葡萄病毒A实时荧光定量RT-PCR检测技术的建立及应用

任 芳，董雅凤*，张尊平，范旭东，胡国君

（中国农业科学院果树研究所，国家落叶果树脱毒中心，辽宁兴城 125100）

出版日期:2018-11-25发布日期:2018-11-25

Development and Application of a Quantitative RT-PCR Approach for Detection of Grapevine virus A

REN Fang，DONG Yafeng*，ZHANG Zunping，FAN Xudong，and HU Guojun*

（National Center for Eliminating Viruses from Deciduous Fruit Trees，Research Institute of Pomology，Chinese Academy of Agriculture Sciences，Xingcheng，Liaoning 125100，China）

Online:2018-11-25Published:2018-11-25

摘要/Abstract

摘要： 根据文献报道和GenBank已登录序列设计引物建立了葡萄病毒A（Grapevine virus A，GVA）SYBR GreenⅠ染料法实时荧光定量RT-PCR检测技术体系。该技术标准曲线循环阈值与模板浓度呈现良好线性关系，扩增效率为99.2%，决定系数为0.999，可特异性检测GVA，灵敏度高（达常规RT-PCR的100倍），重复性好。对不同季节、不同品种以及不同部位葡萄样品（嫩叶、嫩叶柄、老叶、老叶柄、卷须和休眠枝条）中GVA的检出率普遍高于常规RT-PCR。不同季节间比较，对秋、冬季样品检测效果最好，除嫩叶外其余部位检出率均达100%，春夏季检出率为10% ~ 100%。不同部位间比较，老叶柄和休眠枝条检测效果最好，检出率均达100%，其次为老叶（80% ~ 100%），其余部位样品检出率为10% ~ 100%。在大量田间样品检测中，休眠枝条样品检测结果与常规RT-PCR一致，而秋季老叶柄样品检出率明显高于常规RT-PCR。
中图分类号:
S 663.1

引用本文

任 芳，董雅凤*，张尊平，范旭东，胡国君. 葡萄病毒A实时荧光定量RT-PCR检测技术的建立及应用[J]. 园艺学报, 2018, 45(11): 2243-2254.
REN Fang，DONG Yafeng*，ZHANG Zunping，FAN Xudong，and HU Guojun*. Development and Application of a Quantitative RT-PCR Approach for Detection of Grapevine virus A[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2018, 45(11): 2243-2254.





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