学杂志, 2017,23(9):221-229.

URL [本文引用: 1]

光皮木瓜在我国广泛种植,具有广泛的药用价值,国内外****对光皮木瓜的研究做了大量的工作,发现光皮木瓜含有机酸类、黄酮类、三萜类、甾体类、木脂素类等化合物,具有抗肿瘤、保肝、免疫调节、抗菌等多种生物活性,临床上常与其他中药配伍用于治疗风湿性关节痛、腰腿疼痛、四肢麻木等。近年来对光皮木瓜的化学成分和药理活性研究越来越深入,发现光皮木瓜还含有多糖类、木脂素苷类、氧化脂类和联苯类等新的化学成分,具有抗氧化、抗炎抑菌、降血糖、抗癌、抗老年痴呆、抗流感病毒、抗过敏反应和胆碱乙酰基转移酶激活剂等新的活性,并对具有的物质基础与其药理活性的发挥存在的联系有了进一步的研究,但是还不全面,需要进一步的研究发掘。本文通过查阅近几年来国内外文献,对近年来有关光皮木瓜的化学成分和药理活性研究进行总结,以期为光皮木瓜的进一步深入研究和开发利用提供一定的科学依据。

YIN Z

, ZHAO

, ZHANG J

, ZHANG

. Research progress on chemical constituents and pharmacological activities of Chaenomeles sinensis
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2017,23(9):221-229. (in Chinese)

URL [本文引用: 1]

高诚伟, 康勇, 雷泽模, 段志红, 李蕾 . 皱皮木瓜中有机酸的研究
云南大学学报(自然科学版), 1999,21(4):319-321.

[本文引用: 4]

GAO C

, KANG

, LEI Z

, DUAN Z

, LI

. The studies on the acidic constituents in the fresh-fruit of Chaenomeles spciosa
. Journal of Yunnan University, 1999,21(4):319-321.(in Chinese)

[本文引用: 4]

[13]

龚复俊, 陈玲, 卢笑丛, 王有为 . 皱皮木瓜果实中有机酸成分的GC-MS分析
植物资源与环境学报, 2005,14(4):55-56, 58.

DOI:10.3969/j.issn.1674-7895.2005.04.012 URL [本文引用: 3]

The constituents and contents of esterifing derivatives of organic and aqueous phases in extracts from Chaenomeles speciosa (Sweet) Nakai fruits were analysed by GC-MS. The results indicated that there were 15 and 17 compounds in organic and aqueous phases, respectively. Besides there were common fatty acids, there were a lof of binary acids and ternary acids. The contents of malic acid and citric acid in aqueous and organic phases reached to 64.007%, 70.492% and 30.305%, 22.121% respectively. Therefore, malic acid and citric acid are the major constituents of organic acids in C. speciosa fruits.

GONG F

, CHEN

, LU X

, WANG Y

. GC-MS analyzing of organic acids in Chaenomeles speciosa fruits
Journal of Plant Resources and Environment, 2005,14(4):55-56, 58.(in Chinese)

DOI:10.3969/j.issn.1674-7895.2005.04.012 URL [本文引用: 3]

于生, 张丽, 单鸣秋, 钱岩, 丁安伟 . UFLC-MS法同时测定木瓜饮片中8种有机酸
中草药, 2016,47(14):2465-2469.

DOI:10.7501/j.issn.0253-2670.2016.14.012 URL [本文引用: 1]

目的建立同时快速测定木瓜饮片中莽草酸、柠檬酸、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、肉桂酸、齐墩果酸、熊果酸8种有机酸的超高速液相色谱-质谱(UFLC-MS)分析方法。方法采用岛津LC-20A快速液相系统,AB Sciex Qtrap 5500型三重四级杆线性离子阱质谱仪,Poroshell 120色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.7μm);流动相为0.5%醋酸水溶液(A)-0.5%醋酸甲醇溶液(B),梯度洗脱:0~5 min,10%A;5~13 min,10%~30%A;13~15 min,30%~95%A;15~25 min,95%A;分析时间25 min;体积流量0.6 m L/min;柱温30℃;进样量2μL。采用电喷雾离子源进行负离子模式检测,多反应监测模式(MRM)用于定量分析,源喷射电压为-4 500 V,离子源温度为550℃。结果测定的8种成分在线性范围内均具有良好的线性关系(r≥0.999 2),平均回收率在96.14%~101.20%。不同产地的木瓜饮片中8种成分的量差异较大,其中,柠檬酸、绿原酸、莽草酸的量较高,咖啡酸的量最低。结论建立的测定方法重复性好,且快速、灵敏度高,可为木瓜饮片的质量控制提供依据以及方法学支持。

