lichun@bit.edu.cn
国家****科学基金获得者
教授
抗逆高效生物转化系统的构建与应用

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微生物耐热元器件的构建及其与底盘宿主的适配性研究

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产紫青霉β-葡萄糖醛酸苷酶的晶体结构解析及其催化识别研究

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若干植物源化合物的人工合成体系构建-甘草酸及其衍生物的生物合成

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耐热耐乙醇酵母的改造与中试试验

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生物制备甘草次酸和GAMG的中试研发

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合成植物天然产物的微生物细胞工厂构建及应用示范

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微生物合成萜烯化合物过程中的跨膜转运与代谢传质强化

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燃料乙醇生产优良菌株选育及产业应用
一种微重力环境下膜式离心转轴生物反应器

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一种间歇补料发酵生产单葡萄糖醛酸基甘草次酸的方法

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一种微重力和模拟微重力环境下膜生物反应器

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一种枯草芽孢杆菌的混菌协同发酵工艺

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一种构建酿酒酵母工程菌生产β-香树脂醇的方法

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一种制备β-葡萄糖醛酸苷酶粗酶制剂的方法

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一种硫醇过氧化物酶提高毕赤酵母外源蛋白质表达量的方法

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一种分离甘草总三萜、甘草总黄酮和甘草总多糖的方法

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一种制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸的方法

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一种提高酿酒酵母耐热性的分子调控方法

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一种利用蛋白支架提高大肠杆菌中异戊二烯合成的方法

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一种微生物智能梯级耐热调控方法

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一种同步分离甘草有效成分的方法
本发明涉及一种微重力环境下膜式离心转轴生物反应器,属于生物设备制造工程领域。包括反应器壳体、挡板、氧气供应组件、膜式离心转轴和参数测量装置;挡板焊接在反应器壳体的内壁上,挡板上有支撑孔,挡板支撑固定氧气供应组件,氧气供应组件环形缠绕在挡板的支撑孔上;膜式离心转轴的顶端固定连接在反应器壳体的顶端,膜式离心转轴的底端位于反应器壳体的底部的上方。本发明的反应器适合于微重力环境下,培养体系内氧气的高效率供给,气液传质均匀,微生物细胞的高效培养与尾气二氧化碳的快速、高效分离和排放。

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本发明涉及一种间歇补料发酵生产单葡萄醛酸基甘草次酸(GAMG)的方法,属于生物转化技术领域。该方法通过补加底物甘草酸及无机盐,既补充了营养物质,使得菌体能够在适宜的环境下生长,又促进了目的产物的合成;发酵结束后,GAMG产量达到13～24g/L,该方法可有效提高GAMG发酵产量,延长转化周期,提高设备利用率,降低产品生产成本。

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本发明涉及一种悬浮生物细胞高效培养的膜生物反应器装置,特别涉及一种用于微重力和模拟微重力环境下的膜生物反应器,主要用于微重力环境和作为地面模拟微重力实验装置进行悬浮生物细胞的长时间培养和生物学效应研究以及重组蛋白的高效制备研究。本发明的膜生物反应器装置能实现微重力环境和地面模拟微重力环境下悬浮生物细胞的长时间高效培养、多参数实时检测和自动调控。

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本技术方案涉及一种枯草芽孢杆菌的混菌协同发酵工艺,属于微生物工程领域。方案选取对枯萎病、霉腐病及黄萎病等不同病原菌有较强的抑制作用的三株不同类型枯草芽孢杆菌,采用混合发酵工艺,分别对三株菌株各自进行斜面培养、摇瓶培养,再按照一定比例混合接种,进行混菌的种子罐培养与发酵罐培养。对发酵时的培养基选择、pH值、温度、通气量及三株菌的接种量比例等工艺进行了优化。与传统的单菌株发酵工艺相比,本技术方案发酵工艺简化,效率提高、生产成本降低,发酵液中有效活菌数≥1012cfu/ml。

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本发明提供了一种酿酒酵母工程菌生产β-香树脂醇的方法，属于生物化工领域。本发明从白色念珠菌中克隆2,3-氧化鲨烯单氧酶基因，利用酿酒酵母组成型启动子构建基因表达盒，通过酿酒酵母的同源重组功能实现基因表达盒与质粒的组装，从而强化了2,3-氧化鲨烯单氧酶并导入了β-香树脂醇合酶。本发明的酿酒酵母工程菌代谢葡萄糖直接合成β-香树脂醇，β-香树脂醇的合成与酿酒酵母生长耦合，实现了植物次生代谢产物β-香树脂醇的酿酒酵母人工合成，该方法不需要效应剂诱导、工艺简单，可用于发酵生产β-香树脂醇。

