铜绿微囊藻气囊结构蛋白GvpC的表达纯化与晶体生长研究
许柏英1,2,*(),张甜甜11. 重庆师范大学生命科学学院, 重庆 401331
2. 中国科学技术大学生命科学学院, 安徽 合肥 230026
收稿日期:
2018-04-17出版日期:
2018-11-01发布日期:
2018-11-14通讯作者:
许柏英E-mail:xbywh@126.com作者简介:
许柏英(1987—),女,副教授,博士,研究方向为蛋白质的结构与功能. E-mail:基金资助:
重庆市前沿与应用基础研究计划资助项目(cstc2015jcyjBX0142);重庆市前沿与应用基础研究计划资助项目(cstc2016jcyjA0375)Expression, purification and crystallization of gas vesicle structure protein GvpC from the cyanobacterium Microcystis aeruginosa
Bo-ying XU1,2,*(),Tian-tian ZHANG11. College of Life Sciences, Chongqing Normal University, Chongqing 401331, China
2. School of Life Sciences, University of Science and Technology of China, Heifei 230026, Anhui, China
Received:
2018-04-17Online:
2018-11-01Published:
2018-11-14Contact:
Bo-ying XU E-mail:xbywh@126.comSupported by:
重庆市前沿与应用基础研究计划资助项目(cstc2015jcyjBX0142);重庆市前沿与应用基础研究计划资助项目(cstc2016jcyjA0375)摘要/Abstract
摘要: 对GvpC进行了初步晶体学研究。首先对GvpC进行分子克隆,利用原核表达系统在体外进行异源表达;结合变复性和凝胶过滤层析的方法纯化GvpC;通过圆二色谱的方法鉴定GvpC的复性效果;运用坐滴蒸汽扩散法进行晶体初筛。结果表明:GvpC在大肠杆菌表达系统中表达为包涵体;通过变复性和凝胶过滤层析能纯化出纯度较高的蛋白;圆二色谱证实复性后的GvpC形成了正确的二级结构,复性效果较佳;通过晶体初筛获得了GvpC的晶体,后续即可通过解析GvpC的晶体结构而获得其三维结构。
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