落葵皱缩花叶病毒CP基因的原核表达及多克隆抗血清的制备
李小琴1，张鹏远1,2，任龙辉1,3，代瑾然1，王建光1,*，陈穗云1,*（1云南大学生命科学学院，昆明 650091；2西南林业大学生命科学学院，昆明 650224；3云南香料烟有限责任公司，云南保山 678000）
出版日期:2017-10-25发布日期:2017-10-25Prokaryotic Expression of Basella rugose mosaic virus CP Gene and Preparation of Its Polyclonal Antiserum
LI Xiaoqin1，ZHANG Pengyuan1,2，REN Longhui1,3，DAI Jinran1，WANG Jianguang1,*，and CHEN Suiyun1,*（1School of Life Sciences，Yunnan University，Kunming 650091，China；2School of Life Science，Southwest Forestry University，Kunming 650224，China；3Yunnan Oriental Tobacco Co.，Ltd.，Baoshan，Yunnan 678000，China）
Online:2017-10-25Published:2017-10-25摘要/Abstract
摘要： 以感病紫茉莉叶片为材料，采用RT-PCR方法克隆落葵皱缩花叶病毒（Basella rugose mosaic virus，BaRMV）的外壳蛋白（coat protein，CP）基因，并构建pET30a-BaRMV-cp原核表达载体。将原核表达载体转化大肠杆菌[Rosetta(DE3)PlysS]，成功诱导表达得到大小约为40.0 kD的与预期大小相符的融合蛋白（His-CP）。SDS-PAGE电泳完毕后用0.25 mol ? L-1的KCl溶液染色，将目的蛋白切胶纯化后免疫新西兰大白兔，制备抗血清。间接酶联免疫吸附法（ID-ELISA）检测该抗体的效价为1︰16 000，Western-blotting分析表明该抗体具有很强的特异性。对野外感病紫茉莉和实验室内接种发病本氏烟检测结果也表明，所制备的抗体具有良好的特异性，可用于大规模样品检测。
中图分类号:
S 681.9
引用本文
李小琴1，张鹏远1,2，任龙辉1,3，代瑾然1，王建光1,*，陈穗云1,*. 落葵皱缩花叶病毒CP基因的原核表达及多克隆抗血清的制备[J]. 园艺学报, 2017, 44(10): 2001-2007.
LI Xiaoqin1，ZHANG Pengyuan1,2，REN Longhui1,3，DAI Jinran1，WANG Jianguang1,*，and CHEN Suiyun1,*. Prokaryotic Expression of Basella rugose mosaic virus CP Gene and Preparation of Its Polyclonal Antiserum[J]. ACTA HORTICULTURAE SINICA, 2017, 44(10): 2001-2007.
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