结球甘蓝自交系YL-1的高效遗传转化体系的建立及应用
崔慧琳1,2,李志远2,方智远2,杨丽梅2,庄 木2,吕红豪2,刘玉梅2,宋江华1,*,张扬勇2,*1安徽农业大学园艺学院,合肥 230036;2中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京 100081
出版日期:
2019-02-25发布日期:
2019-02-25基金资助:
国家重点研发计划项目(2016YFD0101702);国家自然科学基金项目(31572141,31272170)Establishment and Application of YL-1 High-efficiency Genetic Transformation System in Cabbage(Brassica oleracea L. var. capitata)
CUI Huilin1,2,LI Zhiyuan2,FANG Zhiyuan2,YANG Limei2,ZHUANG Mu2,Lü Honghao2,LIU Yumei2,SONG Jianghua1,*,and ZHANG Yangyong2,*1College of Horticulture,Anhui Agriculture University,Hefei 230036,China;2Institute of Vegetables and Flowers,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081,China
Online:
2019-02-25Published:
2019-02-25摘要/Abstract
摘要: 为了筛选结球甘蓝高效遗传转化受体材料,以高代自交系YL-1、21-3、12J35、650为试材,比较不同材料具柄子叶和下胚轴的再生频率差异。在4份供试材料中,YL-1为最优转化受体,再生频率显著高于其他3份材料;YL-1具柄子叶和下胚轴的再生频率无显著差异,均可用于遗传转化。进一步对YL-1遗传转化过程中光照强度、Basta除草剂浓度、农杆菌侵染浓度等关键影响因素进行优化,发现光照强度为4 000 lx时更有利于不定芽诱导;除草剂最适筛选浓度为8 mg · L-1;农杆菌侵染浓度OD600 = 0.3侵染8 min,YL-1抗性芽再生频率最高。基于建立的高效遗传转化体系,共获得47株抗除草剂植株,PCR检测显示其中12株为阳性,初步表明bar基因已转化到甘蓝中,转化率达到2.18%。利用转录组测序技术对2株PCR阳性材料进行基因表达分析,均检测到bar基因高效表达。甘蓝高代自交系YL-1高效遗传转化体系的建立可为今后结球甘蓝基因功能鉴定及重要农艺性状的改良提供基础。
中图分类号:
S 635.1
引用本文
崔慧琳1,2,李志远2,方智远2,杨丽梅2,庄 木2,吕红豪2,刘玉梅2,宋江华1,*,张扬勇2,*. 结球甘蓝自交系YL-1的高效遗传转化体系的建立及应用[J]. 园艺学报, 2019, 46(2): 345-355.
CUI Huilin1,2,LI Zhiyuan2,FANG Zhiyuan2,YANG Limei2,ZHUANG Mu2,Lü Honghao2,LIU Yumei2,SONG Jianghua1,*,and ZHANG Yangyong2,*. Establishment and Application of YL-1 High-efficiency Genetic Transformation System in Cabbage(Brassica oleracea L. var. capitata)[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2019, 46(2): 345-355.
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