, ZHANG

, SHAN M

, QIAN

, DING A

. Simultaneous determination of eight organic acids in Chaenomeles Fructus by UFLC-MS
Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2016,47(14):2465-2469. (in Chinese)

DOI:10.7501/j.issn.0253-2670.2016.14.012 URL [本文引用: 1]

陈发兴, 刘星辉, 陈立松 . 果实有机酸代谢研究进展
果树学报, 2005,22(5):526-531.

DOI:10.3969/j.issn.1009-9980.2005.05.020 URL [本文引用: 2]

果实中有机酸是决定果实风味品质的重要因素之一.有机酸在果实自身代谢中参与了光合作用、呼吸作用,以及合成酚类、氨基酸、酯类和芳香物质的代谢过程.综述了果实有机酸的合成、降解、液泡贮藏等代谢过程的生理生化机制,包括果实中有机酸的组分,果实生长发育过程中有机酸的变化,有机酸代谢酶、液泡膜质子泵与果实中有机酸含量的关系,果实有机酸的遗传与分子生物学研究进展,以及环境因素与栽培措施对果实有机酸的影响与调控;并提出了今后待研究的问题.

CHEN F

, LIU X

, CHEN L

. Advances in research on organic acid metabolism in fruits
Journal of Fruit Science, 2005,22(5):526-531. (in Chinese)

DOI:10.3969/j.issn.1009-9980.2005.05.020 URL [本文引用: 2]

文涛, 熊庆娥, 曾伟光, 刘远鹏 . 脐橙果实发育过程中有机酸合成代谢酶活性的变化
园艺学报, 2001,28(2):161-163.

DOI:10.3321/j.issn:0513-353X.2001.02.015 URL Magsci [本文引用: 1]

以红桔砧10 年生罗伯逊脐橙为试材, 研究了果实发育过程中有机酸代谢相关酶活性的变化及其与有机酸积累的关系。结果表明: 在整个果实发育过程中, 柠檬酸合成酶(CS) 和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC) 活性与有机酸含量呈极显著正相关。这不仅证明脐橙果实中存在通过CO2 固定合成有机酸的途径, 还说明CS、PEPC 是有机酸合成的关键酶, 抑制CS 的活性能降低果实中有机酸的生成量。

WEN

, XIONG Q

, ZENG W

, LIU Y

. Changes of organic acid synthetase activity during fruit development of navel orange ( Citrus sinesis Osbeck)
Acta Horticulturae Sinica. 2001,28(2):161-163. (in Chinese)

DOI:10.3321/j.issn:0513-353X.2001.02.015 URL Magsci [本文引用: 1]

李甲明, 杨志军, 张绍铃, 黄小三, 曹玉芬, 吴俊 . 不同梨品种果实有机酸含量变化与相关酶活性的研究
西北植物学报, 2013,33(10):2024-2030.

URL [本文引用: 1]

In this study,the pear cultivar ‘Yali’,‘Chili’ and ‘Balixiang’ were used to determine the dynamic change of fruit organic acids accumuation and related enzyme activities during fruit development,the correlation of organic acids contents and the activities of related enzyme were also explored.The results demonstrated that:(1)The contents of organic acids decreased gradually during fruit development.The total organic acid content of ‘Chili’ was the highest,followed by ‘Yali’,and the ‘Balixiang’ is the least at the period of fruit ripening.Furthermore,the total organic acid content showed significant difference among three cultivars.(2)At the later stage of fruit development,the content of citric acid of ‘Yali’,‘Chili’ and ‘Balixiang’ was almost the same,but the content of malic acid showed significant difference among three cultivars,which indicated that malic acid played an important role in the difference of organic acid content of different cultivars.(3)NADP-ME activity showed significant difference during late stage of fruit development,however,NAD-MDH and PEPC activities showed no significant difference in synthesis of malic acid,so the NADP-ME was an important enzyme involved in the difference of malic acid content among ‘Yali’,‘Chili’ and ‘Balixiang’.(4)The related enzymes of CS,Cyt-ACO,Mit-ACO and NAD-IDH in synthesis pathway of citric acid showed same trends in different cultivars,but no significant difference at late stage of fruit development,which suggested that they were not main factors leading to the difference of citric acid content.(5)The correlation analysis between organic acid content and activities of related enzymes during the fruit devlopment revealed that both of enzyme activities in malic acid and citric acid synthesis pathway affected the total level of the organic acid content together.

