摘要： 【目的】探究细胞色素P450基因AsCYP6Z2是否与中华按蚊Anopheles sinensis抗拟除虫菊酯有关。【方法】克隆中华按蚊AsCYP6Z2基因的编码区。采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR， qPCR)检测该基因在中华按蚊溴氰菊酯敏感品系(WX-LS)和抗性品系(YN-LR)雌蚊不同发育阶段的表达和在敏感品系雌蛹不同组织中的表达。雌蛹腹部后端分别在25 mg/mL溴氰菊酯溶液和纯丙酮溶液(对照)中体外培养后，采用qPCR检测AsCYP6Z2在溴氰菊酯处理组和丙酮对照组中的表达差异。于化蛹后10 h分别注射dsAsCYP6Z2(RNAi组)和dsEGFP(对照组)，采用qPCR检测AsCYP6Z2在RNAi组和对照组中的表达差异；采用生物测定方法测定RNAi组和对照组中雌成蚊接触0.05%溴氰菊酯药膜1 h内的击倒率及雌成蚊接触0.05%溴氰菊酯药膜1 h并恢复24 h时的死亡率。通过分子对接预测该基因与溴氰菊酯相互作用的氨基酸残基。【结果】克隆获得了AsCYP6Z2基因(GenBank登录号： MT840336)的编码区，其开放阅读框(ORF)长1 251 bp，编码416个氨基酸，无信号肽和跨膜结构域。发育表达谱表明，AsCYP6Z2基因主要在化蛹30 h至成蚊3 h期间高表达，且抗性品系的基因表达量明显高于敏感品系的；组织表达谱显示该基因在腹部后端的表达量较高，其次是在腹部前端和胸部，在头部的表达量最低。雌蛹腹部后端在25 mg/mL溴氰菊酯溶液中培养12 h和24 h后，处理组中AsCYP6Z2的表达量相比于对照组(纯丙酮培养组)分别上调4倍和13倍。RNAi干扰AsCYP6Z2后，RNAi组中AsCYP6Z2基因的表达量相较于对照组(dsEGFP注射组)下调了约80%。雌成蚊接触0.05%溴氰菊酯药膜1 h后，RNAi组中的个体比对照组中的约提前20 min出现明显的击倒现象，且击倒率明显高于对照组；雌成蚊接触0.05%溴氰菊酯药膜1 h并恢复24 h后，RNAi组中的个体死亡率相比对照组增加了17%, 表明沉默AsCYP6Z2基因导致蚊虫对溴氰菊酯的敏感度显著增加。溴氰菊酯与AsCYP6Z2预测蛋白的分子对接研究结果显示，溴氰菊酯可以进入AsCYP6Z2蛋白的结合口袋，并且与Cys-155形成Pi-硫相互作用以及产生较稳定的氢键，侧链也可与AsCYP6Z2的Ala-165, Val-72, Leu-76, Leu-82和Ala-24等氨基酸残基形成稳定的疏水相互作用网络。【结论】研究结果表明AsCYP6Z2基因参与中华按蚊溴氰菊酯抗性表型的维持，这为进一步探究该基因在拟除虫菊酯类杀虫剂代谢过程中的分子机理奠定了前期基础。
PDF全文下载地址:
http://www.insect.org.cn/CN/article/downloadArticleFile.do?attachType=PDF&id=6565
删除或更新信息，请邮件至freekaoyan#163.com(#换成@)
细胞色素P450基因AsCYP6Z2在中华按蚊溴氰菊酯抗性维持中的作用
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
相关话题/基因 培养 组织 信号 干扰
领限时大额优惠券,享本站正版考研考试资料!
