摘要： 【目的】灵活操控靶基因的表达水平对于研究基因的功能十分重要。Gal4/UAS系统已被广泛应用于调控基因表达，可研究果蝇Drosophila等模式生物复杂的生物学问题。受采用载体的特性及插入位点的影响，Gal4或UAS转基因品系在构建好之后，其调控靶基因的能力基本是确定的。本研究旨在在现有Gal4/UAS系统的基础上，开发一种新的策略，实现在果蝇翅芽中灵活操控wingless(wg)基因的表达水平。【方法】用遗传学手段将黑腹果蝇Drosophila melanogaster品系的UAS-wg和UAS-wg-RNAi转基因重组到同一黑腹果蝇品系中。将该重组黑腹果蝇品系与dpp-Gal4黑腹果蝇品系杂交，同时驱动UAS-wg和UAS-wg-RNAi在果蝇幼虫翅芽中共表达。杂交子代幼虫分别放置在不同的温度(18, 25和30℃)下培养。将幼虫翅芽解剖并进行免疫组化染色，测量染色的荧光强度，分析翅芽中wg的表达水平。【结果】在低温(18℃)下，UAS-wg在基因表达调控中起主要作用，wg表现为超表达，但其超表达的效率可被UAS-wg-RNAi有效地削弱。相反，在高温(30℃)下，UAS-wg-RNAi起主导作用，wg的表达受到抑制。并且通过转换温度，可实现wg在翅芽发育的不同阶段在超表达和抑制之间相互转化，从而灵活地操控wg基因在翅芽中的表达水平。【结论】该方法可以灵活操控果蝇翅芽中wg基因的表达水平，对于调控转基因的表达有重要的意义。
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灵活操控果蝇翅芽中wingless基因表达水平的策略
本站小编 Free考研考试/2022-01-03
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