LI J

, YANG Z

, ZHANG S

, HUANG X

, CAO Y

, WU

. Change of organic acid contents and related enzyme activities in different pear cultivars
Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica, 2013,33(10):2024-2030. (in Chinese)

URL [本文引用: 1]

郑惠文, 张秋云, 李文慧, 章世奎, 席万鹏 . 新疆杏果实发育过程中可溶性糖和有机酸的变化
中国农业科学, 2016,49(20):3981-3992.

DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2016.20.012 URL [本文引用: 1]

【目的】明确新疆杏果实可溶性糖和有机酸的组成与含量特征,揭示果实发育过程中糖、酸动态变化规律。【方法】以5个新疆杏品种不同发育阶段的果皮和果肉为试验材料,使用高效液相色谱法(high performance liquid chromatograph,HPLC)检测各样品中可溶性糖和有机酸,对比分析果实发育过程中其组成与含量的变化情况。【结果】从新疆杏果实中共检测到3种可溶性糖(蔗糖、葡萄糖和果糖)。其中,蔗糖和葡萄糖为主要糖。果实成熟时,果皮中两种主要糖分别占总糖含量的60.7%—79.1%和13.5%—34.7%,果肉中占总糖含量的65.5%—82.4%和8.2%—25.9%,果皮、果肉中果糖的含量相对较低,仅占总糖含量的4.6%—10.6%和6.5%—10.7%。整个果实发育过程中,3种可溶性糖和总糖的含量均明显增加,各种糖的比例也发生明显变化。葡萄糖占总糖的比例不断减少,果皮中葡萄糖占总糖比例从79.4%降至13.5%,果肉中从74.1%降至8.2%;而蔗糖的比例不断增加,果皮中从11.0%增加到79.1%,果肉中从11.0%增加到82.4%,成为成熟果实中最主要的糖。从新疆杏果实中共检测到6种有机酸,包括苹果酸、奎宁酸、柠檬酸、酒石酸、草酸和富马酸。成熟果实中苹果酸、奎宁酸和柠檬酸是最主要的有机酸,占总酸含量的94.6%—98.3%。果实发育过程中,苹果酸和草酸呈下降趋势,柠檬酸、奎宁酸和富马酸呈上升趋势,酒石酸无明显变化规律。果实发育前期(幼果期至膨大期),总酸的含量明显增加,而在果实成熟过程中(转色期至完熟期)迅速下降。整个果实发育过程中,尽管苹果酸占主导地位,但各品种在有机酸的积累模式上有明显差异,依据其变化特点可分为2种模式:由苹果酸和奎宁酸或苹果酸向苹果酸、奎宁酸和柠檬酸3种主要有机酸共积累。果实成熟时,3种共积累酸的比例在品种间差异较大:‘库尔勒托拥’(KE)、‘阿克牙勒克’(AK)和‘克孜佳娜丽’(KZ)中,柠檬酸苹果酸奎宁酸;‘索格佳娜丽’(SG)中,奎宁酸苹果酸柠檬酸;‘苏联2号’(SL)中苹果酸、奎宁酸和柠檬酸的比例相当。果皮和果肉在可溶性糖、有机酸的组成、含量和积累模式上均无明显差异。【结论】新疆杏果实发育过程中,可溶性糖和有机酸积累呈现明显的变化规律,糖的积累模式由葡萄糖积累型向蔗糖积累型转变,有机酸由苹果酸和奎宁酸积累型或苹果酸积累型向苹果酸、奎宁酸和柠檬酸3种酸共积累的模式转变,糖、酸积累模式的转变在新疆杏果实甜度和酸度以及风味品质决定中都具有十分重要的作用。

ZHENG H

, ZHANG Q

, LI W

, ZHANG S

, XI W

. Changes in soluble sugars and organic acids of Xinjiang apricot during fruit development and ripening
Scientia Agricultura Sinica, 2016,49(20):3981-3992. (in Chinese)

DOI:10.3864/j.issn.0578-1752.2016.20.012 URL [本文引用: 1]

王小红, 陈红, 董晓庆 . ‘蜂糖李’果实发育过程中有机酸含量变化及其与苹果酸代谢相关酶的关系
果树学报, 2017,34(8):1007-1015.