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本发明涉及一种制备β-葡萄糖醛酸苷酶粗酶制剂的方法，属于生物技术(发酵工程)领域。本发明向含有甘草酸或甘草酸盐的产酶培养基中加入外源促进剂，其中外源促进剂为甘草总提取物、或甘草总多糖和/或甘草总黄酮，促进菌株产紫青霉Penicillium purpurogenum Li-3（保藏号:CGMCC No.5446）诱导产生β-葡萄糖醛酸苷酶，对比不加促进剂产酶提前5～48小时，酶活提高了10～200%。

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本发明针对提高毕赤酵母外源重组蛋白质制备能力，公开了一种硫醇过氧化物酶作为辅助因子提高毕赤酵母外源重组蛋白质表达量的方法。本发明将硫醇过氧化物酶基因与来自毕赤酵母或酿酒酵母的诱导型启动子或组成型启动子相连接，构建基因表达载体，转化入表达外源重组蛋白质的甲醇诱导型毕赤酵母菌株中进行共表达或过表达。该发明为提高细胞生产重组蛋白质的能力和生物反应效率提供新方法，对于生物技术过程强化具有重要价值。

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一种分离甘草总三萜、甘草总黄酮和甘草总多糖的方法，属于医药、食品和化工领域。本发明利用甘草中三萜类、黄酮类和多糖类成分化学结构特点以及在不同溶剂中、不同pH下的溶解特性，使甘草提取物中主要活性成分即黄酮类、三萜类和多糖类成分同步分离。本方法不仅工艺简单、步骤少，溶剂可重复使用，成本大大降低，而且分离效果好，得率和纯度都很高，并且三大类成分在同一生产线上分离出来，避免了单一成分提取分离造成其它有效成分损失。

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本发明涉及一种制备单葡萄糖醛酸基甘草次酸(GAMG)的方法，属于食品添加剂领域。本发明向含有甘草酸(或其盐)的培养基中添加促进剂甘草总提物、或甘草总多糖和/或甘草总黄酮，促进Penicillium purpurogenum Li-3诱导产生β-葡萄糖醛酸苷酶，酶活提高0.5～5倍。转化甘草总提物或甘草总三萜中甘草酸及其类似物生成GAMG，分离纯化发酵液中GAMG。本发明不仅提高了酶活,而且避免以甘草酸(或其盐)为碳源甘草酸(或其盐)复杂提取分离过程，降低生产成本。

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针对现代生物医药与轻工业食品产业体系中，微生物控温发酵生产过程高能耗的问题。本发明提供一种提高酿酒酵母耐热性的分子调控方法，属于生物化工领域。以嗜热菌，耐热菌中的热激蛋白、泛素、ATP合成酶基因以及酿酒酵母中热激蛋白基因作为功能元件，以酿酒酵母中不同强度启动子作为调控元件，通过单功能、多功能、协同型3种不同组装方式构建耐热元器件，构建的耐热元器件再以载体和基因组整合2种策略导入酵母细胞中

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本发明提供了一种利用蛋白支架将大肠杆菌MEP途径中的脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶、脱氧木酮糖-5-磷酸还原异构酶和2-甲基赤藓糖醇-4-焦磷酸合成酶共区域化，提高异戊二烯生产的方法。本发明从枯草芽孢杆菌和大肠杆菌中分别克隆了所需靶酶分子的基因，构建成增强MEP代谢途径的重组质粒，合成银白杨异戊二烯合成酶基因并构建外源表达蛋白支架以及异戊二烯合成酶的重组质粒，将两种重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中，获得可以通过蛋白支架将三种靶酶分子共区域化提高异戊二烯合成的大肠杆菌工程菌株。

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发酵过程中，微生物的生长和生产经常遭受热胁迫的限制。以构建耐热大肠杆菌底盘宿主为目的，本发明利用合成生物学方法创建了一种微生物智能梯级耐热调控方法，能在细胞和菌群两个层面上提高微生物的耐热性，其主要包括梯级耐热系统和数量调控系统。梯级耐热系统以人工设计的RNA温敏开关与启动子组合为调控元件，实现微生物的梯级耐热。微生物数量调控系统则利用群体感应系统和RNA温敏开关组合为与门开关，动态地开启利他性程序死亡系统。通过两个系统的协同作用，提高了微生物对特定高温以及高温波动的适应性与鲁棒性。

