龙钢 研究员 | 博士生导师

学科 病毒学

课题组 病毒组装与宿主研究组




电话 +86
邮箱 glong@ips.ac.cn
地址 上海市岳阳路320号生命科学实验楼

研究方向
病毒组装与宿主





个人简介 龙钢研究员，主要从事病毒膜融合蛋白研究和HCV形态和生物化学特征的研究。系统性研究了一种新型膜融合蛋白的结构与功能;构建了适用基于HCV膜蛋白E2 N端Flag肽段标记的亲和纯化型的HCV病毒载体，首次实现了感染性病毒粒子与宿主脂蛋白颗粒和其他大量杂志的分离，并对纯化的病毒粒子的生物化学特性进行多方面的研究;构建了多个包含HCV反式组装系统的细胞系，并成功的实现了感染性HCV病毒颗粒在小鼠肝细胞中的组装和释放。申请人从事科研工作以来共发表论文15篇，其中第一作者论文8篇。所有研究成果分别发表在Gastroenterology，PLoS Pathogens,Biomaterials，J Virol，J Biol Chem等国际知名期刊上。现承担“十二五”国家科技重大专项子课题、973丙肝项目,中国科学院知识创新工程项目等。

学术兼职 　 课题组长：龙钢博士研究员 　　科研助理：郭巾旭、赵凡凡、马鹏娟
　　研究生：张小龙、蒋望、王萧宁、邓力宾、吕大为、Fawad Mu？ammad
　　已毕业研究生：于琨、杨再立、赵婷


发表论文和专利 1. Zhao F, Zhao T, Deng L, Lv D, Zhang X, Pan X, Xu J, Long G. Visualizingthe Essential Role of Complete Virion Assembly Machinery in EfficientHepatitis C VirusCell-to-Cell Transmission by a Viral Infection-Activated Split-Intein-Mediated Reporter System. J Virol. 2017 Jan 3;91(2).
2. Zhao F, Zhao T, Deng L, Lv D, Zhang X, Pan X, Xu J, Long G.Visualizing the essential role of complete virion assembly machinery in efficient Hepatitis C virus cell-to-cell transmission by viral infection activated split-intein mediated reporter system (VISI).J Virol.2016 Nov 16. pii: JVI.01720-16..
3. Yang Z,Wang X,Chi X,Zhao F,Guo J,Ma P,Zhong J,Niu J,Pan X,Long G.Neglected but Important Role of Apolipoprotein E Exchange in Hepatitis C Virus Infection.J Virol.2016 Oct 14;90(21):9632-9643.
4. Zayas M, Long G, Madan V, Bartenschlager R. Coordination of Hepatitis C Virus Assembly by Distinct Regulatory Regions in Nonstructural Protein 5A. PLoS Pathog. 2016Jan4;12(1):e**.
5. Metz P,Chiramel A,Chatel-Chaix L,Alvisi G,Bankhead P,Mora-Rodriguez R,Long G,Hamacher-Brady A,Brady NR,Bartenschlager R.Dengue Virus Inhibition of Autophagic Flux and Dependency of Viral Replication on Proteasomal Degradation of the Autophagy Receptor p62.J Virol.2015 Aug;89(15):8026-41.
6. Lee JY,Acosta EG,Stoeck IK,Long G,Hiet MS,Mueller B,Fackler OT,Kallis S,Bartenschlager R.Apolipoprotein E likely contributes to a maturation step of infectious hepatitis C virus particles and interacts with viral envelope glycoproteins.J Virol.2014 Nov;88(21):12422-37.
7. Da Costa D,Turek M,Felmlee DJ,Girardi E,Pfeffer S,Long G,Bartenschlager R,Zeisel MB,Baumert TF.Reconstitution of the entire hepatitis C virus life cycle in nonhepatic cells.J Virol.2012 Nov;86(21):11919-25.
8. Da Costa D,Turek M,Felmlee DJ,Girardi E,Pfeffer S,Long G,Bartenschlager R,Zeisel MB,Baumert TF.Reconstitution of the entire hepatitis C virus life cycle in nonhepatic cells. J. Virol.J Virol.2012 Nov;86(21):11919-25.
9. Long G,Hiet MS,Windisch MP,Lee JY,Lohmann V,Bartenschlager R. Mouse hepatic cells support assembly of infectious hepatitis C virus particles.Gastroenterology.2011Sep;141(3):1057-66.Comments in: Model systems for hepatitis C research: the cup half empty? 2011 Gastroenterology, 141(3):806-9 and Exiting from uncharted territory: Hepatitis C virus assembles in mouse cell lines. 2012 Hepatology, 55(2):645-8.
10.Merz A*,Long G*,Hiet MS,Brügger B,Chlanda P,Andre P,Wieland F,Krijnse-Locker J,Bartenschlager R. Biochemical and Morphological properties of hepatitis C virus particles and determination of their lipidome.J Biol Chem.2011 Jan 28;286(4):3018-32.(* Co-first authors)
11.Zheng F,Huang Y,Long G,Sun X,Wang H.Helicoverpar armigera single nucleocapsid nucleopolyhedrovirus ORF51 is a ChaB homologous gene involved in budded virus production and DNA replication.VirusRes.2011 Jan;155(1):203-12.
12.Pietschmann T,Zayas M,Meuleman P,Long G,Appel N,Koutsoudakis G,Kallis S,Leroux-Roels G,Lohmann V,Bartenschlager R.Production of infectious genotype 1b virus particles in cell culture and impairment by replication enhancing mutations.PLoS Pathog.2009 Jun;5(6):e**.
13.Long G*,Pan X*,Vlak JM.Conserved leucines in N-terminal heptad repeat HR1 of envelope fusion protein F of group II nucleopolyhedroviruses are important for correct processing and essential for fusogenicity.J Virol.2008 Mar;82(5):2437-47.(* Co-first authors)
14.Pan X,Long G,Wang R,Hou S,Wang H,Zheng Y,Sun X,Westenberg M,Deng F,Wang H,Vlak JM,Hu Z.Deletion of a Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus gene encoding a virion structural protein (ORF107) increases the budded virion titre and reduces in vivo infectivity.J Gen Virol.2007 Dec;88(Pt 12):3307-16.
15.Long G,Pan X,Vlak JM.Absence of N-linked glycans from the F2 subunit of the major baculovirus envelope fusion protein F enhances fusogenicity.J Gen Virol.2007 Feb;88(Pt 2):441-9.
16. Long G,Pan X,Westenberg M,Vlak JM.Functional role of the cytoplasmic tail domain of the major envelope fusion protein of group II baculovirus.J Virol.2006 Nov;80(22):11226-34.
17.Long G,Pan X,Kormelink R,Vlak JM.Functional entry of Baculovirus into insect cells and mammalian cells is dependent on clathrin-mediated endocytosis.J Virol.2006 Sep;80(17):8830-3.
18. Long G,Westenberg M,Wang H,Vlak JM,Hu Z.Function, Oligomerization and N-linked glycosylation of the Helicoverpa armigera SNPV envelope fusion protein.J Gen Virol.2006 Apr;87(Pt 4):839-46.
19. Dong C,Li D,Long G,Deng F,Wang H,Hu Z.Identification of functional domains required for HearNPV P10 filament formation.Virology.2005 Jul 20;338(1):112-20.
20. Long G,Chen X,Peters D,Vlak JM,Hu Z.Open reading frame 122 of Helicoverpa armigera single nucleocapsid nucleopolyhedrovirus encodes a novel structural protein of occlusionderived virions.J Gen Virol.2003 Jan;84(Pt 1):115-21.
　　Book Chapter
　　1.Bartenschlager, R., G. Long, and D. Moradpour. 2008. Chronic hepatitis C: Portrait of a silent epidemic and the etiologic agent, p95-120. In Olaf, W., and Ulrike, P., (ed), Comparative Hepatitis. ISBN: 978-3-7643-8557-6, A Birkh？user book.