URL [本文引用: 2]

【目的】明确‘蜂糖李’果实有机酸组成与含量特点,揭示其发育过程中有机酸含量的变化规律及其与苹果酸代谢相关酶的关系,阐明有机酸积累的关键时期和关键酶。【方法】以‘蜂糖李’及对照‘四月李’为材料,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatograph,HPLC)分析测试李果实发育过程中有机酸组分及含量,并测定苹果酸代谢相关酶的活性。【结果】利用高效液相色谱分析李果实中有机酸组分及含量,发现‘蜂糖李’果实成熟时总酸含量(ω,后同)为5.94 mg·g-1,包括苹果酸、酒石酸、柠檬酸、草酸、莽草酸和琥珀酸6种,其中以苹果酸含量最高(占总酸含量的88%),‘四月李’果实中有机酸组分与‘蜂糖李’一致,均属于苹果酸型。2个李品种果实中总酸含量的差异主要是由苹果酸含量的差异所致。通过分析李果实发育过程中有机酸含量的变化,发现‘蜂糖李’果实中苹果酸含量大量积累的关键时期在果实发育前期,整体呈先增加后降低的趋势,草酸、酒石酸含量逐渐降低,而柠檬酸含量逐渐升高。与‘四月李’相比,‘蜂糖李’果实中苹果酸、草酸、酒石酸及总酸含量的变化趋势与之一致,且苹果酸及总酸含量在整个过程中均显著低于‘四月李’,而柠檬酸含量的变化趋势与之相反。最后通过分析苹果酸含量与相关代谢酶活性之间的相关性,表明‘蜂糖李’果实中苹果酸在果实发育前期大量积累主要是该时期磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)活性增强促进了苹果酸的大量合成以及NADP-苹果酸酶(NADP-ME)活性降低减少苹果酸的分解,与NAD-苹果酸脱氢酶(NAD-MDH)关系不大,而‘四月李’苹果酸积累的关键酶是NAD-MDH。在果实发育后期,‘蜂糖李’及‘四月李’NADP-ME活性迅速升高,前者PEPC活性减弱,后者NAD-MDH活性下降,使得2者果实中苹果酸的降解大于合成而呈降低趋势。【结论】‘蜂糖李’是以苹果酸为主要有机酸的低酸型李品种,其果实中苹果酸积累的关键时期为果实发育前期,苹果酸含量的变化由PEPC和NADP-ME协同调控,而对照‘四月李’由NAD-MDH和NADP-ME起主要的调控作用。

WANG X

, CHEN

, DONG X

. Changes of organic acids content during ‘Fengtang plum’ (P. salicina) fruit development and its relationship with malic acid metabolism related enzymes
Journal of Fruit Science, 2017,34(8):1007-1015. (in Chinese)

URL [本文引用: 2]

周亚菁, 谢晓梅, 岳静怡, 查日维, 杨沫, 张玲 . 应用AQ-C18色谱柱的液相色谱法同时测定木瓜中6种脂肪酸和酚酸
中药材, 2015,38(10):2117-2119.

DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2015.10.025 URL [本文引用: 1]

目的：建立同时测定木瓜脂肪酸和酚酸含量的高效液相色谱法。方法：选用Ultimate AQ-C_18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;0.5%磷酸二氢铵溶液（磷酸调节pH值至2.2）-乙腈为流动相,梯度洗脱;PDA检测器三波长切换检测,奎尼酸、苹果酸、莽草酸：210 nm,原儿茶酸：260 nm,绿原酸和咖啡酸：325 nm;柱温：30℃;流速：1.0m L/min。结果：6种有机酸峰面积与进样量均呈良好的线性关系（r≥0.9875）,加样回收率在96.5%~104.8%（RSD≤4%）之间。结论：该方法简便,选择性和重复性好,可准确、有效地测定木瓜中主要小分子有机酸的含量,为不同检测波长下的中药极性有机酸成分测定提供了科学依据和实验资料。

