芥蓝二氢黄酮醇4-还原酶基因BoaDFR的克隆与功能鉴定

郑好¹, 张芬¹, 简越¹, 黄文莉¹, 梁莎¹, 江敏¹, 袁巧¹, 汪俏梅², 孙勃^1,**()

¹四川农业大学园艺学院,成都 611130
²浙江大学农业与生物技术学院园艺系,杭州 310058

收稿日期:2020-05-19修回日期:2020-11-05出版日期:2021-01-25发布日期:2021-01-29
通讯作者:孙勃E-mail:bsun@sicau.edu.cn

基金资助:国家自然科学基金项目(32072586);国家自然科学基金项目(31500247);农业农村部转基因专项(2016ZX08009003-001);四川省科技厅项目(2018NZ0081);知食供应链科技有限公司科技项目(2020008)

Cloning and Function Identification of Dihydroflavonol 4-Reductase Gene BoaDFR in Chinese Kale

ZHENG Hao¹, ZHANG Fen¹, JIAN Yue¹, HUANG Wenli¹, LIANG Sha¹, JIANG Min¹, YUAN Qiao¹, WANG Qiaomei², SUN Bo^1,**()

¹College of Horticulture,Sichuan Agricultural University,Chengdu 611130,China
²Department of Horticulture,College of Agriculture and Biotechnology,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China

Received:2020-05-19Revised:2020-11-05Online:2021-01-25Published:2021-01-29
Contact:SUN Bo E-mail:bsun@sicau.edu.cn

摘要/Abstract

摘要： 以白花芥蓝‘四季粗条’为材料克隆了BoaDFR基因,GenBank登录号为MT472647,CDS序列长为1 158 bp,编码385个氨基酸,与甘蓝型油菜、甘蓝和白菜等具有高度同源性。BoaDFR表达水平在芥蓝不同发育时期、不同器官中存在显著差异,随植株发育总体呈现先下降后上升的趋势,在幼嫩种子中表达量最高。芥蓝原生质体的亚细胞定位结果显示BoaDFR定位在细胞核上。构建了农杆菌介导的芥蓝瞬时过表达体系,将BoaDFR转入白花芥蓝‘四季粗条’和黄花芥蓝‘福州黄花’中,发现BoaDFR在两种芥蓝中均高水平表达,转基因植株叶片颜色明显变紫,花青素苷显著积累,总含量最高达461.43 μg·g^-1 FW,而野生型和转空载体芥蓝叶片中几乎检测不到花青素苷。通过HPLC在转基因植株叶片中共检测到8种花青素苷,均为矢车菊花青素苷,其中矢车菊-3-阿魏酰-丙二酰-槐糖苷-5-葡萄糖苷占比最高。
中图分类号:
S635

引用本文

郑好, 张芬, 简越, 黄文莉, 梁莎, 江敏, 袁巧, 汪俏梅, 孙勃. 芥蓝二氢黄酮醇4-还原酶基因BoaDFR的克隆与功能鉴定[J]. 园艺学报, 2021, 48(1): 73-82.
ZHENG Hao, ZHANG Fen, JIAN Yue, HUANG Wenli, LIANG Sha, JIANG Min, YUAN Qiao, WANG Qiaomei, SUN Bo. Cloning and Function Identification of Dihydroflavonol 4-Reductase Gene BoaDFR in Chinese Kale[J]. Acta Horticulturae Sinica, 2021, 48(1): 73-82.





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