摘要： 【目的】明确烟粉虱Bemisia tabaci MED隐种抑制蛋白基因Btarrestin是否参与吡虫啉耐药性。【方法】根据已有烟粉虱转录组数据，利用RT-PCR克隆Btarrestin的全长序列，进行生物信息学分析。通过qPCR分析Btarrestin在烟粉虱MED隐种各个龄期(卵，1-2龄、3龄、4龄若虫，雌、雄成虫)以及吡虫啉处理(100 mg/L)后成虫中的表达量变化，明确其时空表达模式。利用RNAi技术沉默Btarrestin，观察沉默前后Btarrestin表达量和烟粉虱MED隐种成虫死亡率变化。【结果】成功克隆烟粉虱MED隐种Btarrestin的cDNA序列(GenBank登录号: MK204377)，编码区全长1 227 bp，编码409个氨基酸，预测所编码的蛋白分子量约为45.33 kD，理论等电点(pI)为8.38。保守结构域分析表明，Btarrestin具有Arrestin_N和Arrestin_C两个超家族保守结构域，符合抑制蛋白家族特征。分子系统树分析表明，Btarrestin与褐飞虱Nilaparvata lugens的Arrestin亲缘关系最近。Btarrestin的表达量随烟粉虱MED隐种的生长发育逐渐升高，成虫期表达量最高。100 mg/L吡虫啉处理成虫24 h后Btarrestin的表达量较对照增加了2.39倍。RNAi干扰Btarrestin后进行生物测定，烟粉虱MED隐种成虫的死亡率上升了31.27％。【结论】Btarrestin可能与烟粉虱MED隐种对吡虫啉的耐药性有关。
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烟粉虱MED隐种抑制蛋白基因Btarrestin的克隆及特性分析
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
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