ZHOU Y

, XIU X

, YUE J

, ZHA R

, YANG

, ZHANG

. Simultaneous detection of six fatty acids and phenol acids of Chaenomeles spesiosa fruit on AQ-C18 column with HPLC
Journal of Chinese Medicinal Material, 2015,38(10):2117-2119. (in Chinese)

DOI:10.13863/j.issn1001-4454.2015.10.025 URL [本文引用: 1]

姜华昌, 曾翎, 尹炳龙, 干均江, 刘定鉴 . SO₄ ²-/FE₂O₃-Al₂O₃-SiO₂固体超强酸的制备及其催化水解蔗糖生成乙酰丙酸
林产化学与工业, 2010,30(6):61-65.

URL Magsci [本文引用: 1]

通过共沉淀法制备了不同比例的SO42-/Fe2O3-Al2O3-SiO2固体超强酸,并将其用于蔗糖的催化水解制备乙酰丙酸。实验结果发现:焙烧时间和焙烧温度对比表面积的影响较大,焙烧时间越短,焙烧温度越低,比表面积就会更大;硫酸浸渍浓度和浸渍时间对催化剂的性质也有一定影响。将固体超强酸作催化剂用于蔗糖催化水解制乙酰丙酸,结果发现焙烧温度600℃、焙烧时间4h制备的催化剂的活性较高,乙酰丙酸的产率也较高,达到33.05%。

JANG H

, ZENG

, YIN B

, GAN J

, LIU D

. Preparation of SO ²-₄/Fe₂O₃-Al₂O₃-SiO₂ solid super-acid catalyst for producing levulinic acid from hydrolysis of sucrose
Chemistry and Industry of Forest Products, 2010,30(6):61-65. (in Chinese)

URL Magsci [本文引用: 1]

CHEN F

, LIU X

, CHEN L

. Developmental changes in pulp organic acid concentration and activities of acid metabolising enzymes during the fruit development of two loquat ( Eriobotrya japonica Lindl.) cultivars differing in fruit acidity
Food Chemistry, 2009,114:657-664.

DOI:10.1016/j.foodchem.2008.10.003 URL [本文引用: 1]

Changes in organic acid concentration and related enzyme activities in loquat ( Eriobotrya japonica Lindl.) pulp were studied, using low-acid ‘Changhong 3’ and high-acid ‘Jiefangzhong’ cultivars. Both titratable acidity (TA) and malic acid concentration increased during the early stages of fruit development and decreased at the later stages. The difference in TA between the two cultivars could be explained by the difference in malic acid concentration, which could result from a difference in NAD-malate dehydrogenase (NAD-MDH) and NADP-malic enzyme (NADP-ME) activities. Although the difference in malic acid concentration between the two cultivars could not result from a difference in phosphoenolpyruvate carboxylase (PEPC) activity, malic acid concentration in both ‘Changhong 3’ throughout fruit development and ‘Jiefangzhong’ at the early stages increased linearly and curvilinearly with increasing PEPC activity, respectively. Therefore, NAD-MDH, NADP-ME and PEPC activities may play significant roles in malic acid biosynthesis and degradation.

[23]

周先艳, 朱春华, 李进学, 高俊燕, 龚琪, 沈正松, 岳建强 . 果实有机酸代谢研究进展
中国南方果树, 2015,44(1):120-125.

DOI:10.13938/j.issn.1007-1431.2015.44.01.038 URL [本文引用: 1]

果实中有机酸组成与含量是影响果实品质的重要因素,合理调控果实有机酸含量一直是人们关注的研究热点。综述了近年来国内外果实有机酸代谢研究进展,主要包括果实内有机酸的组成,有机酸含量在果实发育过程中的变化,有机酸代谢及相关酶活性变化,有机酸代谢分子生物学研究,内外条件和栽培措施对果实有机酸的影响,果实有机酸含量的调控措施等内容;提出了今后研究中需要解决的问题。

ZHOU X

, ZHU C

, LI J

, GAO J

, GONG

, SHEN Z

, YUE J

. Advances in research on organic acid metabolism in fruits
South China Fruits, 2015,44(1):120-125. (in Chinese)

DOI:10.13938/j.issn.1007-1431.2015.44.01.038 URL [本文引用: 1]

DIAKOU

, SVANELLA

, RAYMOND

, GAUDILLERE J

, MOING

. Phosphoenolpyruvate carboxylase during grape berry development: protein level, enzyme activity and regulation
Australian Journal of Plant Physiology, 2000,27:221-229.

