甘蓝BoMLPKn1的克隆及其拟南芥同源基因AtAPK1b的功能研究

施松梅1,3,*，高启国1,*，左同鸿2，蒲全明4，刘豫东1，刘贵喜1，朱利泉2,**，何新华3

1西南大学园艺园林学院，重庆 400716；2西南大学农学与生物科技学院，重庆 400716；3西南大学资源环境学院，重庆 400716；4南充市农业科学院，四川南充 637000

出版日期:2019-11-25发布日期:2019-11-25


基金资助:国家重点基础研究发展计划（‘973’计划）项目（2012CB113900）；国家自然科学基金项目（30900986，31572127）；重庆市自然科学基金重点项目（cstc2012jjB80010）

Cloning and Functional Analysis of BoMLPKn1’s Orthologs Gene AtAPK1b in Arabidopsis

SHI Songmei1,3,*，GAO Qiguo1,*，ZUO Tonghong2，PU Quanming4，LIU Yudong1，Liu Guixi1，ZHU Liquan2,**，and HE Xinhua3

1College of Horticulture and Landscape Architecture，Southwest University，Chongqing 400716，China；2College of Agronomy and Biotechnology，Southwest University，Chongqing 400716，China；3College of Resources and Environment，Southwest University，Chongqing 400716，China；4Nanchong Academy of Agricultural Sciences，Nanchong，Sichuan 637000，China

Online:2019-11-25Published:2019-11-25

摘要/Abstract

摘要： 在克隆甘蓝BoMLPK编码序列过程中，获得BoMLPKf1/2编码序列和1个新的转录文本（命名为BoMLPKn1）。BoMLPKf1/2和BoMLPKn1的cDNA大小分别为1 215、1 233和1 257 bp，分别编码含404、410和418个氨基酸残基的多肽链。与BoMLPKf1/2相比，BoMLPKn1有两个插入序列，一个是在1 102 ~ 1 114 bp之间有12个碱基的插入，另一个是在1 152 ~ 1 182 bp之间有30个碱基的插入。BoMLPKf1/2 定位在甘蓝3号染色体上，BoMLPKn1定位在4号染色体上。氨基酸序列比对发现，BoMLPKf1和BoMLPKn1的N端均含典型的豆蔻酰化基序，BoMLPKf2的N端含疏水结构域。3个转录文本均具有1个高度保守的Ser/Thr蛋白激酶结构域。RT-PCR检测发现自交不亲和甘蓝自花授粉15 min后BoMLPKf2相对表达量急剧升高，BoMLPKf1和BoMLPKn1在自花授粉15 min后相对表达量无明显变化。亚细胞定位检测到BoMLPKn1定位在细胞膜上。利用CRISPR-Cas9植物编辑系统对BoMLPKn1拟南芥直系同源基因AtAPK1b基因组进行定点敲除，获得突变体植株。与野生型相比，突变体植株均能够正常开花结籽。结果表明MLPKn1基因在整个十字花科进化中是高度保守的，不参与自交不亲和反应，这与MLPKf1/2不同。
中图分类号:
S 635

引用本文

施松梅1,3,*，高启国1,*，左同鸿2，蒲全明4，刘豫东1，刘贵喜1，朱利泉2,**，何新华3. 甘蓝BoMLPKn1的克隆及其拟南芥同源基因AtAPK1b的功能研究[J]. 园艺学报, 2019, 46(11): 2164-2175.
SHI Songmei1,3,*，GAO Qiguo1,*，ZUO Tonghong2，PU Quanming4，LIU Yudong1，Liu Guixi1，ZHU Liquan2,**，and HE Xinhua3. Cloning and Functional Analysis of BoMLPKn1’s Orthologs Gene AtAPK1b in Arabidopsis[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2019, 46(11): 2164-2175.





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