摘要： 【目的】对绿豆象Callosobruchus chinensis气味结合蛋白(odorant binding proteins, OBPs)基因进行克隆、鉴定和组织表达分析，为研究OBPs在绿豆象嗅觉感受过程中的功能奠定基础。【方法】基于绿豆象触角转录组数据，通过RT-PCR克隆绿豆象6个OBP基因并进行生物信息学分析；通过qRT-PCR分析OBP基因在绿豆象雌雄成虫头(不含触角)、触角、腹、足和翅各组织中的表达情况。【结果】获得了6个绿豆象OBP基因的开放阅读框，命名为CchiOBP1-CchiOBP6(GenBank登录号: MN832700-MN832703, MN901841-MN901842)；CchiOBP5为一段C端不完整的Minus-C OBP，其余均属于完整的Classical OBPs，预测6个CchiOBPs均含有信号肽。系统发育分析表明CchiOBP1, CchiOBP2和CchiOBP5与叶甲科(Chrysomelidae)昆虫OBPs的亲缘关系较近，CchiOBP3, CchiOBP4和CchiOBP6与天牛科(Cerambycidae)昆虫OBPs的亲缘关系较近。qRT-PCR结果表明，6个CchiOBPs基因在绿豆象成虫的触角、头(不含触角)、腹、翅和足部均有不同的表达量，CchiOBP1-4和CchiOBP6在雌雄成虫触角中均呈现高表达，且极显著高于在其他组织中的。CchiOBP5在雌成虫触角和头部(不含触角)中呈现高表达，但在雄成虫中表现为在足部的表达量显著高于在其他组织中的，在触角中的表达量最低。【结论】确定了绿豆象6个CchiOBPs基因的核苷酸和氨基酸序列组成，其中有5个CchiOBPs基因在绿豆象雌雄成虫触角中高表达，推测其在绿豆象嗅觉识别寄主植物过程中发挥重要作用。
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绿豆象气味结合蛋白基因的克隆及表达分析
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
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