优惠券领取后72小时内有效，10万种最新考研考试考证类电子打印资料任你选。涵盖全国500余所院校考研专业课、200多种职业资格考试、1100多种经典教材，产品类型包含电子书、题库、全套资料以及视频，无论您是考研复习、考证刷题，还是考前冲刺等，不同类型的产品可满足您学习上的不同需求。 ...考试优惠券 本站小编 Free壹佰分学习网 2022-09-19绿眼赛茧蜂线粒体基因组全序列测定和分析
摘要：【目的】测定绿眼赛茧蜂Zelechlorophthalmus线粒体基因组全序列，分析其基因组结构及茧蜂科(Braconidae)部分类群的系统发育关系。【方法】利用IlluminaMiSeq二代测序技术对绿眼赛茧蜂的线粒体基因组进行测序，对基因组序列进行拼装、注释，分析其结构特点和碱基组成；基 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03基于线粒体基因组序列的鞘翅目肉食亚目水生类群系统发育分析
摘要：【目的】明确肉食亚目(Adephaga)水生类群线粒体基因组的基本特征，并基于线粒体基因组序列分析肉食亚目水生类群的系统发育关系。【方法】基于IlluminaHiSeqXTen测序技术测定了圆鞘隐盾豉甲Dineutusmellyi和齿缘龙虱Eretessticticus的线粒体全基因组序列，对 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03沙葱萤叶甲表皮蛋白基因的鉴定及表达谱分析
摘要：【目的】表皮蛋白是昆虫体壁的主要组成部分，在昆虫生长发育中起着重要的作用。本研究旨在鉴定沙葱萤叶甲Galerucadaurica表皮蛋白基因，分析其表达模式，以期为进一步研究其在沙葱萤叶甲生长发育中的作用提供必要的基础。【方法】根据本实验室组装的沙葱萤叶甲转录组测序数据，应用生物信息学方法鉴定 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03褐飞虱丝氨酸蛋白酶抑制剂基因Nlserpin4的克隆及表达模式分析
摘要：摘要:【目的】克隆和分析褐飞虱Nilaparvatalugens丝氨酸蛋白酶抑制剂基因Nlserpin4，并探明其时空表达谱和病原真菌诱导表达模式。【方法】基于褐飞虱转录组和全基因组序列数据，利用PCR技术克隆得到褐飞虱Nlserpin4基因的全长cDNA序列；利用生物信息学手段分析其核苷酸和 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03疆夜蛾Plus-C气味结合蛋白PsauOBP7的组织表达谱及配体结合特性分析
摘要：【目的】明确疆夜蛾PeridromasauciaPlus-C气味结合蛋白PsauOBP7在不同化学感受器官中的表达谱，解析PsauOBP7重组蛋白的气味结合特异性。【方法】通过qRT-PCR检测PsauOBP7在疆夜蛾雌蛾和雄蛾的触角、口器、足和翅中的表达谱。原核表达并纯化PsauOBP7重组 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂Bmserpin2对酚氧化酶原激活和抗菌肽基因表达的抑制作用
摘要：【目的】丝氨酸蛋白酶抑制剂家族蛋白是昆虫中调控自身免疫反应的重要蛋白酶抑制剂，本研究旨在研究家蚕Bombyxmori丝氨酸蛋白酶抑制剂2(Bmserpin2)在家蚕2个重要的自身免疫通路即酚氧化酶原(prophenoloxidase,PPO)激活通路和革兰氏阳性菌诱导抗菌肽的TOLL通路中的调 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03小菜蛾基因组中内源性逆转录病毒元件PxERV的发现与特征分析
摘要：【目的】内源性逆转录病毒(endogenousretroviruses,ERVs)是一类在宿主基因组中世代留存的有类似病毒结构的序列元件。本研究在通过前期小菜蛾Plutellaxylostella精巢转录组分析发现一个小菜蛾内源性逆转录病毒元件PxERV的基础上，探究该逆转录病毒元件的序列特征 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03转飞蝗羧酸酯酶基因果蝇品系的构建及其在有机磷农药代谢解毒中的作用
摘要：【目的】在活体水平验证飞蝗Locustamigratoria羧酸酯酶基因LmCesA1和LmCesA2是否参与有机磷杀虫剂的代谢解毒。【方法】采用Gal4/UAS系统，借助转基因技术，构建两个转基因黑腹果蝇Drosophilamelanogaster品系，选取3品系Gal4(act-Gal4, ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03梨小食心虫生物钟基因Gmper和Gmtim的鉴定及其对羽化节律的影响
摘要：【目的】本研究旨在探究梨小食心虫Grapholitamolesta生物钟基因Gmper和Gmtim的分子特性与表达模式，分析其对羽化节律的调控作用，为梨小食心虫的防控提供潜在新靶标。【方法】根据梨小食心虫转录组数据，采用PCR技术克隆生物钟基因Gmper和Gmtim的cDNA全长；利用RT-q ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03二点委夜蛾非典型嗅觉受体AlepOrco的基因克隆、原核表达及多克隆抗体制备
摘要：【目的】非典型嗅觉受体(olfactoryreceptorco-receptor,Orco)与典型嗅觉受体共同形成离子通道，在昆虫嗅觉识别中具有至关重要的作用。本研究旨在克隆和表达二点委夜蛾AthetislepigoneOrco基因，明确其分子特性，为进一步研究该基因在二点委夜蛾中的功能奠定基 ...中科院动物研究所 本站小编 Free考研考试 2022-01-03