DOI:10.1071/PP99141 URL [本文引用: 1]

The protein level and regulation of phosphoenolpyruvate carboxylase (PEPC, EC 4.1.1.31, involved in malic acid synthesis) were studied during fruit development of 2 grape cultivars, Cabernet Sauvignon and Gora Chirine (fruits of normal and low organic acid content, respectively). The protein level and in vitro activity were higher in the low-acid cultivar than in the normal-acid cultivar for most stages. In vivo PEPC activity, measured using 14CO2 labelling, was significantly higher in the low-acidcultivar than in the normal-acid cultivar about 1 week before and 1 week after veraison. However, partitioning into malate was the same for both cultivars. Antibodies raised against the N-terminal part of Sorghum PEPC recognised grape PEPC, indicating the presence of the consensus phosphorylation site involved in PEPC regulation. PEPC phosphorylation status was estimated by studying sensitivity to pH and malate. Grape PEPC appeared more sensitive to low pH and malate during ripening (IC50 malate, 0.2-0.7 mM) compared to during the earlier stages of development (IC50 malate, 1.2-2 mM) for both cultivars. Therefore, in the normal-acid cultivar, PEPC seems to participate in controlling malic acid accumulation but does not seem to control the differencesin malic acid concentration observed between the two cultivars.

[25]

靳李娜, 覃江文, 刘义梅 . 资丘木瓜采收期对商品性状的影响
中国药师, 2014,17(9):1519-1521.

DOI:10.3969/j.issn.1008-049X.2014.09.027 URL [本文引用: 1]

目的：了解资丘木瓜采收期对商品性状的影响,确定能保持其传统性状特征的最佳采收期。方法：测定不同采收期资丘木瓜的醇溶性浸出物含量、重量以及酸度,并对资丘木瓜产区近3年的天气情况进行总结,结合产地晒制加工过程,探讨适宜采收期。结果：从6月7日~8月27日,资丘木瓜果实平均重量6月最低,8月最高,其密度以7月中旬最高；在整个采收时间内,资丘木瓜的醇溶性浸出物含量变化不明显；7月中下旬为高温、干燥少雨天气,适于晒制。结论：结合传统习惯,晒制条件,商品性状,确定资丘木瓜的最佳采收期为7月中旬。

LE L

, QIN J

, LIU Y

. Influence of harvest time on the characters of Chaenomeles spciosa(Sweet) Nakai
China Pharmacist, 2014,17(9):1519-1521. (in Chinese)

DOI:10.3969/j.issn.1008-049X.2014.09.027 URL [本文引用: 1]

李娜, 姜洪芳, 金敬宏, 任红荣, 张卫明 . 不同采收期的宣木瓜总黄酮含量分析
食品研究与开发, 2011,32(2):112-114.

DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2011.02.034 URL [本文引用: 1]

为确定宣木瓜适宜采收期提供依据.定期采集同一基地宣木瓜样品,以芦丁为标准品,采用分光光度法测定不同时期的总黄酮含量.结果表明:果实生长过程中的总黄酮含量在0.94%～1.62%之间,以7月8日含量最高;宣木瓜适宜采收期为每年的7月上旬至中旬.

, JIANG H

, JIN J

, REN H

, ZHANG W

. Total flavone content analysis of Chaenomeles speciosa by different harvest times
Food Research and Development, 2011,32(2):112-114. (in Chinese)

DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2011.02.034 URL [本文引用: 1]

为确定宣木瓜适宜采收期提供依据.定期采集同一基地宣木瓜样品,以芦丁为标准品,采用分光光度法测定不同时期的总黄酮含量.结果表明:果实生长过程中的总黄酮含量在0.94%～1.62%之间,以7月8日含量最高;宣木瓜适宜采收期为每年的7月上旬至中旬.

[27]

齐红, 王云, 郭庆梅, 周凤琴, 李圣波 . 不同采收期皱皮木瓜质量动态分析
中国实验方剂学杂志, 2017,23(2):19-22.

