基于牡丹类黄酮糖基转移酶基因建立VIGS技术体系
舒庆艳1,*,朱 瑾1,2,*,门思琦1,2,郝 青3,王倩玉1,2,刘政安1,曾秀丽4,王亮生1,2,**1中国科学院北方资源植物重点实验室/中国科学院植物研究所北京植物园,北京 100093;2中国科学院大学,北京 100049;3青岛农业大学园林与林学院,山东青岛 266109;4西藏自治区农牧科学院蔬菜研究所,拉萨 850032
出版日期:
2018-01-25发布日期:
2018-01-25Establishing Virus Induced Gene Silencing(VIGS)System in Tree Peony Using PsUFGT Genes
SHU Qingyan1,*,ZHU Jin1,2,*,MEN Siqi1,2,HAO Qing3,WANG Qianyu1,2,LIU Zheng’an1,ZENG Xiuli4,and WANG Liangsheng1,2,**1Key laboratory of Plant Resources and Beijing Botanical Garden,Institute of Botany,The Chinese Academy of Sciences,Beijing 100093,China;2University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100049,China;3Landscape and Forestry College,Qingdao Agricultural University,Qingdao,Shandong 266109,China;4Institute of Vegetables,Tibet Academy of Agricultural and Animal Husbandary Sciences,Lhasa 850032,China
Online:
2018-01-25Published:
2018-01-25摘要/Abstract
摘要: 牡丹(Paeonia suffruticosa Andrews)花色的化学基础研究较为深入,但因其无遗传转化体系,导致花色相关基因的功能验证只能利用其他植物进行旁证。利用保守区段长分别为413和418 bp的牡丹花瓣类黄酮糖基转移酶基因PsUF3GT和PsUF5GT,通过VIGS表达载体,采用二因素三水平的试验体系对目的基因进行沉默。结果表明,PsUF3GT和PsUF5GT的表达量在花斑中(盛开期花瓣,真空抽滤15 min)和非斑中(蕾期花瓣,真空抽滤10 min)分别比空载体处理的花斑中(盛开期花瓣,真空抽滤10 min)和非斑中(蕾期花瓣,真空抽滤15 min)降低了65.0%和85.0%;花斑中总花青苷含量分别降低了24.2%和28.2%,尤其是盛开期花瓣(真空抽滤15 min)处理后3G型糖苷降低了92.2%,蕾期花瓣 (真空抽滤10 min)处理后3G5G型糖苷降低了54.9 %。由此获得了沉默PsUF3GT和PsUF5GT的适宜体系:以盛开期或者花蕾期带花柄的花朵为材料,抽真空渗透10 ~ 15 min后,置于去离子水中暗培养1 d(8 ℃,湿度60%);之后转移至23 ~ 25 ℃、湿度60%的环境,光照培养3 d后可用于检测和分析。本研究中建立的VIGS体系可有效沉默花瓣中的内源基因,为牡丹基因功能验证及其花色形成的分子机制研究奠定了基础。
引用本文
舒庆艳1,*,朱 瑾1,2,*,门思琦1,2,郝 青3,王倩玉1,2,刘政安1,曾秀丽4,王亮生1,2,**. 基于牡丹类黄酮糖基转移酶基因建立VIGS技术体系[J]. 园艺学报, 2018, 45(1): 168-176.
SHU Qingyan1,*,ZHU Jin1,2,*,MEN Siqi1,2,HAO Qing3,WANG Qianyu1,2,LIU Zheng’an1,ZENG Xiuli4,and WANG Liangsheng1,2,**. Establishing Virus Induced Gene Silencing(VIGS)System in Tree Peony Using PsUFGT Genes[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2018, 45(1): 168-176.
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