摘要： 【目的】fruitless (fru)是昆虫求偶和交配行为中的关键基因，但是其在桔小实蝇Bactrocera dorsalis中的具体功能尚不清楚。本研究旨在明确fru在桔小实蝇求偶交配行为中的作用，进一步明确fru的生物学意义。【方法】根据NCBI上桔小实蝇fru的预测序列设计两端引物，以桔小实蝇羽化10 d已交配的成虫头部cDNA为模板克隆fru基因的全长cDNA，并对其编码蛋白的结构域进行预测。通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测该基因在桔小实蝇交配前后表达量的变化。待合成fru基因的dsRNA后，注射到羽化9 d后的桔小实蝇雄成虫腹部进行RNAi，分别于注射后48 h和72 h取样，检测fru基因的相对表达量；并于RNAi后72 h进行求偶交配行为观察，测定桔小实蝇的交配频率和交配持续时间。【结果】克隆获得桔小实蝇fru的全长cDNA，长2 865 bp，编码954个氨基酸，预测蛋白分子量104.1 kD，等点为6.01。该基因所编码的蛋白具有特殊结构域，分别为一个BTB (Broad-complex, Tramtrack and Bric-a-bric)结构域和两个锌指(zinc finger)结构域。RT-qPCR结果表明，相比未交配的桔小实蝇成虫，fru基因在雄成虫头部中的表达量在与雌成虫交配后显著上升。相对于空白对照组(注射DEPC水)和阴性对照组(注射dsGFP)，注射dsfru的RNAi处理组的雄性求偶时间延长(延长了25~35 min)，且交配频率下降(降低了17%~22%)，说明fru基因在雄性桔小实蝇的求偶交配行为中发挥着重要作用。【结论】本研究结果为明确fru在非模式昆虫桔小实蝇求偶交配行为中的功能提供参考，并为深入研究桔小实蝇的求偶交配行为和绿色防控提供了理论基础。
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fruitless在桔小实蝇求偶和交配行为中的作用
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
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