URL [本文引用: 1]

目的：考察不同采收期皱皮木瓜外观特征与内在多元药效成分的动态变化规律,探讨皱皮木瓜药材的最佳采收期。方法：观察不同采收期皱皮木瓜果实外观特征包括表面颜色、长度、直径及质量变化,采用高效液相色谱法、紫外分光光度法等对内在绿原酸、齐墩果酸、熊果酸、鞣质及总有机酸含量进行测定,用主成分分析法（principal component analysis,PCA）进行综合评价。结果：不同采收期皱皮木瓜果实外观特征及内在多元药效物质的含量呈现动态变化,综合评价显示,8月下旬采收的样品综合评价指数最高。结论：综合分析认为8月中下旬为皱皮木瓜药材最佳采收期,此时果实表示颜色由绿色变为绿黄色。该研究可为皱皮木瓜药材采收、质量评价等提供一定科学依据。

, WANG

, GUO Q

, ZHOU F

, LI S

. Dynamic quality analysis of Chaenomelis fructus in different harvesting periods
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae, 2017,23(2):19-22.(in Chinese)

URL [本文引用: 1]

邵文豪, 董汝湘, 刁松锋, 孙洪刚, 姜景民, 李军民, 黄世清 . 皱皮木瓜果实发育后期品质变化及其成熟阶段的划分初探
西北植物学报, 2015(1):175-181.

DOI:10.7606/j.issn.1000-4025.2015.01.0175 URL [本文引用: 1]

以湖北长阳产皱皮木瓜为材料,测定果实发育后期果实鲜质量、果长、果径、果色、果实硬度以及果肉干物质量、可溶性糖含量、总酸含量和总黄酮含量等品质指标的动态变化,划分不同成熟阶段,为判断果实适宜采收期、实现优质生产提供理论参考。结果表明：（1）皱皮木瓜果实发育后期果实鲜质量、果长、果径、果肉干物质量和可溶性糖含量均呈现上升趋势;果色由绿色、黄绿色渐变为淡黄色到黄色;果实硬度、果肉总酸和总黄酮含量呈先上升后下降趋势。（2）各品质指标快速变化的时间区域存在差异,果实鲜质量在花后105-150d增加较快,果色在150d后逐渐变黄,果实硬度在花后135-165d快速下降,果肉总酸、总黄酮含量则在花后105-120d快速增加至峰值。（3）根据主成分分析结果和各品质指标的变化特点,可初步将皱皮木瓜果实发育后期划分为未成熟（花后105d之前）、早期成熟（花后120-150d）和成熟（花后165-180d）3个阶段。研究表明,随着果实成熟度的提高,皱皮木瓜果实鲜质量、果色、果肉干物质量、可溶性糖含量等指标不断升高,果实硬度逐渐下降,其食用加工品质不断提升,而在早期成熟阶段（花后120-150d）果实的药用品质则相对较高。

SHAO W

, DONG R

, DIAO S

, SUN H

, JIANG J

, LI J

, HUANG S

. Changing in fruit qualities during the late stage of fruit development inChaenomeles speciosa and its identification of fruit ripening process
Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica, 2015(1):175-181. (in Chinese)

DOI:10.7606/j.issn.1000-4025.2015.01.0175 URL [本文引用: 1]

朱钦士 . 正转和反转的三羧酸循环
生物学通报, 2015,50(1):16-19.

URL [本文引用: 1]

三羧酸循环是细胞能量代谢和化学合成路线的核心,葡萄糖、氨基酸、脂肪酸和血红素通过此环状反应链合成和转化。"燃料"分子中的碳原子通过加水脱氢的方式被氧化成为二氧化碳,氢原子则被脱氢酶脱下,在电子传递链中释放能量合成ATP。在许多原核生物中,三羧酸循环是逆向进行的,其主要功能是固定二氧化碳中的碳原子,以用于有机物的合成。异养生物的出现和大气中氧浓度的上升,使得三羧酸循环从还原型向氧化型转变。

ZHU Q

. The forward and reverse tricarboxylic acid cycle
Bulletin of Biology, 2015,50(1):16-19. (in Chinese)

URL [本文引用: 1]

黄家培, 沈兰萍, 任青, 殷敏 . 琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂
生理科学, 1984,4(5):105.