科研进展和成果 本课题组的研究方向为HCV的分子生物学，侧重于研究病毒感染过程的早期和晚期，研究感染性病毒颗粒的入侵细节，组装过程和宿主相互作用等。希望通过这些研究，揭示病毒组装和释放过程中的关键事件加深人们对HCV入侵和组装的认知，并期望以此为靶标开发干扰病毒组装和传播的新药物。课题组将基于HCV分子病毒研究方法，逐步建立正向遗传学,功能基因组学、蛋白质组学，生物影像以及系统生物学手段；对重要的细胞因子在HCV组装，释放和入侵过程中的重要作用进行系统性研究。
　　Topic1，感染性HCV病毒颗粒的多重标记和病毒入侵研究。
　　运用现代标记技术（如荧光蛋白，荧光化合物，量子点等）研究病毒与宿主的相互作用的一个热点。这些研究包括病毒与特异性受体的结合，病毒在细胞表面的动态移动和病毒运用细胞内吞途径侵入细胞等。结合HCV核心蛋白的N端Tetracysteine标记，脂类和核酸化学标记，载脂蛋白荧光标记和HCV感染性病毒颗粒纯化（Merz，Long et al., 2011），建立一个新方法用来快速分离核衣壳和包膜多重标记的感染性病毒颗粒。这样的病毒颗粒可以用来研究HCV感染性病毒粒子在膜表面的聚集，与细胞受体的相互作用和病毒利用细胞内吞途径等分子机制。通过对这些机制的了解，提出新的抗病毒感染的策略。
　　Topic2，对感染性HCV病毒颗粒蛋白质组的研究。
　　HCV是一种特异的高度依赖宿主脂蛋白和脂类的病毒，这也导致了HCV的不均一性甚于其他传统的病毒。已有的研究证明，HCV和宿主极低密度脂蛋白VLDL合成通路紧密相关。但人们对感染性HCV病毒粒子精确的分子组成知之甚少。我们拟通过HCV正向遗传学方法获得高产感染性HCV病毒粒子的毒株,利用HCV感染性病毒颗粒的亲和纯化方法（Merz，Long et al., 2011），纯化出大量的感染性HCV病毒粒子来研究感染性病毒粒子的病毒蛋白和宿主蛋白成分。通过研究这些蛋白和它们之间可能的复合体，深入了解感染性HCV病毒粒子对宿主蛋白的依赖。
　　Topic3，载脂蛋白调控HCV病毒组装的机制。
载脂蛋白E（ApoE）是HCV感染生活史中非常关键的一个宿主蛋白(Chang et al.,2007, Long et al.,2011)。ApoE参与病毒颗粒的形态发生，决定了病毒的感染性，说明在感染性病毒粒子的组装过程中它发挥了关键作用。但人们对载脂蛋白E在何时，何处和以何种方式调控病毒组装等分子机制并不了解。我们将构建一个可供病毒复制并能精细调控ApoE表达的细胞系统，研究ApoE参与组装并决定病毒感染性的详细机制。


奖励荣誉

实验室介绍 科研助理：马鹏娟
　　研究生：王萧宁、吕大为
　　已毕业研究生：于琨、杨再立、赵婷、张小龙、赵凡凡、邓力宾、蒋望