项目级别：院科学研究基金（院级）
起止时间：2013.06- 2015.05
参加人员：原 韬、 谷 军 、夏海华
项目简介：该项目根据GenBank中已登录的基因组序列，设计特异性引物，Kan（F），Kan（R），XylA（F），XylA（R）用于鉴定扩增Kanr基因敲除。设计ADH1，TAL1，TKL1，HXT2，TKL1，TEF1基因荧光定量PCR引物，利用pSH65质粒转化初始菌株，经筛选、鉴定成功敲除初始菌株外源抗性基因，获得1株无外源抗性基因工程菌株SC18-2377，对工程菌株进行了混合糖生长驯化，驯化后获得菌株SC18-23771，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNO：10667。经葡萄糖、木糖混合碳源发酵实验，该菌株木糖利用率较出发菌株有所提高。实时定量检测了乙醇转化过程中5种酶mRNA变化情况，驯化后菌株乙醇转化过程中TAL1、HXT2基因表达量有较大提高是代谢过程中的关键酶。为进一步开发并高效葡萄糖、木糖混合底物发酵转化乙醇奠定了基础
