柑橘鳞皮病毒RT-LAMP检测方法的建立与应用

李 敏，周天宇，吴佳星，周 彦，曹孟籍*，李中安*

西南大学，中国农业科学院柑桔研究所，重庆 400712

出版日期:2019-07-25发布日期:2019-07-25


基金资助:国家重点研发计划政府间国际科技创新合作重点专项（2017YFE0110900）；重庆市基础科学与前沿技术研究专项（cstc2017jcyjBX0016）；重庆市研究生科研创新项目（CYS18133，CYS17086）

Establishment and Application of Loop-mediated Isothermal Amplification on Citrus psorosis virus

LI Min，ZHOU Tianyu，WU Jiaxing，ZHOU Yan，CAO Mengji*，and LI Zhongan*

Citrus Research Institute，Southwest University，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Chongqing 400712，China

Online:2019-07-25Published:2019-07-25

摘要/Abstract

摘要： 根据NCBI数据库柑橘鳞皮病毒（Citrus psorosis virus，CPsV）的外壳蛋白（coat protein，CP）基因序列设计了4组特异性引物，通过一系列优化，筛选并获得1组特异性引物。以感染CPsV的柑橘叶片总RNA为模板，采用一步法RT-LAMP（One-step reverse transcription loop-mediated isothermal amplification），在60 ℃下反应60 min，对扩增产物进行琼脂糖电泳分析，同时测定其特异性和灵敏度。结果表明，建立的RT-LAMP检测方法能特异性扩增CPsV，灵敏度为RT-PCR的10倍。用RT-LAMP 方法对87个田间样品进行检测，发现有5个样品感染了CPsV，其检测结果与RT-PCR法一致。RT-LAMP法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点，适合对CPsV样品的快速检测与鉴定。
中图分类号:
S 666

引用本文

李 敏，周天宇，吴佳星，周 彦，曹孟籍*，李中安*. 柑橘鳞皮病毒RT-LAMP检测方法的建立与应用[J]. 园艺学报, 2019, 46(7): 1409-1416.
LI Min，ZHOU Tianyu，WU Jiaxing，ZHOU Yan，CAO Mengji*，and LI Zhongan*. Establishment and Application of Loop-mediated Isothermal Amplification on Citrus psorosis virus[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2019, 46(7): 1409-1416.





PDF全文下载地址:

http://www.ahs.ac.cn/CN/article/downloadArticleFile.do?attachType=PDF&id=6758