摘要: 【目的】本研究旨在克隆琥珀蚕Antheraea assama丝腺转录因子基因AaSGF-1,分析其序列特征及表达模式并制备多克隆抗体,为探讨该基因的生理功能奠定基础。【方法】采用RT-PCR和RACE技术从琥珀蚕丝腺中克隆AaSGF-1的cDNA序列,并进行生物信息学分析;利用qPCR检测AaSGF-1在琥珀蚕5龄第4天幼虫不同组织(头、中肠、脂肪体、丝腺、血液、表皮)中的表达模式;构建原核表达质粒载体,在大肠杆菌Escherichia coli BL21中表达AaSGF-1,利用纯化的融合蛋白免疫新西兰兔子,获得高效的抗体。利用免疫荧光技术检测AaSGF-1在琥珀蚕蚁蚕丝腺和表皮及4龄幼虫丝腺中的表达情况。【结果】克隆了琥珀蚕AaSGF-1的cDNA序列(GenBank登录号: MK889510.1),开放阅读框(ORF)序列长1 050 bp,编码349个氨基酸残基,预测蛋白分子质量为38.8 kD,理论等电点(pI)为8.74。qPCR检测结果显示AaSGF-1在琥珀蚕5龄幼虫丝腺组织尤其是后部丝腺中高量表达,而在其他组织中几乎不表达。免疫荧光结果表明AaSGF-1在蚁蚕及4龄幼虫的丝腺中表达。【结论】本研究原核表达了琥珀蚕AaSGF-1,制备了多克隆抗体,证实了AaSGF-1在琥珀蚕幼虫的丝腺中高表达,为进一步研究该基因在琥珀蚕丝腺发育及丝蛋白合成中的作用奠定了基础。
PDF全文下载地址:
http://www.insect.org.cn/CN/article/downloadArticleFile.do?attachType=PDF&id=6635
删除或更新信息,请邮件至freekaoyan#163.com(#换成@)
琥珀蚕丝腺转录因子基因AaSGF-1的克隆、原核表达及组织表达分析
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
相关话题/序列 免疫 基因 组织 基础
Mdogg1基因参与家蝇体内氧化还原平衡的维持
摘要:【目的】本研究旨在克隆鉴定家蝇Muscadomestica中8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(8-hydroxyguanineglycosylase1,OGG1)编码基因Mdogg1,明确其是否参与家蝇氧化应激调控。【方法】根据家蝇转录组数据,利用RT-PCR克隆Mdogg1基因cDNA序列,并进行生物 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03昆虫抗药性相关细胞色素P450基因的表达调控机制
摘要:杀虫剂的频繁持续使用,必然导致昆虫产生抗药性。大量研究事例表明参与杀虫剂解毒的细胞色素P450(简称P450)过量表达是昆虫对不同类型杀虫剂产生抗性的重要原因,但目前人们对P450基因过量表达机制的认识还非常有限。近十年来,随着生命科学与相关研究技术的发展,有关昆虫P450基因表达调控机制的研 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03蒙古寒蝉末龄若虫与成虫复眼的形态、组织结构和超微结构
摘要:【目的】本研究旨在明确蒙古寒蝉Meimunamongolica末龄(5龄)若虫与成虫复眼的差异,探讨蝉总科昆虫在若虫与成虫生态位发生改变的过程中复眼的形态结构及功能变化。【方法】采用光学显微镜、扫描电子显微镜和透射电子显微镜技术,详细观察和比较研究了蒙古寒蝉末龄若虫和成虫复眼的一般形态、组织结 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03基于线粒体基因序列的中国橙黄豆粉蝶遗传分化和谱系生物地理研究(英文)
摘要:【目的】分析中国橙黄豆粉蝶Coliasfieldii种群遗传多样性和遗传分化情况及其系统发生关系,推测其起源及分化时间,并探讨其历史生物地理分布格局的成因。【方法】对2006-2018年采集的中国23个橙黄豆粉蝶地理种群的115头个体样品的4个线粒体基因(COI,Cytb,NDI和ND5)序列 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03基于蜜蜂球囊菌纳米孔测序数据的基因非翻译区延长、SSR位点发掘及未注释基因和转录本鉴定
摘要:【目的】利用已获得的纳米孔长读段测序数据完善现有的蜜蜂球囊菌Ascosphaeraapis参考基因组注释信息,并对未注释的新基因和新转录本进行鉴定和功能注释。【方法】基于已获得的纳米孔长读段测序数据,采用gffcompare软件将蜜蜂球囊菌全长转录本与参考基因组注释的转录本进行比较,进而对参考 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03基于线粒体基因和核基因的中华虎凤蝶指名亚种地理种群遗传分化分析
摘要:【目的】探讨中华虎凤蝶指名亚种Luehdorfiachinensischinensis地理种群的遗传分化情况。【方法】采用PCR技术对中华虎凤蝶指名亚种5个地理种群60头个体的线粒体COI基因和3个非编码核基因(ITS2,Pgi-intron和Tpi-intron)片段进行扩增,利用MEGA, ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03转基因抗除草剂大豆对大豆田节肢动物及杂草多样性的影响
摘要:【目的】随着转基因作物种植面积的不断加大,其生态安全问题也越来越受到关注。对生物多样性的影响研究作为转基因作物环境安全释放的必要环节,亦是客观评价其风险的重要手段。本研究旨在分析抗除草剂大豆对大豆田节肢动物及杂草多样性的影响。【方法】2019年6-9月,调查安徽合肥分别种植4种处理大豆品种[喷 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03花椒窄吉丁触角转录组及嗅觉相关基因分析
摘要:【目的】建立花椒窄吉丁Agriluszanthoxylumi成虫触角转录组数据库,挖掘嗅觉相关基因,为今后研究其触角的化学感受机制及生物防控提供理论支撑。【方法】采用高通量测序平台IlluminaNovaSeq6000对花椒窄吉丁雌雄成虫触角进行转录组测序,用Trinity软件对获得的高质量r ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03景观基因组学的研究进展及其在害虫综合治理中的应用
摘要:随着测序技术和生物信息学的快速发展,昆虫基因组学及其相关研究成果与日俱增。把农田景观要素嵌入基因组结构、适应性遗传变异和基因功能的研究,揭示在特定景观背景下害虫适应性和致害性的分子机理,是景观基因组学与害虫治理研究的新领域。景观基因组学是景观生态学与种群基因组学的交叉学科,旨在探究生物对所处环 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03埃及伊蚊不同组织的基因共表达模式分析
摘要:【目的】利用权重基因共表达网络分析(weightedgeneco-expressionnetworkanalysis,WGCNA)探索埃及伊蚊Aedesaegypti不同组织基因共表达模式。【方法】从NCBISRA数据库中选择埃及伊蚊不同组织的转录组数据中具代表性的9种组织(雌雄成蚊的触角和脑 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03