URL [本文引用: 1]

正讲述酶竞争性抑制作用时常举丙二酸、草酰乙酸、草酸对琥珀酸脱氢酶有竞争性抑制作用的例子。对此同学提出,戊二酸的化学结构与草酸相比更与琥珀酸相似,为什么书上不提戊二酸对琥珀酸脱氢酶有竞争性抑制作用呢? 为此做了邻苯二甲酸、戊二酸、丙二酸、草酰乙酸、草酸和丁酸对琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制作用定性实验。得以下结果。

HUANG J

, SHEN L

, REN

, YIN

. Succinate dehydrogenase competitive inhibitor
Physiological Science, 1984,4(5):105. (in Chinese)

URL [本文引用: 1]

林军, 胡海峰, 胡又佳, 朱宝泉 . 莽草酸及其代谢产物在医药工业中的应用
医药生物技术, 2011,18(5):461-465.

URL [本文引用: 1]

莽草酸代谢途径是芳香族氨基酸合成过程中的一段共同代谢途径,广泛存在于植物和微生物中。莽草酸途径的代谢产物莽草酸、奎尼酸和没食子酸均含有多功能的六碳环状结构以及3个不对称的碳原子手性中心,可以在化学修饰下形成一系列具有潜在药理学活性的衍生物,广泛应用于医药工业。文章着重介绍莽草酸代谢途径的相关产物及其衍生物在抗病毒、抗肿瘤、抗菌、抗炎及抗血栓等方面的应用。

LIN

, HU H

, HU Y

, ZHU B

. The applicaition of shikimic acid and its metabolites in the pharmaceutical industry
Pharmaceutical Biotechnology, 2011,18(5):461-465.(in Chinese)

URL [本文引用: 1]

杨莉莉, 马龙, 李献军, 单燕, 杨玥, 同延安 . 乙酰丙酸对“巨峰”葡萄叶绿素、产量和品质的影响
北方园艺, 2015(24):5-8.

DOI:10.11937/bfyy.201524002 URL [本文引用: 1]

以4年生"巨峰"葡萄为试材,通过叶面喷施不同浓度的乙酰丙酸,探究了乙酰丙酸对"巨峰"葡萄叶绿素、产量和品质的影响。结果表明:喷施乙酰丙酸能相对提高葡萄叶片叶绿素含量,尤其是稀释600倍的处理效果最明显,在幼果期喷施第4周后所有喷施乙酰丙酸处理叶绿素含量相对对照增加效果显著;喷施乙酰丙酸葡萄产量提高了5.1%~27.9%,喷施稀释600倍的增产效果最佳;喷施不同浓度乙酰丙酸使葡萄单果粒重提高了0.38~0.83g;喷施乙酰丙酸增加了葡萄果实可溶性糖含量、糖/酸、花青素含量,降低了可滴定酸含量,显著增加了葡萄皮的总酚物质、类黄酮、花青素含量,利于葡萄色香味的增加,不影响果实维生素C和单宁酸含量,且以喷施稀释600倍的效果最佳。葡萄生产上,可以喷施稀释600倍的乙酰丙酸,以增产和改善果实品质。

YANG L

, MA

, LI X

, SHAN

, YANG

, TONG Y

. Effect of Levulinic acid on ‘Kyoho’ grape chlorophyll, yield and quality
.Northern Horticulture, 2015(24):5-8. (in Chinese)

DOI:10.11937/bfyy.201524002 URL [本文引用: 1]

曹虎 . 国外****对水杨酸生理功能的再发现
植物杂志, 1995,3:43.

URL [本文引用: 1]

正自1838年拉菲尔·皮里亚命名水杨酸以来,这种初始从柳树皮提取的化合物,一直作为退热药使用,从普通感冒到心脏病,在几十年中人工合成的水杨酸衍生物阿斯匹林几乎成了医生手中的万能药。近年国外植物生理学家在植物的生殖开花、抗感染等生理研究中,相继发现了植物内源水杨酸的微妙变化,认为水杨酸是调节植物生理活动的重要化学物质,它的作用特性与激素类似。有的****已肯定水杨酸是继脱落酸、细胞分裂素、乙烯、吲跺乙酸、赤霉素等之后的又一大植物激素,有的****鉴于调节机理尚不十分清楚而持保留态度。

CAO

. Rediscovery of physiological function of salicylic acid by foreign scholars
Plant Journal, 1995,3:43. (in Chinese)

URL [本文引用: 1]