太子参芜菁花叶病毒和蚕豆萎蔫病毒的双重RT-PCR检测
匡云波1,2,陈满足1,陆伊荣1,陈 晶1,叶祖云1,2,*(1宁德师范学院生物系,福建宁德 352100;2福建省特色药用植物工程技术研究中心,福建宁德 352100)
出版日期:
2017-04-25发布日期:
2017-04-25Detection of Turnip mosaic virus and Broad bean wilt virus in Pseudostellaria heterophylla by Duplex RT-PCR
KUANG Yunbo1,2,CHEN Manzu1,LU Yirong1,CHEN Jing1,and YE Zuyun1,2,*(1Biology Department,Ningde Normal University,Ningde,Fujian 352100,China;2Engineering Research Center for Medical Plants with Fujian Provincial Characteristics,Ningde,Fujian 352100,China)
Online:
2017-04-25Published:
2017-04-25摘要/Abstract
摘要: 针对不同产地栽培的太子参(Pseudostellaria heterophylla)中主要存在芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)和蚕豆萎蔫病毒(Broad bean wilt virus,BBWV)侵染且为害严重的情况,建立能同时检测这2种病毒的双重RT-PCR快速检测方法。根据GenBank数据库中的TuMV、BBWV外壳蛋白(coat protein,CP)基因核苷酸序列的保守区域分别设计简并引物,在单一RT-PCR检测体系的基础上,建立和优化双重RT-PCR检测体系。双重RT-PCR的优化结果显示,最佳扩增循环数为35,最佳引物浓度为0.4 μmol ? L-1,最佳退火温度为51 ℃。其灵敏度测定结果显示,2种病毒在样品cDNA稀释至原液的10-4倍后仍能扩增出特异条带。应用该方法对7份栽培太子参样品和4份脱毒苗样品进行了检测,结果表明,建立的双重RT-PCR检测方法可稳定、准确、灵敏地同时检测TuMV和BBWV。
中图分类号:
S 432.4+1
S 567
引用本文
匡云波1,2,陈满足1,陆伊荣1,陈 晶1,叶祖云1,2,*. 太子参芜菁花叶病毒和蚕豆萎蔫病毒的双重RT-PCR检测[J]. 园艺学报, 2017, 44(4): 784-791.
KUANG Yunbo1,2,CHEN Manzu1,LU Yirong1,CHEN Jing1,and YE Zuyun1,2,*. Detection of Turnip mosaic virus and Broad bean wilt virus in Pseudostellaria heterophylla by Duplex RT-PCR[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2017, 44(4): 784-791.
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