转Cry1Ac青花菜回交后代鉴定方法研究

李占省，张黎黎，张小丽，舒金帅，苏彦宾，孙继峰，刘玉梅*，方智远，杨丽梅，庄 木，张扬勇，吕红豪

中国农业科学院蔬菜花卉研究所，农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室，北京 100081

出版日期:2018-01-25发布日期:2018-01-25

Studies on Identification Methods in Backcross Generation of Cry1Ac-transgenic Broccoli

LI Zhansheng，ZHANG Lili，ZHANG Xiaoli，SHU Jinshuai，SU Yanbin，SUN Jifeng，LIU Yumei*，FANG Zhiyuan，YANG Limei，ZHUANG Mu，ZHANG Yangyong，and Lü Honghao

LI Zhansheng，ZHANG Lili，ZHANG Xiaoli，SHU Jinshuai，SU Yanbin，SUN Jifeng，LIU Yumei*，FANG Zhiyuan，YANG Limei，ZHUANG Mu，ZHANG Yangyong，and Lü Honghao

Online:2018-01-25Published:2018-01-25

摘要/Abstract

摘要： 转Bt基因青花菜在遗传分离后代中的鉴定方法，对于准确筛选阳性单株和抗虫材料具有重要影响。利用5份青花菜材料、1份阳性对照（转Cry1Ac基因纯合材料）和5份回交父本（阴性对照）为试验对象，在基因水平上对Cry1Ac进行普通PCR扩增，蛋白水平上采用Bt-Cry1Ab/1Ac转基因检测试纸条测定，表观上采用小菜蛾离体饲虫试验进行抗性鉴定，比较阐明了3种方法的鉴定效果和优缺点。结果表明，3种方法分别从5份青花菜回交材料的159个分离单株中检测到82、77和75份阳性株，经卡方显著性检验，各材料阳性单株与非阳性单株分离后代均符合孟德尔遗传规律。分析表明，小菜蛾离体饲虫试验对于鉴定转Cry1Ac后代抗虫效果准确可靠，但需要很好地控制实验条件；Bt-Cry1Ab/1Ac转基因检测试纸条灵敏度高，可快速观察到Bt毒蛋白的实际表达量，基本不受条件限制，但必须控制人为误差；普通PCR扩增能够鉴定阳性株，但不能反映实际抗虫效果，必须结合小菜蛾饲虫试验或Bt毒蛋白水平上的检测才能实现精准鉴定。

引用本文

李占省，张黎黎，张小丽，舒金帅，苏彦宾，孙继峰，刘玉梅*，方智远，杨丽梅，庄 木，张扬勇，吕红豪. 转Cry1Ac青花菜回交后代鉴定方法研究[J]. 园艺学报, 2018, 45(1): 97-108.
LI Zhansheng，ZHANG Lili，ZHANG Xiaoli，SHU Jinshuai，SU Yanbin，SUN Jifeng，LIU Yumei*，FANG Zhiyuan，YANG Limei，ZHUANG Mu，ZHANG Yangyong，and Lü Honghao. Studies on Identification Methods in Backcross Generation of Cry1Ac-transgenic Broccoli[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2018, 45(1): 97-108.





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