doi:10.12202/j.0476-0301.2020408李坤义,
李森^,
北京师范大学生命科学学院，北京师范大学生命科学与技术国家级实验教学示范中心，100875，北京
基金项目:国家自然科学基金资助项目（32071222）；北京市教育委员会共建基金资助项目

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通讯作者:李森（1973—），男，博士，教授. 研究方向：蛋白质的结构与功能. E-mail：lisen@bnu.edu.cn

中图分类号:Q518.4; Q556

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出版历程

收稿日期:2020-12-15
网络出版日期:2021-06-23
刊出日期:2021-09-02

Effect of crowded environment on unfolding of alkaline phosphatase

Kunyi LI,
Sen LI^,
College of Life Sciences, National Demonstration Center for Experimental Life Sciences & Biotechnology Education, Beijing Normal University, 100875, Beijing, China



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摘要
摘要:为了更好地模拟细胞内的真实环境，在碱性磷酸酶的变性环境中分别加入小分子渗透剂（蔗糖）和大分子拥挤试剂（葡聚糖），创造拥挤环境，利用酶活力测定和荧光光谱等方法，研究该拥挤环境对碱性磷酸酶稳定性的影响作用．实验结果表明：在碱性磷酸酶由盐酸胍导致的变性过程中，蔗糖与葡聚糖可抑制碱性磷酸酶活力的丧失，随着蔗糖与葡聚糖的质量浓度增加，其抑制效果随之增强；荧光光谱的检测结果也表明蔗糖和葡聚糖对碱性磷酸酶的去折叠具有一定的抑制作用．在2种试剂中，蔗糖对碱性磷酸酶活力与构象稳定性的保护能力要强于葡聚糖．
关键词:大分子拥挤试剂/
渗透剂/
碱性磷酸酶/
蛋白质稳定性
Abstract:The effect of macromolecular crowding agent dextran 70 and osmolyte sucrose on unfolding of alkaline phosphatase was studied by monitoring changes in enzymatic activity and fluorescence emission spectra．Both dextran 70 and sucrose were found to stabilize the activity and conformation of alkaline phosphatase in GdmCl-induced unfolding．Protection against GdmCl-induced unfolding afforded by sucrose was stronger than by dextran 70．
Key words:macromolecular crowding/
osmolyte/
alkaline phosphatase/
protein stability