大花君子兰查尔酮合酶基因CmCHS的克隆及其功能验证
刘 玥1,李月庆2,孟祥宇3,黄 靖1,汤 昊1,李源恒1,高 翔2,赵春莉1,*1吉林农业大学园艺学院,长春 130118;2东北师范大学分子表观遗传学教育部重点实验室,长春 130024;3沈阳大学生命科学与工程学院,沈阳 110044
出版日期:
2021-10-25发布日期:
2021-11-01基金资助:
吉林省发展和改革委员会资助项目(2020C024-5)Cloning and Functional Characterization of Chalcone Synthase Genes(CmCHS)from Clivia miniata
LIU Yue1,LI Yueqing2,MENG Xiangyu3,HUANG Jing1,TANG Hao1,LI Yuanheng1,GAO Xiang2,and ZHAO Chunli1,*1College of Horticulture,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China;2Key Laboratory of Molecular Epigenetics of Ministry of Education,Northeast Normal University,Changchun 130024,China;3College of Life Science and Bioengineering,Shenyang University,Shenyang 110044,China
Online:
2021-10-25Published:
2021-11-01摘要/Abstract
摘要: 为研究大花君子兰(Clivia miniata)查尔酮合酶的结构及功能,基于前期构建的大花君子兰转录组数据库,对参与花青素合成的CHS基因家族进行鉴定和筛选。在大花君子兰中克隆得到4个CmCHS(CmCHS1 ~ CmCHS4),其开放阅读框全长分别为1 173、1 170、1 173和1 173 bp,编码390、389、390、390个氨基酸。氨基酸序列比对分析证实,CmCHS具备该基因家族典型的保守结构域。进化树分析结果显示,4条CmCHS属于真实的CHS,编码蛋白属于Ⅲ型聚酮合成酶(PKS),亚细胞定位于细胞质和细胞核中。基因表达特异性分析结果表明,CmCHS1和CmCHS2在花朵初开和盛开期表达量较高;CmCHS1、CmCHS2、CmCHS3在红色叶片和果皮中的表达量大大高于绿色叶片和果皮,CmCHS4则相对较低。构建原核表达载体pET-32-CmCHS,体外酶活检测表明,4个CmCHS重组蛋白皆可催化香豆酰辅酶A和丙二酰辅酶A生成柚皮素查尔酮。
中图分类号:
S 682.1+3
引用本文
刘 玥, 李月庆, 孟祥宇, 黄 靖, 汤 昊, 李源恒, 高 翔, 赵春莉, . 大花君子兰查尔酮合酶基因CmCHS的克隆及其功能验证[J]. 园艺学报, 2021, 48(10): 1847-1858.
LIU Yue, LI Yueqing, MENG Xiangyu, HUANG Jing, TANG Hao, LI Yuanheng, GAO Xiang, and ZHAO Chunli, . Cloning and Functional Characterization of Chalcone Synthase Genes(CmCHS)from Clivia miniata[J]. Acta Horticulturae Sinica, 2021, 48(10): 1847-1858.
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