柑橘4种病毒多重PCR检测技术的建立及应用
黄爱军*,王 莹,丁 敏,卢占军,易 龙赣南师范大学生命科学学院,国家脐橙工程技术研究中心,江西赣州 341000
出版日期:
2019-08-25发布日期:
2019-08-25基金资助:
江西省重点研发计划项目(20161ACF60016);国家自然科学基金项目(31860488)Establishment and Application of Multiplex PCR Rapid Detection of Four Citrus Viruses
HUANG Aijun*,WANG Ying,DING Min,LU Zhanjun,and YI LongCollege of Life Sciences,Gannan Normal University,National Navel Orange Engineering Research Center,Ganzhou,Jiangxi 341000,China
Online:
2019-08-25Published:
2019-08-25摘要/Abstract
摘要: 柑橘衰退病毒(CTV)、柑橘碎叶病毒(CTLV)、柑橘黄化脉明病毒(CYVCV)和柑橘叶斑驳病毒(CLBV)是影响柑橘生产的重要病毒性病害,建立快速、准确的检测方法是防控该病害的基础。本研究通过筛选针对4种病毒基因组保守区域设计的特异性引物,优化影响多重RT-PCR扩增的引物浓度、退火温度,建立了可同时扩增4种病毒的多重RT-PCR检测体系。该检测体系扩增的特异片段大小分别是CTLV 889 bp、CYVCV 612 bp、CTV 462 bp和CLBV 294 bp,扩增产物清晰,特异,检测灵敏度较普通单重RT-PCR灵敏度低约10倍。采用多重RT-PCR和单重RT-PCR对收集到的59份田间样品分别进行检测,结果显示2种方法检测结果一致,4种病毒的检出率在11.9% ~ 54.2%之间。建立的多重RT-PCR方法可准确、快速、灵敏地检测单一或复合侵染的4种柑橘病毒。
中图分类号:
S 666
引用本文
黄爱军*,王 莹,丁 敏,卢占军,易 龙. 柑橘4种病毒多重PCR检测技术的建立及应用[J]. 园艺学报, 2019, 46(8): 1616-1622.
HUANG Aijun*,WANG Ying,DING Min,LU Zhanjun,and YI Long. Establishment and Application of Multiplex PCR Rapid Detection of Four Citrus Viruses[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2019, 46(8): 1616-1622.
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