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一种同步分离甘草有效成分的方法，属于医药、食品和化工领域。本发明利用甘草中黄酮类、三萜类和多糖类成分化学结构特点以及在不同溶剂中、不同pH下的溶解特性，使甘草提取物中三大类主要活性成分同步分离。本方法不仅避免了单一或间歇性提取分离造成另一些有效成分流失，而且用碱性溶剂提取后大大提高了有效成分的提取率和分离三大类成分的得率和纯度，并减少试剂用量，方法简便易行，能耗低，成本低，更加适于工业化生产。
Novel trends for producing plant triterpenoids in yeast.

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A Novel β-Glucuronidase from Talaromyces pinophilus Li-93 Precisely Hydrolyzes Glycyrrhizin into Glycyrrhetinic Acid 3-O-Mono

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Enhancing oleanolic acid production in engineered Saccharomyces cerevisiae

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Toward the lowest energy consumption and emission in biofuel production: combination of ideal reactors and robust hosts.

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Structure-guided engineering of the substrate specificity of a fungal β-glucuronidase toward triterpenoid saponins

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Biosynthesis of Plant Triterpenoid Saponins in Microbial Cell Factories.

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Productive Amyrin Synthases for Efficient α-amyrin Synthesis in Engineered Saccharomyces cerevisiae

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Design of Glyco-Linkers at Multiple Structural Levels to Modulate Protein Stability

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Boosting 11-oxo-β-amyrin and glycyrrhetinic acid synthesis in Saccharomyces cerevisiae via pairing novel oxidation and reduct

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Sequence Editing Strategy for Improving Performance of β-glucuronidase from Aspergillus terreus

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Immobilization of purified β-glucuronidase on ZnO nanoparticles for efficient biotransformation of glycyrrhizin in Ionic liqu

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Engineering of the terpenoid pathway in Saccharomyces cerevisiae co-overproduces squalene and the non-terpenoid compound olei

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Enhancing the thermostability of β-glucuronidase by rationally redesigning the catalytic domain based on sequence alignment s

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Intelligent Microbial Heat-Regulating Engine (IMHeRE) for Improved Thermo-Robustness and Efficiency of Bioconversion.

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Overproduction of squalene synergistically downregulates ethanol production in

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An environment friendly and efficient process for xylitol bioconversion from enzymatic corncob hydrolysate by adapted Candida

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Advances in bioprocessing for efficient biomanufacture

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Refactoring β-Amyrin synthesis in Saccharomyces cerevisiae

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Efficient biosynthesisofglycyrrheticacid3-O-mono-β-D-glucuronide (GAMG)inwater-miscibleionicliquidbyimmobilizedwholecellsof P

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Enhancing stress-resistance for efficient microbial biotransformations by synthetic biology

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Microbial diversity and community distribution in different functional zones of continuous aerobic–anaerobic coupled process

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Characteristics and vegetable oils degumming of recombinant phospholipase B

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Enhanced pathway efficiency of Saccharomyces cerevisiae by introducing thermo-tolerant devices

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Simultaneous in-situ excess sludge reduction and removal of organic carbon and nitrogen by a pilot-scale continuous aerobic–a

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Novel helper factors influencing recombinant protein production in Pichia pastoris based on proteomic analysis under simulate

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A novel pathway construction in Candida tropicalis for direct xylitol conversion from corncob xylan

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Direct and efficient xylitol production from xylan by Saccharomyces cerevisiae through transcriptional level and fermentation

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Bifunctional graphene/？-Fe2O3 hybrid aerogels with double nanocrystalline networks for enzyme immobilization

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N-glycosylation enhances functional and structural stability of recombinant

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Encapsulation of R. planticola Rs-2 from alginate-starch-bentonite and its controlled release and swelling behavior under sim

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N-linked glycosylation influences on the catalytic and biochemical properties of Penicillium purpurogenum glucuronidase

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Cloning and expression of a gene with phospholipase B activity from Pseudomonas fluorescens in Escherichia coli

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Transcriptional profiling of protein expression related genes of Pichia pastoris under simulated microgravity