柑橘黄化脉明病毒基因组的长链RT-PCR扩增、克隆及序列分析

崔甜甜，王艳娇，宾 羽，李中安，周常勇，宋 震*

西南大学/中国农业科学院柑桔研究所，国家柑橘工程技术研究中心，重庆400712

出版日期:2017-05-25发布日期:2017-05-25

Long RT-PCR，Cloning and Sequencing of Full-length Genome of Citrus yellow vein clearing virus

CUI Tiantian，WANG Yanjiao，BIN Yu，LI Zhongan，ZHOU Changyong，and SONG Zhen*

Citrus Research Institute，Southwest University/Chinese Academy of Agricultural Sciences；National Citrus Engineering Research Center，Chongqing 400712，China

Online:2017-05-25Published:2017-05-25

摘要/Abstract

摘要： 为了建立柑橘黄化脉明病毒（Citrus yellow vein clearing virus，CYVCV）基因组长链RT-PCR扩增体系，构建其全长cDNA克隆，为深入了解CYVCV分子特性及其致病机理奠定基础。根据GenBank中CYVCV基因组序列和5′ RACE扩增结果设计引物。以感染CYVCV的代代酸橙（Citrus aurantium ‘Daidai’）植株总RNA为模板进行长链RT-PCR扩增，得到CYVCV全基因组cDNA，克隆至pGEM-Teasy载体，并进行序列测定与分析。结果显示，建立了一步扩增CYVCV全基因组的长链RT-PCR方法，扩增出约7.5 kb的目标片段；所获得的4个CYVCV全基因组cDNA序列与GenBank中已登录的相关毒株的核苷酸序列同源性为93% ~ 99%。

引用本文

崔甜甜，王艳娇，宾 羽，李中安，周常勇，宋 震*. 柑橘黄化脉明病毒基因组的长链RT-PCR扩增、克隆及序列分析[J]. 园艺学报, 2017, 44(5): 944-952.
CUI Tiantian，WANG Yanjiao，BIN Yu，LI Zhongan，ZHOU Changyong，and SONG Zhen*. Long RT-PCR，Cloning and Sequencing of Full-length Genome of Citrus yellow vein clearing virus[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2017, 44(5): 944-952.





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